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感染症学雑誌 第82巻 第 6 号 Fig. 1 Gram staining smearsfrom Bactecblood culture bottles
a) Aerobic bottle,S. aureus: Tight clusters, large cells. Individual cells cannot be distinguished.b)Aerobicbottle,S.epidermidis:Tetradsorsmallclusters.Clustersare plain.Medium-size cells.c)Anaerobicbottle,S.aureus:Tightclusters,medium-size cells.d)Anaerobicbottle,S.epidermidis:Clustersare plain.Medium-size cells.
血液培養液中のブドウ球菌属の塗抹グラム染色による形態学的鑑別
1）順天堂大学臨床検査医学科，2）順天堂練馬病院臨床検査部
近藤 成美
１）山田 俊彦
１）三澤 成毅
１）中村 文子
１）小栗 豊子
２）（平成 20 年 4 月 1 日受付）
（平成 20 年 7 月 15 日受理）
Key words : blood culture, gram stain, Staphylococcus aureus
感染症診療において，血液培養は重要な役割を占め ている．近年では自動化機器の普及により，比較的迅 速に分離菌の同定と薬剤感受性を知ることができるよ うになったが 2〜3 日を要する．2007 年当院おける血 液培養からの分離菌としては，ブドウ球菌属が 41％
を占め，15％ が黄色ブドウ球菌，25％ がコアグラー ゼ陰性ブドウ球菌である．両者の病原性は大きく異 なっているため，その鑑別は治療方針に大きく影響を 与える．今回，我々の施設における Bactec システム
を用いた血液培養液の塗抹グラム染色の形態学的観察 により，好気ボトル・嫌気ボトルでの Cluster の重積 と菌の大きさが黄色ブドウ球菌の特徴的な所見と考え られたことから（Fig. 1），判定基準の妥当性につい て検討した．その結果，血液培養液の塗抹グラム染色 によるブドウ球菌の形態学的観察での，早期の鑑別が 可能となった．
対象と方法：当院では Bactec システム（ベクトン・
ディッキンソン社）を用いて血液培養を行い，陽性の
短 報別刷請求先：（〒114―8431）東京都文京区 2―1―1 順天堂大学医学部臨床検査医学講座
近藤 成美
血液培養液中のブドウ球菌属の形態学的鑑別 657
平成20年11月20日
Table 1 Criteria for distinguishing Staphylococcus aureus from coaglase-negative staphylococci in Gram staining from BACTEC blood culture bottles
CNS S.aureus
③ Plain orsmallclusters
① Tightclustersare seen frequently from aerobicbottle,ortight clustersare seen from aerobicbottle and from anaerobicbottle Clusters
④ Medium to small(≦ 1μm)
② Large cellsfrom aerobicbottle (＞ 1 μm).Formedium-size cells, largerfrom aerobicthan anaerobicbottle
Cellsize
アラームが鳴った時点で取り出し，グラム染色（ハッ カー変法）と直接塗抹法による薬剤感受性試験を行っ ている．
グラム染色によりブドウ球菌属と推定されたものに ついて，好気ボトル・嫌気ボトルでの菌の大きさや集 蔟形態の特徴を記載．黄色ブドウ球菌，コアグラーゼ 陰性ブドウ球菌（CNS）の形態学的推定（2 名以上の 技師による合議で確認）を行い，下記の基準（Table 1）により判定，培養による同定菌種と塗抹グラム染 色による推定との一致率を求めた．
結果と考 察：平 成 19 年 12 月〜平 成 20 年 2 月 の 3 カ月間にブドウ球菌が分離されたもののうち，好気・
嫌気ボトル両者が陽性となり，かつグラム染色上の形 態の記載が行われていた 35 例について検討した．そ の結果，判定保留は 3 例（Staphylococcus aureus），グ ラム染色で S. aureus と判定された 20 例のうち，培養 で S. aureus 19 例，CNS1 例．グラム染色で CNS と判 定された 12 例のうち，培養で S. aureus 1 例，CNS11 例であり，判定保留 3 例を除いた 32 例での S. aureus に対する陽性予測値は 90％，陽性尤度比 11.4 であっ た．
過去の報告
１）では黄色ブドウ球菌とコアグラーゼ陰 性ブドウ 球 菌 の 鑑 別 の た め，ラ テ ッ ク ス 凝 集，di- rectTCT，in-situ hybridization，PCR などの方法が
挙げられてきた．しかし，これらは感度が低かったり 手技的に煩雑なことから実用上に問題があった．
血液培養液のグラム染色所見によるブドウ球菌の形 態的鑑別につ い て は，Murdoch ら の BacT! ALERT の報告
２）があり，89％ 以上の感度・特異度が得られて いる．これは Bactec のシステムには適用できないと され，我々の追試でも陽性予測値は 61.1％ にとどまっ た．
今回提示した，血液培養のグラム染色所見によるブ ドウ球菌の形態的鑑別は，追加の操作を必要とせず黄 色ブドウ球菌に対する陽性予測値も 90％ と高いため，
日常検査での適用が十分に可能と考えられる．ただし，
全体の約 10％ に黄色ブドウ球菌で判定保留となるも のがあり，実際の運用には注意が必要である．また，
確定には PCR などの併用が必要であろう．
文 献
1）Chapin K, Musgnug M：Evaluation of Three Rapid Methods for the Direct Identification of Staphylococcus aureus from Positive Blood Cul- tures. JCM 2003；41：4324―7.
2）Murdoch DR, Greenlees RL：Rapid identifica- tion ofStaphylococcus aureusfrom BacT!ALERT blood culture bottles direct Gram stain charac- teristics. J Clin Pathol 2004；57：199―201.
Morphological Identification of Staphylococcus spp. from Blood Culture Bottles Based on Direct Gram Staining
Shigemi KONDO
１）, Toshihiko YAMADA
１）, Shigeki MISAWA
１）, Ayako NAKAMURA
１）& Toyoko OGURI
２）1)Department of Laboratory Medicine, Juntendo University School of Medicine,
2)Department of Clinical Laboratory, Juntendo University Nerima Hospital
