肝硬 変 患者 清 中 け 作 用阻 害物質 関す 研究

肝 硬変患 者^血清中^{に お}け^{る イ ン ス リ ソ}作用 阻害物質^に関 す^る研 究

金 沢大 学 医学 部 内科 学 第 ^一 講 座 (

^主

任^:小 林 健 ^一教 授)

白 田 里 香

( 平成

⁴

年

⁷

月

2 8 日

受付)

肝 硬 変^に

^お

け

る イ

^{ン ス}

リ

ン抵抗 性 発 現^の機 序

^を

解 明 す

^{る た め}

, 肝 硬変 患 者

^血

清 中^の

^イ

^{ン ス}

^リ

^ン作 用 阻害 活性

^を

^ラ ッ

ト

脂 肪 細 胞

を

用^い

て

検 討

し た

^. 健 常^ラッ

ト よ り

分 離

した

脂 肪細 胞

と

肝 硬 変 患 者

血

清

と を

前貯 置

した

後, 脂 肪 細 胞

に

対す

る

^{t 2 5}

Ⅰイ

ン ス

リ

ソ結 合 率

を

測 定 す

^{る と}

, 健 常 者

^血

清

^で

前 肘 置

^{し た}

場 合^に此

しイ

ンス

リ

ソ結 合 率^に有意 差

は

認

め ら れ な か

っ

た

^.

し か し

, 肝 硬 変 患 者

血

清

^と

前 肺 置

L た

健 常^ラッ

ト

脂 肪 細 胞

^を

用^い糖 輸 送率 (g

l

u c o s e c

l

e a r a n c er ate,

G C R

)

を

検 討

した と

こ

ろ

,

イ

ン スリソ

非刺 激 下 (

^b

^a.^{s a}

^l

^{), 刺激 下 (st}

ⁱ

^{m u}

^l

^ate

^d

^{) の いず}

^れ

^に

^お

^い

^て

^{も, 健 常 者}

^血

^{清前 貯 置の場 合}

^に

^比

^{し G C R ほ}

^{有 意に低 下}

^{し て}

^い

^た

^.

^ま

た

,

イ

^{ンス リソ}反 応 性^の指 標

^で

あ

^る

(

^イ

^{ン ス}

^リ

^ソ刺 激 下

^{G C R}

)/( 非 刺激 下

^{G C R}

)

^ほ

肝 硬変 患者

^血

清 前 貯 置

^で

低 下 傾 向

^を

,( 刺 激 下

G C R

卜( 非 刺 激 下

G C R

)

は

肝 硬 変 患 者

血

清 前 貯 置

で

有 意^に低 下

し て

い

た

^.

̀

一方,

イ

^{ン ス}

リ

^ン非 刺 激 下 あ

^る

^い

^ほ

刺 激 下

G C R と 血

中

^イ

^{ン ス}

^リ

^ソ値, 他^の

^イ

^{ンス リソ}括 抗^{ホ ル モ ン},

血

糖^コ ン

ト

^{ロ ー ル}

や

肝 機 能^の指 標

な ど と

の間に有 意

な

相 関 関 係

ほ

認

め られ な か

^っ

た

^. 次^に, 本 阻 害 活 性^の安 定 性

を5 6 ℃3 0

分 間 熱処

理

, あ

る

^い

は

凍 結 融 解に

よ り

検 討

し た

^.

上

記 処 置

に よ り

, 無 処 置

^血

清^の際

^{み ら れ た イ}

^ンス

^リ

^ソ非 刺 激 下

お よ び

刺 激 下

G C R

の低 下

は み ら れ

な く

な り

,

イ

ン ス

リ

ソ作 用 阻 害 活 性

は

失 活

し た

^.

ま た

, 肝 硬 変 患 者

^血

清

を

^{モ ル カ} ット

Ⅱ に

て分 子量 分画

^し

^ラッ ト脂 肪細 胞 糖輸送 率^に及 ぼ す 影 響

^{を み た と}

^こ

^ろ

, 分

子

量

1 万

未満

の分 画^に阻 害活 性

が

認

め ら れ た

^. 以

上

の結 果

よ り

肝 硬 変 患 者

血

清 中^に

は

,

イ

^{ン ス}

リ

^ソ作 用

を イ

^{ン ス}

リ

^ソ受 容 体 結 合 後, 特^に糖 輸 送^{の レベル}

^{に お}

^い

^て

阻 害 す

^る

活 性

^が

存 在 す

^る

^こ

^{と が}

判 明

^した

^,

^{ま た}

, 本 阻 害 活 性 物 質

^ほ

,

イ

ンス

リ

ソ

や そ

の他^の既 知^{の ホル}

モ ン

と は

無 関係

な

未 知^の物 質^であ

り

, 比 較 的 低 分

子

領域の物 質

^で

あ

る 可

能 性

が

示

さ

れ

た

^. 本 宿 性

は

, 肝 硬変 患 者^に

み ら

れ

る イ

ン ス

リ

ソ抵 抗性^{の 一} 因

を

担って い

る 可

能 性

が

あ

り

, 今後

さ ら

^{に こ の}阻 害 活性 物 質

を

解 明す

る

こ

と が

, 肝 硬変^{で の}耐糖 能 異 常

を

説 明 す

^る

糸^口

に な る と

思

わ れ る

^.

K e

y

^{w o r}

d

s liver ci^rrho si^s,in sulin resi^s

^t

a n c e, in sulin re c e

p t

^or,

g

lu co s e

t

ran s

p

^{o r}

t

肝臓

は

, 空 腹 時^に

お

け

^る

糖 産 生

や

食 後^の糖 処

理 な ど

生 体^{で の} 糖 代 謝^の恒 常 性

を

司

る

重 要

な

臓 器^{の 一} つであ

る

^.

そ れ

故, 肝 臓

が

障 害

を

受

け た

場 合 耐 糖 能^に異常

^を

き

^た

す^こ

^{と は}

容 易^に想 像

^さ れ

,実 際 肝 硬 変(

1i

v e r c

i

r r

h

o s

i

s,

L C

)^の

よ

う な慢 性^で高度^の肝 障 害患 者

^{に ブ ド ウ}

糖 負荷 試 験

^を

施行 す

^{る と}

, 大多 数

^が

境 界 型 も

^し

く

ほ

糖 尿 病型

を 呈

す

る

^こ

と が

知

られ

^{て い}

る

^1).

L C

患 者^に

お

け

^る

耐糖 能 異 常^の特徴

ほ

,

血

糖^の基礎 値

は 正

常^であ

る が ブ ド ウ

糖 負 荷後 高 値

を 示

す^一 方,

血

中

^イ

^{ン ス}

^リ

^ン値

^ほ

基礎 値

^{よ り}

高値

^{を 呈} し

,

ブ ド ウ

糖 負 荷後 過 剰分 泌

を

示 す^こ

^と

^にあ

る

^. 現 在, こ の耐 糖能 異 常 発 現^の機 序^に関

^{して は}

必 ず

し

も

明 ら か

に

な

っ

た と ほ

言

い難^い

が

,

L C で ほ ブ ド ウ

糖 負荷 時^, 高

血

糖

と

共^に高

イ

^ンス

リ

ソ

血

症

を

伴 う^こ

と が

多く,

イ

ン ス

リ

ソ抵 抗 性^の果

た

す役 割

が

強 調

され て

き

^た

^2).

^{た だ}

,

イ

ンス

リ

ン抵 抗性

^は

肝 臓^に

^お

け

^{る イ}

^ン

ス

リ

^ソ抵 抗 性

と

, 筋 肉

や

脂 肪 阻織

な ど

末 梢 魁 織^に

お

け

る イ

^{ン ス}

リ

ソ抵 抗 性に分

け

て考

^{え る 必}

要

^が

あ

る

, 空 腹 時

^血

糖 値

^{が 主 と し} て

肝臓

か ら

^の糖 産 生

に よ

って規 定

さ

れて い

る

^{3 )こ}

と を

考 慮 す

^る と

t

L C

で

は

少

な

く

と

も 肝 糖産 生

は 正

常^に保

た

れ

て お り

, 肝 臓

で

の

イ

ン ス

リ

ソ抵 抗 性

^は

あ

ま り

問 題^に

な

ら

な

^{い こ}

と

に

な る

^. 実 際

P

etr

id

e s

ら

^{4 )}

は

,

L C

患 者^に

グ

ル ^{コ ー} スク ラン

プ を

行^い生 理

的

^血

中

^イ

^{ン ス}

^リ

^ン濃度^に

^お

け

^る

肝 糖 放 出

^を

検 討

^{し た と}

^こ

^ろ

,

L C

患 者

で

も 肝 糖 放 出

は

健 常 者

と

同様^に抑 制

さ れ る

こ

と を

報告

し

て い

る

. こ の こ

と は

,

L C

に

お

け

る イ

ン スリ ン抵 抗性

^が

肝臓

よ り

も 末 梢 阻 織^に大 きく 影 響

^を

受

け る 可

能 性

を 示

唆

し

^{て い}

る

.

末 梢 組 織で の糖 利 用能^の低 下^の原 田

と し て は

, 従 来

イ

ン スリソ

受 容 体^{レベ ル に}

^お

け

る イ

^{ン ス}

リ

ン結 合 能^の低 下^{5 )}

^や

, 受 容体以 後^{で の}

イ

ン ス

リ

ン作

用

^の異常⁶⁾

な ど が

論

じ ら れ

^てき

た

^.

し か し

,

L C と

いう病 態

^を

考

^{え る と}

t 糖 利 用

^を

抑制 す

^る

何

^{ら か}

^の物質

が 血

中^に存 在 す

る

^{7 )}

可

能 性 も 考

え て お

く

必

要

が

あ

る

^.

そ

^こ

で

今

^回

著 者

は

,

L C

患 者

血

清 中^に

^イ

^{ン スリ ソ}作

用 を

阻害 す

る

活 性

^が

存 在 す

る か 否 か を

検 討す

る た め

, 患 者

血

清

^と

前貯置

し た

健 常^ラッ

ト

脂 肪 細 胞

を

用^い ,

イ

ン ス

リ

ン受 容 体 結合 軋

^イ

ン ス

リ

ソ刺 激 下

^{お よ び}

非 刺 激 下

^で

^の糖 輸 送 動 態

を

測 定

^した

^.

^ま た

, 本 稿 性

と 血

中

イ

^{ン ス}

リ

^ン値

や

種^{々 の}

イ

^{ン ス}

リ

^ン括抗^{ホ ルモ}

ン

と

の関係,

血

糖^{コ ン}

^ト

^{ロ ール}

^や

肝 障害^の程 度

^と

^の関係

な

ど

を

検 討

し

, 本 宿 性

が

既 知の物 質^に関 連 す

^{る か}

否

か を

推 察

^した

^. 更

に

,

L C

患 者

血

清に熱 処

理

, 凍 結 融 解 処 理 あ

る

^い

は

分子 量 分画 処

理 を

加 え

^る

^こ

^と

^に

よ り

, 本 活 性

が ど

う変 化 す

^{る か}

^{につい て}検 討

し た

^.

A b br e via

t

io n s : B G, blo od

_g

l^{uc o s e}

;

B S A , bo vin e s e r u m albumi n

;

C , C O n

t

r Ol

_;

Cor

t

_, CO r

t

is ol; F B G･fa s

t

in

g

blood

_g

lu c o s e

;

F F A, fre e fa

tt y

a cid

_;

G C R,

g

lu c o se cleara nce ra

t

e

;

G H,

g

^{r O W}

t

h ho r m o n e

;

G L U T ･

g

luc o s e

t

r a n s

p

^{o r}

t

e r ; H b AIC_,

g

l

_y

c ohe m o

g

lob in A IC

;

H P T, he

p

a

p

la s

t

in

t

e s

t ;

I C G , indo c

y

^{a n}in e

g

^{r een ;} IRl･

肝 硬変 患 者

^血

清 中^の

^イ

^{ン スリン}作 用 阻 害 物 質^{につ い}

^て

対 象

お よ

び 方 法

Ⅰ

^. 対 象

対象

と し た

肝 硬 変 患 者 (

^{L C}

) 群

は1 9 8 6

年

4

月

か ら1 9 8 9

年

9

月

ま で

^に金 沢 大学 第

1

内科に通 院 も

し

く

ほ 入

院 中

^で

あっ

た

患 者

で_, 全例 腹

^水

, 黄 痘

な ど を

認

め な

^い代 償 期^の肝 硬 変^であ

り

, 腹 腔鏡^, 肝 生 検 所 見

^{よ り}

確 定 診 断

^{し た}

^･

^{な お}

, 病 歴, 家 族 軋 臨 床^症状

^{お よ び}

^{糖 尿病 網 膜 症}

^{な ど}

^{の合 併症の有 無に}

^{よ り}

^{, 一 次 性} 糖尿病^の関 与

^が

明

ら か な

場合

^ほ

対 象

^{よ り}

除 外

^{し た}

^･

^{ま た}

^, 膵 疾 乱 腎疾患^, 内分 泌 疾 患

な ど

他 疾 患^の合 併

^が

明

ら か な

場 合

^{お よ} び

標準体重

^{よ り + 1 0}

% 以

上

^の肥 満 者 も 除 外

し た

^･

1 2 ら

Ⅰイ

^{ン ス}

リ

^ソ結 合 率^の測 定^艦

^{は L C}

群

^{1 7}

名 ( 男 性

^{1 4}

名, 女 性

3

乳 平 均 年齢

^{6 1}

^.

^{1 ±2}

^.

³

歳), 健 常 対照 老 (c o ntr o

l

,

C

) 群

8

名 (男性

7

名, 女鱒

¹

^{名, 平 均年 齢}

^{3 2}

^■

^{8 ± 5}

^･

⁹

^歳)

^を

^{対 象}

^{と し}

^{,糖 輸}

送率^の測 定^に

は L C

群

2 8

名 ( 男 性

1 1

名^, 女 性

1 7

名, 平 均 年 齢

49

^.

5 士0

^.

9

歳),

C

群

^{1 7}

名 ( 男 性

^{1 3}

名, 女 性

4

名, 平 均 年 齢

30

^.

2 土 1

^.

1

歳)

を

対 象

と し た

^.

Ⅱ

. 方 法

1

^. 臨 床検 査

対 象 者^に 対

し

早 朝 空 腹 時^に採

血 を

行^い ,

血

糖 値 (

^{b l}

^{o o}

^d

g

l

^{u c o s e},

B G

),

グ リ

^{コ ヘ} モ

グ

^ロ

ビ

ン

A

IC (g

l

_yc o

h

e mog

l

o

bi

n

A

IC,

H b A

IC),

血

清

イ

^{ン ス}

リ

^ソ濃度 (

ⁱ

^{m m} u n o r e a ct

i

v e

i

n s u

li

n,

I RI

), 成 長^{ホ ル モ ン} (g^{r o w}t

h h

o r m o n e,

G H

),

コル チ

ゾ

^ー ル

(c ort

i

s o

l

,

C

o rt), 遊 離 脂 肪 酸 (

^f

^{r e e}

^f

^at t y ^{a c}

id

,

F F A

)

^を

測 定

^し た

.

な お

,

血

糖^ほ

グ

ル^{コ ー} ス

オ キ

^シ

ダ

^{ー ゼ}法,

I R I お よ び C

o rt

ほ

栄研

^イ

^{ム ノ ケ ミ カ ル}研 究 所 ( 東 京) 製

^キ

^ッ

^ト

,

G H ほ ダイ

ナ

ポ

ッ

ト

社 ( 東 京) 製

キ

ッ ト

を 用

^い

そ れ

ぞ

れ R I A

法^に

よ り

,

ま た血

清遊 離脂 肪 酸

^は

和 光 純 薬

工

業 社 ( 大 阪) 製^の試 薬

を 用

^い

た

酵素 法に

よ り

測 定

し た

^.

ま た

対 象

と な

っ

た L C

群 中

^{3 8}

名^に

75

_g 経^口

ブ ド ウ

糖 負 荷 試 験 (o r a

l

g

l

u c o s e to

l

e r a n c e te st_,

O G T T

)

を

施 行

^し

,

日

本 糖 尿 病学 会^の

^{7 5}

g‑

^{O G T T}

^{の診 断に関す}

る

委員 会^の勧 告^町に従^って判定

し た

^.

2

. 遊離 脂 肪 細胞^の調 整

市販ラッ

ト 用

固 形 飼 料

を

自 由^に摂 取

さ せ た

体 重

^{1 3 0}

‑

^{1 5 0}

g の

ウ

ィ ス タ^ー 系 雄 性ラッ ト

を

,

ド

ラ

イ

ア

イ

スに て窒 息

死 さ

^せ,

ただ ち

に副睾 丸

周 囲

^の脂 肪 組 織

を

摘 出

^{し た}

^{. コ ラ}

^ゲ

^{ナ ー ゼ}

²

mg/^m

^l

(フ ナ^コ シ , 東 京) ^の

入

^っ

た ポ リ

^エ チレ ン製の バ

イ

^アル (

20

m

l

,

W h

e ato n 社,

M ill

v

ill

,

U

.

S

.

A

)^{. に}細 切

し た

脂 肪 阻 織

を 入れ

, 恒温 槽 内

^{で3 7 ℃}

,

6 0

分 間 振返 後^, 消 化阻 織

を 2 5

恥^{m ナ}

^イ

7 7 9

ロ ンメ _ッシ ュ に通

し

, 緩 衝 液

で 3 回

洗浄

した

^. 得

ら れ た

遊 離 脂 肪 細 胞

^を

計 数 盤

^で

細胞 数

^を

算定

^した

後, 恒温 槽 内^に

^{3 0}

分 静 置

さ

せ以 下の 実 験に供

した

^{g ).}

な お

, 本実 験

^ほ

す^{べ て}

1

% 牛

血

清^ア ル

ブ

ミ ン (

b

o v

i

n e s e ru m a

lb

u r n

i

n ,

B S A

,

F

r a ct

i

o n

V

) (

^A

^{r m o u r}.^社,

^K

^{a n}

^k

^a

^k

^{e e,}

^U

^.

^S

^.

^A

^).

^を

^含

^{む H}

^{epe s‑}

^K

^{r e}

^b

^s‑

^{R i}

^n‑

ge r^‑

bi

c ar

b

o n ate (

K R B

^‑

H

epe s)J^{緩 衝 液 (}

⁰

^.

⁹

^%

^N

^a

^Cl

^,

¹

^.

^{1 5}

^%

K Cl

,

1

.

2 2

%

^C

^a

^C1

²,

2

.

1 1

%

^{K H}

²

^{P O}

⁴,

3

.

8

%

M

g

S O

4

･7

H

2

0

,

1

^.

3

%

^N

^a

H C O

3_.

0

^.

1 6 M N

^a‑P y^{r u V a}te,

0

^.

1 M N

a^‑

f

u m a r ate,

0

^.

1 6 M N

a

⊥

‑g

l

uta m ate,

0

.

3 M

‑⁽

⁵

^.

⁴

^{% ) g}

^l

^{u c o s e, p}

^{H 7}

^.

⁴

⁾

^を

^用

い

た

.

ま た

, 非 標 識

^イ

^{ン ス}

^リ

^ソ

^ほ

す^{べ て モノコ ソ}

^ボ

^ー

^ネ

^ソ

^{ト ブ}

タ

イ

^{ン ス} リン(.

N

o v o 社,

C

ope n

h

age n,

D

e n m a r

k

)

を

用^い

た

^.

そ

の他^の化 学 試 薬 煩

^は

和 光純 薬

^工

業社^のも^の

を

使

^{用 した}

^.

3

^{. 1 2 5}

Ⅰイ

^{ン ス}

リ

^ン結 合率の

測

定

1 2 5

Ⅰ

^‑

j

ソ ス

リ

ン結 合率の測定

ほ O l

e

f

s

k

y

ら

^の方法^{岬 ‖)}

を

^一 部改 変

^{し て}

行^っ

^た

^. 前 処 置

^{と し}

^て遊 離脂 肪 細 胞

²

^×

^{1 0}

⁵ 個^むこ患 者 空 腹 時

血

清

1 0

恥

1 を

添 加

し

, 緩衝 液^で最終 容 量

1 血 と し

て

3 7 ℃ 1

時 間, 前 脚 置

^{し た}

後,

3 回

洗 浄

^{し た}

^.

^{さ ら}

^に,

^{K R B}

‑

^H

^ep^{e s} 緩衝 液(p

H 7

.

6

) ^で

3 7 ℃ 1

時 間酵 置

し た

後,

イ

^{ン ス}

リ

ソ受容 体^に結 合

し た 血

清 中^の

イ

ンス

リ

ソ

を

除 去す

る た め

緩衝 液 (p

H 7

^.

0

)

で 3 回

洗 浄

^し

,

1 2 5

Ⅰイ

ン ス

リ

ソ結 合 率^の測 定^に供

^{し た}

^. す

^{な わ ち}

, 遊

離 脂 肪 細胞 (

2

×

1 0

⁵個/^tu

^b

^e)

を 0

^.

2

ng/ ^m

^l

^{の 12 5}

^Ⅰイ

^{ン ス}

^リ

^ソ( 比 活 性

^{1 9 7}

p

C i

/p g,

N

e w

E

ng

l

a n

d N

u c

l

e a r 社.

B

o sto n.

U

^･

S

^.

A

)^. , 緩 衝 液

と

共に種^々の濃度 (

⁰

^〜

^{1 0}

⁴ⁿg/^m

^l

) ^の非 標 識

^イ

^{ン ス}

^リ

ソの存 在 下

お よ び

非存 在 下^で

1

m

l と し

,

1 6 ℃ 2

時 間 楷 置

し た

^. 反 応 終

了

後, 細 胞 浮 遊液

^{3 0 0}

〃

1 を

シ

リ

^コ ンオ

イ

^ル( 東京 化 成

^工

業, 東 京)

2 0 0

J^J

l を 入 れ た

微 小 遠

心

管

に

重 層

し

,

B

^{e c}

k

m a n

M i

c r o

f

uge

B

(

^B

^{e c}

^k

^{m a n}

^I

^{n str u m e nts} 社!

P

a

l

o

A l

to,

U

^･

S

^･

A

)^･

に て

30

秒 間 遠

心 した

^.

上

層^に浮 遊

^{し た}

脂 肪 細 胞

^を

綿 棒^です く

い

, 放射 活 性

を ウ

^ェル型シ ンチ レ ^ー ショ ン カ

ウ

ン タ ^ー (

A l

o

k

a

社, 東 京

)

^{に て}測 定

^し

, 脂肪 細 胞^に対 す

^る

^{1 2 5}

^トイ

^{ン ス リンの}結 合 率

を

求

め た

^.

そ

^の際,

0

^.

1

ng/^m

^l

^の濃 度^の非 標 識

^イ

^{ン ス リソ}存 在 下^に

^お

け

^る

結 合 率

^{か ら}

,

1 0

^̀ng/^m

^l

^{濃 度に}

^お

^け

^る

^{過 剰の非 標} 識

イ

^{ン ス} リ ソ存 在 下に

お け る

結 合 率

を

非 特 異 的 結 合 率 (^{n o n s}pe c

ifi

c

bi

n

d i

ng)

と し

^て差

し

引^い

た も

^の

を

特 異 的 結 合 率

(

sp^{e c}

ifi

c

b i

n

di

ng)

^{と し}

,

血

清^に

^{よ る}

阻害 活 性

^を

以下^の式

^で

求め

た

^.

% 阻害 率⁼

^{1 0 0}

‑ 〔特 異的 結 合率

( 血

清^に

^{よ る}

)/ 特 異 的結 合 率

(

緩 衝 液^に

よ る

)〕 ^×

1 0 0

T

a

bl

e

L C li

n

i

c a

l

c

h

a r a cte r

i

^st

i

c s o

f

t

h

e s u

b

j^{e cts w}

^h

^{o s e s e r u m u s e}

^{d f}

^{o r}

1 2 5

I

^‑

i

n s u

li

n

b i

n

di

ng ^{a s s a}y

G

r o up 諾⁾

^S

^{e x}

^H

拾^{C (p}畏

^l

^{, (n}毘

^l

⁾

L C 6 1

.

1 士2

^.

3

^*

M

⁼

1 4

(^{n =}

^{1 7}

⁾

^F

⁼

³

C 3 2

.

8 ±5

^.

9 M

⁼

7

(n ⁼

8

)

^F

⁼

¹

4

^.

3 士 0

^.

2 1 3

^.

1 ±2

^.

6

^{* *}

4

.

5 士0

.

6

^{* * *}

7

^.

4 ±0

^.

7 1

.

5 ±0

.

6

L C

,

1i

v er c

i

r r

h

o s

i

s;

C

, C O ntr O

l

; n,n u m

b

er o

f

s u

b

je cts;

M

, m a

l

e;

F

,

f

e m

a l

e

I RI

,

i

m rn u n o r^ea ct

i

v e

i

n s u

li

n;

G H

, gr O Wt

h h

o^rm o n e; ^〜 , n Ot

d

o n e; ^* p <

0

^･

0 0 1

; ^{* *},P

< 0

^･

0 5

;

* * *

,P

< 0

^･

01

^･

V

a

l

u e s a r e expr e s s e

d

as rn e a n

士 S E M

･

1 m m u n o r eac

t

iv e in s ulin

;

K R B, K rebs Riⁿ

_g

e r bi^{c a r}bo n a

t

e

;

L C, 1iv er cir rho sis

;

O G T T, O ral

_g

lu cose

t

olera n c e

t

e s

t

_; P T,

p

rO

t

hr o mbin

t

im e