所 属
学 位 論 文 審 査 結 果 の 要 旨
三 重 大 学 大 学 院 医 学 系研 究 科
甲 生 命 医 科 学 専 攻 基 礎 医 学 系 講 座
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氏 名 薬 理 ゲ ノ ミ ク ス 分 野主 査 溝 口 明 審 査 委 員 副 査 冨 本 秀 和
副 査 竹 内 万 彦
（ 学 位 論 文 審 査 結 果 の 要 旨 ）
笹 川 朔 太
In Vivo Detection of Mitochondrial Dysfunction Induced by Clinical Drugs and Disease‑Associ,ated Genes Using a Novel Dye ZMJ214 in Zebrafish
［主 論 文 審 査 結 果 の 要 旨］
著 者 ら は 論 文 に お い て 下 記 の 内 容 を 述 べ て い る
。
ミトコ ン ド リ ア の 機 能 不 全 は 、 様 々 な 薬 物 誘 発 毒 性 お よ び 遺 伝 的 障 害 に 関 与 し て いる
。
近 年 ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ は 、 化 学 ス ク リ ー ニ ン グ と ゲ ノ ム ス ク リ ー ニ ン グ の 両 方 に つ い て 多 彩 な モ デ ル 動 物 と し て 注 目 さ れ て いる。そ の 透 明 性 を 利 用 し て 、 ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ に お け る 化 学 物 質 お よ び 遺 伝 子 の 新 規 機 能 を 同 定 す る た め の 様 々 なin vivo
蛍 光 イ メ ージ ン グ 法 が開 発 さ れ て い る。
し か し な が ら 、 生 き た ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ に お い て ミ ト コ ン ドリ ア 膜 電 位 を 検 出 す る こ と が で き る 蛍 光 プ ロープ は 存 在 し て い な い。
こ の 研 究 で は 、 受 精 後 4〜 8日 目 の 生 き た ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ に 単 純 な 浸 漬 で投 与 で き ミ ト コ ン ド リ ア 膜 電 位 を 検 出 で き るZMJ214
と い う 新 規 シ ア ニ ン 色 素 を 同 定 し た。ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ の ZMJ214
シ グ ナ ル は 、 オ リ ゴ マ イ シ ン お よ びFCCP
によ っ て そ れ ぞ れ 増 加 お よ び 減 少 し、ZMJ214
蛍 光 と ミ ト コ ン ド リ ア 膜 電 位 と の 聞 に 正 の 相 関 が あ る こ と が 示 唆 さ れ た。 ZMJ214
で 染 色 さ れ た ゼ ブ ラ フ ィ ッシュのinvivo
イ メ ー ジ ン グ は 、 ミ ト コ ン ド リ ア 毒 性 の た め に 市 場 か ら 回 収 さ れ た 抗 糖 尿 病 薬 ト ロ グ リ タ ゾ ン お よ び 抗 て ん か ん 薬 トル カ ポ ン に よ っ て 誘 発 さ れ る ミ ト コ ン ド リ ア 膜 電 位 の 変 化 を 検出 した。対 照 的 に ト ロ
グ リ タ ゾ ン お よ び ト ノ レ カ ポ ン に 類 似 し 商 業 的 に 使 用 さ れ て い る ピ オ グ リ タ ゾ ン お よ び エ ン タ カ ポ ン は 、ZMJ214
で 染 色 さ れ た ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ に お い て ミ ト コ ンド リア 膜 電 位 の 変 化 を 引 き 起 こ さ な か っ た。 ZMJ214
で 染 色 さ れ た ゼ ブ ラ フ ィ ツ シ ュ のラ イ ブ イ メ ー ジ ン グ は ま た 、 自 閉 症 に 関 連 す る ミ ト コ ン ド リ ア 担 体 タ ン パ ク 質 で あ るslc25a12
のノ ッ ク ダウ ン が 、 ミ ト コ ン ド リ ア 膜 電 位 を 調 節 不 全 にす る こ と を 明 ら か に し た
。
これらの結果は、ZMJ214
がin vivo
で ミ ト コ ン ド リ ア 機 能 不 全 を 引 き 起 こ す 化 学 物 質 お よ び 遺 伝 子 を 同定 す る た め の 有 用 な ツ ー ノレ で あ り 得 る こ と を 示 唆 し て い る。
新 規 蛍 光 色 素
