Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
歯根破折後の血流の違いによる歯髄組織の創傷治癒
Author(s)
伊藤, 幸太; 小林, 史卓; 武田, 侑大; 木所, 亮; 松岡,
海地; 松坂, 賢一; 井上, 孝
Journal
歯科学報, 112(2): 159-159
URL
http://hdl.handle.net/10130/2742
Right
目的：チタンは生体親和性が高く，イオン化しにく いため，デンタルインプラント治療の材料に用いら れている。しかし，異種金属との接触によりイオン が溶出する可能性があり，インプラント埋入後の患 者の血液中からチタンイオンが検出されたとの報告 もある。また，インプラントの失敗原因として，チ タンに対するアレルギー反応との関連を示唆する報 告もある。本研究では，チタンイオンが免疫担当細 胞に及ぼす影響について，マウス脾細胞を用い，サ イトカインレベルおよび細胞数を指標にして検討した。 方 法：５∼１０週 齢 の C５７BL／６マ ウ ス，BALB/c マ ウスより採取した脾細胞を，１０％FBS を含む RPMI １６４０培 養 液 に５．０×１０５/ml に 調 整 し，９６-well 細 胞 培養プレートに播種した。培養液に，濃度４．５∼７２ ppm のチタンイオンを添加し，対照群は無添加と した。細胞数の変化について，XTT 細胞増殖 Assey Kit を用いて，チタンイオン添加７日後まで，継時 的に検討した。また，培養４日後に LPS を添加し， その１７時間後のサイトカインレベルをMulti-Analyte-ELISAKit で 調 べ た。統 計 学 的 解 析
は，Bonfer-roni s Multiple Comparison Test を用い，p＜０．０５ を有意差とした。 成績および考察：細胞数の変化を調べた結果は，両 系統のマウス脾細胞ともチタンイオン添加１０時間後 から濃度依存的に細胞の増殖がみられ，１８ppm チ タンイオン添加群では，７日後に対照群に比べ有意 （BALB/c : p＜０．０５，C５７BL／６：p＜０．０１）な増殖 がみられた。LPS 添加後の Malti-AnlyteELISAKit の結果では，両系統のマウスとも９ppm チタンイ オン添加群で IL-1β，IL-6，IL-10，IFNγ，TNFα，GM -CSF のレベルが対照群より有意（p＜０．０２）に高 かった。これらの結果から，チタンイオン添加群で サイトカインレベルが上昇したのは，細胞増殖によ るものと考えられたため，細胞数を考慮してサイト カインレベルを評価したところ，チタンイオン添加 によってサイトカインレベルに変化はみられない か，逆に対照群よりも減少している傾向がみられ た。以上のように，チタンイオンはマウス脾細胞の 増殖を促すため，LPS 刺激により誘発されるサイ トカインレベルが上昇することがわかった。 目的：生活歯が歯根破折した場合，歯髄組織中の血 流変化が起きていることが考えられる。しかしなが ら，その細胞動態に関して詳しく検索した研究は少 ない。本研究の目的は，生活歯の歯根破折を想定し た実験モデルを作成し，歯髄組織の治癒過程を歯冠 側（血流の低下部位）と歯根側（血流の正常部位） に分けて検索することである。 方法：実験動物には２５０∼３００g の SD 系雄性ラット を用いた。麻酔下にて下顎右側第１臼歯近心根部に 粘膜 Flap 形成後，骨面中央部をラウンドバー（直 径１mm）にて切断し歯冠側および歯根側に分離し た。複根歯のため歯冠側は近心根以外の根尖を伝う 血流低下群，歯根側は根尖から直接血流が入る群と した。切断後，１，２，３，５および７日後，通法 に従い，H-E 染色標本を作製した。免疫組織化学染 色として，細胞増殖のマーカーである PCNA，神経 幹細胞および象牙芽細胞のマーカーである Nestin を施し検索した。 成績：H-E 染色では，１日例で歯冠側および歯根側 いずれも切断面に象牙芽細胞の消失およびフィブリ ン網の形成，２および３日例では，炎症性細胞の浸 潤と毛細血管および膠原線維の増生が認められた。 ５日例では，血管腔内の充血が観察され，７日例は 歯根側で切断面に硝子様を呈した結合組織の形成が 観察された。 PCNA は，歯冠側および歯根側いずれも１およ び２日例では認められず，３日例では血管周囲に強 い陽性が観察され，さらに歯冠側で歯髄全体に陽性 を認めた。また５日例では切断面に陽性細胞が散見 されたが，７日例ではわずかに認められた。Nestin は，陽性細胞が１日例で歯冠側および歯根側いずれ も象牙芽細胞層に認められ，２日例では象牙芽細胞 下層に散見された。また３日例では切断面周囲にも 陽性細胞が認められ，さらに歯根側では歯髄全体に 陽性を示した。５および７日例では歯冠側において 象牙芽細胞下層で，歯根側では歯髄全体で陽性が観 察された。 考察：PCNA の結果から３日例において歯冠側で 細胞増殖能が強かったことから，歯髄細胞の血流低 下環境への抵抗性と残存した毛細血管の周囲に存在 する細胞の増殖・活性化によるものと考えられた。 ま た３，５お よ び７日 例 で 歯 根 側 は 歯 髄 全 域 に Nestin 陽性が観察されたことから，未分化間葉系 細胞が象牙芽細胞への分化を起こしたことが考えら れた。
