胃肝様腺癌の悪性度と転移能

胃肝様腺癌の悪性度 と転移能

佐藤英之，上野義之，河田純男 ^＊ ，本山悌一 ^＊＊

山形大学医学部内科学第二講座

＊ 兵庫県立西宮病院

＊＊ 山形大学医学部人体病理学講座

要　　　旨

【目的】これまで明確な証拠に乏しかった胃肝様腺癌の悪性度について、その実態とそ

れに関わる因子を明らかにすることを目的とする。

【材料 と方法】臨床病理学的解析のために外科的に切除した胃肝様腺癌1

8例を材料と し、対照として低分化充実型腺癌3 1例、管状腺癌1 6例を用いた。実験的に浸潤・転移能 を解析するために胃癌由来の肝様腺癌細胞株、低分化充実型腺癌細胞株、管状腺癌細胞 株それぞれ１株を材料とし、細胞接着性試験、ゼラチンザイモグラフィー、ケモイン ベージョンアッセイ、受精鶏卵漿尿膜法、ヌードマウスへの異種移植、リアルタイム PCR を用いた血管新生関連因子の発現量測定を行なった。また、外科的切除検体を用い て血管内皮の免疫組織化学を行ない、腫瘍新生血管の形態について評価した。

【結果】生存率を比較すると肝様腺癌は、低分化充実型腺癌、管状腺癌に比べて有意に

予後不良であり（P<0. 05 ）、静脈侵襲や肝転移が有意に多かった。培養細胞での検討で は、肝様腺癌細胞株で細胞遊離能や基底膜の破壊能、浸潤能が特に高いとは言えなかっ た。受精鶏卵漿尿膜法で腫瘍細胞に誘導される新生血管の数に差はなかったが、ヌード マウス移植腫瘍で肝様腺癌細胞腫瘍においてのみ類洞様血管が見られた。血管新生関連 因子の中で肝様腺癌細胞株において発現量が特に多かったものは、Angi opoi e t i n- 1, - 2 や Angi oge ni n であり（P<0. 05 ）、一方特に低いものはなかった。外科的切除検体での組織 学的検討では、肝様腺癌において低分化充実型腺癌、管状腺癌と比べて類洞様血管の形 成が顕著であった。

【結論】胃肝様腺癌は、低分化充実型腺癌と比較して予後不良であることが判り、その

原因は血行性転移のきたしやすさに求められた。さらに血行性転移のきたしやすさに は、類洞様血管の形成が鍵となっていることが示された。

キーワード：肝様腺癌、胃、悪性度、転移、培養細胞

緒　　　言

　肝 様 腺 癌（he pat oi d ade noc ar c i noma ）は、

I s hi kur a ら

によって提唱された腺癌の特殊 型で、腫瘍細胞は肝細胞様の好酸性の豊富な細 胞質と円形ないし類円形の核を持ち、索状ある いは充実性の増殖を示し、α- f e t opr ot e i n （AFP ） などの蛋白を産生することを特徴とする。胃は 肝様腺癌の最好発部位で、胃肝様腺癌は多くの 人によって極めて悪性度の高い腫瘍との印象を 持たれているが

、類似の増殖形態を示す通 常型低分化充実型腺癌と比べても悪性度が高い のか否かということに関しては、これまで必ず しも十分な証拠はなかった。そこで、著者らは 先ず、外科的切除材料を用い、肝様腺癌と通常 型低分化充実型腺癌との間で予後および予後因 子に差がないかどうかを臨床病理学的に検討 し、差があった場合には、それに関わる因子が 何であるかを明らかにすべく、細胞培養系と移 植系とを用いて調べることとした。

研究材料と方法

１．外科的切除検体

　1 9 9 2年から2 0 0 9年の間に山形大学医学部人体 病理学教室および関連病院で胃の肝様腺癌であ ると確定診断された1 8例を用いた。対照として 山形大学医学部人体病理学教室で診断した全低 分化充実型腺癌例のうち経過の明らかな3 1例を 用い、管状腺癌例は進行度がⅡA からⅢB の進 行癌で、経過が把握できている1 6例を用いた。

なお、低分化充実型腺癌は内分泌細胞癌とリン パ球浸潤癌を完全に除きえたものとした。

２．培養細胞

　胃原発の肝様腺癌細胞株TSG11

と対照とし て低分化充実型腺癌細胞株MKN45

と管状腺 癌細胞株MKN74

とを用いた（表１）。実験期 間中、いずれの細胞株も1 0％の割合の牛胎児血 清（PAA Lab. , Pas c hi ng, Aus t r i a ）を含む RPMI 1640 （I BL ，群馬）培養液で維持した。

３．組織学的検討

　臨床病理学的因子の検討のためには、病理診 断のために用いた標本を再検討した。免疫組織 化学的検討は、代表的ブロック２個を選び、間 接 酵 素 抗 体 法 のUl t r aTe c h HRP St r e pt avi di n- Bi ot i n De t e c t i on Sys t e m （Be c kman Coul t e r ， Mar s e i l l e ，Fr anc e ）を 用 い た。α- f e t opr ot e i n

（AFP ）を検出するために抗AFP ウサギポリク ローナル抗体（ニチレイ、東京）を、血管内皮 を検出するために抗CD31 マウスモノクローナ ル 抗 体JC70A （Dako ，Gr os t r up ，De nmar k ） をそれぞれ１次抗体として用いた。

４．細胞接着性試験

　培養細胞における細胞の接着性の強さを調べ るために、Take i c hi

の方法を用いた。トリプ シン処理をカルシウム存在下で行なうことによ りカルシウム依存性接着分子を細胞表面に残し たまま細胞を解離するTC 処理、あるいはトリ プシン処理をe t hyl e ne gl yc ol t e t r aac e t i c ac i d

（EGTA ）存在下で行なうことによりカルシウ

ム依存性分子を細胞表面から除去し細胞を解離

するTE 処理の後、各細胞を２×1 0

個/ ml に調

製し、１mM塩化カルシウム存在下、非存在下

表１．本研究で用いた胃癌培養細胞株

に分け、80r pmで旋回培養を行い、3 0分後に位 相差顕微鏡で細胞の集合状態を観察した。

５．基底膜分解能の測定

　基底膜を構成する細胞外基質の分解能を調べ るためにHe us s e n とDowdl e

のゼラチンザイモ グラフィーを用いた。１×1 0

個の癌細胞を無 血清で4 8時間培養し、その培養上清を５倍に濃 縮後、ゼラチンを含有させたポリアクリルアミ ドゲルで電気泳動し、次いでゼラチナーゼ/ Ⅳ 型コラゲナーゼを活性化してゼラチンを分解さ せたところでクマシーブルーでゲルを染色し た。Ⅳ型コラゲナーゼのMat r i x Me t al l opr ot e i - nas e （MMP ） - 2, MMP- 9 を検出した。

６．間質への浸潤能の測定

　基底膜への浸潤能を調べるためにケモイン ベージョンアッセイ

を用いた。マトリゲルマ トリックスでコートされた８μm の孔を持つ フィルターを装着した2 4穴Bi oCoat

マトリゲ ル

イ ン ベ ー ジ ョ ン チ ャ ン バ ー（Be c t on Di c ki ns on, Fr ankl i n Lake s , Ne w Je r s e y ）の上室 に0 . 1％牛血清アルブミン（BSA ）（PAA Lab. ， Pas c hi ng ，Aus t r i a ）含有RPMI 1640 培養液で調 製 し た ５×1 0

個/ ml の 細 胞 浮 遊 液 を0 . 5 ml 入 れ、下室に牛フィブロネクチン（ライフ研究所、

山形）が最終濃度1 0μg/ ml になるように調製し た0 . 1％ BSA 含 有RPMI 1640 培 養 液 を0 . 7 5 ml 入 れ、4 8時間培養し、フィルター下面に移動して きた細胞を数えた。

７．血管新生の生物学的測定

　腫瘍細胞により誘導される血管新生を調べる た め に、Kni ght on ら

の 受 精 鶏 卵 漿 尿 膜 法

（Chor i oal l ant oi c me mbr ane as s ay: CAM法）を 用いた。産卵後１日目のホワイトレグホンの受 精鶏卵（ゲン・コーポレーション、岐阜）を購 入し、漿尿膜上に培養細胞をそれぞれ１×1 0

個移植した。腫瘤が約７mm となったところ で、実体顕微鏡で観察し、腫瘤周辺に見られる 車軸状の血管を新生血管と評価した。

　また、新生血管の性状を調べるために、１

×1 0

個 の 培 養 細 胞 を ６ 週 齢 ヌ ー ド マ ウ ス

（BALB/ C- nu/ nu ）（日本クレア、東京）の背部 皮下に移植し、腫瘍の最大径が約1 0 mm になっ たところで腫瘍を摘出し、組織標本化した。

８．血管新生関連因子の発現測定

　表２に示す血管新生に関わる因子として知ら れている血管新生関連因子について、培養細胞 での発現状態を調べるためにRe ve r s e t r ans c r i - pt as e - pol yme r as e c hai n r e ac t i on （RT- PCR ）を 用 い た。培 養 細 胞 よ りTRI ZOL

（I nvi t r oge n, Car l s bad, Cal i f or ni a ）を用いてRNA を抽出し、

RT- PCR で発現が確認されたものについては、

リアルタイムPCR で発現量を測定した。リア ル タ イ ムPCR は、Powe r SYBR

Gr e e n PCR Mas t e r Mi x （Appl i e d Bi os ys t e ms , Fos t e r Ci t y , Cal i f or ni a ）を 用 い、7500/ 7500Fas t Re al - Ti me PCR Sys t e m（Appl i e d Bi os ys t e ms , Fos t e r Ci t y , Cal i f or ni a ）で行なった。Gl yc e r al de hyde - 3- pho- s phat e - de hydr oge nas e （GAPDH ）を 内 在 性 コ ントロール遺伝子とし、相対定量法で評価し た。

９．統計学的処理

　臨床病理学的因子の評価は、Fi s he r の直接確 率 計 算 法 を 用 い た。血 管 新 生 関 連 因 子 の mRNA 発現量については、３群の差の検定と してKr us kal - Wal l i s 検定を行なった。また、多 重比較検定（Bonf e r r oni 法）も行なった。生存 率の比較にはKapl an- Me i e r 法を用いた。いず れもP<0. 05 を有意差ありとした。

結　　　果

１．臨床病理学的検討

　肝細胞様の好酸性の豊富な細胞質と円形ない し類円形の核を持ち、索状あるいは充実性の増 殖を示すということに加え、その胞巣内に免疫 組織化学的にAFP が検出されるという要件（図 １）を備えた1 8例の胃肝様腺癌の臨床病理学的 な所見は表３のごとくである。進行度ⅡA から

ⅢB までを合わせたもので、生存率を通常型の

低分化充実型腺癌群および管状腺癌群と比較し

㸪 㸪

表２．検討した血管新生関連因子

てみると、肝様腺癌群の成績は有意に悪かった

（図２）。予後に関わる因子で、肝様腺癌と低分 化充実型腺癌との間で有意の差が見られたのは 静脈侵襲とリンパ節転移であった（表３）。ま た、術前既に遠隔転移が確認されていた４例は 肝転移で、これらを含め、死の転帰をとった９ 例に最終的には肝転移が確認されていた。肝様 腺癌は、低分化充実型腺癌に比べると若年に発 生していた。なお、低分化充実型腺癌群と管状 腺癌群の生存率に有意差はなかった。

２．細胞接着性

　TSG11 細胞は、MKN74 細胞同様、TE 処理後

の細胞はカルシウムの存在の有無に関わらずほ

とんどバラバラであったが、TC 処理後の細胞

はカルシウム存在下では多数の集塊を作り、そ

の 程 度 はMKN74 細 胞 よ り も 目 立 っ た（図3a,

3b ）。また、MKN45 細胞は、TC 処理後もTE 処

理後もカルシウムの存在の有無に関わらずさら

に多数の集塊を作った（図3c ）。すなわち肝様

腺癌TSG11 細胞が特に遊離しやすいという所

見はなかった。

表３．臨床病理学的所見

３．基底膜分解能

　MKN74 細胞では主としてMMP- 9 （92kDa ） に 相 当 す る 部 位 に、MKN45 細 胞 で はMMP- 2

（72kDa ）に相当する部位に活性バンドを認め たが、TSG11 細胞ではそのいずれにもほとんど 活性バンドは認められず、また、他の部位にも 活性バンドは検出されなかった（図４）。

４．間質への浸潤能

　ケモインベージョンアッセイでフィルター下

面に移動する細胞は、MKN45 細胞で有意に多 く（P<0. 05 ）、MKN74 細 胞、TSG11 細 胞 で は ほとんど認められなかった（図５）。

５．新生血管の数量と質

　CAM法では、 TSG11 細胞、 MKN45 細胞、 MK N74 細胞の腫瘍周囲で血管密度に著差は生じな かった（図6b ～6d ）。

　ヌードマウス移植腫瘍では、TSG11 細胞が形

成する腫瘍はしばしば拡張が著しい類洞様の血

　図１．胃肝様腺癌の組織像：a. 好酸性の豊富な細胞質を持つ腫瘍細胞が充実性に増殖している。

b. AFP に対する免疫組織化学で陽性細胞が確認される。

　図２．組織型別の生存曲線（St age ⅡA ～St age ⅢB ）。肝様腺癌群は、管状腺癌群、低分化充実型 腺癌群と比較して、有意に生存率が低い（P<0. 05 ）。平均観察期間およびその中央値はそれぞれ、

肝様腺癌群で24カ月、11カ月、低分化充実型腺癌群で43カ月、30カ月、管状腺癌群で54カ月、56カ

月である。

　図３．細胞接着性試験：a. MKN74 細胞、b. TSG11 細胞、c . MKN45 細胞。TSG11 細胞は、TE 処 理後の細胞はカルシウム存在下でもバラバラであるが、TC 処理後の細胞はカルシウム存在下で集 塊を作る。その程度はMKN74 細胞よりも目立つ。また、MKN45 細胞は、TE 処理後もTC 処理後も カルシウムの存在の有無に関わらず、多数の集塊を作る。

　図４．ザイモグラムによるゼラチナーゼ/ Ⅳ型コラゲナーゼ活性：レーン1. MKN74 細胞、レーン 2. MKN45 細胞、レーン3. TSG11 細胞。MKN74 細胞では主としてMMP- 9 の強い活性が認められ、

MKN45 細胞ではMMP- 2 の活性が認められる。TSG11 細胞ではいずれにもほとんど活性は認めら

れない。MMP: Mat r i x Me t al l opr ot e i nas e 。

　図５．ケモインベージョンアッセイ： a. MKN45 細胞、b. MKN74 細胞、c . TSG11 細胞。d. 200 倍1 視野あたりの平均移動細胞数。フィルター下面に移動した細胞は、MKN45 細胞で有意に多く、

MKN74 細胞、TSG11 細胞ではほとんど認められない（*P<0. 05 ）。矢印: 移動した細胞。

管を含んでいたのに対し（図7a ）、MKN74 細胞 が形成する腫瘍では小径の円形～楕円形の血管 しか含まれていなかった（図7b ）。MKN45 細胞 が形成する腫瘍は拡張した血管も含んでいたが

（図7c ）、類洞様と呼べる血管はなかった。

６．血管新生関連因子の発現

　血管新生関連因子mRNA の発現をRT- PCR で

みると、検索したVEGF- A ，PDGF- A ，PDGF - B ， Angi opoi e t i n- 1 ， Angi opoi e t i n- 2 ， Angi oge n- i n ，Mi dki ne ，HGF ，bFGF のすべてにおいて、

バンドがごく弱いものもあるが、３種の細胞株 いずれでも発現が確認された（図8a ）。リアル タイムPCR を用いた相対定量法での発現量は、

VEGF- A ， PDGF- A ， PDGF- B では、３種の細胞 　図６．受精鶏卵漿尿膜法： a. 移植前、 b. TSG11 細胞、 c . MKN45 細胞、d. MKN74 細胞。腫瘤を 中心に車軸状に集中する血管がTSG11 細胞で多いということはない。

　図７．ヌ ー ド マ ウ ス 移 植 腫 瘍 の 組 織 像：a. TSG11 細 胞、b. MKN74 細 胞、c . MKN45 細 胞。

TSG11 細胞が形成する腫瘍では類洞様の血管がみられるが、MKN74 細胞が形成する腫瘍では、小

径の円形ないし楕円形の血管のみである。MKN45 細胞が形成する腫瘍では拡張した血管もみられ

るが、類洞様血管とまではいえない。矢印：血管。

　図８．血管新生関連因子の発現測定：a. RT- PCR による検出。b ～d. リアルタイムPCR （相対定 量 法）に よ るAngi opoi e t i n- 1 、Angi opoi e t i n- 2 、Angi oge ni n のmRNA 発 現 量 の 比 較。b ～d.

Angi opoi e t i n- 1 、Angi opoi e t i n- 2 、Angi oge ni n がTSG11 細胞においてMKN45 細胞、MKN74 細胞よ

り有意に発現量が多い（*P<0. 05 ）。

株 で 発 現 量 に 大 き な 差 は み ら れ な か っ た。

Angi opoi e t i n- 1 ，Angi opoi e t i n- 2 ，Angi oge ni n ， Mi dki ne ， HGF ， bFGF については、 TSG11 細胞 でMKN45 細胞、MKN74 細胞より有意に発現量 が多かった（P<0. 05 ）。特に発現量の差が大き かったのは、Angi opoi e t i n- 1 ，Angi opoi e t i n- 2 ， Angi oge ni n でそれぞれ5 0倍、1 0 0倍、７倍程度 であった（図8b ～8d ）。

７. 外科的切除検体における類洞様血管 　CD31 陽性細胞をマーカーとして、壁が薄く

内腔が著しく引き伸ばされ、腫瘍細胞塊と直に 接している類洞様血管の有無を調べたところ、

肝様腺癌では1 8例中全例に確認されたが（図 9a ）、低分化充実型腺癌では調べた2 0例では３ 例（1 5％）にすぎず（図9c ）、管状腺癌では調べ た1 6例では全く認められず（図9b ）、類洞様血 管の出現頻度は肝様腺癌において有意に高かっ た（P<0. 05 ）。

　図９．外科的切除検体におけるCD31 に対する免疫組織化学：a. 肝様腺癌。b. 管状腺癌。c . 低分

化充実型腺癌。肝様腺癌では類洞様血管がみられる。管状腺癌、低分化充実型腺癌では類洞様血管

の形成はなく、小径の血管が線維性結合織とともにある。

考　　　察

　本研究で、胃肝様腺癌の生存率が低分化充実 型腺癌や管状腺癌に比べて有意に劣ることが示 されたことによって、これまで必ずしも明確な 証拠のなかった胃肝様腺癌の予後の悪さ

は、初めて科学的に証明されたものと考える。

特に低分化充実型腺癌との厳密な区別の上に両 者を比較することが重要であるのは、肝様腺癌 が低分化充実型腺癌と診断されていることが少 なくなく、さらに低分化充実型腺癌の中には内 分泌細胞癌が紛れ込んでいることも少なくない からである

。本研究の結果では、低分化充実 型腺癌と管状腺癌との間で予後に関して有意の 差が認められてはおらず、管状腺癌に比べて低 分化充実型腺癌の予後が不良であるとする従来 の報告

は再検討の必要性があることも示して いる。

　胃肝様腺癌の悪性度の高さの重要な原因は、

本研究でも有意に静脈侵襲が多く、かつ遠隔転 移が多いことから、血行性転移にあると考えら れる。血行性転移については、これまで多段階 過程で説明されてきている

。すなわち、原発 巣からの遊離、基底膜の破壊、浸潤、間質内の 移動、血管への侵入、血流による移動、標的臓 器の血管壁への付着、血管外への侵出等の段階 が考えられる。

　実験材料として肝転移巣を初代培養の材料と した培養細胞株を用いたということは、それら 全てが肝への転移能を持っていたとみなすこと ができる。多段階のどの段階で特に優れた機能 を発揮するかを肝様腺癌細胞株TSG11 、低分化 充 実 型 腺 癌 細 胞 株MKN45 、管 状 腺 癌 細 胞 株 MKN74 でみたところ、原発巣から遊離して基 底膜を破壊し間質に浸潤するまでの過程を模し た実験、細胞接着性試験やゼラチンザイモグラ フィー、ケモインベージョンアッセイで、肝様 腺癌細胞が他の２種の細胞に比べて特に活発で あるということを示す結果は全く得られなかっ

た。

　血行性転移において腫瘍と血管との関係を特 に血管の側からみるとき、侵入されるべき血管 の数が多いことと、侵入されやすい血管の性状 とが想定される。CAM 法で見る限り、誘導さ れる新生血管の数に肝様腺癌細胞株、低分化充 実型腺癌細胞株、管状腺癌細胞株で差はなかっ た。ヌードマウス移植腫瘍では、肝様腺癌株に よる腫瘍でのみ類洞様血管が認められたが、他 の細胞株による腫瘍では認められなかった。

　他方、培養細胞レベルでみた血管新生関連因 子の発現は、代表的な血管内皮細胞の増殖・分 化因子とされるVEGF- A

や血管周皮細胞の増 殖・分化に関わるとされるPDGF （- A ，B ）

に おいては、３細胞株間に差はなかった。肝様腺 癌細胞株において他の２細胞株との間に大きな 発 現 量 の 差 が あ っ た の は、Angi opoi e t i n- 1 ， - 2 、およびAngi oge ni n であった。肝様腺癌細胞 株において発現が有意に低いというものは調べ た限り認められなかったので、これらの高発現 と類洞様血管形成との間に関連性があるかとい うことが問題になる。

　Angi opoi e t i n- 1 は、血管内皮細胞と周皮細胞 の接着を誘導することで血管の安定化に関わっ ているとされる

。Angi opoi e t i n- 2 は、 Angi opo- i e t i n- 1 の生理的拮抗物質で血管内皮細胞と周皮 細胞との接着を阻害し、内皮細胞の発芽を誘導 することで血管は不安定な状態となり血管新生 が促進されるとされる

。Sugi mac hi ら

は、正 常肝ではAngi opoi e t i n- 1 が Angi opoi e t i n- 2 より 多く発現しているのに対し、肝細胞癌では逆と なっていることから、肝細胞癌の血管新生に Angi opoi e t i n- 2 が重要な役割を果たしている可 能性を述べている。Angi oge ni n は、 Angi oge ni n 受容体が血管内皮細胞と周皮細胞とにあり、血 管内皮細胞と周皮細胞の相互作用の調整をして いるのではないかと考えられている

。しか しながらこれらの因子と類洞様血管との関係は 見えてこない。

　そもそも類洞様血管と血行性転移との間に関

係があるのかということを考えるとき、Sugi no らの一連の研究

が参考になる。従来考えら れていた血行性転移では、癌細胞の血管に侵入 する前に必ず間質への浸潤の段階が必要であ り、この転移様式は浸潤依存性転移

というこ とができる。これに対して、Sugi no らの提唱す る浸潤非依存性転移では、癌胞巣が直接類洞様 血管に接し、おそらくは成長による容積増大と いう物理的圧力により、血管内に入り込み、確 かにこの様式では癌細胞が原発巣と血管との間 にある間質には一度も浸潤する必要はない。こ の説は、肝細胞癌や腎細胞癌、絨毛癌のように 類洞様血管を伴いやすい腫瘍に血行性転移が多 いとする古くからの半ば病理学的常識ともよく 合う。

　外科的切除検体に立ち返って、類洞様血管の 形成が、肝様腺癌に有意に多いことからも、類 洞様血管の形成が肝様腺癌の血行性転移のきた しやすさに大きく関わっていると考えられる。

　本研究の結果から、胃肝様腺癌は低分化充実 型腺癌と比較して予後不良であることが判り、

両者は厳格に区別する必要があると考える。ま た、肝様腺癌が予後不良である原因は血行性転 移のきたしやすさに求められ、類洞様血管の形 成が少なくともその一因と推測される。

文　　　献

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T, Ogur a G, Goodi s on S, e t al . : Si nus oi dal

t umor angi oge ne s i s i s a ke y c ompone nt i n

he pat oc e l l ul ar c ar c i noma me t as t as i s . Cl i n Exp

Me t as t as i s 2008; 25: 835- 841

A St udy f or Mal i gnancy and Met ast at i c Pot ent i al of Hepat oi d Adenocar ci noma of t he St omach

Hi deyuki Sat o, Yoshi yuki Ueno, Sumi o Kawat a ^＊ , Tei i chi Mot oyama ^＊＊

Second Depar t ment of I nt er nal Medi ci ne, Yamagat a Uni v er s i t y Facul t y of Medi ci ne

＊ Hyogo Pr ef ect ur al Ni s hi nomi ya Hos pi t al

＊＊ Depar t ment of Human Pat hol ogy, Yamagat a Uni v er s i t y Facul t y of Medi ci ne

[ Obj e c t i ve ] To de t e r mi ne t he mal i gnant pot e nt i al of he pat oi d ade noc ar c i noma of t he s t omac h ( HAS) and t he pr ognos t i c f ac t or s of pat i e nt s wi t h t hi s c anc e r .

[ Mat e r i al s and me t hods ] A c l i ni c opat hol ogi c al anal ys i s was pe r f or me d on 18 s ur gi c al l y r e s e c t e d pat i e nt s wi t h HAS and c ont r ol s ( 31 wi t h poor l y di f f e r e nt i at e d s ol i d ade noc ar c i noma, 16 wi t h t ubul ar ade noc ar c i noma of t he s t omac h) . The i nvas i ve / me t as t - at i c pot e nt i al and t umor angi oge ne s i s we r e i nve s t i gat e d us i ng t hr e e gas t r i c c anc e r c e l l l i ne s . The mor phol ogy of t umor angi oge ne s i s was al s o as s e s s e d i n s ur gi c al l y r e s e c t e d s pe c i me ns .

[ Re s ul t s ] The HAS pat i e nt s s howe d s i gni f i c ant l y s hor t e r s ur vi val ( P < 0. 05) and hi ghe r ve nous i nvas i on/ he pat i c me t as t as i s r at e s t han t he poor l y di f f e r e nt i at e d s ol i d/ t ubul ar ade noc ar c i noma pat i e nt s . The c e l l r e l e as e , bas e me nt me mbr ane de s t r uc t i on and i nvas i ve pot e nt i al s we r e not s i gni f i c ant l y di f f e r e nt among t he t hr e e c e l l l i ne s . Al t hough t he ve s s e l numbe r di d not di f f e r s i gni f i c ant l y , t he r e we r e di f f e r e nc e s i n t he ve s s e l mor phol ogy among t he t hr e e c e l l l i ne s . Hi s t opat hol ogi c al l y , s i nus oi dal ve s s e l f or mat i on was mor e pr omi ne nt i n HAS t han i n poor l y di f f e r e nt i at e d s ol i d/ t ubul ar ade noc ar c i noma.

[ Conc l us i on] HAS has poor e r pr ognos i s t han poor l y di f f e r e nt i at e d s ol i d ade noc ar c i no- ma, whi c h may ac c ount f or t he gr e at e r pr ope ns i t y of HAS f or he mat oge nous me t as t as i s . Fur t he r mor e , s i nus oi dal ve s s e l f or mat i on may pl ay a ke y r ol e i n t he pr ope ns i t y f or he mat oge nous me t as t as e s .

Key wor ds : He pat oi d ade noc ar c i noma, St omac h, Mal i gnanc y , Me t as t as i s , Cul t ur e d c e l l

ABSTRACT