a ’・i・’’
一
b 4．o
コ
e 2．o
o
4．0
Fig．8マウス唾液腺由来前駆細胞の増殖に対する
短期間アミノ酸除去の影響
20種類の単一アミノ酸除去培地を作成し、mSGPの増殖変化を調べた。アミノ酸を1種類 除去した単一アミノ酸除去培地（δ培地）を20種類作成した。mSGP細胞をδ培地を用いて
48時間培養し、細胞形態と増殖の変化を24時間ごとに評価した。Ial 48時間後のmSGP細胞の形態。いずれの単一アミノ酸除去培地を用いて培養した
場合においても、細胞形態の変化を認めなかった。scale bar 100μm。［b1細胞増殖の変化。縦軸は、細胞数（24hr、 48hr）1開始時の細胞数（Ohr）を表す。δGly 培地を用いて培養した場合、コントロールに比較して細胞数が増加した（δGly：3．89 倍、control 3．17倍de’p＜0．05）。δCys，δ Gln，δGlu，δAsp，δArg，δPro培地を用い て培養した場合、コントローールに比較して細胞数が減少した（48hr；δCys：o．73倍，
δGln：0．87倍，δGlu：2．29倍δAsp：2．33倍，δArg：0．97倍，δ Pro：1．84倍、’p＜0．OOI、
p＜0．05）。δThr，δMet，δVal，δ Leu，δlle，δPhe，δTrp，δLys，δHis培地を用いて培 養した場合、コントロールに比較して細胞数が減少した（δThr，＝1．09倍δMet：1．39倍，
δVal：2．11倍，δLeu：2．32倍，δlle：2．30倍，δPhe：1．94倍，δTrp＝2．27倍，δLys＝1．89 倍，δ His：2．52倍、’p＜O．OOI、pく0．05）。24時間（biack bar）、48時間（white bar）。
コε
4．0
2．0
o
勲﹇ 勲﹇
■■■1 ■■■鳳
鼎﹇
一 鰯圓國■
一㍗莱一圏コ闇一■一
＊＊
n
■■■■ ■■■墨 層■■■ ■■■巳 ■■騨匿 ■■■巳 ■■■■ ■■圏■ 圏■■■ ■圏■ 一 ■■■■ 一 ■■■墜 一 一 ■■■■ 一 ■■■9 一 一 一 ■■■■ o
control 2．s 5．0 t O 20 sO（mM GIy）
Fig．9グリシン添加・除去によるmSGP細胞の増殖変化
2．5mM，5mM， 10 mM，20mM，50mMグりシン添加培地を用いてmSGP細胞を 48時間培養した。グリシン添加から24時間後に、各濃度のグリシン添加培地を除
去した。
グリシンは濫度依存性にmSGP細胞の増殖を抑制した。グリシンの除去により mSGP細胞の細胞増殖は回復した。
グリシン添加24時間（black bar）、48時間（white・bar）、48時間時グリシン除去
（gray bar）． ”p〈O．05
52
a
3．0
2．0コ
e
1 ．0
E・［＝＝rM－
r一“一一”一’一一1
o
contro12．5 5．0 l o 20 50｛mMGIy）
b
3．0
2．0
1
．0 1 ．0
禽 ★
一一葡一一@ 響讐 一 一隔一一葡一顯一聯暉騨一一騨隅一一口一■一一 旧一囎一屠一一一騨顯一 嚢 費 砦
ゑね
0 扁囎騨一顯＿＿一囎一一顯願騨覇一一曜畢騨騨｝暉一願騨騨騨聯暉一騨騨＿暉聯一口＿＿＿＿一＿＿＿馴＿
control Gly Ala Ser Cys Gln Asn Glu Asp Tyr Arg Pro
コε
3．0
2．0
1 ．0
o
嚢 鳶 嚢 費
一一i．一
Thr Met Val Leu 11e Phe Trp Lys His
Fig．10マウス胎児線維芽細胞の増殖に対するグリシンの影響
Glycine調整培地を作成し、マウス胎児線維芽細胞の増殖変化を調べた。 C57BV6マウス 胎児線維芽細胞（E13）を採取し、10％ウシ胎児血清を含んだDMEMで24時間培養した。そ の後グリシン添加培地（2．5mM、5mM、10叩M、20mM、50mM）と20種類の単一アミノ酸除 去培地を用いて48時間培養した。細胞数の変化を観察し．24時間毎にMod而ed MTT
assayを行った。［a】グリシン濃度変化に伴うマウス胎児線維芽細胞数の変化。縦軸は、細胞数（24時 間．48時間）ノ開始時の細胞数（Ohr）を表す。線維芽細胞数は濃度に比例して減少 した。’p＜0．OOI”p＜0．05。24時間（black bar）、48時間（white・bar）。
Ib】単一アミノ酸除去培地で培養した場合のマウス胎児線維芽細胞数の変化。グリシ
ン除去培地で培養した場合、24時間、48時間の細胞数が増加した（ZIGiy；24hr；t．80倍、48hr；2．31倍、コントロール；24hr＝1．24倍、48hr：一1 ．59倍）。＊p＜0．001、
勲p＜0．05。24時間（black bar）、48時間（white bar）。
a
恥OOO煽ヴ信00」Oα
（o／o）