Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
№３：ブタMalassez 上皮遺残細胞における
lipopolysaccharide 刺激後のtoll like
receptor４，NF-κB の変化
Author(s)
佐古, 亮; 村松, 敬; 小林, 史枝; 関谷, 紗世; 杉内,
亜紀奈; 佐野, 陽祐; 月野和, 隆; 間, 奈津子; 末原,
正崇; 古澤, 成博
Journal
歯科学報, 114(3): 284-284
URL
http://hdl.handle.net/10130/3355
Right
目的：Malassez 上皮遺残は歯根膜のセメント質側 の部分に存在している歯原性上皮で，刺激がなけれ ば増殖しない細胞である。根尖性歯周炎は細菌感染 により生じる炎症性疾患であるが，罹患した際に Malassez 上皮遺残細胞が増生し，時として歯根嚢 胞が形成される。しかしながら，Malassez 上皮遺 残細胞と細菌刺激の関係は不明な点が多い。本研究 では Malassez 上皮遺残細胞に対してグラム陰性菌 の細胞壁成分である lipopolysaccharide（LPS）に より刺激を行い，toll like receptor４（TLR４），NF
-κB の発現を検索した。 方法：実験には，ブタ由来 Malassez 上皮遺残細胞 （北海道医療大学・安彦善裕教授より供与）を用い た。培 地 に は D-MEM（１０％FBS，１％ penicillin-streptomycin 添加）を使用し，３５mm ディッシュに １×１０５ cells/well の密度にて播種した。２４時間後， 培養液に E. coli 由来 LPS（Sigma-Aldrich）を１μg /ml の濃度で添加し，１２時間後に TRIzolⓇ にて RNA を抽出し，定量ならびに逆転写後，TLR４と NF-κB に対する TaqManⓇ プローブを用いて定量的 Real-time PCR 法にて発現を検索した。なお内在性コン トロール遺伝子には１８S rRNA を用い，対照群とし ては LPS の代わりに D-MEM を添加したものを用 いた。 成 績 お よ び 考 察：定 量 的 Real-Time PCR 法 の 結 果，LPS を添加した群では TLR４と NF-κB の遺伝 子発現量は対照群と比較し，どちらも発現減少がみ られた。これまでの報告ではブタ Malassez 上皮遺 残由来細胞を LPS で６時間刺激することで炎症性 サイトカインの発現上昇がみられるという報告があ るが，今回の結果からは TLR４経路のシグナルは LPS 刺激後から１２時間では発現のピークが過ぎ， 減少が生じたと考えられた。 目的：安心・安全な医療を提供できる歯科医師とし て，全身的偶発症の診断と対応は必須の項目であ り，国家試験の出題数も増加している。実際に臨床 実習中の学生が担当している患者が血管迷走神経反 射などの全身的偶発症に陥ることもある。全身的偶 発症はしばしば遭遇するものではないので，座学だ けの知識ではその対応を技能として身につけること は難しい。そこで，ロールプレイとして学生同士が 歯科医師と患者を演じ，全身的偶発症発生時の状況 のシミュレーションと講義を組み合わせることで， 知識の整理，および急変時の診断と対応の習得を目 指すことを目的として，新しい臨床実習に取り組ん だので，その概要を報告する。 方法：臨床実習の学生１１９名，１グループ６名の中 で歯科医師役３名と患者役３名に分けて実習を行っ た。歯科診療において重要と考えられる全身的偶発 症を想定し，教員が患者背景を設定した。患者役は 事前学習として自覚・他覚症状を自習し，当日は自 覚症状の演技を行い，事前に用意された複数のモニ ター画面から正しいものを選び，他覚症状を提示し た。歯科医師役が正しく診断，対応できた場合は回 復に向かうようにした。歯科医師役は患者役の自覚 症状や提示された他覚症状から患者の病状を診断 し，酸素投与や複数の薬物から適切なものを選択さ せた。これらのシミュレーション実習の後にフィー ドバックと補足講義を行った。 結果および考察：学生のアンケートでは満足度が高 く，口頭試問においてもシミュレーション実習を 行った範囲はよく答えることができた印象であっ た。歯科診療における全身的偶発症の診断と対応を 学べるシミュレーション教育の資源は少なく，この ような心肺蘇生以外の救急処置に対する体験型実習 は初めての試みであった。しかし，学生が事前に学 習し，実際に酸素マスクなどに触れて体験した後に フィードバックと補足講義を行うことで，医療従事 者として誰もが対応できなければならない救急処置 を楽しみながら学習することができ，このシミュ レーション実習は非常に効果が高かったと考える。 今後は実習内容を改善するとともに，歯科麻酔学講 座の教員が患者役を演じ，学生が歯科医師役となっ て，適切な診断と対応を行えるかを臨床実習の成績 評価方法にも応用していきたいと考えている。
