癩 患 者 に お け る 口 腔 剥 離 細 胞 学 的 研 究
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(2) 46. 日. 細 胞 形 質 はPap.染 に よつ て 青,青. 高. 豊. 色 で は,そ の角 化 の進 行 程 度. ×赤,赤,黄. b)含. の4色 に染 め わ け られ. るの が み られ た.. 蔵. 嗽 液 に よ る所 見. 前 記 と同 様 な方 法 で その 平 均 値 を 百分 率 で 算 出 し た結 果,未. 細 胞 の大 き さは,小 型 細 胞 と して は 一 般 に小 青 細. 角 化 即 ち 青 細 胞 と前 角化 即 ち赤 細 胞 が. 最 も多 く剥 離 され,こ れ に 反 して 角 化 即 ち 黄 細 胞. 胞 及 び黄 色 細 胞 が み られ,大 型 細胞 と して は大 淡 青. は非 常 に少 く剥 離 され て い るのが み ら れ た(表2,. 細 胞 及 び大 淡 赤 細 胞 が み られ,形 状 は類 円形,又 は. 図2).. 扁平 多 角形 の もの が み られ た.一 般 に細 胞 形質 と核 は 明瞭 に境 され て い て,細 胞 形 質,核 の 内部 構 造 が. 表2. 部 位 別 並 びに 含嗽 液 に よ る正 常 口腔 剥 離上 皮 細 胞 の 角化 状 態. 鮮 明 に み られ た.黄 細 胞 を除 い た他 の3色 の剥 離 上 皮 細 胞 に は1〜2個. 程 度 の 核 小体 のみ られ るもの も. あ つ た. この他 口腔 内 の種 々の 球 菌 及 び桿 菌 が 剥離 上 皮 細 胞 の表 面 に附 着 して い る所 見 が しば しば み られ た. 又舌 根部 よ りの塗 抹 標 本 で は リンパ 球,好 中球 桿 状 核,歯 肉部 で は大,小. リンパ球,好 中球 桿 状 核 及. び分葉 核 の名型 の 白 血球 が少 数 み られ,含 嗽液 よ り の 塗抹 標本 で も前 記 の 各型 の 白血球 が 少 数 み られ た. さて 以 上 の所 見 に基 いて 正 常 口腔 粘 膜 の 剥離 上 皮 註: 数 字 は%を 示 す. 細 胞 の 部位 別並 び に含 嗽液 に よ る角化 状 態,退 行 性 変 化,核 一 細 胞形 質 の面 積 比 率 に つ いて 若干 の観 察 を行 つ た 結 果 は以 下 の 如 くで あつ た. 2.角. 化状態. a)部. 位 別 によ る所 見. 角化 の程 度 によ り青,青. ×赤,赤,黄. 図2. 含 嗽液 中の正 常 人 口腔 粘 膜剥 離 上皮 細 胞 の角 化状 態(10例). の4種 の細. 胞 を10例 につ い て 分類 し,そ の平 均 値 を百 分 率 で算 出 した 結果,硬. 口蓋,歯 肉,舌 根,頬 部 の 順 で 角化. 細 胞即 ち黄 色 細 胞 の百 分 率 の 減少 が み られ た(表1 及 び 図1). 表1. 図1. 実. 験. 症. 例. 正 常 人 の 口腔 粘 膜 剥離 上 皮細 胞 の 部 位別 に よる 角 化 状態(10例). 3.剥. 離 上皮 細 胞 の 退行 性 変 化. 剥 離上 皮 細 胞 は 角化 進 行程 度 に応 じて 各 種 の退 行 性 変化 をお こ して い るの が し ば しば み られ るが,便 宜 上上 皮 細 胞 の退 行 性 変化 を核 周 囲空 胞,核 濃 縮,核 崩壊, 核 融 解,核 消 失 の5型 に 分類 して 百 分率 を算 出 した. a)部. 位 別 に よ る所 見. 上皮 細 胞 の退 行 性 変 化 は平 均 して17.8 %で あつ た.核 消 失 型 は 硬 口蓋 で最 も多 く,頬 部 で最 も少 くみ ら れ た(表3,写 真1〜4)..
(3) 癩 患者におけ る口腔剥離 細胞学 的研究 表3. 部 位 別 並 に含 嗽 液 に よる 正常 口腔 粘 膜剥 離 上 皮細 胞の 退 行 性変 化. 47. 尚載 せ ガ ラス測 微 計 は オ リンパ ス製 で1区 劃10μ 1. の もの,接 眼 測微 計 は1区劃. (10mmを20等. /2mm. の 目盛 の もの,顕 微 鏡 はZeissを. 分). 用 い た.. 以上 の 方 法 で 油浸 装 置 に よ り計 測 し た 細 胞 を 35mmフ. イル ム に撮 影 して ス ラ イ ドに作 製,プ ロ. ジ ェ ク ターで ス ク リー ン上 に原 板 の10倍 に な るご と く拡大 投 影 して それ を 描画 した. 以上 の 方 法 で得 た 投 影図 を 松 式 プ ラー メー ターで 3回 計 測 し平均 値 に よつて 投 影 図 の表 面 積 を求 め た. 次 に顕 微 鏡 下 の核,細 胞形 質 の長 径 及 び短 径 と, 投 影 図の 表 面積,長 径 及 び短 径 の 数値 を基 に して, b)含. 個 々 の核,細 胞 形質 の 表面 積 の 絶 対値 を次 の方 法 で. 嗽液 に よ る所 見. 上 皮 細 胞の 退 行 性変 化 は平 均 し13.7%で あつ た. 核 濃縮 は最 も多 くみ られ,核 消失 は 比 較 的少 くみ ら れ た(表3,写 4.核‑細. (1) n1=核 の投 影 図 表 面積 c2=細 胞 形 質の 投 影図 表 面 積. 真9). 胞 形 質面 積 比(N/C)の. 計 測的 観 察. 核及 び細 胞形 質 表面 積 を 測定(夫 々N, ‑細 胞 形 質面 積 比(N/C)を 算定 した . 1)試. 算 出 した.. (2) α1×β1=核 の投 影図 長 径 及 び短 径 α2×β2=細 胞形 質 の投 影図 長 径 及 び短 径. C)し 核. (3) γ1×δ1=顕 微 鏡 下の 核 長 径及 び短 径 γ2×δ2=顕 微 鏡 下の 細 胞 形質 長 径 及 び短 径. 料 及 び計 測 した細 胞 の 選択. 正常 口腔 粘 膜 よ り含嗽 液 で 剥離 した 上皮 細 胞50個. (4) 〓. =核 の投 影図表面積 と核の投影. 〓. =細 胞形質の投影図表面績と細. の核 及 び 細 胞形 質 の辺 縁 の 明 確 な,断 裂 して い な い. 図長径及 び短径 との比. もの,或 は核 の 退 行 性変 化 を お こ して い ない もの を 任 意 に選 択 した. 2)核. 胞形質の投影図長径及び短径 と の比. 及 び細 胞形 質 の 計 測. 核 及 び 細胞 形 質表 面 積 の 実 質的 数 値 を出 す た めに. (5) N=γ1×. δ1×P1=顕. 微鏡 下 の核 の 表 面積. C=γ2×. δ2×P2=顕. 微 鏡 下 の 細 胞 形 質 の 表. 先 ず 細 胞 体の 長 径,短 径 を 観 察 し便宜 上大,中,小 の3型 に細 胞 体 を分類 した(表4).. 面積 以 上 の 方法 で算 出 した数値 に従 つ て個 々の 細胞 の. 表4. N/Cを. 計 算 し た(図3,. 〜 等 は 夫 々6〜7.9. ,. 4,. 〜 , 7〜 等 は 夫 々5〜6.9, 3)結. 5).尚. 8〜9.9等. 図3の6〜,. 7〜8.9等. を 抱 括 し て い る.. 果. 正 常 口腔 剥 離 上 皮 細 胞 の 小,中,大. の3型. を,そ. 細 胞 形 質 面 積 か ら み る と 小 型1600μ2以. この計 測法 は 対 物 鏡 ×100,接 眼 鏡 ×10,計1000 倍 の 油 浸装 置 に して 載 物 卓 子 に載 せ ガ ラス測 微 計 を 載 せ,接 眼鏡 を廻 して,載 せ ガ ラス測 微 計及 び接眼 測微 計 の 線 を平 行 に な し, 160mmの. 筒長 で載 せ ガ. ラス測 微 計の6区 劃 と接 眼 測 微 計の9区 劃 とが 丁度 重 り合 うので その条 件 にお け る接眼 測 微 計 の1区 劃. の絶対値. 60/ =6.7μ 9. を 求 め た.次. に 被検 標 本 を お. き,検 体 の大 きさが 接 眼 測微 計 の 何 区 劃 に 当 るか を 測 り,そ の 区 劃 に6.7μ を乗 じて核 及 び細 胞 体 の長 径,短 径 を求 め た.. 3000μ2以. 下,大. 型3000μ2以. 大 型80〜160μ2で 又N/Cに. 型70〜178μ2,. あ つ た.. 範 囲 で あ り,そ. 最 大0.14に. のN/Cは. 最 小0.02か. ら ら. わ た つ て み られ た(表5). 上 は 一 般 に い わ れ て い る 核‑細 ちN/Cと. 胞形 質 面. し た 結 果 で あ る.. 次 に 推 計 学 上 の 処 理 に は 細 胞 形 質‑核 ちC/Nに. の 型. 供 さ れ た 細 胞 形 質 面 積 は, 625μ2か. 5320μ2の. 積 比,即. 下,中. 上 に ほ ぼ 区 分 さ れ,. 小 型 細 胞 の 核 面 積 は77〜182μ2,中. さて,以. 8. を 抱 括 し,図4の5. して 回 帰 係 数 を 計 算 し,回. 面 積 比,即 帰 直 線 を 引い.
(4) 48. 図3. 日. 高. 豊. 蔵. 含嗽液中の正常 口腔粘膜 剥離上皮細胞の細胞形質面積. 図4. 図6. 回 帰 直 線*. 含 嗽 液 中 の正 常 口腔 粘 膜 剥 離 上皮 細 胞 の 核面 積. 表5. 含嗽 液 中の 正 常 口腔 粘膜 剥 離 上 皮 細 胞 の面 積 及 びN/C. 表6. 図5. 含 嗽 液 中の 正 常 口腔 粘 膜 剥離 上 皮細 胞 の核‑細 胞 形 質面 積 比 率(50細 胞). 正常 剥 離上 皮細 胞の 回 帰 係 数. * 回 帰 直 線:. y=a+bx. y: x:平. C/N 方 ミク ロ ン単 位 の 細 胞 投 影 面 積. た(図6,表6). IV.総. 括 ・考. 按. 正 常 口腔 粘 膜 の 部 位 に よ る 剥 離 上 皮 細 胞 の 角 化 に 対 す る研 究 は, Leiahmann修. Weinmann(1940)49,はWrightの 正 法 とErnst‑Gram法. 報 告 して お り, Miller (1951)21),渡. et al(1951)20),. 辺(1957)44),松. 島 田(1956)34)等. はPap.染. に よ り染 色 し Montgomery. 井(1958)17),正. 慶 ・. 色 に よ る結 果 を 報 告 し. て い る. 松 井 の 報 告 に よ れ ば,角. 化 の 進 行 程 度 に 応 じて 細.
(5) 癩 患者 におけ る口腔剥離細胞学 的研究 胞 形 質 は青,赤,黄. に染 別 され る ことを 組 織学 的 所. 見 を 対照 と して明 か に して い る.. 49. 正常 口腔 粘 膜 の剥 離 上 皮細 胞 の 投 影面 積 に つ いて み るに,清 水 は 正常 口腔 粘膜 の 剥 離 上皮 細 胞 の型 を. 又 正常 口腔 粘 膜 の 含嗽 液 に よ る剥 離 上 皮 細 胞の 角. 深 層 よ り表 層 に わ たつ てI〜 Ⅳ迄 の4型 に分類 し,. 化 に対 す る研 究 は,外 国文 献 で は み あ た らず,白. その うち特 に極 く小 型 の 細 胞 即 ちI,. 石(1958). 209個 を対 象 に して その 投 影面 積 を計 測 し た 結 果,. 32)がPap.法. に よつ て新 生 児,成 人,老. 人 に おけ る所 見 を 報告 して い る.. I型 で は細胞 面 積600μ2以. さて 私 は 正常 口腔 粘 膜 の剥 離 上 皮 細胞 を部 位 別 に 塗 抹標 本 を作製 して,松 井 の細 胞 基 準 に従 つ て 角化 の 分 類 を試 み た 結果,硬. 口蓋72.2%,歯. 舌 根27.7%,頬5.9%の. 順 で 角化 細胞 の 減少 が み ら. れ,且 つ 核 消失 型 は硬 口蓋17.5%に. 肉55.0%,. Ⅱ型 の 細胞. 下, Ⅱ型600〜1400μ2. と報 告 して い る. 私 は細 胞の 大 き さを集 計 の便 宜 上 先 づ小,中,大 の3型 に分類 し,小18,中20,大12計50個. 最 も多 く頬 粘 膜. につ いて. そ の計 測 を行 つ た 結果 小 型 の 細胞 面 積 は1600μ2以 下,中 型3000μ2以. 下,大 型3000μ2以. 上の もの が. 1.8%に 最 も少 くみ られ た.こ れ を 松 井 の成 績 と比. み られ,小 型 の細 胞 面 積 は清 水 の極 く小 型 の細 胞即. 較 す るに硬 口蓋78.0%,歯. ちI,. 頬6.0%の. 肉63.0%,舌. 根33.0%,. 順 で 角 化細 胞 の 減少 が み られ た と報 告 し. Ⅱ型 とほ ぼ一 致 して い る.又 清 水 は普 通 にみ. られ る細胞 面 積 は1000μ2〜3000μ2で. あ るとの べ て. て い るの とほ ぼ一 致 して い る.こ の こと は清 水 の述. い るが,私 の 中 型 の細 胞 面積 もそれ と ほぼ 一致 して. べ て い る如 く硬 口蓋 で は角化 が促 進 され,頬 粘 膜 で. い る.次 に清 水 に最 大 の 細 胞面 積 は14000μ2の. は摩 擦 等 の外 力 の 働 きが 弱 くて 表 層 の 細 胞が よ く保. のが み られ た と報 告 して お り, Johnstonは5000μ2. 存 されて い る もの と思 わ れ る.. の もの が み られ た と報 告 して い るが,私 の大 型 の最. 又 含 嗽 液 に よ る角化 状 態 は私 の 成績 で は青 色 細胞 40.2%,(青. ×赤)色 細 胞3.5%,赤. 黄 色 細 胞6.2%で 均13.7%で. 色 細 胞50.1%,. あ り,上 皮 細 胞 の退 行 性 変 化 は平. あ る.こ れ を 白石 の 成人 にお け る成 績 と. 比 較 す るに青 色 細 胞35.0%,(青 赤 色細 胞51.7%,黄. ×赤)色 細 胞2.3%,. 色 細胞11.0%で. 大 の 細胞 面 積 は5320μ2で 小 さ く, Johnstonの. あ り,上 皮 細 胞. も. 清水 のそ れ よ りは るかに. それ に ほ ぼ一 致 して い た.. 清水 に比較 して,本 実験 結果 の値 が小 さい の は清 水 は位 相 差顕 微 鏡 に よ る新 鮮標 本 に よ る測 定 で あ り, 私 の は固 定染 色標 本に よ る結 果 で あ るた め と考 え ら れ る.即 ち位 相 差 顕 微 鏡法 標 本 と固 定 染色 標 本 と を. の 退行 性 変化 は平 均8.7%と 報 告 して い るの とほ ぼ 一 致 して いた .即 ち含 嗽 液で は角化 細 胞 の剥 離 は比. 上 皮 お よ び頸 管 内膜 細 胞 にお い て10%〜60%の. 較的 少 く,核 濃縮 型 の 細 胞が 多 く剥離 され て い たの. い しは細 胞 形 質 の収縮 を認 め て い る.仮 に 円形 細胞. が み られ た が,こ れ は部 位 別 に採 取 した塗抹 所見 の. で その直 径 に28%収 縮 が あつ た とす れ ば,そ れ は面. うち,頬 粘膜 か ら剥離 され た 上皮 細 胞 の 角化 状 態及. 積で48%も 収 縮 した こ とに な る.ま たFarber5)等. び退 行 性 変化 と ほほ 同 じ傾 向 を示 して い る.. は湿 塗 抹法 の 場 合,細 胞 が扁 平 化 され,収 縮 が 少 い. 次 に部 位 別 によ る角化 状 態 の百 分率 と含 嗽 液 に よ. マ イ ク ロメ ー ターで 比 較 し た 貴 家14)に よれ ば,腟 核な. ので 詳 細 な観 察 か司 能 とな る点,組 織 切 片標 本 に ま. る角 化 状 態の 百 分率 と を比 較検 討 して み るに,前 者. さ ると のべ て い るが,清 水 は位 相差 顕 微鏡 と湿 塗抹. で は 局部 的の 角 化状 態 が み られ るが,後 者 で は 口腔. 法 で は さらに そ の位 の 開 きが あ るとの べて い る.尚. 粘 膜 全体 と して の 角化 状 態 が み られ る.従 つ て正 常. この 点 の詳 細 につ いて は教 室 の 河本 が検 索 を行 つ て. 口腔 粘膜 よ りの 剥離 上 皮 細胞 の 角化 状 態 に つ いて,. い る.. 部 位別 に よ る百 分率 と含 嗽液 に よ る百 分 率 とは一 致 しな かつ た.然. しな が ら可 及 的 多数 の 場 所 か ら採 取. 核 面 積 は 小 型77〜182μ2,中 型80〜160μ2で. 型70〜178μ2,大. あ り,そ のN/Cは. 小 型0.06〜. して これ を平 均 すれ ば 含 嗽液 の 値 に近 づ くこと は容. 0.14,中 型0.03〜0.07,大. 易 に想像 され る.. て い る.こ の結 果 か ら小 型 よ り大 型 へ のN/Cの. 次 に 正常 剥 離 上皮 細 胞のN/Cに 域 で はJohneton(1952). 12)がPap.染. つ い て は,他 領 色法で子宮. 頸 癌 の 塗 抹 標 本 につ い て, Foraker(1954)6)が. 子. 面積 の増 大 の た めに,そ のN/Cは. 推. 小 さ くな る もの. と考 え られ る. Papanicolaou学 派 で は,通 常 は核 一 細胞 形 質比N/Cが. 水(1959)31)が. は細 胞 の 大 きさ とN/Cと. 本 に つ い て夫 々計 測 を行 つ て い るにす ぎな い.. なつ. 移 を み るに,核 面 積 の 増減 に は左右 さず,細 胞 外形. 宮頸 癌 の 組 織切 片 標 本 に つ い て,口 腔 領域 で は清 位 相 差 顕 微鏡 に よ り 口腔 癌 の 新鮮 標. 型0.02〜0.04と. 用 い られて い るが,こ の 場合 に の 相関 関 係 を検 索 す るの. に 回帰 直 線 を作 製 す るため 便 宜 上C/Nと. して 計 算.
(6) 50. 日. し た.そ. 高. 豊. 蔵. う して こ れ に よ つ て. Y=a+bX…. V.結. … … … … … … … … … … … … …(1). Papanicolaou法 (2). 論. を応 用 して 正 常 口腔 粘 膜 の 剥 離. 上 皮 細 胞を 部 位別 並 びに 含 嗽 液 に よ る塗 抹標 本 を作 製 して,夫 々 の 角化 状 態,退 行 性 変 化及 び特 にN/C. (3). を 観察 し次 の 結果 を得 た.. (4). 1)部. 位 別 に よ る剥 離 上 皮 細胞 の 角化 状 態 は,そ. の 進 行 程度 に よ り硬 口蓋,歯 肉,舌 根,頬 部 の順 で (5) 危 険 率: t.995 (1%),自 r=+0.97な. 角化 細 胞 の 減少 が み られ,且 つ核 消失 型 が 硬 口蓋 に 最 も多 く,頬 部 に 最 も少 な くみ られ た.. 由度: N‑2. 2)含. る関係 に お いて 相 関性 を証 明 す るこ. 嗽 液 で は未 角化 と前 角 化 の 青及 び赤 色 細胞. 用い た 場 合 には 当然 細. が 最 も多 く剥離 され,角 化 即 ち黄 色 細 胞 は少 な く剥. 胞 面 積 の 増 大 に応 じて この 値 が 増 加 す る こ とが考 え. 離 され,且 つ 核濃 縮 型 は 最 も多 く,核 消失 型 は 比 絞. られ る.. 的 少 数で あつ た.. とが 出来 た.従 つ てC/Nを. 次 にForakerは. 3)剥. 子 宮頸 管 の 正 常上 皮 細 胞 のN/C. につ い て計 測 した 結 果0.038〜0.05の. 離 上 皮細 胞 の 細 胞形 質 面 積,核 面 積 を 計 測. した結果,小 型 細 胞で は1600μ2以. もの が み られ. た と報 告 して い るが,本 実験 結 果 の方 が や や大 きい. 以 下,大 型3000μ2以. 値 を示 した.こ れ は両 者 の 臓 器 に よ る相異,細 胞選. 182μ2,中 型70.178μ2,大. 択 基 準等 の相 違 に よ る の で あ ろ う が,組 織 切 片標. た. 4). 本 で あ るか,湿 塗抹 標 本 で あ るか に よ る差 異 が最 も 大 きい 因子 と考 え られ る.以 上 私 はPap.法. N/Cは. 下,中 型3000μ2. 上,細 胞小 型 の 核 で は77〜. 小,中,大. 型80〜160μ2で. あつ. 型 細 胞 の順 に減 少 す るこ. とを 認 めた.. により. 癩 の 場 合 と比 較 す るた め の基 準 に正 常 口腔 粘膜 の 部. (文献 は第2編 の 末 尾 に一 括 掲 載 す る). 位 別 並 び に含 嗽 液 に よ る剥 離 細 胞 につ いて 角化 状 態, 退 行 性変 化,特. に核‑細 胞 形 質面 積 比(N/C)の. 察 を 行 つ た が, Pap.法. 観. は 細 胞 の 角化 状 態 を青,赤,. オ レ ンヂ と そ の程 度 に よ り識 別 で き る点,核 内構造 が 鮮 明 にみ られ る点 に特 長 が み られ た.. Oral. Exfoliative I.. Normal. Cytology. in Case. Exfoliative. of Leprosy. Cytology. By Toyozo From. the Depertment Clinic,. Hidaka,. D.. D.. S.. of Oral Surgery, Okayama University Medical School and the Dental Aisei-en Leprosarium, Nagashima, Okayama Prefecture.. Exfoliated epithelial cells of oral mucosa of 15 normal healthy individuals were taken as smear specimens from various intraoal areas and their garglings and stained by Papanicolaou technic. Keratinization, degenerative changes, and nuclear-cytoplasmic ratio (N/C) were studied in each smear. 1. A decrease of keratinized epithelial cells was noticed in the order of hard palate , gingiva, base of the tongue and buccal mucosa..
(7) 癩患者における口腔剥離細胞学 的研究. 51. 2. In the garglings more non-keratinized and precornified blue and red cells were ex foliated, while fewer keratinized orange cells. 3. Areas of the cytoplasm and nncleus of the exfoliated epithelial cells were mearsured and classified into small, middle, and large cells. 4. The N/C ratio was noticed to show a decrease in th order of small, middle and large cells..
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