旋毛虫の新生幼虫が産生する生理活性物質の合成に関する研究

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Title

旋毛虫の新生幼虫が産生する生理活性物質の合成に関する

_{研究( はしがき )}

Author(s)

高橋, 優三

Report No.

平成12年度-平成13年度年度科学研究費補助金 (基盤研究

_{(C)(2) 課題番号12670229) 研究成果報告書}

Issue Date

2001

Type

研究報告書

Version

URL

http://hdl.handle.net/20.500.12099/554

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(2)

はしがき

旋毛虫(獅c肋e肋)が産生する各種の蛋白は旋毛虫の宿主内への侵入および生存･維持に大きく関与しているものと考えられている｡我々はすでに筋肉幼虫からセリンプロテアーゼインヒビター遺伝子をクローニングし､■融合蛋白の合成を行い､医薬への応用研究を本格化させようとしている｡一方､旋毛虫の新生幼虫は組織貫通能に優れているため､プロテアーゼ等の蛋白を産生している可能性が高いと思われる｡よって､当研究では筋肉幼虫だけでなく､新生幼虫のcDNAライブラリーからも新たな生理活性物質の検索を行った｡また､旋毛虫感染に伴うMyoD､myOgeninなどのマウス筋肉分化関連遺伝子発現の動態､並びに旋毛虫が分泌するマクロファージ遊走抑制因子などの各種の蛋白の発現

についても検討を行った｡

旋毛虫(r甲血払およびr卵e〝ゐ乎血肋)の新生幼虫､筋肉幼虫よりcDNA

ライブラリーを作製して､有用なクロ∵ンの検率を行?た｡その結果､r

ク∫e批わ乎血鮎のライブラリーから新規な蛋白をクロ⊥ニングした｡この蛋白は

主に筋肉幼虫時に発現し､上宿主の鯨肉細胞の変真に関与している可能性が示唆

された｡r甲血融からはセリンプロテアーゼ､ミオシン､=トロポミオシンをクローニングした｡次に､大腸菌によって合成した組替えセリンプロテアーゼ蛋

白の活性に?いて検討を行っ=た結果､特異的なプロテア｢ゼ活性が認められた｡

すなわち､各種のセリンプ占テラーゼ基質を用いた実験から当プロテアーゼは

プラスミン作用を主体とするプロテア⊥ゼであることが示唆された｡一方､マ

ウスのMyoD､11瓜yOgehin遺伝子は旋毛虫感染によるシスト形成の初期に多く発現された｡また､旋毛虫の発育ステージにより､旋毛虫が分泌するマクロファ

ージ遊走抑制因子などの各種の蛋白の襲撃量特大きく異なっていた｡

今後はよ′り有用なクローンの検索を痩ける

とともに､セリンプロテアーゼイ

ンヒビター､セリンプロテアーゼ､▲ま七宿主の筋肉細胞の変異に関与するクロ

ーンを昆虫細胞で発現させ､より詳細な活性の検討を行う予定である｡-研究組織

旋毛虫の新生幼虫が産生する生理活性物質の合成に関する研究

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