60 氏名（生年月日） 本 籍
学位の種類
学位授㌻の番号 学位授与の日付 学位授与の要件学位論文題目
論文審査委員
（6） ウン ノ ス ミ海野寿美（昭和3
医学博＋ 乙第1084号 ’lz成2年6月ユ5日学位規則第5条第2項該当（博士の学位論文提出者）
ヒト末梢リンパ球の’ηレ肋におけるムンプス抗体産生能の検討 （主査）教授 福山 幸夫 （副査）教授 内山 竹彦，相川 英三論 文 内 容 の 要 旨
目的勿 罐zoにおけるヒト末梢リンパ球のムンプス
ELISA抗体検出法の確立とそれを用いたりンパ球レ ベルでの免疫能の検討を目的とした． 対象と方法 （1）健康成人及び小児より採取したヘパリン加静脈 血を対象として用いた．Fico11－Hypaque比重遠沈法で リンパ球分離を，羊赤血球ロゼット環形成法によってT細胞とB細胞への分画を，complement－mediated
Tcell lysis法によってOKT8（一）， OKT4（一）の 分離を行なった．リンパ球は培養液RPMI1640（10％ fetal cow serum添加）に浮遊し，セミマイクロプレー
トで培養した．リンパ球の抗体産生刺激用抗原として， pokeweed mitogen（PWM），及び感染価1．6×107 TCID，。／m1の紫外線不活化ムンプスウイルス笹崎株 を添加した，各ドナーの血清ムンプス抗体価はムソプ スELISA北研法で，またリンパ球培養上清中のムソ プス抗体価は同法の修飾変法で測定した． （2）PWM及び不活化ムンプス抗原による刺激下で 種々の条件で培養し，上清中のムンプス抗体を測定し， リンパ歯数，培養日数，刺激抗原量について至適条件 を検討した． （3）血清中のムンプス抗体の有無によるリンパ球の 勿び伽。でのムンプス抗体産生能の違いについて検討 した． （4）血清ムンプス抗体陽性者のリンパ球をT細胞 とB細胞に分画し，その混合比を変化させて抗原刺激 時の抗体産生能を検討した．
（5）血清ムンプス抗体陽性者のT細胞を
OKT8（一）とOKT4（一）に分けて，それぞれとB
細胞を抗原刺激下で混合培養した場合のムンプス抗体 産生について検討した． 結果 （1）培養条件は未分画リンパ球300－400×104／ m1，培養日数7日が適切であった． PWM 2μg／0．2m1／ weH，ムンプスウイルス抗原は0．150r O，2ml／we11の 時良好な抗体産生が認められた． （2）血清ムンプス抗体陰性者のリンパ球は有意のム ンプス抗体産生を示さず，抗体陽性者のリンパ球は有 意の抗体産生を示した． （3）T／B比が1．0以上，各細胞数100×104以上で培 養すると著明な抗体産生が得られた．未分画リンパ球 では，抗体産生陰性例においても，T／B比の調整によ り抗体産生が認められた． （4）OKT4（一）（suppressor T細胞）十B細胞群の 抗体産生はT＋B細胞群のそれより低値であった． OKT8（一）（helper T細胞）＋B細胞群の抗体産生は T十B細胞群のそれとの間に差を認めなかった． 考察 勿。痂。におけるヒト末梢リンパ球のムンプス抗体 産生能の検出法を高感度ELISA法を用いて初めて確 立した．これを用いてT／B細胞比，helper T細胞， suppressor T細胞のB細胞ムンプス抗体産生に及ぼ す影響を勿魏zoで検討することが可能になった． 結論 勿θ伽。におけるヒト末梢リンパ球のムンプス抗体 一670一61 産生能の検出法を初めて確立し，産生能がT細胞とB 細胞の相互作用に依存している事が明らかとなった．
論 文 審 査 の 要 旨
これまで，ムンプスウイルスに対する勿碗劣。リンパ球抗体産生能については，適切な検査法がなく，検討 されたことがなかった．著者は，血清ムンプスELISA北研法に修飾を加え，2次抗体蛋白濃度を6．0μg／mlに 調整することにより，微量の抗体を検出する事が可能となり，特異性と感度の高い末梢リンパ球ELISA抗体 産生検出法を確立した．著者は，この方法を用いて，血清ムンプスELISA抗体陽性者のリンパ球のムンプス ELISA抗体産生能， T・B各細胞の再構成によるムンプスELISA抗体産生能， T細胞subsetのB細胞に与える影響について検討し，その抗体産生能は，B細胞数，ならびにT細胞とB細胞のinteractionに依存するこ とを明らかにした，学術上価値ある論文である． 主論文公表誌 ヒト末梢リンパ球のin vitroにおけるムンプス抗体 産生能の検討 東京女子医科大学雑誌 第59巻 第10・11号 1248－1255頁（平成元年11月25日発行） 副論文公表誌
1）Interferon production by human peripheral lymphocytes in response to measles virus
（麻疹ウイルスのヒト末梢リンパ球によるイ ンターフェロン産生能）
The Kitasato Archives of Experimental
Medicine 60（1－2）：41－49，1987
2）B群溶連菌感染症の現状一第2回全国アンケー ト調査結果一
小児科臨床42（別冊）：1251－1255，1989
