液状化検体細胞診 (LBC)
～
子宮頸部・膣細胞診を中心に～2013年5月11日 オリンパス株式会社 ライフサイエンス営業企画部
◆ ”液状化検体細胞診（LBC）”って何？
－用語、定義、etc.
◆ 現状は？
◆どうしてLBCなのか？
－歴史的背景
－従来法の問題点
－LBCの特長
◆細胞像の特徴
－従来法との違い
本日の内容
液状化検体細胞診とは．．．（用語）
・従来の細胞診（従来法）－直接塗抹法
・液状化検体細胞診 (Liquid Based Cytology ： LBC)
>米国を中心として世界的な広がりを見せている細胞診検査（特に婦人科）
>定義 ：
試料を保存液などに採取し、 液状化処理した検体から細胞を回収し、 液状化処理した検体から細胞を回収し スライド標本を作製して細胞診検査を行うこと
-Thin Layer法（標本）
-Mono Layer法（標本）
商品名
-ThinPrep （Hologiｃ社） ： オリンパス（株）、ホロジックジャパン（株）
-SurePath （BD社） ： 日本ベクトン・ディッキンソン (株）
-TACAS ： （株）医学生物学研究所（MBL）
-LBC PREP ： 武藤化学（株）
婦人科細胞診の現状
9 %
9 1 %
米国
（6,000万検体 / 年）
ThinPrep
SurePath
従来法
日本
（1,000万検体 / 年）
LBC 従来法
5%
27%
68%
LBCの普及率
LBCの普及と子宮頸がん発症数（06年ASCO報告）
Reference: American Cancer Society. Cancer Facts and Figures 1997-2005. Atlanta, GA: American Cancer Society; 1997-2005.
発症数
ThinPrepの普及率
Wall Street Journal, Nov 1987
その結果:
世間からの抗議
責任問題
法律による改革
新技術の採用
LBCの普及
従来法における問題点
偽陰性の 偽陰性の 3 3 分の2 分
偽陰性の 偽陰性の 3 3 分の１ 分の 試料採取時または標本作製時のエラー
‣ 採取器具に異常細胞が採取されなかった
‣ 採取した異常細胞が正しくスライドへ移らなかった
‣ 乾燥変性など、細胞の保存不良
鏡検時（スクリーニングまたは同定）のエラー
‣ 異常細胞が見逃された
‣ 細胞の同定を誤った
偽陰性の原因
1 Gay JD, et al.: False-Negative Results in Cervical Cytologic Studies, Acta Cytologica 1985, Vol. 29(6):1043-6 2 Joseph MG, et al.: Cyto-Histological Correlates in a Colposcopic Clinic: A 1-Year Prospective Study,
Diagnostic Cytolopathology 1991, Vol. 7(5):477-81
3 Linder J, et al., ThinPrep Papanicolau Testing to Reduce False-Negative Cervical Cytology, Arch Pathol Lab Med 1998, Vol. 122(2):139:44
1,2,3
従来法における問題点
細胞採取
従来法
染色
↓
鏡検
細胞固定
スライドガラスに
細胞塗抹
採取器具を 採取器具を
廃棄
廃棄
試料採取時または標本作製時のエラー
0 25 50 75 100
綿棒／スパーテル ブルーム型採取器具
1. Hutchinson ML, et al. Am J Clin Pathol. 1994;101:215-219.
93% 93%
of cells of cells
82% 82%
of cells of cells
92% 92%
of cells of cells
従来法における問題点
採取器具に残った細胞の割合
スライドに塗抹された細胞の割合
細胞の 割 合（ 百分率％）
頸管ブラシ／スパーテル 頸管ブラシ／スパーテル
各種採取器具別、廃棄される細胞の割合
染色
↓
鏡検 細胞採取
バイアル内で 採取器具を
すすぐ
ほとんどの細胞 を回収保存
機械で
細胞塗抹
LBC （例： ThinPrep システム）
従来法（試料採取／標本作製時）の問題点を改善
LBC
空気乾燥、固定不良による 細胞変性を防止
細胞の有効利用が可能
+
細胞の長期保存が可能
⇒追加の標本作製や、
分子生物学的検査などの
補助的検査の追加が可能
検査室 検査室
従来法（試料採取／標本作製時）の問題点を改善
分散 細胞の回収 細胞の転写
診察室 診察室
採取した細胞をバイアル の保存液に入れます
〇自動塗抹装置（標準化）
〇血液、粘液、および判定に重要でない細胞断片から 細胞を分離します
○薄くて均一な厚さの鏡検しやすい塗抹標本を作製
○同品質の標本を複数枚作製可能
染色へ
LBC （例： ThinPrep システム）
必要な消耗品
フィルター フィルター
スライド スライド バイアル バイアル
LBC （例： ThinPrep システム）
13
分散 分散 細胞の回収 細胞の回収 細胞の転写 細胞の転写
LBC （例： ThinPrep システム）
処理原理
ThinPrep の標本作製技術
Controlled Membrane Transfer テクノロジー ThinPrep の標本作製技術
Controlled Membrane Transfer テクノロジー
バイアル内の 細胞を均一に攪拌し、フィルター膜面に 細胞を回収して、スライドガラスへ 細胞を転写します。
従来法 LBC （ ThinPrep®）
LBCと従来法の違い
標本の比較
従来法 LBC（ ThinPrep
®）
採取された細胞の多くがスライドに 塗抹されず捨てられている
採取された細胞の一部だけが塗抹さ れる（検体の一部の状態が反映され る）
細胞は重なり合ったり、塊を作る 細胞像を不明瞭にする成分が多い 採取された細胞の多くがスライドに 塗抹されず捨てられている
採取された細胞の一部だけが塗抹さ れる（検体の一部の状態が反映され る）
細胞は重なり合ったり、塊を作る 細胞像を不明瞭にする成分が多い
採取された殆どの細胞をバイアルに回 収
採取された細胞は攪拌後、無作為に 転写される（検体全体の状態が反映さ
れる）
細胞は均等に分布 不明瞭成分を最小化
採取された殆どの細胞をバイアルに回 収
採取された細胞は攪拌後、無作為に 転写される（検体全体の状態が反映さ
れる）
細胞は均等に分布 不明瞭成分を最小化
Source: Hutchinson ML, et al. Am J Clin Pathol. 1994;101:215-219.
LBCと従来法の違い
標本の品質比較
正常
HSIL （高度扁平上皮内病変）は子宮頸部癌に速やかに進展 し易い前駆病変であるため、 HSIL の検出は重要です
軽度（ LSIL ） 癌
病変の進行の仕方
高度（ HSIL ）
90%
10%
もし治療されなければ、
CIN2
の58%
、CIN3
の68%
が、持続あるいは癌に進展する子宮頸部細胞診検査
検査のポイント
著者（日付） 掲載誌 従来法からの増加率
p
値Bolick, 1998 Acta Cytol 173% <0.001
Papillo, 1998 Acta Cytol 55% <0.01
Diaz-Rosario, 1999 Arch Pathol Lab Med 103% <0.001
Guidos, 1999 Diagn Cytopathol 233% <0.001
Yeoh, 1999 Hong Kong Med J 28% <0.01
Ferris, 2000 J Fam Pract 119% <0.001
Weintraub, 2000 Diagn Cytopathol オッズ比= 1.86; 244% <0.001
Harkness, 2003 J Reprod Med 47% <0.006
Limaye, 2003 Arch Pathol Lab Med 233% <0.001
発表された発表された査読済み論文査読済み論文 （直接直接バイアルバイアル法）
HSIL検出率の増加
ルーチン使用においてThinPrep によりHSIL検出率が増加
【増加率】
年 著者
ThinPrep ASCUS LSIL HSIL
2000 Weintraub 18,247 69% 224% 94%
1999 Diaz-Rizario 56,339 5% 72% 103%
1999 Carpenter 2,727 45% 57% 26%
1999 Yeoh 16,541 53% 58% 28%
1998 Johnson 1,000 22% 71% 125%
1998 Guid 9,583 70% 267% 233%
1998 Dupress 19,351 18% 43% 33%
1998 Bolick 10,694 26% 181% 173%
1998 Papillo 16,314 22% 88% 55%
TOTAL 262,736
SIL検出率の増加
ThinPrep はSILの検出率を高める
FDA承認（品質表示） 例： ThinPrep システム
FDA（米国食品医薬品局）とは．．．
日本の“厚労省”に当たる“保健社会福祉省”に属する一機関です。
従来の子宮頸部細胞診検査の代替として使用できる。
従来の細胞診検査と比べて、－軽度扁平上皮内病変（ LSIL）以上の検出において、有意に効果がある。
－高度扁平上皮内病変（HSIL）の検出率が向上
－腺疾患の検出率が向上
－標本の質が明らかに改善される。
ブルーム型ブラシまたは、スパーテルと頸管ブラシの併用による細胞採取法 を使用することが出来る。
HPV検査（HCⅡ、Cervista）が可能である。
PCR法によるクラミジア／淋菌検査（COBAS、Aptima）が可能である。
事前に検体の一部を分注して使用できる。 標本作製の標準化（自動塗抹装置）
採取細胞を有効利用（採取した殆どの細胞を回収）
複数枚の同品質の塗沫標本の作製が可能
→特染や免疫細胞化学的検索が可能
乾燥などによる細胞変性が最小限
背景がきれいで細胞が均等分布した鏡検しやすい標本
限定された塗沫範囲
→スクリーニング時間の短縮及び、細胞検査士の疲労度減少
細胞の長期保存が可能
→細胞診標本の再作製、HPV検査（分子生物学的検査）などの追加が可能 細胞診：15℃～30℃で6週間 HCⅡ：2℃～30℃で3ヶ月間
LBCの特徴( 例： ThinPrep システム )
利点
不適正な標本の減少
子宮頸部疾患の検出率の向上
分子生物学的診断が可能 （HPV、クラミジア、淋菌、etc.）
LBCの特徴( 例： ThinPrep システム )
その結果．．．
コストの加算
細胞の見方に慣れが必要
LBCの特徴
課題
従来法 LBC （ ThinPrep®）
LBCの細胞像
標本の比較
従来法
同一患者の
LBC （ThinPrep®）
固定（保存）法
細胞の大きさ
塗抹のパターン
標本の背景
LBCの細胞像
細胞像の特徴
各LBCで
独自の特徴がある 各LBC共通
☆細胞像は各LBCによって違う！
従来法と何が違うのでしょうか？
LBCの細胞像
細胞像の特徴
固定法 （細胞は、バイアル溶液中で固定保存される）
‣細胞質の詳細が鮮明になる
‣核の詳細が鮮明になる
L-SIL
40x
L-SIL
60x
H-SIL
内膜腺Ca
LBCの細胞像
細胞像の特徴
細胞の大きさ
‣“従来法に比べて” 小さく見える
‣溶液の中で、細胞は凝集する（物理的特性）
40x
固定（保存）法
細胞の大きさ
塗抹のパターン
標本の背景
LBCの細胞像
細胞像の特徴
各LBCで
独自の特徴がある 各LBC共通
☆細胞像は各LBCによって違う！
従来法と何が違うのでしょうか？
LBCの細胞像
早く慣れるためには．．．
正確に、自信を持って鏡検
☆処理原理の違い ⇒ 細胞像に影響
各LBC独自の細胞像の特徴を
知ることが大事ある！
まとめ
従来法の問題点に着目して開発された液状化検体細胞診
（ LBC ）は、
まとめ
“不適正標本が減少すること”
“精度が向上すること”
“標本が鏡検しやすいこと”
“ HPV 検査などの付加検査が、同一検体から出来て便利なこと”
などから、米国を中心として世界中に普及しています。
日本でも今後、“子宮頸部細胞診”を始めとして、その有用性が
期待されます。
ありがとうございました
「円相」盤珪（1622～1693年）筆。墨書き（和紙）。『禅の芸術
（The Art of Zen）：日本の僧の書画1600～1925年』（Addiss S.
著）所収。ニューヨーク市Harry N Abrams社（1989年）。
Yabumoto氏提供。
