抗 原捕 捉 免疫 測 定法 に よる抗 ア シァ ロ糖 タ ンパ ク質 受 容 体 抗 体 の検 出
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自己免疫性肝疾患における臨床的意義-森
末
佳
子
キー ワ ー ド:自 己 免 疫 性 肝 炎,原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変,抗 ア シア ロ糖 タ ン パ ク質 受 容 体 抗 体,自 己抗 体, ア イ ソ タ イ プ 緒 言 自 己 免 疫 性 肝 炎 と 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 は,代 表 的 な 自 己 免 疫 性 肝 疾 患 で あ る.こ れ ら の 疾 患 で は,抗 核 抗 体, 抗 平 滑 筋 抗 体 な ど 細 胞 の 構 成 成 分 に 対 す る 様 々 な 自 己 抗 体 が 検 出 さ れ,特 に 肝 細 胞 膜 タ ン パ ク 質 に 対 す る 自 己 免 疫 反 応 が そ の 病 因 と し て 重 要 と 考 え ら れ て い る1).ア シ ア ロ 糖 タ ン パ ク 質 受 容 体(asialoglycoprotein receptor; ASGPR)は,シ ア ル 酸 が は ず れ た ア シ ア ロ 糖 タ ン パ ク質 の 糖 鎖 末 端 部 分 に 表 出 す る ガ ラ ク トー ス を 特 異 的 に 認 識 し,肝 細 胞 に 取 り込 む 受 容 体 で あ る2).我 々 は,こ のASGPR が,肝 細 胞 の 類 洞 側,細 胞 隣 接 面 に 表 出 し,か つ 肝 細 胞 に 特 異 的 に 発 現 す る こ と を 免 疫 電 子 顕 微 鏡 法 に て 明 ら か に し,肝 細 胞 特 異 的 膜 タ ン パ ク 質 で あ る こ と を 示 し て き た3,4).そ し て,ASGPRは,家 兎 に 長 期 の 免 疫 に よ り実 験 的 肝 炎 を 誘 導 し た,い わ ゆ る 肝 細 胞 特 異 タ ン パ ク 質 の 構 成 成 分 で あ る こ と が 明 ら か と な り5,6),自 己 免 疫 性 肝 炎 に お け る 標 的 抗 原 の 一 つ と し て 注 目 さ れ て い る7).し た が っ て,ASGPRに 対 す る 自 己 免 疫 反 応 の 解 析 は,自 己 免 疫 性 肝 疾 患 の 病 態 解 明 に 重 要 と考 え ら れ,液 性 免 疫,細 胞 性 免 疫 の 面 か ら 精 力 的 に な さ れ て き た7-11). 我 々 は,以 前 ラ ッ ト肝 細 胞 膜 タ ン パ ク 質 粗 分 画(liver membrane extracts; LME)を 用 い て,マ ウ ス を 免 疫 す る こ と に よ り ラ ッ トお よ び ヒ トASGPRを 認 識 す る マ ウ ス モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 を 作 成 し た12-14).そ し て,こ の マ ウ ス モ ノ ク ロナ ー ル 抗ASGPR抗 体 を用 い て,LMEに 含 まれ るASGPRを 捕 捉 す る こ とに よ り患 者 血 清 中 に 存 在 す る抗ASGPR抗 体 を測 定 す る捕 捉 免 疫 測 定 法 を開 発 し,本 法 に よ り,自 己免 疫 性 肝 炎,原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 血 清 中 に は,他 の 肝 疾 患 や,肝 疾 患 以 外 の 自己 免 疫 性 疾 患 に比 べ 高 率 に 抗ASGPR抗 体 が 検 出 され る こ とを 明 らか に した15).本研 究 で は,自 己免 疫 性 肝 疾 患 に お け る 抗ASGPR抗 体 測 定 の 臨床 的 意 義 を明 らか に す るた め, 抗ASGPR抗 体 と 自 己免 疫 肝 疾 患 患 者 の 臨 床 検 査 デ ー タ,病 期,病 勢 と の 関 連 を検 討 し,ま た,検 出 され る抗 ASGPR抗 体 の ア イ ソ タ イ プ に つ い て も解 析 した の で 報 告 す る. 患 者 と 方 法 1. 患 者 21例 の 自 己免 疫 性 肝 炎 患 者(女 性20例,男 性1例;19 歳 ∼77歳,平 均54歳),40例 の 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者(女 性40例;35歳 ∼69歳,平 均50歳)か ら血 清 を採 取 し た. 自 己免 疫 性 肝 炎 患 者 は全 例,抗 核 抗 体,ま た は 抗 平 滑 筋 抗 体 が 陽 性 で,国 際 診 断 基 準 に よ り診 断 した16)抗 核 抗 体 , 抗 平 滑 筋抗 体 は,間 接 蛍 光 抗 体 法 で検 出 した 自己 免 疫 性 肝 炎 の病 勢 は,Treichelら の 基 準10)に準 じ判 定 し た す な わ ち,肝 生 検 所 見 で,様 々 な 程 度 の 線 維 化 を伴 い拡 大 した 門脈 域 に,piecemeal necrosisを 伴 う形 質 細 胞 や リンパ球 の強 い浸 潤 を認め,ま た実 質 域 に もfocal necrosis を伴 う炎 症 細 胞 浸 潤 を認 め る もの を活 動 期 と した 寛 解 期 は,改 善 した理 学 所 見 と血 液 検 査 デー タ;血 清ALT(ア ラ ニ ン トラ ン ス ア ミナ ー ゼ)値 が 正 常 値 の3倍 以 下 γ グ ロブ リ ン値 が2.5g/dl以 下,血 清 総 ビ リル ビ ン値 が3 mg/dl以 下,に よ り判 定 した 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 は,標 準 的 な病 歴,臨 床 検 査 デ ー (平成14年1月10日 受 理) 指 導:辻 孝 夫 教 授(岡 山 大 学 大 学 院 医歯 学 総 合 研 究 科 消 化 器 ・肝臓 ・ 感 染 症 内科 学) 論 文 請 求 先:岡 山 大 学 大 学 院 医 歯 学 総 合 研 究 科 消 化 器 ・肝 臓 ・感 染 症 内 科 学 電 話:086-235-7219160 森 末 佳 子 タ,肝 組 織 所 見 に 基 づ き 診 断 し た17,18).原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 の 病 期 は,Scheuerの 提 唱 し た 病 理 学 的 病 期 分 類19)で 判 定 し た.抗 ミ ト コ ン ド リ ア 抗 体 は,間 接 蛍 光 抗 体 法 で 測 定 し,原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 全 員 陽 性 で あ っ た.血 清 は,-20度 で 保 存 し た.研 究 は ヘ ル シ ン キ 宣 言 の ガ イ ド ラ イ ン に 沿 っ て 行 わ れ た.ま た そ れ ぞ れ の 患 者 か ら研 究 参 加 の 同 意 を 得 た. 2. 捕 捉 免 疫 測 定 法 に よ る 抗ASGPR抗 体 の 測 定 抗ASGPR抗 体 の 測 定 は,既 報 の ご と く捕 捉 免 疫 測 定 法 で 行 っ た15).す な わ ち,免 疫 測 定 用 プ レ ー ト に 我 々 が 作 成 し た マ ウ ス モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗ASGPR抗 体(ク ロ ー ン 8D7)を 固 相 化 し た.次 に,150∼250gのSD系 ラ ッ トか ら 既 報3)の ご と く調 整 し たLMEを 反 応 さ せ,LME に 含 ま れ るASGPR抗 原 を プ レ ー ト上 に 捕 捉 し た.そ し て,10,000倍 に 希 釈 し た 血 清 を 反 応 させ た 後,ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ 標 識 山 羊F(ab')2分 画 抗 ヒ ト免 疫 グ ロ ブ リ ン 抗 体(Kirkegaard & Perry Laboratories Inc., Gaithers burg, MD)を 加 え た.最 後 に,基 質 と し て2,2'-azino-bis(3-ethylbenz-thiazoline-6-sulfonic acid)を 加 え
て 発 色 し,吸 光 度(OD)を415nmで 測 定 し た.正 味 の
OD(net OD)を,測 定 し たODか ら,LMEを 加 え ず
に 測 定 し た 検 体 のOD値 を 差 し 引 い て 算 出 し,抗ASGPR 抗 体 値 は,下 記 の 計 算 式 に て 算 出 し た15):(検 体 のnet OD
陰 性 コ ン ト ロー ル のnet OD)÷(陽 性 コ ン トロ ー ル のnet OD-陰 性 コ ン ト ロ ー ル のnet OD).陽 性 コ ン ト ロ ー ル は, 任 意 に 選 定 し た 特 定 の 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 血 清,陰 性 コ ン ト ロ ー ル は,任 意 に 選 定 し た 特 定 の 健 常 者 よ り得 た 血 清 を 用 い た.す べ て,duplicateで 測 定 し,平 均 値 を 結 果 と し た. 測 定 し た 抗ASGPR抗 体 値 と患 者 の トラ ン ス ア ミナ ー ゼ,ビ リ ル ビ ン 値,自 己 抗 体 価 な ど の 臨 床 デ ー タ との 相 関 は,ス ピ ア マ ン 順 位 相 関 に よ り検 定 し,有 意 な 関 連 の あ る 項 目 に つ い て は,直 線 回 帰 分 析 に よ り相 関 係 数 を 算 出 し た.抗ASGPR抗 体 値 と 自 己 免 疫 性 肝 炎 の 病 勢 と の 関 連 は,マ ン ・ホ イ ッ トニ ー 検 定 で,原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 の 病 理 学 的 病 期 と の 関 連 は,ク ラ ス カ ル ・ワ リ ス 検 定 で 解 析 し た. 3. 抗ASGPR抗 体 の 抗 体 ア イ ソ タ イ プ の 解 析 上 記 の 捕 捉 免 疫 測 定 法 で,ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ 標 識 山 羊 F(ab')2分 画 抗 ヒ ト免 疫 グ ロ ブ リ ン抗 体 の 代 わ りに,ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ 標 識 山 羊F(ab')2分 画 抗 ヒ トIgG抗 体, 抗 ヒ トIgM抗 体,抗 ヒ トIgA抗 体 を 使 用 し て 解 析 し た. 結 果 自 己 免 疫 性 肝 炎 患 者21症 例 の 抗ASGPR抗 体 値 は,中 央 値0.163(-0.16-0.789),原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者40 症 例 で は,中 央 値0.734(0.129-1.174)で あ っ た.患 者 の 疾 患 別 臨 床 検 査 デ ー タ と 抗ASGPR抗 体 値 と の 相 関 に つ き検 討 し た と こ ろ,自 己 免 疫 性 肝 炎 患 者 で は,γ-グ ロ ブ リ ン値(P=0.012)お よ びIgM値(P=0.007)と の 問 に 有 意 な 相 関 を 認 め た が,ト ラ ン ス ア ミナ ー ゼ,ビ リ ル ビ ン な ど と は 有 意 な 関 連 は 認 め ら れ な か っ た(表1). そ こ で,γ-グ ロ ブ リ ン値 お よ びIgM値 に つ き,直 線 回 帰 分 析 に て 解 析 し た と こ ろ,抗ASGPR抗 体 値 と γ-グ ロ ブ リ ン 値 と の 間 に は,相 関 係 数0.526(P=0.014)と 正 の 相 関 関 係 を 認 め(図1A),IgM値 と の 間 に は,相 関 係 数0.716(P=0.0003)と 強 い 正 の 相 関 関 係 を認 め た(図 1B).原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 で は,抗 ミ ト コ ン ド リ ア 抗 体 を 含 め 抗ASGPR抗 体 値 と有 意 な 相 関 を 示 す 臨 床 検 査 項 目 は 認 め ら れ な か っ た(表2). 次 に,自 己 免 疫 性 肝 炎 の 病 勢 と 抗ASGPR抗 体 値 と の 関 連 に つ き 検 討 し た.自 己 免 疫 性 肝 炎 患 者21例 の う ち, 血 清 採 取 時 前 後 約1ヶ 月 以 内 に 肝 生 検 が 施 行 さ れ,組 織 学 的 な 病 勢 判 定 が 可 能 で あ っ た 症 例 は14例 で,判 定 の 内 訳 は,活 動 期10例,寛 解 期4例 で あ っ た.活 動 期 自 己 免 疫 性 肝 炎 患 者 の 抗ASGPR抗 体 値 は,中 央 値0.177(-0.16-0.789)で,寛 解 期 の 中 央 値0.03(-0.01-0.076) に 比 べ 有 意 に 高 値 を 示 し た(P=0.034,図2).さ ら に, 血 清 トラ ン ス ア ミナ ー ゼ 値 が 正 常 に もか か わ ら ず 抗ASGPR 抗 体 値 の 上 昇 が み ら れ た2症 例 の 肝 生 検 組 織 像 を検 討 し た.い ず れ の 症 例 も,小 葉 構 造 の 破 壊,門 脈 域 の 拡 大, 線 維 化,拡 大 し た 門 脈 域 にpiecemeal necrosisを 伴 う 形 質 細 胞 や リ ンパ 球 の 強 い 浸 潤 を 認 め,ま た 実 質 域 に もfocal 表1 自己免疫性肝炎患者 の臨床検査 データと抗ASGPR抗 体値 との関連 ,ス ピ アマ ン 順 位 相 関 AST,ア ス パ ラ ギ ン酸 トラ ン ス ア ミナ ー ゼ;ALT,ア ラ ニ ン トラ ン スア ミナ ー ゼ;T.Bil,総 ビ リル ビ ン;γ-glob,γ-グ ロブ リン;ANA,抗 核 抗 体;ASMA,抗 平 滑 筋 抗 体
図1 自己 免 疫 性 肝 炎 患 者 にお け る抗ASGPR抗 体 値 と γ-グ ロブ リン値, IgM値 との 相 関 A) γ-グ ロ ブ リン 値 との 相 関 相 関係 数=0.526,P=0.014(直 線 回 帰 分 析) B) IgM値 と の 相 関 相 関 係 数=0.716, P= 0.0003(直 線 回帰 分 析) 表2 原発性 胆汁性肝硬変患 者の臨床検査 デー タ と抗ASGPR抗 体値 と の関連 ,ス ピ ア マ ン 順 位 相 関 AST,ア ス パ ラ ギ ン 酸 ト ラ ン ス ア ミナ ー ゼ;ALT,ア ラ ニ ン トラ ン ス ア ミナ ー ゼ;T.Bi1,総 ビ リ ル ビ ン;γ-glob,γ-グ ロ ブ リ ン;ANA,抗 核 抗 体;AMA,抗 ミ ト コ ン ド リア 抗 体 necrosisが み られ,活 動 性慢 性 肝 炎 の像 を認 め た(図3). 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 のScheuerの 提 唱 した病 理 学 的 病 期 別 に 抗ASGPR抗 体 値 を 比 較 検 討 した.患 者40例 の う ち,血 清 採 取 時 前 後 約1ヶ 月 以 内 に肝 生 検 が 施 行 さ れ, 病 理 学 的 病 期 判 定 が 可 能 で あ っ た 症 例 は28例 で,I期12 図2 自 己免 疫 性 肝 炎 患 者 に お け る 抗ASGPR抗 体 値 活 動 期 と寛 解 期 の 比 較 a,活 動 期 と寛 解 期 の判 定 は,本 文 「対 象 と方 法 」を参 照,P= 0.034(マ ン ・ホ イ ッ トニ ー 検 定) 図3 血 清 トラ ンス ア ミナ ー ゼ値 が 正 常 に もか か わ ら ず 抗ASGPR抗 体 値 の 上 昇 が み られ た 自己 免 疫 性 肝 炎 患 者 の 肝 生検 組 織 像 患 者 は,54歳,女 性.ア ラニ ン トラ ン ス ア ミナ ー ゼ,27IU/l;総 ビ リル ビ ン,1.99mg/dl;γ-グ ロ ブ リ ン4 .839dl;抗 核 抗 体,160 倍;抗 平 滑 筋 抗 体,320倍;抗ASGPR抗 体 値,0.683拡 大 し た 門脈 域 にpiecemeal necrosis(矢 印)を 伴 う形 質 細 胞 や リ ンパ 球 の 強 い 浸 潤 を認 め,ま た 実 質 域 に もfocal necrosis(矢 じ り)が み られ る(HE染 色).Bar=100μm
162 森 末 佳 子 例,Ⅱ 期11例,Ⅲ 期5例 で あ っ た.各 病 理 学 的 病 期 の 間 で は,抗ASGPR抗 体 値 に 有 意 な 差 は認 め られ な か っ た (図4). 次 に,抗ASGPR抗 体 の 抗 体 ア イ ソ タ イ プ に つ き検 討 した.自 己 免 疫 性 肝 炎 活 動 期 で は,検 討 で きた5例 中4 例 で,IgM型 主 体 の 上 昇 が 観 察 され,1例 でIgG型 主 体 の 抗ASGPR抗 体 の 上 昇 が み ら れ た.IgA型 の 抗 ASGPR抗 体 が 主 体 と な る症 例 は認 め なか った.寛 解 期 で は い ず れ の ア イ ソ タ イ プ の抗ASGPR抗 体 も低 値 で あ っ た(図5A).一 方,原 発 性 胆 汁性 肝 硬 変 で は,検 討 で き た8例 中5例 で,IgG型,IgM型 抗ASGPR抗 体 両 者 が,3例 で はIgM型 の み が 検 出 され た.病 理 学 的病 期 の 間 で は,抗ASGPR抗 体 ア イ ソ タ イ プ の 明 らか な 差 は 認 め られ な か っ た(図5B). 自 己免 疫 性 肝 炎1症 例 で,ス テ ロ イ ドに よ る 治療 前 後 で の 抗ASGPR抗 体 の 抗 体 ア イ ソ タ イ プ別 変 動 を解 析 で きた.症 例 は41歳 の 女 性 で,血 清 トラ ン ス ア ミナ ー ゼ 値 の 上 昇,組 織 学 的 に も強 い 活 動 性 炎症 所 見 を認 め た た め, プ レ ドニ ン1日40mgの 投 与 を行 っ た.治 療 前 に はIgM型 抗ASGPR抗 体 の上 昇 を 認 め た が,ス テ ロ イ ド治 療 に よ り,ト ラ ン ス ア ミナ ー ゼ 値 の 改善 と と もにIgM型 抗 ASGPR抗 体 は 低 下 し た(図6).本 症 例 は,抗 平 滑 筋 抗 体 も,治 療 前640倍 と高 値 を示 した が,治 療 に よ る抗 体 価 の 変 化 は 認 め られ な か っ た. 図4 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 に お け る抗ASGPR抗 体 値Scheuerの 病 理 学 的 病 期 分類 で の 比 較 図5 抗ASGPR抗 体 の ア イ ソ タ イ プ A) 自己 免疫 性 肝 炎 患 者 で検 出 され る抗ASGPR抗 体 の ア イ ソ タ イ プa,活 動 期 と寛 解 期 の 判 定 は,本 文 「対 象 と方 法 」 を参 照. B) 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 で 検 出 され る 抗ASGPR抗 体 の ア イ ソ タ イ プb, Scheuerの 病 理 学 的 病 期 分 類 □,IgG;■,IgM;□,IgA 図6 自 己免 疫 性 肝 炎 患 者 に おけ る ステ ロ イ ド治 療 前 後 での抗ASGPR抗 体 値 の ア イ ソ タ イプ 別 変 動 患 者 は41歳 の女 性.血 清 トラ ンス ア ミナ ー ゼ値 の 上 昇,組 織 学 的 に も強 い活 動 性 炎 症 所 見 を認 め た た め,プ レ ドニ ン1日40mgの 投 与 を 行 っ た.ALT,ア ラ ニ ン トラ ン ス ア ミナ ー ゼ □,IgG;■,IgM;□,IgA.
考 案 本研 究 で は,我 々 が 開 発 した 抗 原 捕 捉 免 疫 測 定 法 に よ り,自 己免 疫 性 肝 炎 お よ び 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 の 血 清 中抗ASGPR抗 体 を 測 定 し,そ の 臨 床 的 意 義 を検 討 し た.自 己 免 疫 性 肝 炎 で は,抗ASGPR抗 体 値 と血 中 トラ ン ス ア ミナ ー ゼ 値 との 間 に 明 らか な 関 連 は 認 め られ なか っ た もの の,肝 生 検 組 織 所 見 で 判 定 し たpiecemeal ne crosisを 有 す る 活 動 期 患 者 で は,寛 解 期 患 者 に 比 べ 抗ASGPR抗 体 値 の 有 意 な上 昇 が 認 め られ,本 抗 体 は 門 脈 域 の 炎症,門 脈 域 周 囲 の 肝 細 胞 壊 死 な ど組 織 学 的 活動 性 を よ く反 映 して い る もの と考 え られ た.実 際,血 清 ト ラ ン ス ア ミナ ー ゼ 値 正 常 に もか か わ らず,肝 生 検 組 織 所 見 でpiecemeal necrosisや 門 脈 域 に 形 質 細 胞 や リンパ球 の 強 い 浸 潤 を認 め,抗ASGPR抗 体 値 の 上 昇 を示 す 症 例 が 確 認 さ れ た.こ れ らの 所 見 は,肝 組 織,特 に 門 脈 域 周 辺 の炎 症 所 見 と抗ASGPR抗 体 との 関 連 を示 した他 家 の 報 告8,9)ともよ く合 致 す る所 見 で あ る.特 に,抗ASGPR 抗 体 は 門 脈 域 周 辺 の 肝 細 胞 に よ り選 択 的 に 結 合 す る こ と が 示 さ れ て お り20),特 徴 的 なpiecemeal necrosisな ど門 脈 域 周 辺 の 肝 細 胞 壊 死 に 関 連 して抗ASGPR抗 体 の 上 昇 が 認 め られ る こ とは,ASGPRを 標 的 とす る免 疫 応 答 が 自己免 疫 性 肝 炎 の 病 態 に重 要 な役 割 を果 た して い る とす る仮 説7-9)を支 持 す る所 見 と考 え られ る. 今 回,自 己 免 疫 性 肝 炎 患 者 の 臨 床 検 査 デ ー タの う ち γ グ ロブ リン が抗ASGPR抗 体 値 と正 の 相 関 を示 し た. γ-グ ロブ リン との 関 連 は,抗ASGPR抗 体 陽性 の 患 者 は, 陰 性 の 患 者 に 比べ γ-グロブ リンが高 値 とす る他 家 の報 告21) と も一 致 す る所 見 で,抗ASGPR抗 体 上 昇 患 者 で のBリ ンパ球 活 性 化 に よ る抗 体 産 生 の 増 強 が推 測 され る ま た, 今 回 の 検 討 で は,自 己 免 疫 性 肝 炎 患 者 のIgM値 と抗 ASGPR抗 体 値 との 間 に,よ り強 い正 の 相 関 が 認 め られ た.ま た,抗ASGPR抗 体 の ア イ ソ タ イ プ を検 討 し た と こ ろ,活 動 期 患 者 で 上 昇 が 観 察 さ れ る抗ASGPR抗 体 の ア イ ソ タ イプ は 主 にIgMで あ っ た.こ の こ とか ら,抗 ASGPR抗 体 値 とIgM値 との 相 関 が,活 動 性 を反 映 して 上 昇 す るIgM型 抗ASGPR抗 体 に 起 因 して い る可 能 性 が 示 唆 され る.Treichelら は,自 己 免 疫 性 肝 炎 活 動 期 に は,IgM型,IgG型 両 者 の 抗ASGPR抗 体 が 検 出 さ れ, い っ た ん 寛 解 期 に 入 る とIgM型 抗ASGPR抗 体 が 消 失 す る こ と,い ず れ の 時 期 で もIgA型 抗ASGPR抗 体 は 検 出 さ れ な い こ と を報 告 して い るが10),本研 究 の 所 見 と も よ く合 致 した 所 見 と考 え られ る. さ ら に今 回,1例 の 検 討 で は あ る が,自 己免 疫 性 肝 炎 に お け る ス テ ロ イ ド治 療 を反 映 し たIgM型 抗ASGPR 抗 体 の 変 化 が 示 さ れ た.す な わ ち,治 療 に よ り寛 解 に な る と活 動 期 に は 上 昇 して い たIgM型 抗ASGPR抗 体 が 減 少 した.こ の 症 例 で は,抗 平 滑 筋 抗 体 価 に は 変 動 が 認 め な か っ た こ とか ら,IgM型 抗ASGPR抗 体 の 変 化 は, ス テ ロ イ ドに よ る非 特 異 的 な 抗 体 産 生 の抑 制 で は な く, 肝 組 織 に お け る炎 症 の 沈 静 化 を反 映 し て い る,よ り特 異 的 な変 化 と推 測 され る.今 後 症 例 を 増 や して,自 己免 疫 性 肝 炎 の免 疫 抑 制 治療 の 評 価 に おけ るIgM型 抗ASGPR 抗 体 の 意 義 を明 らか に してい く必 要 が あ る もの と思 わ れ る. 原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 に お け る抗ASGPR抗 体 測 定 の 意 義 に 関 して は,今 回の 検 討 で は,原 発 性 胆 汁性 肝 硬 変 患 者 の 臨 床 検 査 デー タに は,抗ASGPR抗 体 値 との 間 に 相 関 あ る もの は 認 め られ な か っ た.ま た,抗 ミ トコ ン ドリ ア 抗 体 価 との 相 関 も認 め られ なか っ た.そ こ で,Scheuer の病 理 学 的病 期 分 類 との 関 連 も検 討 した が,明 ら か な 関 連 は 認 め られ なか った.一 方,抗 体 ア イ ソ タ イ プ の検 討 で は,IgM型 の 抗ASGPR抗 体 が 全 例 で 検 出 され る こ とが 明 ら か と な っ た.抗 ミ トコ ン ド リア抗 体 の 主 た る標 的 抗 原 で あ る ピ ル ビ ン酸 脱 水 素 酵 素 に 対 す る抗 体 もIgG 型,IgM型 両 者 ま た はIgM型 単 独 が 主 で あ る こ とが 報 告 され て お り22),今 回検 討 した 抗ASGPR抗 体 ア イ ソ タ イ プ も同 様 の 結 果 で あ っ た こ とは 興 味 深 い.し か し,抗 ASGPR抗 体 ア イ ソ タ イプ も原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 の 病 期 との 関 連 は み られ ず,そ の 臨床 的 意 義 は 明 らか と な ら な か っ た.我 々 は 以 前 の 検 討 で,こ の抗 原 捕 捉 免 疫 測 定 法 に よ る抗ASGPR抗 体 は原 発 性 胆 汁性 肝 硬 変 患 者 全 例 に 検 出 され る こ と を報 告 し た が15),抗ASGPR抗 体 測 定 の 臨 床 的 意 義 と して,抗 ミ トコ ン ドリア 抗 体 な ど と同 様 に 疾 患 マ ー カー と し て有 用 で あ るか ど うか が 今 後 の 検 討 課 題 と思 わ れ る. 結 論 我 々 が 開 発 した 抗 原捕 捉 免 疫 測 定 法 に よ り,自 己免 疫 性 肝 炎,原 発 性 胆 汁 性 肝 硬 変 患 者 血 清 中 抗ASGPR抗 体 を測 定 し,自 己免 疫 性 肝 炎 で は,抗ASGPR抗 体 値 が そ の 病 勢 と関 連 の あ る こ と を 明 らか に し た.特 にア イ ソタ イ プ の検 討 で,IgM型 抗ASGPR抗 体 が,病 勢 を 反 映 して い る こ と,治 療 に よ り変 動 す る こ と を示 した .以 上 か ら,IgM型 抗ASGPR抗 体 は,自 己免 疫 性 肝 炎 の 活 動 性 の 評 価,治 療 効 果 の 評 価 に 有 用 で あ る可 能 性 が あ る もの と思 われ る.
164 森 末 佳 子 謝 辞 稿 を終 え るに あ た り,ご懇 切 な 指 導 とご校 閲 を賜 った恩 師 岡 山 大 学 大 学 院 医 歯学 総 合 研 究 科 消化 器 ・肝 臓 ・感 染 症 内科 学 教 室 辻 孝 夫 教 授,水 野 元夫 助 教 授,ま た,本 研 究 の 実 施,検 討 に ご援 助 頂 い た教 室 員 の 方 々 に深 謝 いた し ます. 文 献
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Clinical significance of anti-asialoglycoprotein receptor autoantibodies, detected by a capture-immunoassay, in autoimmune liver diseases
Yoshiko MoRisuE
Department of Medicine and Medical Science,
Okayama University Graduate School of Medicine and Dentistry (Director: Prof. T. Tsuji)
In the development of autoimmune chronic active hepatitis (AIH), the pathogenic relevance of autoimmune responses against asialoglycoprotein receptor (ASGPR) has been implicated. We have previously developed a capture enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of anti-ASGPR antibodies and found a high prevalence of anti-ASGPR antibodies in AIH and primary biliary cirrhosis (PBC). In this study, to clarify the clinical signifi
cance of the measurement of anti-ASGPR antibodies in autoimmune liver diseases we studied correlations between the titer of anti-ASGPR antibody and various laboratory data, activity and stage of the disease. We also determined the isotype of the anti-ASGPR antibody. In AIH, the anti-ASGPR antibody titer was positively correlated with serum ƒÁ-globulin and IgM values, but not with serum transaminase. The anti-ASGPR antibody titer in histologically
active disease with piecemeal necrosis was significantly higher than that in quiescent disease. The most common Isotype of anti-ASGPR antibodies detected in active AIH was IgM. We encountered a case of AIH where the titer of IgM anti-ASGPR antibody decreased by induction of remission with steroid therapy. These results suggest that the measurement of IgM isotype anti-ASGPR antibody might be useful for the evaluation of disease activity and effects of therapy in AIH patients.
