岡 山 医 誌 (1993) 105, 859∼869
HTLV-I関
連 細 気 管 支 ・肺 胞 異 常症(HABA)
に お け る肺 組 織 中ADFの
検 討
岡 山大 学医 学部 第二 内科 学教 室(指 導:木 村郁 郎教 授)
北
村
智
樹
(平成5年7月14日
受稿)
Key words: HTLV-I Associated Bronchiolo-alveolar Disorder: HABA, ATL-derived factor: ADF, Diffuse panbronchiolitis, Idiopathic interstitial pneumonia, Anti HTLV-I antibody
緒 言
レ トロ ウ イ ル ス1-4)であ る, Human T lympho tropic virus I(以 下HTLV-I)の 感 染 に 伴 い, HTLV-I感 染Tリ ンパ 球 か ら, ATL由 来 因 子 ATL-derived factor: ADFが 産 生 され る.こ のADFは 自分 自 身 の 増 殖 因 子 に 係 わ る と さ れ る イ ン タ ー ロ イ キ ン2(IL-2)の 受 容 体 の ひ と つ, IL-2R/p55,即 ちTac抗 原5-8)の 発 現 に働 き,オ ー トク ラ イ ン様 メ カ ニ ズ ム に 作 用 し て い る可 能 性,さ らに は 細 胞 の 分 化 や 活 性 化 に も係 わ り,種 々 の ウ イ ル ス 感 染 に も深 く関 連 し て い る 基 本 的 な 物 質 で あ る 可 能 性 が 淀 井 に よ り報 告9-12)さ れ て い る.こ のADFはcomplementary DNA塩 基 配 列 か ら推 定 され る ア ミノ酸 配 列 か ら 酸 化 還 元 酵 素 で あ るThioredoxin13-15)と 同一 分 子 で あ る こ とが 判 明 して い る. び まん 性 汎 細 気 管 支 炎(以 下DPB)16-18),特 発 性 間 質 性 肺 炎(以 下IIP)19,20)の よ う な慢 性 進 行 性 で あ り,か つ 難 治 性 の 肺 疾 患 の 中 に そ の経 過 中 に 成 人T細 胞 白 血 病Adult T cell leuke mia21) (ATL)を 併 発 あ る い は 抗HTLV-I抗 体 陽 性 の もの が あ り,木 村 は これ をHTLV-I関 連 細 気 管 支 ・肺 胞 異 常 症(HTLV-I Associated Bronchiolo-alveolar Disorder: HABA)と し
て 報 告22-27)し て き た. 今 回HABA症 例, DPB並 び にIIP症 例 に お い て, HTLV-Iと 肺 局 所 に お け る こ れ ら の 特 異 病 態 形 成 との 関 連 を 検 討 す る 目 的 で,肺 組 織 中ADFの 局 在 に つ い て 抗ADF抗 体 を1次 抗 体 と し て 用 い たavidin-biotin-complex method (ABC法)に よ る免 疫 組 織 染 色 法 に よ り検 討 を 行 っ た の で 報 告 す る. 対 象 並 び に方 法 1. 対 象 症 例 肺 組 織 中 のADFの 局 在 を検 討 した 対 象 症 例 は, HABAのbronchiolar type(以 下HABA-B)
3例, HABAのalveolar type(以 下HABA-A) 1例, DPB 6例, IIP 5例 の 合 計15例 で あ っ た (Table 1). HABA-B及 びDPBは 自覚 症 状, 肺 の 聴 診 所 見,肺 機 能 検 査,胸 部X線 像,肺 生 検 組 織 像 等 に つ い て 厚 生 省 研 究 班 のDPB診 断 の 手 引 き28)によ り診 断 した.一 方, HABA-A及 びIIPは 同様 に厚 生 省 研 究 班 のIIP診 断 基 準19) に よ り診 断 し た.性 別 は 男 性9例,女 性6例 で, 年 齢 は19歳 か ら79歳 ま で で あ っ た. 2. 抗HTLV-I抗 体 検 出 法 抗HTLV-I抗 体 の 検 出 法 は 日沼 ら1)の間 接 蛍 光 抗 体 法 に 準 じて, HTLV-I持 続 感 染 細 胞 株 で あ る, MT-1細 胞29)とMT-2細 胞30)を用 い て 判 定 した.MT-1細 胞 とMT-2細 胞 をphos phate buffered saline (PBS)で 洗 浄 後 塗 抹 標 本 を作 製 し,冷 風 乾 燥 後 ア セ トン に て10分 間 固 定 し た.次 い で 被 検 血 清 をPBSで10倍 希 釈 し, 室 温 で30分 間 反 応 させ,洗 浄 後2次 抗 体 と し て FITC標 識 抗 ヒ トIgG家 兎F(ab)2抗 体 を30分 間 反 応 させ,再 度PBSに て 洗 浄 後50% glycerin
PBSに て 封 入 し,落 射 型 蛍 光 顕 微 鏡 に て 観 察 し た.蛍 光 を認 め な い 場 合 を 陰 性,細 胞 質 に 点 状, 顆 粒 状 に 蛍 光 を認 め る場 合 をgranular pattern, 又 ほ ぼ 均 一 に 蛍 光 を 認 め る場 合 をdiffuse pat ternの2つ に 陽 性 反 応 を 区 別 し,陽 性 蛍 光 所 見 と してMT-1がgranularに 数%染 色 され, MT -2の70∼80%がdiffuseに 染 色 さ れ る状 態 を抗 HTLV-I抗 体 陽 性,一 方MT-1とMT-2が 共 にdiffuse patternあ る い はMT-2の み が, diffuseに 染 色 さ れ る もの を,抗HTLV-I抗 体 は 陰 性 で あ るが, HTLV-I関 連 反 応22-24,31)陽性 と した. MT-2 diffuse patternは 陽 性 範 囲 が 広 く抗HTLV-I抗 体 及 び そ の 関 連 反 応 を包 括 す る も の で あ る.又 何 れ の 検 査 に お い て も常 に 抗 HTLV-I抗 体 陽 性 血 清(抗 体 価640倍)と 抗 体 陰 性 の 健 康 人 血 清 を コ ン トロー ル と し て 用 い た. 3. 肺 組 織 採 取 法 肺 組 織 の 採 取 法 と し てはtransbronchial lung biopsy 9例, open lung biopsy 2例,及 び 剖
検4例 で あ っ た. 4. 免 疫 組 織 染 色 法
抗ADF抗 体 を1次 抗 体 と し て 用 い た 免 疫 組 織 染 色 の 方 法 は, transbronchial lung biopsy,
open lung biopsy,も し くは 剖 検 に よ り採 取 し た 肺 組 織 を フ ォ ル マ リン 固定 後 パ ラ フ ィ ン 包 埋 し,4.5μmに 薄 切 した パ ラ フ ィ ン切 片 の 脱 パ ラ フ ィ ン 標 本 を作 製 し,内 因性peroxidaseを 阻 止 す る 目 的 で,0.3%過 酸 化 水 素 メ タ ノー ル を 組 織 切 片 に 滴 下 し,室 温 に て6分 間 反 応 させPBS に て 洗 浄 後 非 特 異 的 染 色 を 防 ぐ 目的 で,正 常 ヤ ギ の 血 清 を 組 織 切 片 に 滴 下 し,室 温 で10分 間 反 応 後PBSに て 洗 浄 した. 1次 抗 体 と して 抗ADF抗 体(京 大 淀 井 教 授 提 供)を,0.5%のbovine serum albuminを 含 むPBSを 使 用 し て5μg/mlに 希 釈 し,こ の 抗ADF抗 体 を 組 織 切 片 とmoist chamber内 に て37℃,60分 間 反 応 後PBSに て 洗 浄 した. 次 い で,2次 抗 体 と してUniversal Rabbit Kit system (Biomeda corp., Foster, U.S.A.)を 用 い, biotin標 識 抗 家 兎IgG抗 体 とmoist cham ber内 に て37℃,10間 反 応 後PBSに て 洗 浄 し た.次 い でperoxidase-avidinを 組 織 切 片 と moist chamber内 に て37℃,10分 間 反 応 させ, 発 色 試 薬 を加 え, hematoxyllinに よ るcounter stainingを 行 い, peroxidaseの 褐 色 の 呈 色 反 応 を も っ てADF陽 性 所 見 と し,肺 組 織 中ADF
Table 1 Subjects for immunohistochemical
staining with anti-ADF antibody in HTLV-I associated
bronchiolo-alveolar
disorder (HABA), Diffuse panbronchiolitis
(DPB), and Idiopathic
inter
stitial pneumonia (IIP)
HABAに お け る肺 組 織 中ADFの 検 討 861 の 局 在 を光 学 顕 微 鏡 下 に 判 定 した.尚,1次 抗 体 と し て 正 常 家 兎IgG抗 体 を 用 い て 反 応 させ, 陰 性 コ ン トロー ル と し た 成 績 1. 対 象 症 例 に お け る抗HTLV-I抗 体 の 判 定 HABA症 例 は4例 全 例 抗HTLV-I抗 体 が 陽 性 であ り, HABA-B症 例 は 全 例 末 梢 血 中にATL 細 胞 が 低 率 で は あ る が 出 現 し て い る.一 方, HABA-A症 例 は 末 梢 血 中 にATL細 胞 が 出 現 して お ら ず, ATLの キ ヤ リヤ ー 状 態 で あ る.ま た,DPBで は 症 例5及 び 症 例6の2例,一 方, IIPで は 症 例11,症 例12の2例 が 間 接 蛍 光 抗 体 法1)に よ ってHTLV-I関 連 反 応 が 陽 性 で あ っ た.
Fig. 1 Immunochemical staining of MT-1 cells
with anti-ADF antibody (•~100). Cyto
plasm were positive, but nuclei were
negative.
Fig. 2 Immunochemical staining of MT-2 cells
with anti-ADF antibody (•~100). Cyto
plasm were positive, but nuclei were
negative. MT-2 cells were stained posi tively more than MT-1 cells.
Table 2 Localization of ADF in the lung tissues of HTLV-I associated bronchiolo-alveolar disorder (HABA), Diffuse panbronchiolitis (DPB), and Idiopathic interstitial pneumonia (IIP)
2. MT-1細 胞 とMT-2細 胞 に お け るADFの 検 討 HTLV-I持 続 感 染 細 胞 株 で あ るMT-1細 胞, 及 びMT-2細 胞 に つ い て 抗ADF抗 体 を1次 抗 体 と し て 用 い たABC法 に よ り免 疫 染 色 を 行 い,細 胞 内ADFの 分 布 を判 定 し た . HTLV-I の 感 染 細 胞 が 数%し か 存 在 しな いMT-1細 胞 で は,9.5%のADF陽 性 細 胞 が 認 め られ た. ADF の 染 色 パ ター ン に つ い て は,細 胞 質 が 均 一 に 褐 色 に 染 色 さ れ,細 胞 の 核 部 分 は 染 色 さ れ て い な か っ た(Fig. 1). 一 方MT-2細 胞 で は67 .2の 細 胞 がADF 陽 性 所 見 を 呈 し, ADFの 染 色 パ タ ー ン に つ い て はMT-1細 胞 と同 様 に 細 胞 質 が均 一 に褐 色 に染 色 さ れ て お り,細 胞 の 核 部 分 は 染 色 さ れ て い な か っ た(Fig. 2).尚, ADF陽 性 のMT-2細 胞 はMT-1細 胞 に 比 し細 胞 質 は 濃 く染 色 され て い た.
Fig. 3 Immunohistochemical staining with
anti-ADF antibody of case 3 (HABA-B)
(•~20). Bronchial epithelia were strongly
positive as shown by the arrow (the
upper one). The lower one was negative
control stained with rabbit normal
serum. 3. 肺 組 織 中ADFの 局 在 の 検 討 1) HABA症 例 HABA 4例 で は 全 例 の 肺 組 織 中 にADFの 局 在 が 証 明 さ れ た(Table 2). ADFの 肺 組 織 中 の 分 布 に つ い て は,気 管 支 上 皮 細 胞(Fig. 3 -6) ,肺 胞 上 皮 細 胞,血 管 内 皮 細 胞 に 陽 性 で あ り,さ らに 肺 胞 腔 あ る い は 気 道 内 に 脱 落 した 肺 胞 マ ク ロフ ァー ジ を主 体 とす る細 胞 に もADFが 陽 性 で あ っ た(Fig. 4).各 症 例 毎 にADFの 肺 組 織 中 の 局 在 を検 討 し た と こ ろ,症 例1か ら 症 例4ま で の 全 例 に お い て気 管 支 上 細 胞 はADF
Fig. 4 Immunohistochemical staining with
anti-ADF antibody of case 3 (HABA-B).
Bronchial epithelia were strongly posi
tive. Desquamative cells were also posi tive as shown by the arrow (•~100).
Fig. 5 Immunohistochemical staining with
anti-ADF antibody of case 3 (HABA-B).
Bronchial epithelia were strongly posi
tive. Nuclei of bronchial epithelia were
also positive as shown by the arrow (•~ 200).
HABAに お け る 肺 組 織 中ADFの 検 討 863 が 陽 性 で あ っ た.さ らに 症 例3で はADFが 気 管 支 上 皮 細 胞 の 核 に も認 め ら れ た(Fig. 5).症 例1か ら 症 例3ま で のHABA-B全 例 で肺 胞 上 皮 細 胞,血 管 内 皮 細 胞 にADFが 陽 性 で あ り, う ち症 例1,症 例3で は 気 道 内 の 脱 落 細 胞 や 一 部 細 胞 周 囲 の 間 質 も 陽 性 に 染 色 さ れ た. 2) DPB症 例 DPBで は6例 中1例(16.7%),即 ち症 例5 に お い て の み,気 管 支 上 皮 細 胞 にADFの 局 在 が 証 明 さ れ た(Table 2, Fig. 7) .本 例 で は 気 管 支 上 皮 細 胞 以 外 にHABA-B症 例 でADF の 認 め られ た 肺 胞 上 皮 細 胞,血 管 内 皮 細 胞,気 道 内 の 脱 落 細 胞 等 に つ い て は 陰 性 で あ っ た.さ ら に 抗HTLV-I抗 体 は 全 例 陰 性 で あ る が, HTLV-I関 連 反 応 は6例 中2例 に 陽 性 で あ り, 本 例 もHTLV-I関 連 反 応 陽 性 で あ っ た. 3) IIP症 例 IIPで は5例 中2例(40%),即 ち 症 例13,症 例14に お い て 気 管 支 上 皮 細 胞 に 限 局 したADFの 局 在 が 証 明 さ れ た(Table 2, Fig. 8).尚IIP に お け るHTLV-I関 連 反 応 は5例 中2例 に陽 性 で あ っ た が, ADF陽 性 で あ っ た 症 例13,症 例14 で はHTLV-I関 連 反 応 陰 性 で あ っ た. 4) ADF発 現 の 疾 患 別 並 び に 組 織 別 検 討 全 体 的 に 各 種 肺 組 織 中 細 胞 で のADFの 発 現 はHABAで はDPB, IIPに 比 べ 強 く染 色 さ れ て お り, ADF発 現 量 に 差 が あ る と思 わ れ た.各 種 細 胞 間 で の 比 較 で は 気 管 支 上 皮 細 胞 で最 も 強 く認 め ら れ,次 い で 肺 胞 上 皮 細 胞,脱 落 細 胞, そ して 血 管 内 皮 細 胞 で は 最 も軽 度 のADF発 現 で あ っ た.
Fig. 6 Immunohistochemical staining of case 4
(HABA-A) with anti-ADF antibody (•~
50). Bronchial epithelia were positive as
shown by the arrow.
Fig. 7 Immunohistochemical staining of case 5
(DPB) with HTLV-I related reaction
with anti-ADF antibody (•~50). Bron
chial epithelia were positive as shown by
the arrow (the uppe one). The lower one
was negative control stained with nor
mal rabbit serum.
Fig. 8 Immunohistochemical staining of case
14 (IIP) with anti-ADF antibody (•~100).
Bronchial epithelia were positive as
考 察 DPB及 びIIPは 難 治 で あ る上 に 慢 性 進 行 性 の 経 過 を と り,病 因 に つ い て も現 在 な お 不 明 と さ れ て い る.こ れ らDPB及 びIIPの 中 に 抗 HTLV-I抗 体 陽 性 を示 す も の が あ り,特 にDPB で は 高 率 にATLの 併 存 を 認 め て い る.ま た さ ら にHTLV-I関 連 反 応22-24,31)につ いて も両 疾 患 に お い て 高 率 に 陽 性 で あ る こ とか ら,木 村 は 抗 HTLV-1抗 体 が 陽 性 化 す る 前 段 階 を 反 映 して い る 可 能 性 を指 摘 して い る.こ のHTLV-I関 連 反 応 は,こ れ ま で の 検 討 か らHTLV-I自 体 で は な く, HTLV-I感 染 細 胞 の 構 成 蛋 白 に よ っ て 惹 起 さ れ る 特 異 な 反 応 で あ る と推 察 さ れ て い る. HTLV-Iが 癌 遺 伝 子 を持 た ず,キ ヤ リヤ ー か ら ATLへ の 移 行 も約1万 人 に1人 とわず か で あ る こ と を考 え る時, HABA22-27)の 病 態 で は宿 主 免 疫 能 に お い て 重 要 な 働 き を 示 す リ ン パ 球 が HTLV-I感 染 に よ り既 に何 等 か の 変 化 を受 け て お り,一 部 は 前 癌 状 態 か ら良 性 腫 瘍 的 状 態,さ らに は悪 性 腫 瘍 発 症 に至 る発 癌 過 程26,32)にあ ると 思 わ れ る. IIPに つ い て は 従 来 よ りその 経 過 中 に 高 率 に 肺 癌 の 合 併26,33,34)をみ る こ とが 知 られ て い る.こ の 経 過 は あ た か も ウ イ ル ス 関 与 の 明 らか な 肝 炎 か ら肝 硬 変 に 進 行 し,肝 細 胞 癌 を 合 併 す る に 至 る 経 過35)と相 似 性 が あ る.一 方DPBに つ い て は 慢 性 下 気 道 感 染 症 を伴 う免 疫 異 常 状 態 の 存 在 や,病 理 組 織 学 的 な 検 討 に お け る 細 気 管 支 周 囲 へ の リ ンパ 球 な ど の 円 形 細 胞 浸 潤 な い し はbronchus-associated lymphoid tissue
(BALT)36)の 過 形 成 で あ る との考 え方 な どか ら, 本 症 の 発 症 にHTLV-Iを は じめ とす る ウ イ ル ス 感 染 関 与 の 可 能 性 が 考 え られ る. HTLV-I感 染 に よ り引 き起 こ さ れ る リンパ 球 の 異 常 は, HTLV-IのRNAが 逆 転 写 を受 け DNAに 読 み か え られ て リンパ 球 の 中 に プ ロ ウ イ ル ス と して 組 み 込 まれ る こ と で あ る.こ の プ ロ ウ イ ル ス 遺 伝 子 は4つ の 部 分 か ら成 る とい わ れ, そ の ひ とつ にpX遺 伝 子 部 位 が あ り, pX遺 伝 子 産 物 で あ るp40/Tax蛋 白 は,Tリ ン パ 球 増 殖 因 子 で あ るIL-2に 対 す る レ セ プ ター,即 ち IL-2R/p55(Tac抗 原)を 持 続 的37)に発 現38)し, さ ら に 癌 化 作 用 に 関 連 し て転 写 機 能 を亢 進 させ る機 構 の あ る こ とが 新 た に 判 明39,40)して い る.即 ちHTLV-I感 染 に よ りpX遺 伝 子 の 働 きに よ るIL-2レ セ プ タ ー の 発 現 か らTリ ン パ 球 の 持 続 的 増 殖 が も た ら され, ATLの み な ら ずDPB, IIPの 発 症,さ らに は そ の 進 展 に 深 く関 与 し て い る と考 え られ た. HTLV-I感 染Tリ ンパ 球 か ら のADF産 生 が 淀 井 に よ り報 告9-12)され, ADFの 分 子 特 性 は 分 子 量 約13KD,等 電 点5の 酸 性 蛋 白 で あ り,酸 化 還 元 酵 素 で あ るThioredoxin13-15)と 同 一 分 子 で あ る こ とが 判 明 して い る.こ のThioredoxinは methionine sulfoxideの 還 元 作 用 を 持 つ 物 質41,42)で-Cys-Gly-Pro-Cys-の 部 位 が 活 性 作 用 を有 し,シ ス チ ン 残 基 の プ ロ トン供 与 に よ り, 標 的 蛋 白 のS-S結 合 を開 裂 させ る還 元 活 性 を 示 す. Thioredoxinは 大 腸 菌 で は バ クテ リ オ フ ァ ー ジ感 染 に 伴 い 誘 導 さ れ フ ァー ジDNAの 合 成 回路 を促 進38)し,有 核 細 胞 で は単 純 に 酸 化 還 元 酵 素 と して だ け で な く,蛋 白 合 成 の 開 始,イ ン ス リン 活 性 の 調 節,グ ル コ コ ル チ コ イ ドレセ プ ター の 活 性 化 な ど が 報 告43-45)さ れ て い る.淀 井 ら は, ADFのcomplementary DNA (cDNA) を基 に そ の 蛋 白の 疎 水 性 分 析 を行 い,N末 端 の 15残 基, Thioredoxinと の相 同部 位,C末 端 の 約30残 基 が 親 水 性 に 富 ん で い る こ と を 明 らか に し,こ れ らの 合 成 ペ プ チ ドを作 製 し た.さ ら に, 家 兎 を こ の 合 成 ペ プ チ ドで 感 作 し,抗ADF抗 体 を作 成11)し,細 胞 内 のADFの 分 布, HTLV-I 感 染 とADF産 生 との 関 連,及 び 各 種 病 理 あ る い は正 常 組 織 中 のADF分 布 を検 索 した .正 常 組 織 で は 活 性 化 リン パ 球 の み な ら ず,胸 腺 及 び リン パ 節 で は,非 リン パ 系 の 樹 枝 状 細 胞 にADF 発 現 が 認 め ら れ,病 的 状 態 と してATL患 者 の 皮 膚 組 織, hepatitis B virus陽 性 肝 癌 組 織,そ の 他human papilloma virusやEpstein-Barr virusの 感 染 し た組 織 な ど もそ の 発 現 が 認 め られ
て お り,各 種 ウ イ ル ス 感 染 とADF発 現 との 関 連 性 を 推 定11,43)して い る.と りわ け 子 宮 頚 癌 組 織 で は, in situ hybridization法 に よ り子 宮 内 膜 の 初 期 癌 病 変 部 にhuman papilloma virus DNAの 発 現 とADF蛋 白 との 間 に 相 関 が 証 明46)
さ れ て い る. ADFは ま た,紫 外 線 や 放 射 線 照 射 に よっ て も皮 膚 上 皮 に誘 導 され る こ とが 報 告43,44)
HABAに お け る肺 組 織 中ADFの 検 討 865 さ れ て い る. 今 回,抗ADF抗 体 を1次 抗 体 と し て 用 い た 免 疫 組 織 染 色 法 に よ りHABA, DPB,並 びにIIP の 肺 組 織 中 のADFの 局 在 に つ い て検 討 を行 い, 細 気 管 支 肺 胞 領 域 の 特 異 な病 態 とHTLV-Iと の 関 連 を 追 求 し た.予 備 実 験 と して 行 っ たMT-1 細 胞 とMT-2細 胞 に お け るADF検 出 で はMT -1で 約10% , MT-2で 約70%の 細 胞 にADF陽 性 で あ り,各 々,こ れ ま で の 検 討29,30)から 明 らか に さ れ て い るMT-1, MT-2細 胞 中 のHTLV-I 感 染 細 胞 比 率 と一 致 し て お り, HTLV-Iの 感 染 状 態 をADFの 検 索 か ら推 定 で き る こ と が 明 ら か に さ れ た.次 に 肺 組 織 中 のADFの 局 在 の 検 討 で は, HABA症 例4例 全 例, DPB 6例 中1 例,及 びIIP 5例 中2例 の 肺 組 織 に お い てADF の局 在 が 明 らか に さ れ た. HABA症 例 で はADF が 気 管 支 上 皮 細 胞,肺 胞 上 皮 細 胞,血 管 内 皮 細 胞,及 び 気 道 内 の 脱 落 細 胞 に 陽性 で あ っ た.一 方, HTLV-I関 連 反 応 陽 性 のDPB症 例1例 及 びHTLV-I関 連 反 応 陰 性 のIIP症 例2例 で は ADFが 気 管 支 上 皮 細 胞 に 限 局 して陽 性 で あった. HABA症 例 に お け る肺 組 織 中ADFの 分 布 か ら,肺 に 局 在 す るHTLV-I感 染Tリ ンパ 球 に よ っ て 産 生 さ れ たADFが リ ンパ 系 組 織 に 留 ま ら ず,肺 組 織 内 に 広 範 な影 響 を及 ぼ して い る こ と が 考 え ら れ た. ADF発 現 量 を免 疫 染 色 の 程 度 か ら半 定 量 的 に 判 定 して 比 較 し た と こ ろ, HABA で はDPB, IIPに 比 べ 多 量 にADFが 発 現 して い る と思 わ れ,感 染 ウ イ ル ス 量 の 差 に 関 連 して い る の か も しれ な い.ま た 血 管 内 皮 細 胞 に 比 べ 気 管 支 上 皮 細 胞,肺 胞 上 皮 細 胞 で の 発 現 量 が 明 らか に 多 く認 め ら れ て お り,病 態 との 関 連 で 注 目 さ れ る. DPB及 びIIPの 陽性 所 見 と し て, ADFは 気 管 支 上 皮 細 胞 に 限 局 し て 陽 性 で HABAと は 異 な っ て お り,潜 在 的 なHTLV-I 感 染 状 態,あ る い はHTLV-Iに 関 連 し た他 の レ トロ ウ イ ル ス感 染 な ど の 可 能 性 が 考 え られ た. HABAの 特 異 病 態 に お け るADFの 役 割 に つ い て は,リ ン パ 球 の 増 殖 に 係 わ るIL-2R/ p55(Tac抗 原)の 発 現 作 用,そ れ に 続 くTリ ン パ 球 の 持 続 的 増 殖,さ ら に は 細 気 管 支 肺 胞 領 域 に お け るBALT様 の リン パ 球 集 簇 形 成 あ る い は 肉 芽 腫 形 成 と い っ た 直 接 的 な作 用 が 考 え ら れ る.さ ら に リンパ 球 や マ ク ロ フ ァー ジの 活 性 化47) に よ り 産 生 さ れ る 各 種 サ イ ト カ イ ン48-50)が HABAの 病 像 形 成 に 重 要 な働 き を して い る可 能 性 も考 え ら れ た.最 近,気 管 支 上 皮 細 胞 か ら insulin like growth factor (IGF)が 産 生 され る 報 告49,50)がな さ れ,こ のIGFに は 線 維 芽 細 胞, 及 び平 滑 筋 細 胞 の 増 殖 促 進 作 用50)が認 め られ て い る. HABA症 例, DPB並 び にIIP症 例 に お い て 気 管 支 上 皮 細 胞 に 局 在 の 証 明 さ れ たADFの 役 割 に つ い て は,充 分 明 らか で は な い.し か し な が ら,こ のADFに よ り亢 進 す る気 管 支 上 皮 細 胞 のIGF産 生 が 肺 の 線 維 化 を含 め た器 質 的 病 変 形 成 に 関 与 して い る こ とが 推 察 さ れ た. 結 論 細 気 管 支 肺 胞 領 域 に 特 異 な 病 像 を 形 成 す る HABA, DPB並 び にIIPの 病 態 解 明 の 目的 で 肺 組 織 中ADFの 局 在 を検 討 した. 1. MT-1, MT-2細 胞 で は 各 々 約10%,約 70%の 細 胞 の 細 胞 質 にADFの 局 在 が 証 明 さ れ た が,核 部 分 に は 認 め な か っ た. 2. 肺 組 織 に お け る検 討 で は, HABA 4例 全 例, HTLV-I関 連 反 応 陽 性 のDPB 1例, HTLV-I関 連 反 応 陰 性 のIIP 2例 に おいてADF
が 陽 性 で あ っ た. 3. ADFの 肺 組 織 中 の 分 布 に つ い て は, HABAで は 各 種 上 皮 細 胞,一 部 間 質 か ら気 道 脱 落 細 胞 に ま で 証 明 さ れ, DPB, IIPで は 気 道 上 皮 細 胞 の み に 証 明 さ れ た. 4. DPB, IIPに お け るADF陽 性 症 例 で は, 抗HTLV-I抗 体 は 陰1生で あ り, HTLV-I関 連 反 応 が 陽 性 の 症 例 と陰 性 の もの が 認 め られ た. 以 上 よ り, HABAで は肺 局 所 にお いて, HTLV-I感 染Tリ ン パ 球 か ら産 生 され るADFが 特 異 病 態 の 形 成 に 関 与 して い る こ とが 推 察 さ れ た. 一 方ADF陽 性 のDPB IIPに お い て は HTLV-Iの 潜 在 的 な 感 染 状 態,あ る い は 関 連 す る ウ イ ル ス 感 染 が 存 在 して お り,発 症 あ る い は 病 像 進 展 と密 接 に 関 連 して い る可 能 性 が 推 察 さ れ た. 稿 を終 え るに あた り,終 始 御 指 導御 校 閲 を賜 りま した恩 師 木 村郁 郎 教 授 に深 甚 の謝 意 を表 わ します と
共 に,御 指 導 御 助 言 を頂 きま した 多 田慎 也 講 師 に 深 謝 致 します. 尚,本 論 文 の要 旨は平 成2年 度 厚 生省 特 定 疾 患 び まん性 肺 疾 患調 査 研 究班 及 び第31回 日本 胸 部疾 患 学 会 総会 にお いて発 表 し た.
文
献
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