岡 山 医 誌(1991) 103, 791∼801
気 管支 喘息 におけ る
好酸球 動態の調節 に関す る研究
第2編 喘 息 患 者 末 梢 血 好 酸 球 の 遊 走 能 に 関 す る 検 討 岡 山 大 学 医 学 部 第 二 内 科 学 教 室(指 導:木 村 郁 郎 教 授) 高 橋 寿 保 (平 成3年3月20日 受 稿)Key words: Bronchial asthma , Eosinophil migratory response,
Platelet-activating factor, Interleukin-5 , Eosinophil heterogeneity
緒 言
気 管 支 喘 息病 態 の 特 徴 の 一 つ に,末 梢 血 好 酸 球 増 多 お よ び 気 管 支 組 織 中へ の 好 酸 球 の 浸 潤 が あ り,気 道 閉 塞 の 程 度 と末 梢 血 好 酸 球 数 の相 関1) とか,抗 原 吸 入 誘 発 試 験(Bronchial provoca tion test: BPT)に お け る遅 発 型 気 道 反 応(Late asthmatic response: LAR)の 気 管 支 肺 胞 洗 浄
液(Bronchoalveolar lavage fluid: BALF)中 に 著 明 な 好 酸 球 増 多 が 認 め ら れ る2)など,喘 息 発 作 との 間 に は 密 接 な 関 係 が 認 め ら れ て い る.好 酸 球 は,従 来 ア レ ル ギ ー 性 炎 症 反 応 の 抑 制 作 用 の 側 面 が 強 調 さ れ て い た が,近 年 の め ざ ま し い 細 胞 生 化 学 的 研 究 の 展 開 に よ り,好 酸 球 の産 生 ・ 放 出 す る化 学 伝 達 物 質 が ア レ ル ギ ー 性 炎 症 を誘 導,増 幅 す る こ とが 明 らか と な り,現 在 で は 喘 息 発 作 に お け る重 要 なeffector cellと して の役 割 を担 う も の と考 え ら れ て い る.か か る ア レ ル ギー 性 炎 症 反 応 の 局 所 好 酸 球 浸 潤 には, Platelet activating factor (PAF)3) 4)やInterleukin-5
(IL-5)5)な ど種 々 の 好 酸 球 遊 走 因 子(Eosino phil chemotactic factor: ECF)が 関 与 す る と
考 え られ て お り,近 年BPT後 のBALF中 に ECF活 性 の 増 加 が 認 め られ て い る6).な お か か る 物 質 は,好 酸 球 の 各 種 メ デ ィエ ー ター の産 生 ・ 放 出 の 促 進 や 好 酸 球 の低 比 重 化 を促 す な ど,種 々 の 面 で 好 酸 球 を 活 性 化 す る こ と も知 られ て お り, ア レル ギ ー 性 炎 症 に 深 く関 わ りを 持 つ もの と考 え られ て い る.一 方,成 人 の 気 管 支 喘 息病 態 を よ く反 映 して い る と考 え ら れ る カ ン ジ ダ 喘 息 に お け る リ ンパ 球 の 関 与 が教 室 の 一 連 の 研 究 に よ り明 らか に され7) 8) 9) 10),さ らに 第1編 でか か る リ ンパ 球 由 来 のECFの 主 体 はIL-5で あ る こ と を 明 らか に し た.そ こ で著 者 は, IL-5を は じめ とす る各 種ECFに 対 す る好 酸 球 の 遊 走 能 を測 定 し,種 々 の 喘 息 病 態 に お け る好 酸 球 の 動 態 を, 細 胞 の 反 応 性 と い う側 面 か ら検 討 し た. 対 象 と 方 法 岡 山大 学 第2内 科 外 来 通 院 中及 び 入 院 中 の 気 管支 喘 息 患 者24例 を対 象 と し た.病 型 別 内 訳 は, ア トピー 型12例 ・非 ア トピ ー 型12例 で,① 発 症 年 齢40未 満,② 他 の ア レル ギ ー 性 疾 患 の合 併, ③IgE RIST高 値(>500U/ml),④IgE RAST が 陽 性,⑤ 即 時 型 皮 内 反 応 陽 性(真 菌 類 の み 陽 性 の 場 合 を除 く),の5項 目 の う ち, 3項 目以 上 を満 た す もの を ア トピ ー 型 と し,そ れ 以 外 を非 ア トピー 型 と した(表1).ま た 日本 ア レ ル ギ ー 学 会 の 重 症 度 別 分 類 に 従 う と,軽 症 は10例,中 等 症9例,重 症5例 で あ っ た.な お,発 作 時 と は 日本 ア レ ル ギー 学 会 の分 類 で い う 「小 発 作 」 或 は 「中 発 作 」の 状 態 で あ り,方 非 発 作 時 は, 何 等 自覚 症 状 が な く聴 診 所 見 上 も ラ音 を認 め な い状 態 と し た. 791
方 法
1) 末 梢 血 好 酸 球 の 分 離 精 製
喘 息 患 者 の ヘ パ リ ン 加 末 梢 血5mlに6%デ キ ス トラ ン1mlを 加 え,室 温 で30分 静 置 しbuffy coat を 回 収 し た 後,こ れ にPhosphate buffer saline (PBS)10mlを 加 え, 4℃, 250gで5分 間 洗 條 ・ 遠 沈 し た.沈 渣 に 混 入 し た 赤 血 球 を 除 く た め, 蒸 留 水1mlを 加 え30秒 間 ピ ペ ッ テ ィ ン グ し て 溶 血 さ せ, 1.8%食 塩 水1mlを 加 え て 等 張 に 戻 し た. さ ら にPBSで 洗 滌 ・遠 沈 し た 細 胞 層 をPBS 2 mlに 浮 遊 さ せ た 後,教 室 の 河 田 の 方 法11)に 従 い フ ロ ー サ イ ト メ ー タ ー(FACStar: Becton - Dickinson)を 利 用 し て 好 酸 球 を 分 離 し た.得 ら
れ た 好 酸 球 をHanks' balanced salt solution (HBSS: GIBCO)で2×104個/100μlの 濃 度 に 調 整 し,好 塩 基 球 ・好 酸 球 同 時 算 定 液 に て90% 以 上 の 純 度 を, trypan blue染 色 に て90%以 上 のviabilityを 確 認 し た 検 体 を 用 い た.
2) 低 比 重 好 酸 球 の 分 離
Colloidal polyvinylpyrrolidone-coated sil icagel (Percoll: Sigma)原 液 をHBSSと 混 合 し て 比 重1.082の 等 張Percollを 作 成 し 試 験 管 の 下 層 に 入 れ,そ の 上 に1)で 得 ら れ たHBSS好 酸 球 浮 遊 液 を 静 か に 重 層 し, 700g, 20分 間 遠 沈 し た.沈 渣 細 胞 成 分 を 正 常 比 重 好 酸 球(d> 1.082),中 間 層 に 分 離 さ れ た 細 胞 成 分 を 低 比 重 好 酸 球(d<1.082)と し て 回 収 しHBSSで 洗 條 し た 後, HBSSで2×104個/100μlの 濃 度 に 再 調 整 し た も の を 検 体 と し て 用 い た. 表1 対 象患 者 背景
3) 好 酸球 遊走 能 の測定
図1 PAFに 対 す る 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 10-7∼10-6Mに ピ ー ク が 認 め られ た.Multiwell microchemotaxis chamber
の
(Neuroprobe)と 孔 径5μmのpolycarbonate filter (Nucleopore)を 用 い たmodified Boyden chamber法 に て 好 酸 球 遊 走 能 を 測 定 し た. cham ber下 室 に は 各 濃 度 のPlatelet-activating fac tor (PAF: Sigma)お よ び リ コ ン ビ ナ ン ト ヒ ト interleukin-5 (rhlL-5:サ ン ト リ ー)12)を 入 れ, chamber上 室 と の 間 を 仕 切 る よ う にfilter を の せ た.さ ら にchamber上 室 に1)や2)で 得 ら れ た 好 酸 球 を 入 れ, 37℃ のCO2イ ン キ ュ ベ ー タ ー 内 で30分 間 反 応 さ せ た 後, filterを 取 り 出 し て メ タ ノ ー ル で5秒 間 固 定 し,好 酸 球 の 染 色 を エ オ ジ ノ ス テ イ ン(鳥 居 薬 品)を 用 い て2分 間 行 っ た.そ の 後,キ シ レ ン に1分 間 浸 し て ス ラ イ ドグ ラ ス に 固 定 し て400倍 で 無 作 為 に10視 野 鏡 検 し, filterの 下 室 側 ま で 遊 走 し た 細 胞 数 を 算
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定 し て遊 走 能 と し た.な お,用 い た 好 酸 球 は採 血 後2時 間 半 前 後 に 統 一 し,測 定 はduplicateで 行 っ た.
4) 血 清 中Eosinophil cationic protein (ECP) の 測 定 好 酸 球 分 離 用 と同 時 に 採 血 した 喘 息 患 者 末 梢 血 か ら,採 血60分 後 に 遠 心 分 離 した 血 清 を用 い, ECPRⅡAキ ッ ト(Pharmacia)に て 測 定 し た. 血 清 は 測 定 に 供 す る ま で-20℃ で保 存 した. 図2 rhlL-5に 対 す る 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 濃 度 依 存 性 に 増 加 し, 1μg/mlで ほ ぼplateau と な っ た. 図3 rhIL-5のCheckerboard assay
chemokineticお よ びchemotactic effectが 認 め ら れ た. 成 績 1) 各 濃 度 のPAF及 びrhIL-5に 対 す る 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 は, PAFに 対 し て は 10-7∼10-6Mに ピ ー ク を 認 め(図1), rhIL-5 に 対 し て は1ng/ml∼1μg/mlで 濃 度 依 存 性 に 増 加 し, 1kg/mlでplateauと な る 傾 向 を認 め た(図
2),な お, checkerboard assayに よ り, IL-5 に はchemotacticお よ びchemokinetic effect が あ る こ と が 示 さ れ た(図3).し た が っ て 以 下 の 検 討 に は,遊 走 反 応 が ピ ー ク を 示 す 前 の 濃 度 で の 比 較 が 適 当 と 考 え, PAFは10-7M, rhIL -5は100ng/mlを 用 い た. 図4 PAF, rhIL-5に 対 す る健 常 人 と喘 息 患 者 の 好 酸 球 遊 走 能 の 比 較 PAFに 対 す る遊 走 能 は 健 常 人 よ り喘 息 患 者 で 有 意 に 亢 進 し て い た(p<0.01). IL-5で も, 喘 息 患 者 の 方 が 亢 進 して い る 傾 向 が 認 め ら れ た.
図5 PAF, rhIL-5に 対 す る喘 息 病 型 別 の 好 酸 球 遊 走 能 の 比 較 PAFに 対 す る 遊 走 能 は,ア トピ ー 型 で 健 常 人 お よ び 非 ア ト ピー 型 よ り有 意 に 亢 進 し て い た (p<0.01, p<0.05). IL-5に 対 し て は,ア ト ピー 型 で 健 常 人 よ り有 意 に 亢 進 して い た(p< 0.05). 2) 健 常 人 と喘 息 患 者 間,喘 息 病 型 別 お よ び 重 症 度 別 で の 好 酸 球 遊 走 能 の 比 較 まず 健 常 人 と喘 息 患 者 の 好 酸 球 遊 走 能 を比 較 し た と こ ろ, PAFに 対 す る遊 走 能 は,健 常 人 よ り喘 息 患 者 好 酸 球 が 有 意 に 亢 進 し て お り(p< 0.01),ま たrhIL-5で も,統 計 的 有 意 差 は 認 め ら れ な か っ た もの の,喘 息 患 者 の 方 が 亢 進 して い た(図4).さ らに 喘 息 の 病 型 別 に 分 け て 比 較 す る と, PAF, rhlL-5と も健 常 人 よ りア ト ピー 型 で 有 意 に 亢 進 して い た(p<0.01, p<0.05). 喘 息 の病 型 間 の 比 較 で は, PAFに 対 す る遊 走 能 は,非 ア トピー 型 よ りア トピー 型 で 有 意 に 高 値 を示 し たが(p<0.05), rhIL-5で は 両 者 間 で 有 意 差 は 認 られ な か っ た(図5).ま た 喘 息 の 重 症 度 別 で は, PAF, rhIL-5と も有 意 差 は 認 め ら れ な か っ た(図6). 図6 PAF, rhlL-5に 対 す る喘 息重 症 度 別の好 酸 球 遊 走能 の 比較 重 症度 問 で有 意 差 は認 め られ なか った. 図7 好 酸 球 の遊 走 能 に及 ぼ す 喘息 発作 の影 響 非発 作 時 よ り発作 時 で遊 走能 の 亢進 が認め ら れ た(p<0.10, p<0.05).
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図8 低 比 重 好酸 球 の 遊 走能 に 関 す る検討 正 常 比 重 よ り低 比 重好 酸球 で遊 走能 の 亢進 が 認 め られ た(p<0.05). 3) 発 作 状 態 別 で の 好 酸 球 遊 走 能 の 比較 同 一 症 例 間 で の 喘 息発 作 時 と非 発 作 時 に お け るPAFとIL-5に 対 す る好 酸 球 の 遊 走 能 を 喘 息 患 者5症 例 に つ い て 比 較 した とこ ろ,発 作 時 の 好 酸 球 に は,非 発 作 時 の そ れ に比 してPAF, rhIL -5の 両 者 に よ り有 意 に 高 い遊 走 能 が 認 め られ た (p<0.10, p<0.05)(図7). 4) 比 重 別 で の 好 酸 球 遊 走 能 の 比 較 同一 症 例 で の低 比 重 と正 常 比 重 好 酸 球 のrhIL -5に 対 す る遊 走 能 を4症 例 に つ い て比 較 した と こ ろ,正 常 比重 好 酸 球 よ り低 比 重 好 酸 球 が 有 意 に 高 い遊 走 能 を示 した(p<0.05)(図8). 図9 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 と末 梢 血 好 酸 球 数 と の 相 関 PAFで はr=0.675(p<0.01), IL-5で はr= 0.448 (p<0.05)の 相 関 が 認 め ら れ た. 5) 末 梢 血 好 酸 球 数 とPAF及 びrhlL-5に 対 す る 好 酸 球 の 遊 走 能 と の 関 係 喘 息 患 者 末 梢 血 好 酸 球 数 とPAF(10-7M)及 びrhIL-5 (100ng/ml)に 対 す る 遊 走 能 と の 相 関 を 検 討 す る と, PAFで はr=0.675(p<0.01) の 良 い 相 関 が,ま たrhIL-5で はr=0.448(p< 0.05)の 相 関 が 認 め ら れ た(図9). 6) 血 清ECP濃 度 と 好 酸 球 遊 走 能 と の 関 係 喘 息 患 者 血 清 中ECP濃 度 とPAF及 びrhIL -5に 対 す る 好 酸 球 の 遊 走 能 との 相 関 を 検 討 す ると, PAFで はr=0.545(p<0.05), rhIL-5で はr=0.756 (p<0.01)の 強 い 相 関 が 認 め ら れ た(図10).
図10 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 と血 清ECP濃 度 と の 相 関 PAFで はr=0.545(p<0.05), IL-5で はr= 0.756(p<0.01)の 相 関 が 認 め ら れ た. 考 察 気 管 支 喘 息 の 病 態 に お け る 好 酸 球 の 役 割 は, か つ て の 炎 症 の 場 に お け る生 体 防御 的 機 能 か ら, 近 年 で は む し ろ炎 症 反 応 を増 幅 し組 織 を 傷 害 す る もの と考 え られ る に至 っ て お り,さ らに,喘 息 発 作 と肺 の 好 酸 球 浸 潤 との 間 の密 接 な 関 係 が 知 られ て い る13).この よ う な気 道 局 所 へ の 好 酸 球 浸 潤 を 説 明 す る機 序 の一 つ と し て,教 室 の 一 連 の 研 究8) 10)や第1編 で報 告 した ご と く,好 酸 球 遊 走 因 子(ECF)の 局 所 産 生 が 考 え られ る.そ こ で本 編 で は,気 管 支 喘 息 の 病 態 に お い て 気 道 反 応 局 所 に 集 積 し ア レ ル ギ ー 性 炎 症 反 応 に 関 わ る 好 酸 球 の 動 態 を,そ の 反 応 性 の 側 面 か ら捉 え る 目的 で, PAFお よ びIL-5に 対 す る各 種 病 態 の 喘 息 患 者 好 酸 球 の 遊 走 能 の 検 討 を行 っ た.そ の 結 果,喘 息 患 者 で は 健 常 人 に 比 し,両 物 質 に対 す る 好 酸 球 遊 走 能 の 亢 進 が 認 め られ,ア トピー 型 喘 息 で そ の 傾 向 が 著 し く,特 にPAFに 対 す る遊 走 能 は ア トピー 型 で 著 明 に 亢 進 して い た. さ らに,発 作 時 の 好 酸 球 や 低 比 重 好 酸 球 で 亢 進 が 認 め ら れ,血 清ECP濃 度 及 び 末 梢 血 好 酸 球 数 と好 酸 球 遊 走 能 は相 関 し て い た. 今 回 の 検 討 か ら ア トピー 型 喘 息 患 者 好 酸 球 は, PAFに 対 す る遊 走 能 が 亢 進 して い る こ とが 判 明 し た.こ れ は,ア トピー 型 喘 息 の 病 態 の 主 体 が 1型 ア レ ル ギー 反 応 で あ り,抗 原 刺 激 に よ り肥 満 細 胞 ・好 塩 基 球 系 か ら種 々 のmediatorと と も にPAFやECF-A,ア ラ キ ドン 酸 代 謝 産 物 な ど の 好 酸 球 遊 走 因子(ECF)が 放 出 され て14)気 道 炎 症 が 引 き起 こ さ れ る と考 え ら れ て お り,こ の 反 応 系 で の 好 酸 球 の 集 積 を 説 明 し得 る所 見 と 考 え られ た. ECFに は, lipid mediatorと して PAF3) 4), LTB43) 4), Hydroxyeicosatetraenoic acid (HETE)15)等 が,ま た ペ プ チ ド・ア ミン 類 と してECF-Al6), Histaminel7),補 体 成 分 で あ るC5a18), C56719)等,さ ら にlymphokineと して IL-55)な どが 知 ら れ て い る.な か で もPAFは, 血 管 透 過 性 亢 進 や 気 管 支 平 滑 筋 収 縮 作 用 に 加 え て20),好酸 球 に 対 し て 様 々 な 生 理 作 用 を持 ち,強 力 なECF活 性 を 有 す る3) 4)他 に,好 酸 球 の LTC421)や 活 性 酸 素22)の産 生 亢 進,顆 粒 蛋 白 の 脱 顆 粒 促 進23),好 酸 球 の 低 比 重 化22),細 胞 表 面 の 免 疫 グ ロ ブ リンや 補 体 に 対 す る レセ プ ター の 発 現 増 強24)等,一 般 に活 性 化 と呼 ば れ る状 態 を もた ら し,さ らに 好 酸 球 自体 か ら もPAFが 産 生 さ れ て25),ア レ ル ギ ー 炎 症 の 増 悪 に お け る 一 種 の positive feedback機 構 が 想 定 さ れ て い る.こ の よ う に こ れ ら の 物 質 は,気 管 支 喘 息 の 気 道 反 応 局 所 に お い て,好 酸 球 に 対 す る作 用 を 中 心 と し て 重 要 な 役 割 を担 っ て い る こ とが 想 定 され て い る. 次 に,好 酸 球 に はheterogeneityが あ る こ と が知 られ て お り,そ の 比 重 に よ り低 比 重 お よ び 正 常 比 重 好 酸 球 に分 け られ て い る.低 比 重 好 酸 球 は,よ り活 性 化 され た 好 酸 球 と考 え られ て お り,補 体 や 免 疫 グ ロ ブ リ ン に 対 す る表 面 レ セ プ タ ー 発 現 の 増 強,細 胞 傷 害 作 用 やLTC4・ 活 性 酸 素 産 生 の 増 強 な どが 報 告 され て い る26).今回 の 検 討 に お い て, Flow cytometryに よ るSorting
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で 得 られ た 好 酸 球 を,比 重 遠 沈 法 で低 比 重 と正 常 比 重 の 好 酸 球 に分 け て,両 者 のIL-5に 対 す る遊 走 能 を比 較 し た と こ ろ,低 比 重 好 酸 球 で よ り亢 進 して い た。IL-5は,骨 髄 に お い て 好 酸 球 を選 択 的 に 分 化 誘 導27)し,成 熟 好 酸 球 に 対 して も 選 択 的 に 作 用 して, ECFと して 知 られ て い る. さ ら に最 近,好 酸 球 上 にIL-5レ セ プ タ ー が 存 在 し,そ れ は 低 比 重 好 酸 球 に よ り強 く発 現 さ れ て い る との 報 告 が な され て お り28),低比 重 好 酸 球 のIL-5に 対 す る遊 走 能 亢 進 は こ の こ と を 反 映 し た もの と推 察 さ れ る.一 方 こ れ と は 反 対 に, Hypereosinophilic syndrome (HES)患 者 末梢血 の 好 酸 球 遊 走 能 は,低 比 重 よ り も正 常 比 重 好 酸 球 の 方 が 高 い とい う報 告 もあ り29),気管 支 喘 息 とHESと の 末 梢 血 中 の 低 比 重 好 酸 球 に は 質 的 な 差 異 が 指 摘 さ れ て い る.即 ち, HESの 低 比 重 好 酸 球 は,細 胞 内 顆 粒 が 小 さ くMBP含 量 も少 な く,骨 髄 に お け る 成 熟 過 程 で の 異 常 が 想 定 さ れ て い る の に 対 し,気 管 支 喘 息 の そ れ は,細 胞 膨 化 や 脂 質 含 量 増 加 等 に よ る もの と想 定 さ れ, 反 応 性 の 亢 進 した タ イ プ の 好 酸 球 で あ る と され て お り26),この よ うな質 的 な差 異 が 遊 走 能 の 差 異 と して 表 れ た と推 察 さ れ る.ま た,今 回 の 著 者 の 方 法 で は,好 酸 球 増 多 が 認 め られ な く と も正 常 比 重 と低 比 重 好 酸 球 の 両 者 と も純 度90%以 上 で 得 る こ とが 可 能 で あ っ た が,従 来 の 報 告 に あ る よ う な不 連 続 勾 配 比 重 遠 沈 法 で は,著 明 な 好 酸 球 増 多 が な い 限 り低 比 重 好 酸 球 分 画 へ 相 当 量 の 好 中球 の 混 入 が 避 け ら れ な い.好 中球 の 混 入 は 好 酸 球 遊 走 能 の 測 定 系 に お い て 抑 制 的 に 働 く との 報 告 が あ る こ とか ら11),この 点 に お い て も今 回 の 著 者 の検 討 と従 来 の 報 告 との 差 異 が 説 明 で き るか も知 れ な い. 好 酸 球 遊 走 能 は 喘 息 の 発 作 状 態 に よ り変 化 し, 非 発 作 時 に 比 べ 発 作 時 で よ り亢 進 して お り,さ らに 末 梢 血 中 好 酸 球 数 との 間 に も正 の 相 関 を認 め た.抗 原 吸 入 誘 発 試 験 の 際 に み られ る遅 発 型 気 道 反 応 時 に は末 梢 血 中 の低 比 重 好 酸 球 が 増 加 して い る とか30),末梢 血 好 酸 球 数 と低 比 重 好 酸 球 の 比 率 との 間 に 正 の 相 関 を認 め る31)等の報 告 が あ り,低 比 重 好 酸 球 の 比率 の 増 加 が 全 体 と して の 好 酸 球 遊 走 能 の 亢 進 に 影 響 を与 え て い る可 能 性 が あ る.し か し一 方 で,寄 生 虫 感 染 前 と感 染 後 好 酸 球 増 多 を き た し た 時 と の,同 一 人 の正 常 比 重 好 酸 球 の 遊 走 能 の 比 較 で は,感 染 後 で遊 走 能 の 亢 進 を認 め た とか32),異 な っ た ドナ ー 由 来 の 正 常 比 重 好 酸 球 で は,そ の 殺 寄 生 虫 作 用 に差 異 が 認 め られ る33)等の 報 告 が あ り,正 常 比 重 好 酸 球 内 で も反 応 性 にheterogeneityが 存 在 す る もの と 考 え られ る.今 回測 定 さ れ た好 酸 球 遊 走 能 は, こ の よ う な様 々 な程 度 に 活 性 化 さ れ た 好 酸 球 の 総 和 と して の 反 応 性 を反 映 した も の と考 え られ る.
Eosinophil cationic protein (ECP)34)は, Major basic protein (MBP)35), Eosinophil
peroxidase (EPO)36), Eosinophil derived neurotoxin (EDN)37)と 共 に 好 酸 球 内 に 含 まれ る 顆 粒 蛋 白 の一 つ で あ り強 い組 織 傷 害 性 を有 し て お り,血 清ECP濃 度 とBPT時 の 気 道 反 応 性 と の 間 に は相 関 が 認 め られ て い る38).今 回,血 清ECP濃 度 と好 酸 球 遊 走 能 との 間 に 正 の 相 関 が 認 め られ,こ の こ と は即 ち,好 酸 球 の 化 学 伝 達 物 質 放 出能 と遊 走 能 との 相 関 を示 す もの と考 え ら れ る.ま た,好 酸 球 遊 走 能 と末 梢 血 好 酸 球 数 と に相 関 が 認 め られ た こ とか ら,好 酸 球 の 反 応 性 亢 進 と好 酸 球 産 生 刺 激 とが 平 行 した 現 象 で あ る こ とが 示 唆 さ れ,現 時 点 で は これ らの 現 象 を媒 介 す る物 質 と して, IL-5が 想 定 さ れ る. IL -5に は 前 述 のECF活 性 以 外 に,低 比 重 化 や LTC439)・ 活 性 酸 素40)の産 生 や 脱 顆 粒 の 促 進41), 表 面 レセ プ ター 発 現 の増 強42),細 胞 傷 害 作 用39)や 粘 着 能43)の亢 進,生 存 延 長 作 用39) 40)など,様 々 な 面 で の 好 酸 球 活 性 化 作 用 を有 して い る もの と考 え ら れ て い る.従 っ てIL-5は,好 酸 球 の 産 生 増 加 や 反 応 性 の 増 強 等 を 介 して,気 管 支 喘 息 の 病 態 に 深 く関 わ っ て い る もの と想 像 さ れ,さ ら に 各 種 因 子 との 相 互 関 連 作 用 に つ い て 追 求 す る 必 要 が あ る と考 え られ た. 結 論 気 管 支 喘 息 の 種 々 の 病 態 に お け る好 酸 球 の 動 態 を,好 酸 球 の 反 応 性 の 側 面 か ら み る 目的 で, 喘 息 患 者 末 梢 血 好 酸 球 のPAFお よ びIL-5に 対 す る遊 走 能 を検 討 し,以 下 の 結 果 を得 た. (1) 喘 息 患 者 の 好 酸 球 に は 健 常 人 に 比 して よ り 高 い遊 走 能 が 認 め られ た.
(2) 喘 息 患 者 の 好 酸 球 遊 走 能 は, PAFに 対 して は10-7∼10-6Mに ピ ー ク が 認 め られ, IL-5で は 1ng/ml∼lμg/mlで 濃 度 依 存 性 に 増 加 し, 1μg/ mlでplateauと な っ た. (3) 喘 息 の 各 病 型 間 で は, PAFに 対 して は 非 ア ト ピー 型 よ りア トピー 型 で有 意 に 高 い 遊 走 能 が 認 め ら れ た(p<0.05)が, IL-5で は 両 病 型 間 に 有 意 差 は認 め られ な か っ た. (4) 喘 息 の 重 症 度 別 で は 有 意 差 が 認 め られ な か っ た が,発 作 時 の 好 酸 球 は 非 発 作 時 に 比 し遊 走 能 は 有 意 に 亢 進 して い た(p<0.05). (5) 喘 息 患 者 の 低 比 重 好 酸 球 は,正 常 比 重 の も の よ り高 い 遊 走 能 が 認 め られ た. (6) 好 酸 球 遊 走 能 と末 梢 血 好 酸 球 数,お よ び血 清ECP濃 度 と の 間 に 正 の相 関 が 認 め られ た. 以 上,喘 息 患 者 の 好 酸 球 は様 々 な要 因 で 活 性 化 さ れ,そ の 反 応 性 に はheterogeneityが あ り, しか も好 酸 球 の 反 応 性 と好 酸 球 増 多 は 連 動 し て お り,か か る 気 管 支 喘 息 の 好 酸 球 動 態 にPAF以 外 にIL-5の 関 与 が 重 要 で あ る と考 え られ た. 稿 を終 え るに あ た り,終 始御 指 導 御校 閲 を賜 った 恩 師木 村 郁郎 教 授 に深 甚 の謝 意 を表 す と共 に,直 接 御指 導 頂 い た高 橋清 講 師 に深 謝 致 し ます. (本論文 の要 旨は 第40回 日本ア レルギー 学会 総 会 に て発 表 した。) 文 献
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