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誘 發 性 ニ就 テ 岡山醫科大學衛生學敎室 (主任緒方敎授) 井 上 達

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Academic year: 2022

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(1)93. 「パ ン ク レ アチ ン」ノ 「バ ク テ リオ フ アー ジ」. 誘 發 性 ニ就 テ 岡山醫科大學衛生學敎室 (主任緒方敎授). 井. 上. (本論 文 要 旨ハ 昭和3年2月18日. 達 岡山 醫 學 會 總 會 ニテ 發 表セ リ.). 目. 次 第6節. 第1章. 緒. 論. 第2章. 實 驗 材料 及 ビ實 驗 方 法. 第3章. 實驗成績. 第4章. 小. 括. 「パ ン ク レア チ ン」ノ「フ ア ー ジ 」 誘發性物質 ニ 關 ス ル實 驗. 第1節. 培養試驗. 第1節. 濾過 性 ニ就 テ. 第2節. 各 種「トリプ シ ン」劑 ノ「フア ー ジ」誘 發 作. 第2節. 耐熱 性 ニ就 テ. 用 ノ比 較. 第3節. 吸着 竝 ニ沈 降試 驗. 加 熱 「パ ンク レア チ ン」ノ「フ アー ジ」誘 發. 第4節. 牛 竝 ニ豚 膵臟 ヲ以 テ セ ル實 驗. 第3節. 第5章. 作用 第4節. 抗「ト リプ シ ン」血淸 ヲ以 テ セル實 驗. 第5節. 數 囘洗 滌 セ ル「パ ン クレ ア チ ン」沈 渣 ニ就. 考 案 竝 ニ結 論. 附. 文. 獻. テ ノ實 驗. 第1章. 緒. 論. 一 定 細 菌 ニ諸 種 酵 素 殊 ニ 膵臟 酵 素 ヲ試 驗 管 内 ニ 於 テ 作 用 セ シ メ,「 バ ク テ リ オ フ アー ジ」 ヲ 得 タ リ ト ス ル 報 告 ハ 甚 ダ 多 ク, Pico氏18)ハ,「 酵 素 ヲ,志 ブ ラ 」毒,膽. ト リプ シ ン」,「パ ン ク レ ア チ ン 」,「パパ イ オ チ ン」,「パパイン. 賀 菌 ニ 作 用 セ シ メ 「バ ク テ リ オ フ ア ー ジ」ヲ 證 明 セ リト 云 ヒ, Bachmann. 等2)ハ,「 コ. 汁,「 パ ン ク レ ア チ ン」等 ヲ 志 賀 菌 ニ作 用 セ シ メ 溶 菌 素 ヲ 得 タ リ ト ナ シ, Joetten氏12)ハ,加. ル 志 賀 菌 及 ビ 假 性 赤 痢 菌 液 ニ 「 ト リ プ シ ン」ヲ 作 用 セ シ メ,ソ 氏5)ハ,酒精. u. Aquino氏. 」又 ハ 白 血 球. 熱 セ. ノ 濾 液 内 ニ「フ ア ー ジ 」ヲ 檢 出 シ,又Combiesco. 又 ハ 温 熱 等 ニ テ 處 置 セ ル「 ト リプ シ ン 」,「エ ンテ ロ キ ナ ー ゼ 」ヲ,志 賀 菌 ニ作 用 セ シ メ 「フ ア ー. ジ」ヲ 得 タ ル モ,「 パ パ イ ン」ヨ リハ 之 ヲ 證 明セ ズ,依. テ 氏 ハ 「フ ア ージ 」ハ最 初 ヨ リ前 兩 者 内 ニ 含 有 サ レ 居 タ. ル モ ノ ナ リ ト主 張 セ リ. 然 ル ニPondmann氏19)ノ追. 試 ハ,ソ. 市 販 「ト リプ シ ン」ヲ 志 賀 菌,大 シ得 ザ リ シ ニ,犬. 中 毒 菌 等 ニ 作 用 セ シ メ タ ル ニ,ソ. 數種 ノ. ノ 何 レヨ リ モ「フ ア ー ジ 」ヲ 檢 出. ノ十 二 指 腸 液 竝 ニ 猫 ノ 膵臟 「エ キ ス 」ヲ,「 エ ンテ ロ キ ナ ー ゼ 」ニ テ 賦 活 セ シメ タ ル 活 性 「 ト. リプ シ ン」ニ依 リテ ハ,總. 93. 腸 菌,肉. ノ何 レ ヨ リ モ 何 等 陽 性 結 果 ヲ得 ザ リ キ.又Borchardt氏3)ハ. テ ノ 場 合 陽 性 ノ成 績 ヲ得 タ リ トナ シ,且. 溶 菌 性 物 質 ノ 發 生 ハ,活. 性 「 ト リプ シ ン」.

(2) 94. 井. ヲ 必 要 ト ス ト述 ペ タ リ.之. ニ 對 シ, Flu氏7)ノ. 證 ヲ擧 グ ル ニ 至 ラ ザ リキ,尚 モ,總. ホFlu氏. テ 陰 性 ニ 終 リ タ リ ト,之. 作 用 セ シ メ タ ル ニ,. Y菌. 上. 達. 猫 ノ 活 性 膵 液 ヲ 用 ヒ 赤 痢 菌 ニ 就 テ 行 ヘ ル 追 試 ハ,遂. ハ 「 ト リ プ シ ン」,「パ パ イ オ チ ン」及 ビ 「パ パ イ ン」ヲ 用 ヒ テ 實 驗 セ シ. ニ 反 シHajos氏9)ハ,十. 二 指 腸 液 ヲ 赤 痢 菌(志. 賀,「 フ レ キ シ ネ ル 」, Y菌)ニ. ニ 對 シ 甚 ダ 強 キ 「フ ア ー ジ」ヲ 認 メ タ リ.. 又Keller氏13)ハ,志. 賀,「 フ レ キ シ ネ ル」,大 腸 菌 等 ニ ,犬 及 ビ 猫 ノ十 二 指 腸 及 ビ 膵 臟 ノ 浸 出 液 ヲ 作 用 セ シ. メ,「 フ ア ー ジ 」 ノ發 生 ヲ認 メ タ ル モ,ソ. ノ成 績 不 定ニ シ テ,且. 含 有 「ト リ プ シ ン」量 ト無 關 係 ナ ル ヲ見 テ,. 「フ ア ー ジ」 ハ 最 初 ヨ リ十二 指 腸 液 内ニ 含 有 サ レ居 ル モ ノ ト看 做 シ,又 等 ヲ 作 用 セ シ メ テ,「. ニ ソ ノ實. フ ア ー ジ」 ヲ得 タ ル モ,之. 亦夫. 「パ ン ク レ ア チ ン」,「パ パ イ オ チ ン」. レ等製 劑 中ニ 初 メヨ リ含 有 サ レ居 ル モ ノ ナ ラ ン ト云 ヘ. リ. Hoder. u. Suzuki氏. シ メ,ソ. 等10)ハ,市. 販 「バ ン ク レ オ ン」ヲ 志 賀 菌,「 フ レ キ シ ネ ル 」菌, Y菌,大. レ ゾ レ當 該 菌 「フ ア ー ジ」ヲ 得 タ ル モ,含. 牛,「 モ ル モ ツ ト」,鷄,人. 等)ノ. 腸 菌 等 ニ作 用 セ. 有 「ト リプ シ ン」 トハ 全 ク 無 關 係 ナ ル ヲ 見,且. 膵臟 食 鹽 水 浸 出 液 ヲ 用ヒ テ 實 驗 セ ル 結 果,動. ル ト キ ハ,甚. ダ 容 易 ニ「フ ア ー ジ 」ヲ 得 ル コ ト ヲ得 ト云 ヘ リ.又Wollfs氏25)ハ,「ト. ノKaolinソ. ノ 他 ニ依 ル 吸 着 性 及 ビ 耐 熱 性 ノ差 異 竝 ニ豚,犬. 諸 動 物(豚,. 物 殊 ニ 豚 膵臟 浸 出 液 ヲ 使 用 ス リ プ シ ン」及 ビ 「フ ア ー ジ」. 等 ノ 膵臟 ヨ リ「グ リセ リ ン 」抽 出 法 ニ ヨ リテ 採 リ. タ ル 「ト リプ シ ン 」ノ「フ ア ー ジ」誘 發 性 等 ヨ リ,「 ト リ プ シ ン」劑 ノ 「フ ア ー ジ」作 用 ハ ソ ノ中 ニ 最 初 ヨ リ含 有 サ レ居 ル 「フ ア ー ジ 」ニ 依 ル ト云 ヘ リ. 本 邦 ニ 於 テ モ 山 口 氏26)竝 及ピB菌. 等 ヲ 培 養 シ,ソ. ヲ 培 養 シ,ソ. ニ竹 林 氏22)等. ハ,「 パ ン ク レ ア チ ン」肉 汁 中 ニ 赤 痢 菌,大. レ ゾ レ當 該 菌 「フ ア ー ジ 」 ヲ 得,桑. ノ培 養 液 中 ニ 「フ ア ー ジ」 ヲ 證 明 シ,且. 腸 菌,「 パ ラ チ フ ス 」A. 野 氏14)ハ 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ」肉 汁 中 ニ諸 種 ノ菌. 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ 」内 ノ 不 溶性物. ニ 「フ ア ー ジ」誘 發 性 ア. ル コ ト ヲ 報 告 セ リ.. 以 上 ノ 如 ク 膵臟 酵 素,特. ニ 「ト リ プ シ ン」竝 ニ 膵臟 製 劑 ナ ル 「パ ン ク レア チ ン」,「プ ロ タ ミ ラ ー. ゼ 」,「パ パ イオ チ ン」etc.ヲ 細 菌 ニ作 用 セ シ ム ル 際 ニ於ケ ル,「 フ アー ジ」ノ 檢 出 ニ 關 シ テ ハ,ソ ノ 成 績 區 々 ニ シ テ,或. ハ 主 要 酵 素 タ ル 「 ト リ プ シ ン」ノ 關 係 セル 如 ク,又. ズ,別. 種 ノ 因 子 ヲ求 ム ル モ ノ,或. テ,ソ. ノ 歸 ス ル 所 ヲ知 ラ ザ ル ガ如 シ.. ハ全 然 ソノ 關係 ヲ認 メ. ハ最 初 ヨ リ「フ ア ー ジ」ノ 混 在 セ ル モ ノ ト主 張 ス ル モ ノ 等 ア リ. 余 ハ 膵臟 製 剤 ナ ル 「パ ンク レ ア チ ン」 ノ 「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」 誘 發 作 用 ニ 關 シ,「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」産 生 機 轉 ニ,含 本 態 ニ就 キ 追 及 ヲ試 ミ,所. 有 「 ト リ プ シ ン」ノ關 與 ス ル ナ キ ヤ 否 ヤ ヲ 檢 シ,更ニ 期 ノ成 績 ヲ收 メ タ ル ヲ以 テ,此. 第2章 1. 1.. 進 ミ テ,ソ. ノ作 用. 處 ニ報 告 セ ン トス.. 實驗材料及ビ實驗方法. 實 驗 材 料. 「パ ン ク レ ア チ ン 」(「 コ メ ツ ト」). 大 阪黑田 商 會發 賣ニ 係 ル臟 器 製 劑 ニ シテ,温. 血 動 物 ノ膵臟 中 ノ 「エ ンチ ー ム」 ノ特 殊 混 合物 ヨ リ抽 出 セ. リ ト稱 セ ラル ル類 黄 色無 晶 形 ノ粉 末 ニ シテ,不 快 ナ ラザ ル特 異 臭 ヲ有 シ,水 ニ徐 々 ニ溶解 シ中 性 反 應(pH. 94.

(3) 「パ ンク レ ア チ ン」ノ「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」誘 發 性 ニ 就 テ. 6.8‑7.0)ヲ 2.. 95. 示 ス.. 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ」. 大 阪 武 田 商 店 ノ發 賣 ニ 係 ル臟 器 製 劑 ニ シテ,豚 色 粉 末 ニ シテ,水 3.. 膵臟 ヨ リ最 モ 自然 ノマ マ ニ抽 出 セ リ ト稱 セ ラ ル ル淡 類 黄. ニ徐 々 ニ混 濁 シテ 溶解 シ中性 反 應(pH.. 6.8‑7.0)ヲ. 示 ス.. 「 ト リ プ シ ン」(「 メ ル ク」). 褐 色 ノ結 晶 性 微 小塊 ニ シテ,水 4.. ニ容 易 ニ溶解 シ反 應 中 性 ナ リ.. 「 ト リ プ シ ン」(自 家 製). 牛 膵臟 ヨ リ自 家融 解 ノ方 法 ニ ヨ リテ 製 セ ル,淡 褐 色 粉 末ニ シテ 水 ニ容 易 ニ溶解 シ,反 應 ハ 中 性 ヲ示 ス. (製 法 ハ後 章 ニ於 テ 詳 記 ス.) 5.. 菌株. 總 テ業 室 保 存 ノモ ノニ シテ,特 殊 試 驗 以外 ハ赤痢 菌 異 型 第3型 菌 ヲ使 用 セ リ. 6.. 培養 基. 培 養液 ハ,弱 「アル カ リ」性 「ブ イ ヨ ン」ニ シテ, pH. 7.2‑7.6ノ モ ノヲ使 用 シ,培 養 寒 天 ハ, 2%寒 ニテ, pH. 7.2‑7.6ノ 2. 1.. 實. 驗. 天培養基. モ ノヲ使 用 セ リ. 方. 法. 「パ ン ク レ ア チ ン」竝 ニ「 ト リ プ シ ン」加 「ブ イ ヨ ン」内 菌 培 養. 特 殊試 驗 ノ他 ハ「ブ イ ヨ ン」100.0ccニ 「パ ンクレ ア チ ン」又 ハ「ト リプ シ ン」1.0gヲ 混 和 シ,強 ク振 盪 シテ 1.0%溶. 液 ヲ作 リ,氷 室 ニ一 夜 放 置 シテ,翌 日該 液 ヲ濾 紙 ニテ 濾 過 シ, 10.0cc宛 分注 シ,之 ヲ 「パ ン ク レア. チ ン」又 ハ「ト リプ シ ン」加 「ブ イ ヨ ン」液 ト爲 シ,ソ メ,後 濾 過 又 ハ56°‑58℃ニ1時 2.. ノ中 ニ細 菌 ノ一定 量 ヲ加 ヘ. 37℃ ノ孵 竈 内 ニ24時 時 納. 間 加 熱 シ,生 菌 ヲ殺 シ タル後 之 ヲ試 驗 ニ供 セ リ.. 「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」證 明 法. 「バク テ リオ フア ー ジ」證 明 法 ハD'Herelle氏6)ノ. 原 法 ニ準 據 シ,「 ブ イ ヨ ン」法 及 ビ平板 法 ノ兩 者 ヲ併 用. シ,「 ブ イ ヨ ン」法 ニテ ハ ソノ透 化 状態 ヲ觀 察 シ,平 板 法 ニテ ハ透 明 空 孔Taches 液 塗 抹 部 ニ於 ケ ル菌 苔 發 育 状 態 或 ハsog. Flatterformen nach 3. Viergesノ 出 現,又. ハ試 驗. gilmeister8)ノ 存 否 ヲ注 意 セ リ.. .「バク テ リオ フ ア ー ジ」定 量 法. Appelmanns氏 次1.0cc宛. 法1)ニ 依 リ「ブ イ ヨ ン」9.0cc宛 分 注 セ ル1列 ノ試 驗 管 ノ第1管. 次 ノ試 驗 管 ニ移 シ10倍 遞 降 的 稀 釋 液 ヲ作 リ,各 液 ニ菌 液1‑2白. ニ試 驗 液1.0ccヲ 加 ヘ,逐. 金 耳 宛 加 ヘ, 37℃ ノ孵 竃 ニ納. ム ルコ ト24時 間 ニ シテ,平 板 法 ニ ヨ リテ「バク テ リオ フア ー ジ」陽 性 範圍 ヲ定 メ タ リ,此 際 原液 稀 釋 ニ當 リ 1管 毎ニ 「ピペ ツ ト」ヲ新 シク セ シ ハ勿 論 ナ リ. 試 驗 液 ノ溶 菌價 ハ, Werthemann氏24)ノ. 1%「 95. 規 定ニ 從 ヒLysinexponent. 第3章. 實. 驗. 成. 績. 第1節. 培. 養. 試. 驗. (eL)ヲ. 以 テ 示 ス コ トニ セ リ.. パ ンク レア チ ン ブ イ ヨ ン」内 ニ,赤 痢 菌 各 型,「 チ フ ス」菌,「 パ ラ チ フ ス 」A及. ビB菌,駒.

(4) 96. 井. 込A及. ビB菌,大. 間後, 56°‑58℃. 腸 菌,腸 炎 菌,葡 ニ1時. レ當 該 菌 ヲ 塗 抹 シ,更. 達. 萄 状 球 菌,「 メ チ ニ コ フ 」孤 菌 等 ヲ,移. 間 重 湯 煎 中 ニ テ 加 熱 シ,寒 天 平 板 面 ニ ソ ノ1‑2滴 ニ37℃. ニ 前 記 加 熱 培 養 液1.0ccヲ. ニ24時. 間 培 養 シ空 孔 ノ 有 無 ヲ檢 シ,空. 「ブ イ ヨ ン」9.0ccニ. 同 樣 平 板 法 ニ テ 空 孔 ノ有 無 ヲ 檢 シ,尚 シ タ ル ニ,ソ. 上. 加 ヘ,當. ホ 陰 性 ノ モ ノ ハ,更. 殖 培 養 シ, 37℃24時 テ 塗 布 乾 燥 後,ソ. レゾ. 孔 ヲ認 メ ザ ル モ ノ ハ,更. 該 菌 ヲ 移 殖 シ, 37℃ ニ 今 一 度 第3囘. ニ24時. 間 培 養 シ,. 通 過增 殖 法 ヲ 試 ミ檢. ノ 成 績 次 表 ノ如 シ.. 第1表. +ハPhageヲ. 認 メ タ ル モ ノ,‑ハPhage陰. 即 チ赤 痢 菌 各 型 ニ於 テ ハ最 モ容易ニ,次. 性 ノモ ノ,/ハ. デ駒込A菌. 試 驗 ヲ 行 ハ ザ ル モ ノ ナ リ.以 下 之 ニ 準 ズ.. 及 ビ大 腸 菌 ヨ リ各 該 菌 ニ對 スル 「フ アー. ジ」ヲ得 タル モ,「 チ フ ス」菌 ソ ノ他 ヨ リハ余 ノ試 驗 菌 種 ニ於 テ ハ,反 覆 試 ミタ ル實 驗 ニ於 テ, 通 過增 殖 試 驗3囘 共 ニ陰性 ニ終 リタ リ. 而 シテ斯 ク シテ 得 タ ル各 種 「フ アー ジ」ハ,ソ ノ性状 全 クD'Herelle氏6)法. 則 ニ適 ヘル 性 状 ヲ. 具備 シ,數 囘 ノ通 過增 殖 ニ依 リテ 強力 ナ ル溶 菌 價 ヲ示 ス ニ至 リ,ソ ノ終 末濃 度 ハ各 々eL10‑eL8 96.

(5) 「パ ン ク レア チ ン」ノ「バ クテ リオ フア ー ジ」誘 發 性 ニ就 テ. トナ レ リ.又. ソ ノ耐 熱 性 ハ 何 レモ75℃30分. 第2節. 加 熱 ニ 耐 ユ ル モ, 80℃30分. 97. 加 熱 ニ耐 ヘ 得 ザ リキ.. 各 種 「 ト リ プ シ ン」劑 ノ 「バ ク テ リ オ フ アー ジ」誘 發 作 用 比 較. 余 ハ 「パ ンク レ ア チ ン」ノ「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ト,含 有 「ト リ プ シ ン」 トハ 關 係 ヲ 闡 明 セ ン ガ タ メ,先. ヅ 前 記 ノ 各 種 「 ト リ プ シ ン 」劑 ヲ,「 ブ イ ヨ ン」ヲ用 ヒテ1%溶. 中 ニ赤 痢 菌 異 型 第3型. 菌(爾. 後 單 ニ 異Ⅲ. ト記 ス)ヲ 移 殖 シ, 37℃. ニ24時. 濾 過 器 ニ テ 濾 過 シ,平 板 法ニ テ 「フ ア ー ジ 」ノ産 生 有 無 ヲ 檢 セ ル ニ,次 即 チ 「パ ンク レ ア チ ン」及 ビ「パ ンク レア チ ン」ヨ リMichaelis氏 ニ テ 沈 降精 製 セ ル,「 ハ 之 ヲ 認 メ ズ,殊. 液. 間 培 養 後, Berkefeld. 表 ノ 如 キ成 績 ヲ得 タ リ.. 法17)ニ 從 ヒ乳 酸 及 ビ乳 酸 曹 達. ト リ プ シ ン」ノ ミ ニ 「フ アー ジ」作 用 ヲ 認 メ タ ル モ,他. ニ余 ノ 牛 膵臟 ヨ リ得 タ ル 第1例. 液 トナ シ,該. ノ「 ト リ プ シ ン」劑 ニ. ノ如 キ 強 カ ナ ル 「 ト リ プ シ ン」ニ 於 テ モ,尚. ホ. 該 作 用 ヲ 認 メ得 ザ リキ.尚. ホ 又 「 ト リ プ シ ン」單 位 即 チ 「 ト リ プ シ ン」證 明 範 圍 ト,「 フ ア ー ジ 」證. 明 範 圍 トニ就 テ 見 ル ニ,山. 口 氏26)ガ 「フ ア ー ジ」産 生 能 力 ガ,略ボ. ノ觀 ア リ ト云 ヘ ル ニ反 シ,桑. 「 ト リ プ シ ン」量 ト平 行 ス ル ヤ. 野 氏14)ノ 培 養 液 内 ニ酵 素 ヲ證 明 シ得 ル 範 圍 ニ比 シ,「 フ ア ー ジ」檢. 出 範 圍 一 般 ニ廣 キ ガ如 シ ト云 ヘ ル 如 ク,又Keller氏13)ガ. 市 販 酵 素 劑 ノ「フ ア ー ジ」生 成 作 用 ハ,. ソ ノ 含 有 蛋 白 質 分 解 酵 素 量 トハ 無 關 係 ナ ル ガ 如 シ ト云 ヘ ル 如 ク,余 ン」作 用 ヲ全 ク 認 メ ザ ル 程 度 ノ稀 薄 ナ ル 液 ニ於 テモ,尚. ノ實 驗 ニ於 テモ,「 ト リ プ シ. ホ 「フ ア ー ジ」産 生 能 力 ア ル ヲ 認 ム.. 第2表. 第3節. 加 熱 「パ ン ク レ ア チ ン」ノ「バ ク テ リオ フ アー ジ」誘 發 作 用. 1%「 パ ン ク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」 ヲ 試 驗 管16本 テ 殘 シ,他. ハ2本. 宛7組. ニ 分 チ,重. 湯 煎 中 ニ テ70°‑100℃. ニ「 ト リ プ シ ン」作 用 測 定 ニ 供 シ, 1本 ハ 赤 異Ⅲ 「フ ア ー ジ」産 生 有 無 ヲ檢 シ タ ル ニ,次. ニ各1.0cc宛. 分 注 シ, 2本 ハ 非 加 熱 ノ 對 照 ト シ ニ5分‑30分. ヲ 移 殖, 37℃24時. 異 ヲ認 メザ リ キ. 97. 間 培 養 後 ,平 板 法 ニ依 リテ. 表 ノ如 ク,「 ト リ プ シ ン」作 用 ハ75℃30分. 全 ク ソ ノ 作 用 ヲ 失 フ ニ反 シ,「 フ ア ー ジ」産 生 能 力 ハ, 100℃ニ5分 明 シ得 タ リ. 100℃. 加 熱 シ, 1本 ハ直 チ. 加 熱 ハ 尚 ホ此 外 蒸 氣 釜 中 ニ テ 行 ヒタ ルモ,重. 加 熱 ニ ヨ リテ,. 加 熱 ス ルモ 時ニ 尚 ホ 之 ヲ證 湯 煎 中 ニ テ 加 熱 セ ル 場 合 ト差.

(6) 98. 井. 是 レPico氏18)ガ100℃. 上. 達. 加 熱 ノ 「パ パ イオ チ ン」,「パ パ イ ン」 ニ尚 ホ 「フ アー ジ」誘 發 性 ア リ ト. 云 ヒ,又 桑 野 氏 ガ乾 熱100℃‑110℃15分,濕. 熱100℃15分. 作 用 セ シ メ タ ル「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ 」. ニ,「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ア リ ト云 ヘ ル事 實 ト一 致 ス ル モ ノ ニ テ,「パ ンク レ ア チ ン」ノ「フ アー ジ」. 誘 發 性 ガ,含 有 「トリプ シ ン」ノ蛋 白 分解 作用 ト全 ク無 關 係 ナル 事 ヲ證 ス ル モ ノ ナ リ ト信 ズ.. 第3表. 第4節. 抗 「 ト リ プ シ ン」血淸 ヲ以 テ セ ル 實 驗. 「 ト リ プ シ ン」(「メル ク 」)(本 「 ト リ プ シ ン」 ノ 「フ ア ー ジ」産 生 作 用 ナ キ 事 ハ,第2節 ノ 如 シ)ノ1%食. 3.0ccヲ3日 シ,得. 鹽 水 溶 液 ヲBerkefeld濾. ノ實 驗. 器 ニ テ 濾 過 シ タ ル モ ノ ヲ注 射 材 料 トナ シ,ソ ノ1.0‑. ノ 間隔 ヲ置 キ,數 囘反 覆家 兎 耳靜 脉 内ニ 注 射 シ,最 後 ノ注 射 後7日. 目 ニ全 採 血 ヲ ナ. タ ル 抗 「 ト リ プ シ ン」血淸 ヲ以 テ次 ノ如 キ實 驗 ヲ試 ミ タ リ.. 實 Fuld‑Gross氏. 驗 第1. 法 ニ依 リ 「パ ン ク レ ア チ ン」液 ノ「 ト リ プ シ ン」價 竝 ニ本 血淸. ノ抗 「 ト リ プ シ ン 」價 ヲ 測 定 ス ル. コ ト次 ノ 如 シ. 「パ ン ク レ ア チ ン」液 ハ,「 パ ン ク レ ア チ ン」 ヲ 生 理 的 食 鹽 水 ニ テ, 1%ノ. 割 合 ニ 溶 解 シ,濾. 紙 ニ テ 透 明 トナ. ル 迄 濾 過 シ タ ル モ ノ ナ リ.. 第4表. 醋 酸 酒精ニ テ 白 濁 スル モ ノ ヲ(‑)僅ニ. 「ト リ プ シ ン」 價. 白濁 ス ル モ ノヲ(±)全 ク透 明 ナ ル モ ノ ヲ(+)ト. ス.以 下之 ニ準 ズ. 98.

(7) 「パ ン ク レ ア チ ン」ノ「バ クテ リオ フ ア ー ジ」誘 發 性 ニ 就 テ. 99. 第5表. 即 チ 第4表,第5表. ニ示 ス 如 ク,. セ シ ム ル 時 ハ0.2ト. 1%「. パ ン ク レ ア チ ン」ノ「ト リプ シ ン」價 ハ0.03ナ. ル モ,本. 血淸 ヲ 作 用. ナ レ リ.. 次 ニ,「 ト リプ シ ン」量 ヲ一 定 ニ シ テ,抗. 「 ト リプ シ ン」血淸 ノ種 々 ナ ル 量 ヲ 加 フ ル ニ,第6表. ノ如 シ.. 第6表. 即 チ 本血淸 テハ,. ハ,. 1%ノ. 0.6ccガ1.0ccヲ. 溶 液ニ 於 テ,ソ. ノ1.0ccハ,. 全 ク 中 和 ス ル コ ト ヲ 知 ル,依. 實 1.. 10%抗. タ ル 後,更. 「 ト リ プ シ ン」血淸1.0ccニ,. 液 ニ 就 キ,平. ニ 「ブ イ ヨ ン」8.0ccヲ. 2.. 加 ヘ,赤. ニ1時. 間作 用 セ シ メ タ ル 後,醋. 矢 張 リ陽 性 結 果ヲ 示セ .. 99. 溶 液 ニ於. 第2. ヲ 移 殖 シ, 37℃. ニ24時. 加 ヘ , 37℃. ニ1時. 間 置 キ タ ル後 ,ソ. 間 作 用 セ シメ ノBerkefeld濾. 性 結 果 ヲ 示 セ リ.. パ ン ク レア チ ン」液1 .0cc及. ビ0.2%「. カ ゼ イ ン」液2.0ccヲ. 家 兎 血淸1.0ccニ,「. 加 ヘ,. 酸 酒精 ヲ滴 下 シテ 完 全 ニ「 ト リ プ シ ン」作 用 ノ消 失 セ ル ヲ 證 明 シ タ ル 後 ナ シ,赤. 異Ⅲ. ヲ移 殖 シ, 37℃. ニ24時. 間 置 キ,前. ブ イ ヨ ン」9.0ccニ. ブ イ ヨン 」9.0ccヲ. 加 ヘ,菌. 加 ヘ,同. 移 殖同 樣,檢. 樣 菌 移 殖 ,檢. ス ル ニ 陰 性 ナ リ キ.. ス ル ニ陰 性 ナ リ キ.. , 同 樣 檢 ス ル ニ,. リ.. 抗 「 ト リプ シ ン」血淸1.0ccヲ,「. 4. 健常. 驗. 板 法 ニ テ 「フ ア ー ジ」産 生 有 無 ヲ 檢 シ タ ル ニ,陽. 更 ニ 「ブ イ ヨ ン」6.0ccヲ 加 ヘ 全 量10.0ccト. 3. 異Ⅲ. ハ10%ノ. テ 次 ノ實 驗 ヲ 行 ヘ リ.. 1%「 パ ン ク レ ア チ ン」液1.0ccヲ. 抗 「ト リプ シ ン」 血淸1.0ccニ1%「. 37℃. 1%「 パ ン ク レ ア チ ン」0.1ccヲ,又.

(8) 100. 井. 5.1%「. パ ン ク レア チ ン」液1.0ccニ,「. 以 上,第1ヨ. リ第5ニ. 上. 達. ブ イ ヨ ン」9.0cc加. ヘ,同. 亙 ル 實 驗 ニ就 テ 見 ル モ,「ト. 樣ニ 菌 移 殖 シ テ 檢 ス ル ニ,陽. リ プ シ ン]作. 性 ナ リ キ.. 用 ガ 「パ ン ク レ ア チ ン」 ノ. 「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ト全 ク 無 關 係 ナ ル コ ト明 カ ナ リ.. 第5節 1%「 シ,上淸. 數 囘 洗 滌 セ ル「パ ン ク レ ア チ ン」沈 渣 ニ 就 テ ノ 實 驗. パ ンク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」10.0cc宛 ヲ 捨 テ,再. ビ元 ノ量 ニ至 ル迄 無 菌 食 鹽 水 ヲ加 ヘ 遠 心 沈 澱 ス,斯. 沈 渣 竝 ニ上淸 液 ハ,全 テ 得 タ ル 沈 渣 ハ,之. 如 何 ヲ檢 ス ル ニ,上淸. 力 沈 澱 器ニ テ 遠 心 沈 澱 ク ス ル コ ト7‑8囘. ク 「カ ル ミ ン」纎 維 素 法 ニ テ 「 ト リ プ シ ン」作 用 ヲ示 サ ザ ル ニ 至 ル.斯 ヲ2分. シ, 1半 ハ 前 記 「カ ル ミ ン」纎 維 素 法 ニ テ,「. ル ニ供 シ, 1半 ハ ソ レ ニ5.0ccノ. 肉 汁 ヲ加 ヘ,赤. 液 竝 ニ 沈 渣 ニ 於 テ,全. ニ ハ 「フ アー ジ」産 生 作 用 ア ル ヲ 認 ム.即 産 生 作 用 トハ,無. ヲ 滅 菌 「ス ピッツ 」 ニ 採 リ,強. 異Ⅲ. ニテ クシ. ト リプ シ ン」作 用 ヲ檢 ス. ヲ 移 殖 シ,平 板 法 ニ依 リ「フ ア ー ジ」産 生. ク 「ト リ プ シ ン」作 用 ヲ認 メザ ル ニ,該. 沈渣 加 肉 汁. チ此 場 合 ニ 於 テ モ 亦 「ト リ プ シ ン」作 用 ト 「フ アー ジ」. 關 係 ナ ル コ トヲ 認 ム ナ リ.. 第6節. 小. 括. 以 上 ノ實 驗 成 績 ニ徴 ス ル ニ,「 パ ンク レ ア チ ン」 ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ハ,ソ シ ン」 ト何 等 關 係 ナ キ 事 明 瞭 ニ シテ,是. レKeller13),. Wollfs25),桑. 野,ソ. ノ含 有 「ト リ プ. ノ 他 ノ 諸 氏 ノ報 告 ニ一. 致 ス ル 所 ナ リ.. 第4章. 「パ ンク レア チ ン」ノ 「フ アー ジ 」 誘 發 性 物 質 ニ關 ス ル 實 驗. 「パ ン ク レ ア チ ン」ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ノ含 有 「 ト リ プ シ ン」 ト無 關 係 ナ ル コ トハ,既 ベ タ リ.然 Keller,. ラ バ,「 パ ン ク レ ア チ ン」 中 ノ如 何 ナ ル 物 質 ニ,該. Hoder. u. Suzuki10),. Wollfsノ. 諸 氏 ハ,最. ニ述. 作 用 ヲ求 ム ベ キ ヤ ニ 關 シ テ ハ,. 初 ヨ リ之 等 製 劑 中 ニ 混 在 セ ル 「フ ア ー ジ 」ニ. 依 ル ナ ラ ン ト云 ヘ ル ニ反 シ,桑 野 氏 ハ「プ ロ タミ ラ ー ゼ 」ヲ用 ヒ テ實 驗 セ ル 結 果,該. 作 用 物 質 ハ,. 「トリプ シ ン」又 ハ「アミ ラー ゼ」等 ノ消 化 酵 素 ニ非 ズ,又 「シヤ ンベ ラ ン」濾 液 内 ニ移 行 シ得 ル他 ノ 物 質 ニ モ 非 ズ シ テ,ソ. ハ 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ 」ノ 難 溶 性 固 形 部 ニ 存 ス ト報 告 シ,ソ. ノ 餘 地 ア リ ト思 考 セ ラ ル.余. ハ 此 問 題 ヲ 解 決 セ ン ガ タ メ ニ,次. 第1節. ノ 間尚 ホ研 究. ノ 諸 實 驗 ヲ 行 ヒ タ リ.. 濾 過 性 ニ就 テ. 「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ヲ有 ス ル 「パ ンク レ ア チ ン」内 ノ有 效 物 質 ノChamberland竝Berkefeld 濾 過 器 ヲ 通 過 ス ル ヤ否 ヤ ニ 就 キ テ,次. ノ 如 キ 實 驗 ヲ 試 ミ タ リ.. 或物 質 ノ濾過 性 ヲ論 ズ ル ニ當 リ,該 物 質 ノ濃 度,ソ. ノ溶 媒 液,濾. 器竝 ニ濾 過 壓 ノ關係 スル 所. 大 ナル ハ論 ナ シ,余 ノ使 用 セ シ濾 過 液 及 ビ濾 過 器 ハ次 ノ如 シ. 濾 過 液 ハ1%「. パ ンク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」及 ビ1%「. プロ タ ミ ラ ー ゼ ブ イ ヨ ン」(「ブ イ ヨ ン 」ハ, 100.

(9) 「パ ン ク レア チ ン」ノ「バ ク テ リ オ フ アー ジ」誘 發 性 ニ就 テ. 「リー ビ ヒ」肉 「エ キ ス」10.0g,照. 内 「ペ プ ト ン」10.0g,食. 101. 鹽5.0g,水1000.0cc)ヲ. 使用 セ. リ.. 濾 過 器 ハChamberland 50‑55mm水. F.竝. ニBerkefeld. M.濾. 過 器 ニ シ テ,濾 過 壓 ハBerkefeld濾. 銀 柱 ノ 陰 壓 ニ テ 吸 引 シ, Chamberland濾. 自然 ニ 減 壓 シ零 トナ ル ヲ 待 チ テ,再 分 以 上 煮 沸 セ シ ム ル カ,又. ビ加 壓1‑1.5氣. ハ蒸 汽 釜 中 ニ テ100℃. 器 ハ,. 器 ハ, 1度 約1‑1.5氣. 壓 ニ 加 壓 シタ ル 後,. 壓 ニ 至 ラ シ メ放 置 ス.又. 濾 器 ノ消 毒 ハ, 15. ニ1時. 間 加 熱 シ テ 行 ヒ,淸淨. 法 ト シ テ ハ,充. 分 洗滌 後,蒸 餾 水 ヲ數 囘 通過 セ シメタ リ,尚 ホ 數 度 使 用後 ハ, 25%「 ア ンチホ ル ミ ン」液 ヲ數 囘 通 過 セ シ メ,後 蒸 餾 水通 過 洗 滌 ヲ行 ヒタ リ. 又 濾 過 器 ハ 「フ ア ー ジ」 ヲ抑 留 ス ル ト云 フ, J. Bordet氏4)ノ. 注 意 ニ 據 リ,煮 沸 消 毒 後,尚. ホ. 生 存 セ ル 「フ ア ー ジ」殘 レル ヤ否 ヤ ヲ檢 ス ル タ メ,「 フ ア ー ジ」液 又 ハ 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ 」或 ハ 「パ ンクレ ア チ ン」液 ヲ 濾 過 後,. 5‑10‑15分. 煮 沸 シ,更. 「フ アー ジ」産 生 作 用 ノ 有 無 ヲ檢 シタ ル ニ,常. 實. ニ「ブ イ ヨ ン」ヲ濾 過 シ,ソ. ノ濾 液 ニ 就 キ テ. ニ 陰 性 ナ リ キ.. 驗1. 1%「 パ ン ク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」竝 ニ 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ ブ イ ヨ ン」 ヲ, Berkefeld濾 過 シ,濾 液 ニ就 キ「フ ア ー ジ」誘 發 性 ヲ檢 ス ル ニ,毎. 常 陽 性 ナ リキ,而. シテ,ソ. 過 器 ニテ濾. ノ作 用 ヲ 比 較 ス. ル ニ 次 表 ノ如 シ.. 第7表. 實 上 記 兩 液 ニ就 キ, Chamberland濾 モ,ソ. ノ趣 キ ヤ ヤBerkefeld濾. 驗2. 液 ヲ作 リ,同 樣 檢 ス ル ニ,殆 液 ノ場 合 ト異 リ,余. ノ 行 ヘ ル6例. ド毎 囘 陽 性 結 果 ヲ 得 タ リ ト雖 ニ 就テ 見 ル モ,時. ニ ハ一 見 ソ. ノ濾 液 ニ「フ アー ジ」産 生能 力 無 キ ガ如 キ觀 ヲ呈 ス レド モ,通 過增 殖 法 ヲ行 フ時 ニ ハ, 1‑2囘 ニ於 テ陽 性 成績 ヲ示 セ リ,而 シテ,例 ヘ ソノ濾 液 ガ通 過增 殖 ヲ行 フ必 要 ナ ク,即 ジ」産 生 作 用 陽 性 ヲ示 シタ ル 場 合 ニ於 テ モ, シテ,溶 101. 菌 價 ノ 如 キモ(eL)102‑(eL)103ヲ. Berkefeld濾. 過 ノ場 合 ト異 リテ,ソ. 示 ス ニ 過 ギ ズ.. 後. チ直 ニ「フアー ノ作 用 微 弱 ニ.

(10) 102. 井. 上. 達. 第8表. 第9表. 以 上 ノ成 績 ヲ通覽 ス ル ニ,「 パ ンク レ ア チ ン」竝 ニ 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ 」中 ノ 「フ ア ー ジ 」誘 發 性 物 質 ハ,ヨ. クBerkefeld竝. 反 シ, Pico氏18)ガ. ニChamberland濾. 過 器 ヲ 通 過 シ得 ル モ ノ ニ シテ,桑. 野 氏 ノ報 告 ニ相. 「 ト リ プ シ ン」「パ ン ク レ ア チ ン」ノ濾 液 ヲ志 賀 菌 ニ 作 用 セ シ メ,「 フ ア ー ジ」. ヲ 得 タ リ トス ル 報 告 竝 ニ 山口 氏26)ガ. 「パ ン ク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」 ノBerkefeld濾. 液 ハ,細. 菌 ト. 共 同 ニ ヨ リテ 「フ ア ー ジ」 ヲ産 生 ス ト報 告 セ ル 事 實 トー 致 ス ル モ ノ ナ リ.. 第2節. 耐熱 性 ニ就 テ. 「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」ノ耐 熱 性 ニ 就 テ ハ,多 數 ノ 實 驗 報 告 ア ルモ,略ボ70℃‑80℃ 60分. 加 熱 ニ耐 ヘ ザ ル モ ノ トナ ス ニ一 致 セル ガ如 シ,唯2,. 3ノ 報 告 ハ,稍. 度 ノ 加 熱 ニ 耐 ユ ル モ ノ ア ル コ ト ヲ 報 告 セ リ(Hajos9), Hauduroy11),. 然 レ共,「 フ ア ー ジ」ノ 耐 熱 性 ヲ檢 ス ル ニ 當 リテ ハ,ソ 何 ハ,筑. 波 氏21)モ 云 ヘ ル 如 ク,重. 大 ナ ル 意 義 ノ 存 ス ル 所 ニ シ テ,彼. 「フ ア ー ジ」 ノ素 ヨリ 同 一 ナ ラ ズ トス ル モ,同 用 セ ザ レバ,ソ. 一Mediumニ. ノ意 義 少 シ ト セザ ルベ カ ラ ズ.此. 々 之 ト異 リ,尚. Seiffert20),長. ノMediumノ. 於 テ,同. ニ30分‑. 沼27)氏. ホ高 等).. 如 何,「 フ ア ー ジ」濃 度 ノ如 我 相 對 照 セ ン トス ル ニ ハ, 一 濃 度 ノ 「フ ア ー ジ」ヲ 使. 事 實 ハ余 ノ次 ニ 行 ヘ ル 實 驗 ニ就 テ見 ルモ,亦. 明 瞭 ナ リ. 余 ノ此 處 ニ 行 ハ ン トス ル 實 驗 ハ,ソ. ノ目 的 ハ 「パ ンク レ ア チン 」内 ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 性 物 質 ノ. 102.

(11) 「パ ン ク レ ア チ ン」ノ「バ ク テリ オ フ ア ー ジ」誘 發 性 ニ 就 テ. 103. 耐 熱 性 ガ,普 通一 般 的 見解 ニ於 ケ ル「フ アー ジ」ノ耐 熱 性 ト甚ダ シキ差異 アル ガ如 ク見 ユ ル モ, 「フ アー ジ」モ亦 ソ ノMediumノ. 如 何 ニ ヨ リ テ ハ,ヨ. レア チ ン」内 ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 性 物 ガ,耐. 熱 性 ニ ヨ リテ 「フ ア ー ジ」 ト異 ル カ ニ見ユ ル ノ 誤 マ レ. ル コ トヲ指摘 セ ン トス ル ニ ア リ ト雖 モ,亦 何ニ 重 要 ナ ル 意 義 ヲ 有 ス ル ヤ ノ,一. 一 面 「フ ア ー ジ」ノ 耐 熱 性 ニ關シ,ソ. 如. 驗. バ ン ク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン 」 及 ビ ソ ノBerkefeld濾. ン」 ヲ作 リ,ソ. ノMediumガ. 證 査 タ ル ヲ失 ハ ズ.. 實 1%「. ク 高 熱 ニ 耐 ユ ル 事 ア ル ヲ立 證 シ,「 パ ンク. 液 竝 ニ10%「. ノ 「フ ア ー ジ」産 生 作 用 ノ終末 濃 度 ヲ檢 ス ル ニ,各104,. パ ン クレ. ア チ ン ブ イヨ. 103, 106ナ. リ,依 テ 別 ニ. 余 ノ 「パ ンク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」 ヨ リ得 タ ル 「フ アー ジ」 ノBerkefeld濾. 液(溶. 「ブ イ ヨ ン」ニ テ100倍. ペ プ ト ン」水, 5%卵. 水, 0.5%卵. ニ稀 釋 シ,ソ ノ0.5ccヲ50%「. 白 水 ノ各 々4.5ccニ. 加 ヘ,前. ン ブ イ ヨ ン」竝 ニ ソ ノ 濾 液 ト共 ニ,種 ヨ ン」 ヲ加 ヘ10倍稀. 釋 液 トナ シ,赤. ジ」 ノ有 無 ヲ檢 ス ル ニ,次. 記10%「. ペ プト ン」水, 5%「. パ ンク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」1%「. 々 ナ ル 程 度 ニ 加 熱 シ,加 異Ⅲ. 菌 價eL9)ヲ,. ヲ 移 殖,. 37℃. パ ンク レア チ. 熱 後 各 液 ノ0.5‑1.0ccヲ. ニ24時. 間 置 キ,平. 白. 「ブ イ. 板 法 ニ テ 「フ ア ー. 表 ノ如 シ.. 卵 白液 ハ,無 菌 的 ニ卵 黄ヨ リ分 離 セル卵 白 ヲ,無 菌 杉 箸 ニテ攪拌 シ,充分 セ ル モ ノ ヲ,生 理 的 食 鹽 水 ニ テ5‑0.5%ニ. 稀 釋 セ ルモ ノ ニテ,「フアー. 泡 立 シ タル後 無 菌 布 ニテ 濾 過. ジ」ヲ 加 ヘ タル 後 加 熱 ス ル ニ,大. ナル. 凝 塊 トナ リ凝 固 ス ル ヲ以 テ,強 ク振 盪 シテ 乳 劑 樣 トナ シ「ブ イヨ ン」ニ加 ヘ檢 査 セ リ.. 第10表. 本 表 ニ示 ス如 ク, 1%「 パ ンク レア チ ン ブ イ ヨ ン」 ノBerkefeld濾 ト同 樣, 80℃30分ニ 「フ ア ー ジ」ハ85℃30分 103. テ 全 ク ソ ノ 作 用 ヲ 失 ヒ タ ル ニ反 シ, ニ 耐 ヘ, 1%竝. ニ10%「. 50%‑5%「. 液 ハ, 100倍. 「フ ア ー ジ」液. ペ プ ト ン」水ニ 加 ヘ タ ル. パ ン ク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」及 ビ0.5%卵. 白水 加.

(12) 104. 井上. 「フ アー ジ」ハ,ヨ. ク100℃5分. ニ耐 ヘ,. 達. 5%卵. 白 水 加 「フ ア ー ジ」 ハ 實 ニ100℃15分. ニ耐 ヘ タ. リ.. 即 チ 單 ニ ソ ノ耐 熱 性 ヨ リ,「 パ ン ク レ ア チ ン」 内 ノ 「フ ア ー ジ」混 在 ヲ 否 定 シ得 ザ ル コ トハ,本 實 驗 ニ テ 明 カ ナ リ.. 第3節 「バ ク テ リオ フ アー ジ」 ノKaolin及. 吸着及 ビ沈降試驗 ビ炭 末 ニ依 ル 吸 着 竝 ニ硫 酸 「ア ン モ ン」ニ 依 ル 沈 降 現 象 ニ. 就 テ ハ,ソ ノ説 區 々 ニ シテ一 定 セザル ガ如 キモ,一 定 量 ノ之 等 試 藥 ヲ加 フル 事 ニ依 リテ沈 降乃 至 吸 着 セ ラ ル ル ハ,筑. 波21),小. 島15), Wollfs25)氏. 等 ノ實 驗 ニ 明 カ ナ リ.. 余 ハ 「パ ン ク レ ア チ ン」中 ノ 「フ ア ー ジ 」誘 發 性 物 ガ,果. シ テ 之 等 ノ試 藥 ヲ加 フ ル 事 ニ依 リテ,. 吸 着或 ハ沈 降 セ ラル ル ヤ ヲ實 驗 セ シニ,次 ノ如 キ成 績 ヲ得 タ リ.. 實 1%「. パ ン ク レ ア チ ンブ イ ヨ ン」 ノBerkefeld濾. 一 夜37℃. ニ 置 キ,遠. 心 沈 降 シ テ,ソ. ノ 上淸ニ. 驗1 液10.0ccニ,. Kaolin末. 及 ビ 骨 炭 末 ヲ 種 々 ナ ル 量 ニ 如 ヘ,. 就 キ 「フ アー ジ」誘 發 作 用 ヲ 檢 セ シ ニ,次. 表 ノ 如 シ.. 第11表. 實 1%「. パ ン ク レ ア チ ン ブ イ ヨ ン」 ノBerkefeld濾. 驗2 液10.0ccニ,硫. 酸 安 門 ヲ 加 ヘ 飽 和 及 ビ半 飽 和セ. シ メ,直. チ ニ遠 心 沈 降セ シ メテ,上淸 液 及 ビ沈 渣 ニ就 テ ソ ノ「フアー ジ」誘 發 作 用 ヲ檢 ス ル ニ,次 ノ如 シ. 104.

(13) 「パ ンク レア チ ン」ノ「バ クテ リ オ フ アー ジ」誘 發 性 ニ就 テ. 105. 第12表. 即 チ上 記 實 驗1及. ビ2ニ 示 ス如 ク,「パ ンク レア チ ン」中 ノ「フア ー ジ」誘 發性 物 モ,亦Kaoli及. ニ ヨ リテ ヨ ク 吸 着 セ ラ レ,硫. 第4節. 牛 及 ビ豚 膵臟 ヲ以 テセ ル實 驗. 動 物 膵臟 ヨ リ「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」ヲ證 明 セ ル 報 告 ハ甚 ダ 多 シ,今 獻 ノ2,. 3ニ 就 テ見 ル ニ,山口氏26)ハ. ケ ル モ ノ以 外 ハ,多. 豚 又 ハ 牛 膵臟. Hoder. ト」 ノ膵臟 ヨ リ ハ 「フ アー ジ」 ヲ得 ザ リ シ モ,豚,牛,鷄,人. 如 ク,余. u.. 及 ビ牛 ニ 於. Suzuki氏. 犬 及 ビ豚 ノ膵 臟 等10)ハ,「モ. 數 ノ 「フ ア ー ジ」含 有 セ ル ヲ 見. 又 ハ 牛 ノ膵臟 ハ 多 數 ノ場 合 ニ於 テ,「 フ ア ー ジ」ニ 汚 染 サ レ居 ル モ ノ ノ. ノ次 ニ行 ヘ ル 實 驗 モ 亦 ヨク 之 ヲ證 明 セ リ.. 實 新 鮮 ナ ル 牛膵臟3‑4箇. 驗1. ヲ,ヨ ク血液血 管 脂 肪 組 織 等 ヲ除 キ タル後,肉碎 器 ニ テ細切 シ(A),ソ. ヲ 生 理 的 食 鹽 水 中 ニ 投 ジ,ヨ ク 振 盪 シ テ ー 夜 氷 室 中 ニ 貯 ヘ,翌. ニ混 ジ,赤 異Ⅲ. 日 ソ ノ上淸 液1.0‑2.0ccヲ. 菌 ヲ移 殖 シテ 「フア ー ジ」産 生 如 何 ヲ檢 ス,殘. ノ大 約10.0g. 「ブ イ ヨ ン」10.0cc. リ全 部 ハ分 離 漏 斗 ニ入 レ,「 トル オー ル」ヲ. 重 ネ密 栓 ヲ施 シ,室 温 ニ放 置 シテ 自家 融 解ニ ヨ リテ 飴 色粘 稠 ナ ル「トリプ シ ン」原液(B)ノ析 チ,(3‑4週)該. 液 ヲ分 取 シ,ソ. ノ1.0ccヲ. ル 「 ト リ プ シ ン」(C)ノ0.1gヲ. ニ 酒精ヲ 加 ヘ「ト リ プ シ ン」ヲ 沈 降 セ シ メ精 製 ス(C),斯. 「ブ イ ヨ ン 」10.0ccニ. プ シ ン 」液 抽 出 後 ノ殘 留 組 織(D)ハ,之 ジ「フ アー ジ」檢出 ヲ 試 ミ タルニ次. 出 シ來 ル ヲ待. 前 記 同 樣 「ブ イ ヨ ン」ニ 加 ヘ,「 フ ア ー ジ 」産 生 如 何 ヲ檢 ス,又. シ テ 得 タ ル「 ト リプ シ ン」原 液(B)ハ,之. 105. ル モ ツ. 等 ノ 膵臟 浸 出 液 ヨ リ ハ 容 易 ニ 「フ. ニ豚 ニ於 テ ハ腸 内 容 ト共 ニ 膵臟 中 ニ ハ,多. タ リ ト報 告 セ ル 如 ク,豚. ノ 膵臟 ニ 關 スル 文. ト菌 トノ協 同 ニ依 リテ 「バ ク テ リオ フ. ノ他 ノ臟 器 ヲ 以 テ ハ 發 生 セ ズ ト述 ベ.又Wollfs25)ハ. ヨ リ「チ フ ス 」菌 ニ 對 ス ル 「フ ア ー ジ 」 ヲ 得 タ リ ト云 ヒ,. ア ー ジ」ヲ證 明 シ,殊. 牛,豚. 動 物 又 ハ ソ ノ臟 器 ヲ以 テ セ ル 實 驗 ニ 於 テ,豚. ク 不 定 ナ リ ト云 ヒ,且. ア ー ジ」産 生 ス レ ドモ,ソ. ビ骨炭 末 等. 酸 安 門 ニ ヨ リ テ ハ 沈 降 セ ラ ル ル 事 ヲ 知 リ得 タ リ.. 加 ヘ,前 同 樣 「フ ア ー ジ 」産 生 如 何 ヲ 檢 ス.尚. ヲ 低 温(室温)乾. ノ如 シ.. 燥セ. シ メ,ソ. ノ0.3‑0.5gヲ. 斯 ク. ク精 製 セ ホ 又「ト リ. 同 樣 「ブ イ ヨ ン」 ニ 投.

(14) 106. 井. 上. 達. 第13表. 即 チ膵臟 組 織 ナ ルA部 メ タ ル モ,同一 ン」(C)ヨ. 及 ビD部. ヨ リハ,第1及. ビ第2例. ノ2囘 ニ於 テ 「フ アー ジ」産 出 ヲ認. 組 織 ヨ リ抽 出 シ來 レル 「 ト リ プ シ ン」原 液(B)及. リハ, 3囘 ニ 亙 リテ 行 ヘ ル 實 驗 中1例. カ シ メ タ ル タ メ,尚. ビ ソ レ ヨ リ精 製 セ ル 「 ト リ プ シ. モ 之 ヲ 證 明 シ得 ザ リキ. ,是. レ甚 ダ 異 樣 ノ 感 ヲ抱. ホ 更 ニ再 々 反 覆 檢 シ タ ル モ 常 ニ陰 性 ノ結 果 ニ 終 リタ リ,是. レ恐 ラ ク 極 メ テ. 小 ナ ル 「モ レ キ ユ ー ル 」ナ ル 「フ ア ー ジ」ガ,組 織 中 ニ 抑 留 セ ラ レ テ析 出 液 中 ニ 移 行 シ來 ラ ザ ル カ,. 又 ハ遊 離 シ來 ル トモ ソノ量 僅 少 ニ過 ギ,遂 ニ檢 出 不 能 ニ終 リタ ル カ ニ依 ル ベ シ. 「 ト リ プ シ ン」精製 ニ 當 リ「 ト リ プ シ ン」原 液 ニ 加 フ ル 酒精 ニ依 リ,「 フ ア ー ジ」ノ障 害 セ ラ ル ル 怖 レ ア ル ヲ以 テ,余 「フ アー. ハ 新 シ キ 「フ ア ー ジ」液 ヲ「 ト リプ シ ン」原 液 ニ 加 ヘ,同 一 操 作 ヲ反 覆 セ シ ニ,. ジ 」 ハ 決 シ テ 障 害 ヲ 受 ケ ザ ル コ ト ヲ 認 メ タ リ.此. 長 沼27), Appelmann1)ノ. Watanabe23),. 諸 氏 ノ實 驗 成 績 ト又 一 致 ス ル所 ナ リ.. 實 新鮮 ナ ル豚膵臟2箇. 事 實 ハKabeshima16),. 驗2. ヲ ト リ表 面 ヲ瓦 斯 焔 ニ テ充 分 燒 キ無 菌 的 ニ内 部組 織 ヲ取出 シ,剪 刀 ニテ 細 切 シ,生. 理 的 食 鹽 水 中 ニ投 ジ,氷 室 中 ニ一 夜 貯 ヘ,翌 日上淸 液1.0ccヲ 「ブ イ ヨ ン」9.0ccニ 加 ヘ,赤 異Ⅲ 前試 驗同 樣平板 法 ニ ヨ リ「フ ア ー ジ」産 生如 何 ヲ檢 シ タル ニ, 2箇 ノ中1箇. 菌 ヲ移 殖,. ニ於 テ強 力 ナ ル 「フア ー ジ」 ヲ認. メ タ リ.. 即 チ 前 記 諸 氏 ノ報告 竝 ニ本 實 驗1及. ビ2ニ 示 ス如 ク,牛 竝 ニ豚 膵臟 ハ屡 々 「フ ア ー ジ」ヨ リ汚 染 サ レ居 ル. モ ノ ト認 メ ラ ル.. 第5章. 考 按 竝 ニ結 論. 以 上 ノ 諸 實 驗 ヲ概括 ス ル ニ,「 パ ン ク レ ア チ ン」ノ「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ニ含 有 「 ト リ プ シ ン」ノ 關 係 セ ザ ル コ トハ, Keller,. Hoder. u. Suzuki,. Wollfs,桑. ニ於 ケ ル 如 ク ニ シ テ,最 早 再 言 ス ル ノ 必 要 ナ カ ラ ン ト信 ズ. 野 氏 等 ノ 報 告 セ ル 如 ク,又. 余 ノ實 驗. ,唯 該 作 用 が含 有 セ ラ レ居 ル 「フ ア ー. ジ」ニ歸 スベキ ヤ,或 ハ桑 野氏 ノ云 ヘ ル如 キ不 溶 解 性 非 濾 過 性 ノ物 質 ニ歸 スベ キ ヤ ニ就 キ, 1, 2 ノ考 察 ヲ試 ミ ニ シ. 1.. 耐 熱 性 ニ就 テ. 「パ ンク レ ア チ ン」中 ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ヲ有 ス ル 物 質 ガ,高. 度 ノ 耐 熱 性 ヲ 有 ス ル コ トヲ以 106.

(15) 「パ ンク レアチ ン」ノ「バ クテ リオ フ ア ー ジ」誘 發 性 ニ就 テ. 107. テ,「 フ アー ジ」ノ存 在 ヲ否 定 スル ノ當 ラ ザル ハ,余 ノ前 章 ノ實 驗 成績 ニ徴 シ明 カ ナ ル事 ニ シテ, 「フア ー ジ」 ノ耐 熱 性 ハ ソ ノMediumノ 從 ツ テ,カ. ノHajos氏9)ノ. 如 何 ニ關 ス ル 事 ノ 大 ナ ル ハ,又. 余 ノ實 驗 ノ如 ク ニ シ テ,. 腸 内 容 及 ビ糞 汁 ノ浸 出 液 中 ノ「フ ア ー ジ」ガ, 2‑3分. ノ 煮 沸 ニ耐 ヘ タ. ル 事ハ,何 等 奇 トス ルニ 足 ラズ,又 桑 野 氏 ノ「プロ タ ミラー ゼ」中 ノ有效 性 分 ノ高度 ノ加 熱 ニ耐 ヘ タ ル 事 ヲ 以 テ 「フ アー ジ」存 在 ヲ 否定 シ得 ザル ハ 明 カ ナ ル 事 ナ リ. 即 チ 「パ ン ク レ ア チ ン」 ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 作 用 ハ,少. ク トモ ソ ノ 耐 熱 性 ニ ノ ミ ニ ヨ リテ ハ,. 「フ アー ジ」存 在 ヲ否 定 シ得 ザ ル ハ 明 カ ナ リ.. 2.. 濾 過性 ニ就 テ. 「パ ン ク レ ア チ ン」中 ノ 「フ ア ー ジ」誘 發 性 物 ガ,濾 ナ ル マ否 ヤ ニ關 シテ,大. 過 性 ナ ル ヤ 否 ヤ ハ,該. ナ ル 關 係 ヲ有 ス ルモ ノ ナ リ,然. 物 質 ガ 「フ アー ジ」. ル ニ 余 ノ 實 驗 成 績 ハ 先 ニ示 ス如 ク,. Seiffert20)山 口 及 ビ竹 林 氏 等 ノ 實 驗 ノ 如 ク常 ニ 可 濾 過 性 ヲ示 セ リ,唯Chamberlandニ ニ 非 濾 過 性 ヲ思 ハ ス ル コ トア リ シ モ, 1‑2囘 セ リ,是. レ恐 ラ クSeiffert,. Bordet氏. ノ通 過增 殖 試 驗 ニ ヨ リ テ,ソ. 等 ノ注 意 セ シ如 ク,濾. 於 テハ 時. ノ 然 ラ ザ ル コ トヲ示. 過 器 ニ依 リ吸 着 セ ラ ル ル カ,又. ハ. 濾 過液 内 ニ浮 游 セル 「パ ンク レア チ ン」又 ハ「プ ロタ ミラ ー ゼ」ノ非濾 過 性 物 ニ固 着 シテ,濾 液 ニ 移 行 スル量 僅 少 トナ リテ檢 出 シ難 キマ デ ニテ,非 濾 過性 ニ非 ズ ト思 考 セラル.即. チ濾 過性 ニ ヨ. リテ モ 亦 「フ アー ジ」ノ混 在 ヲ否 定 ス ル ハ 早 計 ナ リ. 3.. 動 物 膵 臟 ノ「フ ア ー ジ」感 染 ニ 就 テ. Wollfs,. Hoder. u. Suzuki,山. 如 ク,動 物 殊 ニ牛,豚. 口,ソ ノ 他 ノ 諸 氏 ノ 實 驗 及 ビ余 ノ 前 章 ニ 於 ケ ル 實 驗 ニ 明 カ ナ ル. ノ膵 臟 ハ,屡 々 「フ ア ー ジ」ニ 感 染 シ,從 ツ テ 夫 レ等 ノ臟 器 ヨ リ作 ラ レ タ ル. 製 劑 ニ,「 フ ア ー ジ 」 ノ混 在 シ得 ル ハ 容 易 ニ理 解 シ得 ル コ トニ シテ,特. ニ ソ ノ製 造 過 程 ニ於 テ,. 「フ アー ジ」ガ甚 ダ シキ障 害 ヲ受 クル ガ如 キ操 作 ヲ受ケ ザ ル 場 合 ニ於 テ ハ尚 ホ ソノ可 能 大 ナ リ. 今試 ミニ膵臟 製 劑 ノ製 法 ヲ一 瞥 セ ンニ . 1.. 「プロ タ ミ ラー ゼ 」ノ 製 法. 「プ ロ タ ミ ラ ー ゼ 」 ハ 新 鮮 ナ ル 豚 ノ 膵臟 ヲ採 リ,脂 シ,「 エ ー テ ル 」 層 ヲ 棄 テ,之. ニ3倍量. 肪 組 織 ヲ 除去. ノ「ア ル コ ホ ー ル 」ヲ加 ヘ,攪. セル 後,細. 挫 シ,「 エー テ ル 」ヲ 加 ヘ振 盪. 拌 振 盪 シ,直. チ ニ濾布 ヲ用 ヒ壓 搾 濾過. シ,共 濾 液 ヲ37℃ 以下 ノ温 度 ニ テ減 壓 蒸 散 セ シメ,更 ニ硫酸 乾燥 器 内 ニ放 置 乾 操 セ シ メテ,粉 末 トナ セル モ ノ ナ リ.. 2.. 「パ ン ク レ ア チ ン」ノ製 法. 「パ ン ク レ ア チ ン」ハ ,豚 又 ハ 牛 ノ 膵 臟 ヲ 採 リ,之. ロフ オル ム 」飽和 水2分 ヲ注 加 シ, 1‑2時. ニ 附 着 セ ル 組 織 ヲ 除 去 後,細. 切 シ,防. 腐 ノ 目 的ニ 「ク ロ. 間 放置 後 濾過 シ,壓 搾 シ得 タル液 ヲ,更 ニ濾 過 シ,ソ. ノ濾 液 ヲ. 4°‑5℃ 以 下 ノ温 度 ノ下 ニテ 蒸 發乾 燥 ス ル ニ至 ラ シム. 上 記 ノ何 レ ノ方 法ニ依. ル モ,「 フ ア ー ジ」ハ何 等 甚 ダ シ キ 障 害 ヲ受 ク ル コ トナ シ,故. 劑 中 ニ「フ ア ー ジ」ノ 混 在 シ得 ルコト ハ,ソ 107. ニ之 等 製. ノ際 使 用 シ タ ル 原 料 ニ 「フ ア ー ジ」存 在 セ バ,必. 然 ノ.

(16) 108. 井. 上. 達. 結 果 ト シテ 來 ル ベ キ モ ノ ナ リト 云 フ モ 不可 ナ カラ ン,況. ヤ 原 料 タ ル 豚 竝 ニ 牛 ノ 膵 臟 ノ 「フ ア ー. ジ」感 染 率 非 常 ニ大 ニ シテ,山. 等 ニ 依ル ニ,ソ. ニ於 テ ヲ ヤ,若. 口, Hoder. u. Suzuki氏. シ ソ レ精 製 セ ラ レ タ ル 「 ト リ プ シ ン 」ニ ハ,ソ. ル 「パ ン ク レ ア チ ン」,「 プ ロ タ ミ ラ ー ゼ」ノ 如 キ 製 劑 ニ,高 リ テ ハ,ソ. 製 ナ. 率 ノ 陽 性 成 績 ヲ 見 ルト 云 フ事 實ニ 至. ノ 間 ノ消 息 ヲ 語 リテ 餘蘊 ナ シ ト云 フ モ 不 可 ナ カ ラ ン.. 結 1.. ノ 頻 度 甚 ダ 高 シ ト云 フ. ノ 「フ ア ー ジ 」證 明 率 低 ク,粗. 論. 「パ ンク レ ア チ ン」ノ「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」誘 發 性 ハ,ソ. ノ 含 有 「 ト リ プ シ ン」 トハ 全 ク 無. 關 係 ナ リ. 2.. 「パン ク レ ア チ ン」中 ノ「フ ア ー ジ」誘 發 性 物 ハ,濾. ヨク吸 着 シ,硫 3.. 渦 性 ニ シテ,「 カ オ リ ン」及 ビ骨 炭 末 ニ. 酸 安 門 ニ テ 沈 降 サ ル.. 動 物 殊 ニ 牛,豚 ノ膵 臟 ハ,屡. 々 「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」 ニ ヨ リ汚 染 セ ラ レ居ル 事 實 及 ビ「パ. ンク レ フ チ ン」製 造 ノ經 過 等 ヨ リ推 ス ル ニ,「 パ ン ク レ ア チ ン」 ノ 「バ ク テ リオ フアー ジ」誘 發 性 ハ,恐. ラク 最 初 ヨ リ ソ ノ 中 ニ含 有 セ ル 「バ ク テ リオ フ ア ー ジ」ニ 依 ル ニ非 ズ ヤト 思 考 セ ラ ル.. 擱 筆 ス ル ニ際 シ終 始 御 懇 篤 ナ ル 御指 導 ヲ賜 ハ リシ,緒 方敎 授 ニ對 シ深 甚 ノ謝 意 ヲ表 ス. (3.. 文 1). Appelmans,. 4). Bordet,. 1922.. 3). Borchardt,. 7). Flu, compt,. 6). D' Herelle,. 10). Hoder n. Suzuki,. soc. d. biol. t. 87, p. 1089. Zeitschr.. f. Hyg.. 小 島,日. 本 微 生 物學會雜. Pico,. 誌,第18卷,. 23). Watanabe,. f. Hyg. Bd. 91, S. 255, 1922.. Hajos,. Combiesco, compt.. Zeitschr. f. Immunitatsf. 11). 14). 1924.. 桑 野,日. Hauduroy, compt.. 正13年.. Michaelis,. 新 醫 學,第15年,第11號,. 16). Kabeshima,. P. Bona, Praktikum. 20) Seiffert 22). 19). Wollfs,. 1755頁.. Compt.. rend.. Pondmann,. 15). soc, d. biol.. s. p. c. Flu, Compt.. Med. Mlin. Nr. 24, S. 823, 1923.. 竹 林,日. rend.. 13) Keller,. d. Physiol. Chem. S. 234. 1926.. 21). 筑 波,. 本 微 生 物 學 會 雜 誌,第19卷,第1867頁,大. Wien Klin. Wochschr. Bd. 34. Nr. 43. 1921. 25). Bd. 37, S. 147,. Centralbl. f. Bact. Bd. 89. S. 202, 1923.. Zeitschr. f. Immunitat.. 本微 生 物 學 會 雜 誌,第18卷,第19卷,大正13‑14年.. 第7號,大正14年.衛. Bd. 37. S. 1,1923.. 5). The Baeteriophage, Williams and Wilkins , Co. 8) Gildmeister Schurman, Der. Compt. rend. soc. d. Biol. t. 86, p. 1106, 1922.. 細 菌 學 雜 誌,第352號,第1頁,大正14年.. 山 口,日. 9). 120頁,大. 17). rend. soc. d. Biol. t. 89. p. 970, 1923.. 正14年.. Bachmann u. Aquino, compt.. 1927, S. 16.. Centralbl. f. Bact. Bd. 98 S. 24, 1926. 12) Joetten,. Bd. 103. H. I. S. 177. t. 83. p. 219 and 471, 1920. 18). 稿). rend. soc. d. biol. t. 89, p. 970, 1923.. Bacteriopbage eine Ultramicrobe. 1927, s. 27. 1923.. 2). Zeitschr. f. Immunitatsf.. Schurman, Der Bacteriophage eine Ultramicrobe,. rend. soc. d. biol. t. 87 p. 17, 1922.. 3.受. 獻. compt. rend. soc. d. biol., t. 85, p. 1098, 1921.. rend. soc. d. biol. t. 86. p. 1108, 1922.. 10.. 27). Werthemann,. Arch.. Bd. 45, S. 507. 1926.. 24). 26). 長 沼,實. 驗醫 學 雜 誌,第9卷,. 生 學 傳 染病 學 雜 誌,第20卷,第3號. 108.

(17) 109. Kurze Inhaltsangabe. Uber. die Bakteriophagiscbe. Wirkung. des Pankreatins.. Von. Toru Aus dem hygienischen. Inoue.. Institut der Med. Universitat. zu Okayama.. (Director: Prof. Dr. M. Ogata.) Eingegangen. am 3. Oktober,. 1928.. Es ist schon lange bekannt (1921),dass aus Pankreas oder seinen Praparaten, (Pank reatin, Trypsin) die Bakteriophagen gefunden wurden. Ich habe auch aus verschiede nen Pankreaspraparaten (Pankreatin, Protamilase, Trypsin (Merk) und von mir herges telltem Trypsin) die phagischeWirkung derselben nachgewiesen. Dann habe ich die Beziehungenzwischender fermentativen undphagischen Wirkung dieser Praparate verglichen und weiter nach der Quells dieser Wirkungen geforscht. Zusammenfassendwill ich hier meine Resultate angeben. 1) Die bakteriophagischeWirkung des Pankreatins steht in keinemZusammenhang mit der Wirkung des in ihm enthaltenen Trypsins. 2) Die bakteriophagischeSubstanz, die aus Pankreatin gewonnen wurde, ist gut filtrierbar, wird von Kaolin und Kohleadsorbiert und fallt,sich durch Zusatz von Ammon sulfaten aus. 3) Hitzewirkung fur Bakteriophagen schwankt je nach dem Medium, in welchem sie enthalten sind. Im eiweissreichenMedium werden die Bakteriophagen bei kurz dauerndem Kochen gesehutzt, z. b. im Eiereiweiss,weil dabei die Koagulation des Eiwei sses als Warmeschutzdienen mag. 4) Aus der Tatsache,dass das Pankreas der Rinder oder besonders das der Schweine oft von Bakteriophagen beschmutzt ist, ferner auf Grund eigener Befunde, die ich bei der Herstellung. des. Trypsins. die bakteriophagische oder beschmutzte. 109. beobachtet. Wirkung. Bakteriophagen. habe,. mocht. des Pankreatins. ich zu dem. Schluss. kommen,. dass. durch vorher in ihm schon enthaltene. ausgelost werden musste..

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参照

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Dieser Fall scheint mir nichts anderes als eine ausgedehnte Verbreitung zu sein uud vom Lewandowskyschen Fall