19.自
色 黒 眼 ラ ッ トの マ ス ト細胞 欠 損 に つ い て
春
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務1)丹
羽
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樹2)大
野
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大 阪 大 学 医 学 部 病 理1),八 木記 念 パ ー ク実験 動物 研 究所2),大 阪 大 学 微 生 物 病 研 究 所3) 目 的 昨 年 お よび本 年 の本 学 会 に お い て丹 羽 らに よっ て報 告 され た 突 然 変 異 ラ ッ ト(以 後WhiteSpotting rat: WS/WSと 略す)は ヘ テ ロで は腹 部 の 白斑 と全 身 の淡 色 化 を お こ し,ホ モ で はmelanocyteの 欠 損 に よ り白 色 黒 眼 とな る.さ らに ホ モ で は著 明 な大 球 性 貧 血 を示 す こ とも 明 らか と な った.こ れ らの表 現 形 質 は マ ウス のW(c-kit)お よびSl遺 伝 子 座 に お け る突 然 変 異 の表 現 形 質 と よ く似 て い る1幻4).そ こで 今 回,Wお よびS1 の ホ モ で み られ る マ ス ト細 胞 の欠 損 が こ のWS/WS ラ ッ トでみ られ るか ど うか を検 討 した. 方 法 な らび に結 果 1.マ ス ト細 胞 の存 在 の有 無 を調 べ るた め,生 後1 週,2∼5週,50週 以上 の ホ モ(WS/WS),ヘ テ ロ (WS/十),お よび正 常(十/十)ラ ッ ト皮 膚 を ホ ル マ リ ン固定 後,1cmあ た りの 一?スト細 胞 数 をalcian blue 染 色 で測 定 した.+/+ラ ッ トで は 全経 過 を通 じて1 cmあ た り350個 前 後,ヘ テ ロで は 正常 の ほ ぼ半 分 の マ ス ト細 胞 を認 め る の に対 し,ホ モ で は生 後5週 ま で は正 常 の2∼3%程 度 に ま で減 少 し,50週 以降 で は マ ス ト細 胞 は 全 く認 め られ な か った. 2.こ の ラ ッ トの突 然 変 異 が マ ウス に お け るWに あ た る もの な のか,あ る い はSlに あた る もの な のか を 調 べ るた め に皮 膚 の移 植 実 験 を行 った.WS/WSラ ッ ト胎 児 皮 膚 を ヌー ドラ ッ トの 腎 被膜 下 へ 移 植 し,移 植 後5週 目に移 植 皮 膚 片 へ の マ ス ト細 胞 の 出 現 の有 無 を 調 べ た.WS/WSラ ッ トの皮 膚 移 植 片 に は マ ス ト細 胞 の 出現 を認 めた.こ れ は移 植 皮 膚 片 が正 常 に マ ス ト細 胞 の分 化 を支 持 す る こ とを示 して お り,マ ウス に お け るW突 然 変 異 の場 合 に相 当 し て いた1∼3). 3.WS/WSラ ッ トで認 め られ る貧 血 の原 因 を 調 べ るた め に血 液 幹 細 胞 の移 植 実 験 を 行 っ た.Cyclo-phosphamide 100mg/kg腹 腔 注 の前 処 置 を し,780R の放 射 線 照 射 を した マ ウス は ラ ッ トの骨 髄 細 胞 を受 け 入 れ る こ とは 知 られ て い る2).こ の 前 処 置 を 行 った マ ウス に+/+お よびWS/WSラ ッ トの骨 髄 細 胞(4× 106個/匹)を 尾 静 脈 か ら注 射 し,7日 後 マ ウス 脾 で の 血 液 幹 細 胞 の 増 殖 の 有 無 を 調 べ た.+/+ラ ッ トの 骨 髄 細胞 を 注 射 した マ ウス の 脾 重量 は(77±6mg,mean ±SE),前 処 置 の み の群(44±6mg)に 比 べ 有 意 に (p＜0.01)増 加 す る のに 対 し,WS/WSラ ッ トの 骨 髄 細 胞 注 射 した マ ウス の 脾 重 量 は(43±7mg)前 処 置 の み の 群 と同 様 で あ った.組 織 学 的 に も+/+の 骨 髄 細 胞 を 注 射 した 脾 臓 に は 赤 芽 球 系 の 細 胞 の 増 殖 を 多 数 認 め た が,WS/WSラ ッ トの 骨 髄 細 胞 を 注 射 した マ ウス の 脾 臓 に は 血 液 細 胞 の増 殖 は 認 め な か った.こ の 結 果 もマ ウス のW突 然 変 異 に 相 当 して い た1∼3). 4.WS/WSは 雌 雄 と もfertileで あ り,生 後30日 目の 精 巣 お よ び卵 巣 の 組 織 像 は,+/+の 組 織 像 と差 を 認 め な か った. 考 察 WS/WSラ ッ トはmelanocyteの 欠 損,大 球 性 貧 血 に 加 え,マ ス ト細 胞 を も欠 損 して い た.そ の欠 損 機 構 は 皮 膚 移 植 お よ び血 液 幹 細 胞 の移 植 実 験 に よ り,マ ウ ス に お け るW突 然 変 異 に 相 当 し てい た1幻4).こ の ラ ッ トの 特 徴 は ホ モで あ って もfertileで あ る こ と と,成 長 に よ り貧 血 の 改 善 が 認 め られ る こ とで あ り,こ の 特 徴 は マ ス ト細 胞 欠 損 の 実 験 モ デル と して きわ め て 有 用 で あ る と考 え ら れ た.今 後 ラ ッ トのW(c-kit)遺 伝 子 を+/+ラ ッ トとWS/WSラ ッ トか ら ク ロー ニ ン グ し,実 際W(c-kit)遣 伝 子 に 異 常 が あ る こ とを 確 認 す る予 定 で あ る. 文 献1) Kitamura, Y. et al.: Blood, 52, 447(1978) 2) Kitamura, Y. and Go, S.: Blood, 53, 142
(1979)
3) Kitamura, Y.: Ann. Rev. Immunol., 7, 59 (1989)
4) Witte, O.N.: Cell, 63, 5(1990)
