目次 第 Ⅰ 章緒言 1 タバココナジラミ 1 2 タバココナジラミが媒介するウイルス 3 3 本研究の目的 7 第 Ⅱ 章タバココナジラミの生態解明第 1 節熊本県に発生しているタバココナジラミのバイオタイプ 1 緒言 9 2 材料および方法 栽培作物からのタバココナジラミ採集 2-

ウイルスを媒介するタバココナジラミの

生態および防除に関する研究

樋口 聡志

2017

i 目 次 第 Ⅰ 章 緒 言 1 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 1 2 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ が 媒 介 す る ウ イ ル ス ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 3 3 本 研 究 の 目 的 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 7 第 Ⅱ 章 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 生 態 解 明 第 1 節 熊 本 県 に 発 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ 1 緒 言 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 9 2 材 料 お よ び 方 法 ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ 10 2-1 栽 培 作 物 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 2-2 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 2-3 バ イ オ タ イ プ の 識 別 方 法 3 結 果 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 15 3-1 栽 培 作 物 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 3-2 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 4 考 察 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 22 第 2 節 熊 本 県 で の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 野 外 越 冬 の 可 能 性 1 緒 言 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 25 2 材 料 お よ び 方 法 ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ 26 2-1 供 試 虫 2-2 雨 よ け ハ ウ ス に お け る バ イ オ タ イ プ Q お よ び B の 越 冬 2-3 野 外 条 件 下 に お け る バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬 3 結 果 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 31 3-1 雨 よ け ハ ウ ス に お け る バ イ オ タ イ プ Q お よ び B の 越 冬

ii 3-2 野 外 条 件 に お け る バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬 4 考 察 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 42 第 Ⅲ 章 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ に 対 す る 増 殖 防 止 対 策 第 1 節 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 薬 剤 検 定 法 の 開 発 と 感 受 性 1 緒 言 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 46 2 材 料 お よ び 方 法 ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ 47 2-1 供 試 虫 2-2 供 試 薬 剤 2-3 検 定 方 法 3 結 果 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 51 3-1 薬 剤 感 受 性 検 定 法 の 比 較 3-2 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 薬 剤 感 受 性 4 考 察 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 59 第 2 節 TYLCV を 保 毒 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ Q に 対 す る 薬 剤 の 感 染 抑 制 効 果 1 緒 言 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 63 2 材 料 お よ び 方 法 ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ 65 2-1 供 試 虫 お よ び TYLCV 獲 得 2-2 2 種 薬 剤 の 処 理 後 日 数 が 感 染 に 及 ぼ す 影 響 2-3 薬 剤 を 処 理 し た ト マ ト 株 に 対 す る 保 毒 成 虫 の 選 好 性 2-4 薬 剤 の 散 布 間 隔 と 感 染 抑 制 効 果 3 結 果 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 75 3-1 2 種 薬 剤 の 処 理 後 日 数 が 感 染 に 及 ぼ す 影 響 3-2 薬 剤 を 処 理 し た ト マ ト 株 に 対 す る 保 毒 成 虫 の 選 好 性

iii 3-3 薬 剤 の 散 布 間 隔 と 感 染 抑 制 効 果 4 考 察 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 84 第 3 節 CCYV を 保 毒 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ Q に 対 す る 粒 剤 の 被 害 抑 制 効 果 と 処 理 時 期 の 検 討 1 緒 言 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 87 2 材 料 お よ び 方 法 ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ ・・ ・・ ・・ ・・・ 88 2-1 試 験 圃 場 お よ び 栽 培 管 理 2-2 試 験 区 の 構 成 2-3 バ イ オ タ イ プ Q お よ び CCYV の 接 種 方 法 2-4 バ イ オ タ イ プ Q お よ び 退 緑 黄 化 病 の 調 査 方 法 3 結 果 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 91 3-1 バ イ オ タ イ プ Q の 密 度 推 移 3-2 メ ロ ン 退 緑 黄 化 病 の 発 病 推 移 3-3 果 実 重 量 お よ び 糖 度 に 対 す る 影 響 4 考 察 ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 98 第 Ⅳ 章 総 合 考 察 ・・・・ ・・・ ・・ ・ ・・・ ・・・ ・・ ・ ・・・ 101 要 約 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 109 引 用 文 献 ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 111 謝 辞 ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ 129 Summary・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 130

1

第 Ⅰ 章 緒 言

1 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 九 州 地 域 は 果 菜 類 の 生 産 量 が 多 く ， 多 数 の 産 地 が 形 成 さ れ て い る 。 特 に ， 冬 春 作 の ト マ ト ， ナ ス ， ピ ー マ ン 等 は ， 温 暖 な 気 候 を 活 か し た 施 設 栽 培 が 行 わ れ て お り ， そ の 生 産 量 は 全 国 の 約 4 割 を 占 め て い る （ 農 林 水 産 省 平 成 26 年 産 野 菜 生 産 出 荷 統 計 ， http://www.e-stat.go.jp /SG1/estat/List.do?lid=000001141603 ）。 こ れ ら の 果 菜 類 の 生 産 に お い て ， タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ Bemisia tabaci (Gennadius)（ カ メ ム シ 目：コ ナ ジ ラ ミ 科 ）（ 図 Ⅰ (A)）は 重 要 害 虫 と し て 広 く 知 ら れ て い る 。 本 種 は ， 熱 帯 ， 亜 熱 帯 お よ び 温 帯 地 域 の 世 界 各 地 に 広 く 生 息 し ，600 種 以 上 を 寄 主 植 物 と す る（ Oliveira et al.，2001）。 ま た ， 形 態 的 に 差 が な い も の の ， 寄 主 範 囲 や 寄 主 適 合 性 な ど に 違 い が あ る こ と も 報 告 さ れ て き た（ Mound，1963；Costa and Russell，1975； Bird and Maramorosch， 1978）。 こ れ ら の 研 究 か ら ， 本 種 は い く つ か の

バ イ オ タ イ プ の 複 合 で あ る と 考 え ら れ る よ う に な り（ Costa and Brown， 1991； Bedford et al.， 1994）， 地 理 的 に 隔 離 さ れ た 24 以 上 の バ イ オ タ イ プ か ら な る と 報 告 さ れ た（ Perring，2001；Boykin et al.，2007）。 こ れ ま で 我 が 国 で 確 認 さ れ た バ イ オ タ イ プ と し て は ， 西 日 本 の ス イ カ

ズ ラ や サ ツ マ イ モ 等 に 生 息 す る 在 来 系 統 で あ る バ イ オ タ イ プ JpL（ 以 下 ， JpL）（ 宮 武 ， 1980； Ueda et al.， 2009）， 沖 縄 な ど の 琉 球 諸 島 で の 在 来 系 統 で あ る バ イ オ タ イ プ Nauru（ Ueda et al.， 2009； 貴 島 ら ，

2011a,b），海 外 か ら 侵 入 し た バ イ オ タ イ プ B（ 以 下 ，B）（ 大 戸 ，1990； 松 井 ，1993）お よ び バ イ オ タ イ プ Q（ 以 下 ，Q）（ Ueda and Brown，2006） の 主 に 4 種 類 で あ り ， 他 に genetic group China に 属 す る 個 体 群 も わ

2 九 州 地 域 で は 従 来 か ら 在 来 の JpL が 生 息 し て い る が （ 宮 武 ， 1980； Ueda et al.， 2009）， 本 バ イ オ タ イ プ は 農 作 物 で 多 発 生 す る こ と が 少 な く ， 農 業 生 産 上 の 重 要 害 虫 で は な か っ た （ 本 多 ， 2008a）。 そ の 後 ， 1989 年 頃 に 国 内 で 発 生 が 確 認 さ れ た B は ，急 速 に 分 布 域 を 拡 大 し て 九 州 地 域 で も 発 生 し ，JpL と は 異 な り 果 菜 類 や 花 き 類 な ど を 加 害 し た（ 大 戸 ， 1990； 松 井 ， 1993， 1995）。 果 菜 類 に お け る B の 被 害 は ， 吸 汁 に よ る 寄 主 植 物 の 草 勢 低 下 や す す 病 ，ま た は カ ボ チ ャ 白 化 症（ Yokomi et

al.， 1990） や ト マ ト の 着 色 異 常 果 （ Schuster et al.， 1990； 松 井 ， 1992） と い っ た 着 色 異 常 症 の 発 生 お よ び Begomovirus 属 を 主 と す る 各 種 植 物 病 原 性 ウ イ ル ス を 媒 介 （ Brown and Bird， 1992； Brown， 2000）

す る こ と で あ る 。さ ら に ，2004 年 に 熊 本 お よ び 鹿 児 島 県 に お い て ，国 内 で 未 記 録 で あ っ た Q が 確 認 さ れ た （ Ueda and Brown， 2006）。 Q は ， イ ベ リ ア 半 島 原 産 で あ り （ Guirao et al.， 1997）， ス ペ イ ン ， イ タ リ ア ， イ ス ラ エ ル （ Brown et al.， 2000； Palumbo et al.， 2001； Nauen

et al.， 2002； Horowitz et al.， 2003）， 中 国 （ Zhang et al.， 2005） お よ び 韓 国 （ Lee et al.， 2005） に 分 布 し て い る 。 Q は B に 比 べ て 寄 主 範 囲 が 同 等 か そ れ 以 上 に 広 く（ 飯 田 ら ，2009；Iida et al.，2009）， さ ら に 海 外 で は ネ オ ニ コ チ ノ イ ド 剤 や ピ リ プ ロ キ シ フ ェ ン に 対 し て 抵 抗 性 が 発 達 し た 個 体 群 が 報 告 さ れ る な ど（ Nauen et al.，2002；Horowitz et al.，2003），低 い 薬 剤 感 受 性 が 特 徴 で あ っ た 。こ の よ う に タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， バ イ オ タ イ プ に よ り 生 物 的 特 徴 が 異 な る た め ， 本 害 虫 の 防 除 に お い て そ の 特 徴 を 把 握 す る こ と は 重 要 で あ る 。

3

2 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ が 媒 介 す る ウ イ ル ス

タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 被 害 は ，1）吸 汁 に よ る 寄 主 植 物 の 草 勢 低 下 や す す 病 の 発 生 ，2）着 色 異 常 症 の 発 生 ，3）Tomato yellow leaf curl virus

（ TYLCV）な ど の 病 原 ウ イ ル ス を 媒 介 す る こ と で あ る（ Oliveira et al., 2001； Perring, 2001； 本 多 ，2008a）。ま た ，そ の 被 害 は ，直 接 的 な 吸 汁 害 よ り も 病 原 ウ イ ル ス を 媒 介 す る こ と に よ る 間 接 的 な 被 害 が 大 き く な り や す い （ 本 多 ， 2008a）。 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ，Begomovirus 属 や Crinivirus 属 な ど の 病 原 ウ イ ル ス を 媒 介 し ，感 染 植 物 に 被 害 を 与 え る 。

西 南 暖 地 の 中 山 間 地 域 の ト マ ト 栽 培 に お い て は ，Tabacco leaf curl Japan virus（ TbLCJV）な ど 土 着 ベ ゴ モ ウ イ ル ス に よ る 病 害 発 生 が 低 頻

度 な が ら 継 続 し て い る （ 大 貫 ら ， 2009）。 ま た ， 国 内 未 記 録 で あ っ た Crinivirus 属 で あ る Tomato chlorosis virus（ ToCV） に よ る ト マ ト 黄

化 病 は ， 栃 木 県 で 初 確 認 さ れ た 後 （ Hirota et al., 2010 ）， 九 州 地 域 の 福 岡 ， 熊 本 ， 大 分 お よ び 鹿 児 島 の 各 県 で も 2011 年 以 降 に 発 生 が 認

め ら れ 病 害 虫 発 生 予 察 特 殊 報 が 発 表 さ れ て い る 。 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ が 媒 介 す る ウ イ ル ス は ， こ こ に 示 し た 以 外 に も 多 数 存 在 す る が ， 九 州 地 域 で 特 に 問 題 と な っ て い る 病 原 ウ イ ル ス は ，Begomovirus 属 で あ る TYLCV と Crinivirus 属 で あ る Cucurbit chlorotic yellows virus

（ CCYV）の 2 種 で あ る（ 樋 口 ，2014）。以 下 に ，そ れ ぞ れ の ウ イ ル ス に つ い て 紹 介 す る 。

（ 1）Tomato yellow leaf curl virus （ TYLCV）

ト マ ト 黄 化 葉 巻 病 の 病 原 ウ イ ル ス で あ る TYLCV は ，Geminiviridae （ ジ ェ ミ ニ ウ イ ル ス ） 科 Begomovirus（ ベ ゴ モ ウ イ ル ス ） 属 で あ り ，

4 が 同 様 に 媒 介 す る と さ れ て い る（ 北 村 ら ，2009）。ト マ ト 黄 化 葉 巻 病 の 病 徴 は ， 新 葉 の 葉 縁 や 葉 脈 間 が 黄 化 お よ び 葉 巻 と と も に 縮 葉 し ， 発 病 部 位 よ り 上 の 節 間 が 短 縮 す る （ 図 Ⅰ (B)）。 本 病 は 保 毒 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ が 低 密 度 で も 発 生 す る 可 能 性 が あ る こ と ， 著 し く 生 育 を 抑 制 し て 収 量 を 大 幅 に 減 収 さ せ る こ と 等 に よ り ， ト マ ト 生 産 に お い て 最 も 大 き な 問 題 と な っ て い る （ 大 貫 ， 2000； 本 多 ，2008b）。我 が 国 で は 1996 年 に 静 岡 県 ，愛 知 県 お よ び 長 崎 県 の ト マ ト で 初 確 認 さ れ（ Kato et al.， 1998；加 藤 ，1999），そ の 後 西 日 本 を 中 心 に 発 生 が 拡 大 し た（ 本 多 ，2010）。 九 州 地 域 で の 発 生 は ，長 崎 県 で 確 認 さ れ て 以 降 ，2003 年 に 大 分 県 で 確 認 さ れ る ま で の 8 年 間 で 全 7 県 に 認 め ら れ て い る 。日 本 に 発 生 し て い る TYLCV は 塩 基 配 列 の 相 同 性 か ら 遺 伝 的 に イ ス ラ エ ル 株 に 近 縁 な 株 （ イ ス ラ エ ル 系 統 ） と マ イ ル ド 株 に 近 縁 な 株 （ マ イ ル ド 系 統 ） の 2 系 統 に 分 け ら れ る が（ 上 田 ，2008），九 州 地 域 に 発 生 し た TYLCV は イ ス ラ エ ル 系 統 の み で あ っ た （ 本 多 ， 2005）。 し か し ， 2011 年 に 熊 本 県 で マ イ ル ド 系 統 の 発 生 が 確 認 さ れ ， 病 害 虫 発 生 予 察 特 殊 報 が 発 表 さ れ て い る 。 マ イ ル ド 系 統 に つ い て は ， 熊 本 県 内 で の 分 布 域 は 不 明 で あ り ， 現 在 の と こ ろ 熊 本 県 以 外 の 九 州 地 域 で の 発 生 は 認 め ら れ て い な い 。

（ 2）Cucurbit chlorotic yellows virus （ CCYV）

Closteroviridae（ ク ロ ス テ ロ ウ イ ル ス ） 科 Crinivirus（ ク リ ニ ウ イ ル ス ）属 で あ る CCYV は ，メ ロ ン 退 緑 黄 化 病 な ど の 病 原 ウ イ ル ス で あ る 。 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ が 媒 介 す る CCYV に よ る ウ リ 類 の 退 緑 黄 化 病 は ， 佐 賀 県 ，熊 本 県 お よ び 宮 崎 県 に お い て 2004 年 に 発 生 が 確 認 さ れ た 新 規 病 害 で あ る（ 行 徳 ，2008；行 徳 ら ，2009）。メ ロ ン 退 緑 黄 化 病 お よ び キ ュ ウ リ 退 緑 黄 化 病 の 発 生 は ，初 め 局 地 的 で あ っ た が ，2005 年 に 長 崎 県 ，

5

2006 年 に 大 分 県 ，2007 年 に 福 岡 県 ，鹿 児 島 県 と 拡 大 し ，九 州 全 県 で 確 認 さ れ て い る（ 行 徳 ，2008）。ま た ，海 外 で も 2010 年 に 台 湾 ，2011 年 に 中 国 お よ び ス ー ダ ン の ウ リ 科 作 物 で CCYV の 発 生 が 報 告 さ れ て い る

（ Huang et al.， 2010； Gu et al.， 2011； Hamed et al.， 2011）。 CCYV は ウ リ 科 ， ナ ス 科 ， ア カ ザ 科 お よ び キ ク 科 の 植 物 に 感 染 が 認 め ら れ る が （ Okuda et al.， 2010）， 本 ウ イ ル ス の 自 然 感 染 は メ ロ ン ， キ ュ ウ リ お よ び ス イ カ の み が 報 告 さ れ て い る 。こ れ ら 3 作 物 の CCYV に よ る 被 害 を み る と ，メ ロ ン 退 緑 黄 化 病 の 発 病 株（ 図 Ⅰ (C)）は ，葉 が 黄 化 す る こ と に よ る 草 勢 の 低 下 ，さ ら に は 果 実 重 量 お よ び 糖 度 が 低 下 す る（ 行 徳 ， 2008）。キ ュ ウ リ 退 緑 黄 化 病 の 発 病 株 は ，葉 が 黄 化 す る と と も に 粗 剛 化 し ， 生 育 不 良 と な り 収 量 が 低 下 す る 。 定 植 1 か 月 以 内 に CCYV の 発 病 が 認 め ら れ た キ ュ ウ リ 株 で は 30% 程 度 減 収 し た 事 例 も あ る （ 宇 賀 ， 2010）。ス イ カ 退 緑 え そ 病 の 発 病 株 は ，葉 全 体 が 黄 化 し ，葉 縁 や 葉 脈 間 に 壊 疽 を 生 じ ， 果 実 糖 度 に は 影 響 し な い も の の ， 果 実 重 量 が 低 下 す る （ 熊 本 県 農 業 研 究 セ ン タ ー ,2011）。

6 図 Ⅰ タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ と 媒 介 す る ウ イ ル ス 病 (A)： タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 成 虫 (B)： ト マ ト 黄 化 葉 巻 病 (C)： メ ロ ン 退 緑 黄 化 病

(A)

(B)

(C)

7 3 本 研 究 の 目 的 九 州 地 域 の 果 菜 類 で 問 題 と な る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， バ イ オ タ イ プ に よ り 生 物 的 特 徴 が 異 な る た め ， 本 害 虫 の 防 除 に お い て そ の 特 徴 を 把 握 す る 必 要 が あ る 。 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 生 態 に 関 す る 基 礎 的 な 知 見 を 得 る た め に ，熊 本 県 に 発 生 し て い る バ イ オ タ イ プ を 把 握 す る と と も に ， 野 外 越 冬 の 可 能 性 を 調 査 し た 。 な お 本 研 究 で は ， 近 年 我 が 国 で 発 生 が 確 認 さ れ ，そ の 後 ，急 速 に 分 布 域 を 拡 大 し て い る Q を 主 な 対 象 と し た 。 昆 虫 媒 介 性 ウ イ ル ス 病 の 防 除 に お い て は ， ウ イ ル ス 媒 介 昆 虫 と ウ イ ル ス 源 ， 栽 培 植 物 の 間 の 伝 染 環 を い か に 断 ち 切 る か が 重 要 で あ る （ 本 多 ， 2005）。 そ の た め に ， ト マ ト 黄 化 葉 巻 病 や ウ リ 類 退 緑 黄 化 病 の 防 除 対 策 は ，「 ウ イ ル ス を 保 毒 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ が 栽 培 す る ハ ウ ス 内 へ 侵 入 す る こ と を 防 止 す る 対 策 」，「 ハ ウ ス 内 で の 増 殖 を 防 止 す る 対 策 」 お よ び 「 ハ ウ ス 内 か ら の 移 出 を 防 止 す る 対 策 」 に 分 け る こ と が で き る （ 表 Ⅰ ）。本 研 究 で は ，そ れ ら 防 除 対 策 の な か で「 増 殖 防 止 対 策 」に つ い て 検 討 し て い る 。す な わ ち ，新 た な 薬 剤 感 受 性 検 定 法 の 開 発 を 行 い ， そ の 開 発 し た 検 定 法 に よ る 感 受 性 の 把 握 ， TYLCV を 保 毒 し た Q に 対 す る 散 布 薬 剤 の 感 染 抑 制 効 果 ，CCYV を 保 毒 し た Q に 対 す る 粒 剤 の 被 害 抑 制 効 果 と 処 理 時 期 に つ い て 検 討 し た 。 本 研 究 で は ， 九 州 地 域 に お け る ト マ ト や メ ロ ン な ど 果 菜 類 の 安 定 生 産 に 寄 与 す る た め ， タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 生 態 解 明 や 「 増 殖 防 止 対 策 」 に 関 す る 防 除 技 術 の 確 立 を 行 い ， 本 種 が 媒 介 す る ウ イ ル ス 病 の 被 害 を 最 小 限 に 抑 制 す る こ と を 目 指 し た 。

8 表 Ⅰ 施 設 栽 培 で 発 生 す る 昆 虫 媒 介 性 ウ イ ル ス 病 に 対 す る 主 な 防 除 対 策 防除対策の分類 個別の防除技術 ハウス開口部への防虫ネット展張 ハウス周辺の感染源（野良生えトマトなど）の除去 侵入防止対策 ハウス周辺の除草 近紫外線除去フィルムの展張 光反射シートの設置 薬剤防除 ハウス内の感染株の抜き取り 増殖防止対策 ハウス内の除草 粘着板の設置 ウイルス病耐病性品種の利用 栽培終了時の施設密閉処理 施設開口部への防虫ネット展張 移出防止対策

9

第 Ⅱ 章 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 生 態 解 明

第 1 節 熊 本 県 に 発 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ 1 緒 言 Q は 低 い 薬 剤 感 受 性 が 特 徴 で あ り ， 海 外 で は ピ リ プ ロ キ シ フ ェ ン や ネ オ ニ コ チ ノ イ ド 剤 に 対 す る 感 受 性 低 下 が 報 告 さ れ て い る (Nauen et al.， 2002； Horowitz et al.， 2003)。 国 内 で も Q の 低 い 感 受 性 が 確 認 さ れ ， 現 状 で は 有 効 な 薬 剤 は 少 な い (松 浦 ， 2006； 樋 口 ， 2006； 小 林 ， 2007)。 ま た ， Q は B と 薬 剤 感 受 性 が 異 な り ， B に 比 べ て 感 受 性 が 低 い 傾 向 で あ る (Horowitzetal.，2003；松 浦 ，2006；小 林 ，2007)。こ の よ う に ， タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ で は バ イ オ タ イ プ に よ り 薬 剤 感 受 性 が 異 な る こ と が 予 想 さ れ る た め ， 防 除 を 行 う 場 合 は ， 地 域 あ る い は 圃 場 で 発 生 し て い る バ イ オ タ イ プ を 把 握 し ， 防 除 薬 剤 を 選 択 す る 必 要 が あ る 。 そ こ で ， 熊 本 県 内 の 栽 培 作 物 お よ び 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 か ら 採 集 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ を 識 別 し ， 県 内 に お け る バ イ オ タ イ プ の 分 布 と 季 節 的 変 動 を 調 査 し た 。

10 2 材 料 お よ び 方 法 2-1 栽 培 作 物 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 2004 年 11 月 ～ 2007 年 2 月 に ， 熊 本 県 内 の 施 設 作 物 に 寄 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 採 集 し た 。ま た ，2006 年 6 月 ～ 10 月 に ，県 内 の 露 地 作 物 に 寄 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 採 集 し た 。 採 集 日 ， 採 集 地 点 お よ び 採 集 作 物 は ，施 設 作 物 を 図 Ⅱ -1-1 と 表 Ⅱ -1-1 に ，露 地 作 物 を 図 Ⅱ -1-2 と 表 Ⅱ -1-2 に 示 し た 。タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は 成 虫 を 吸 虫 管 で 採 集 し ， 2006 年 以 降 は 採 集 虫 を そ の ま ま -20℃ で 冷 凍 保 存 し た 。 2005 年 以 前 は ， 採 集 虫 を そ の ま ま 冷 凍 保 存 す る か ， キ ャ ベ ツ (品 種 ： 秋 徳 )を 用 い て 25℃ ， 16L8D（ 明 期 ： 暗 期 =16h： 8h） 条 件 下 で 1～ 10 か 月 間 累 代 飼 育 し た 後 に ， 成 虫 を 冷 凍 保 存 し た 。 2-2 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 (1)2005 年 の 調 査 熊 本 市 ，玉 名 市 お よ び 八 代 市 に 各 1 地 点 の 計 3 地 点 を 調 査 地 点 と し ， 4～ 6 葉 期 の ト マ ト 苗 (品 種：ハ ウ ス 桃 太 郎 )12 株 を 各 調 査 実 施 月 の 上 旬 に 設 置 し た 。 調 査 期 間 は ， 熊 本 市 と 玉 名 市 が 4～ 11 月 ， 八 代 市 が 7～ 11 月 と し た 。タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ，設 置 7 日 後 の ト マ ト 苗 に 寄 生 し て い る 成 虫 を 30 頭 上 限 に 吸 虫 管 で 採 集 し ，－ 20℃ で 冷 凍 保 存 し た 。な お ， 設 置 地 点 は い ず れ も 施 設 栽 培 地 域 で あ り ， 周 囲 に ト マ ト ， ナ ス お よ び メ ロ ン が 栽 培 さ れ て い た 。 (2)2006 年 の 調 査 熊 本 県 農 業 研 究 セ ン タ ー (合 志 市 )内 の 環 境 条 件 が 異 な る 3 地 点 に ，4 ～ 6 葉 期 の ト マ ト 苗 (品 種：ハ ウ ス 桃 太 郎 )5 株 を そ れ ぞ れ 設 置 し た 。す

11 な わ ち ， 周 囲 が 施 設 栽 培 圃 場 の 地 点 (地 点 A)， 雑 木 林 の 地 点 (地 点 B) お よ び 牧 草 地 の 地 点 (地 点 C)で あ り ，地 点 間 は 300m 以 上 離 れ て い た（ 図 Ⅱ -1-3）。 ト マ ト 苗 は 5 月 18 日 か ら 11 月 21 日 ま で 設 置 し ， ト マ ト 苗 上 で 新 成 虫 が 羽 化 し な い よ う に 14 日 を 目 安 に 苗 を 交 換 し た 。タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， 13～ 23 日 間 隔 で 30 頭 を 上 限 と し て 吸 虫 管 で 成 虫 を 採 集 し ， 冷 凍 保 存 し た 。 2-3 バ イ オ タ イ プ の 識 別 方 法 冷 凍 保 存 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 成 虫 を サ ン プ ル と し ， バ イ オ タ イ プ を 識 別 し た 。B，Q の バ イ オ タ イ プ 識 別 は ，三 浦 (2007)の Multiplex PCR 法 を 用 い た 。 た だ し ， 2004～ 2005 年 に 施 設 作 物 か ら 採 集 し た 個 体 群 の バ イ オ タ イ プ は ， 上 田 (2006)の PCR-RFLP 法 で 識 別 し た 。 B， Q い ず れ と も 識 別 で き な か っ た 個 体 に つ い て は ，JpL の ミ ト コ ン ド リ ア DNA の チ ト ク ロ ー ム オ キ シ ダ ー ゼ Ⅰ （ mtCO I） 領 域 に 特 異 的 に 反 応 す る プ ラ イ マ ー を 用 い て PCR 反 応 を 行 い ， 予 測 さ れ る 増 幅 断 片 が 得 ら れ た も の は JpL と 識 別 し た (上 田 ， 未 発 表 )。 な お ， そ の PCR 産 物 の 一 部 に つ い て は 塩 基 配 列 解 析 を 行 い ，既 知 の JpL の mtCO I 塩 基 配 列 と 照 合 し た 。

12

図 Ⅱ -1-1 熊 本 県 の 施 設 作 物 に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 採 集 地 点 図 中 の 数 字 は 表 Ⅰ -1-1 の No を 示 す ．

13

図 Ⅱ -1-2 熊 本 県 の 露 地 作 物 に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 採 集 地 点 図 中 の 数 字 は 表 Ⅰ -1-2 の No を 示 す ．

14 図 Ⅱ -1-3 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 の 状 況 （ 2006） （ A)： 周 囲 が 施 設 栽 培 圃 場 の 地 点 （ 上 図 ） （ B）： 周 囲 が 雑 木 林 の 地 点 （ 中 図 ） （ C）： 周 囲 が 牧 草 地 の 地 点 （ 下 図 ） 図 中 の 矢 印 は ト マ ト 苗 を 示 す ．

(C)

(A)

(B)

15 3 結 果 3-1 栽 培 作 物 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 (1)施 設 作 物 か ら の 採 集 施 設 作 物 か ら 採 集 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ 識 別 結 果 を 表 Ⅱ -1-1 に 示 し た 。 2004 年 で は ， 1 市 1 作 物 1 地 点 か ら 22 頭 を 採 集 し て バ イ オ タ イ プ を 識 別 し た 。2005 年 で は ，5 市 3 町 の 5 作 物 12 地 点 か ら 151 頭 を 供 試 し た 。 2006 年 で は ， 10 市 3 町 1 村 の 7 作 物 24 地 点 か ら 564 頭 を 供 試 し た 。2007 年 で は ，2 市 1 町 の 2 作 物 4 地 点 か ら 67 頭 を 供 試 し た 。こ れ ら の 2004～ 2007 年 に 採 集 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， B や JpL は 認 め ら れ ず ，Q の み が 確 認 さ れ た 。ま た ，採 集 時 期 に よ る バ イ オ タ イ プ の 違 い は 認 め ら れ な か っ た 。 (2)露 地 作 物 か ら の 採 集 露 地 作 物 か ら 採 集 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ 識 別 結 果 を 表 Ⅱ -1-2 に 示 し た 。2006 年 に ，9 市 5 町 1 村 の 8 作 物 29 地 点 か ら 394 頭 を 採 集 し て バ イ オ タ イ プ を 識 別 し た 。識 別 結 果 は ，Q が 372 頭 ，JpL が 21 頭 お よ び 不 明 が 1 頭 で あ り ，B の み 確 認 さ れ な か っ た 。な お ，不 明 と し た 1 頭 に つ い て は mtCO I 領 域 の 塩 基 配 列 を 解 析 し た が ，種 を 特 定 す る こ と が で き な か っ た 。 採 集 日 は 6～ 10 月 で あ っ た が ， ど の 時 期 に 採 集 し た 個 体 群 も Q の 割 合 が 高 か っ た 。 JpL を 確 認 し た 山 鹿 市 と 山 江 村 の 2 地 点 は ， 山 間 部 の 露 地 ナ ス 圃 場 で あ り ， 周 囲 に 雑 木 林 や 雑 草 が 多 か っ た 。

16 バイオタイプ Q B JpL 1 メロン 2004/11/15 合志市 22 22 0 0 0 2 トマト 2005/5/31 八代市 22 22 0 0 0 3 2005/6/9 熊本市 24 24 0 0 0 4 2005/10/12 合志市 8 8 0 0 0 5 2005/11/15 山都町 8 8 0 0 0 6 2005/11/15 山都町 5 5 0 0 0 7 ミニトマト 2005/5/13 天草市 10 10 0 0 0 8 2005/7/1 玉名市 23 23 0 0 0 9 ナス 2005/12/15 熊本市 12 12 0 0 0 10 メロン 2005/6/9 熊本市 10 10 0 0 0 11 2005/10/4 植木町 12 12 0 0 0 12 2005/10/13 熊本市 5 5 0 0 0 13 スイカ 2005/12/27 益城町 12 12 0 0 0 14 トマト 2006/5/9 合志市 25 25 0 0 0 15 2006/5/26 八代市 29 29 0 0 0 16 2006/5/26 八代市 24 24 0 0 0 17 2006/9/15 阿蘇市 11 11 0 0 0 18 2006/10/6 合志市 26 26 0 0 0 19 ミニトマト 2006/6/15 玉名市 26 26 0 0 0 20 2006/6/26 山鹿市 30 30 0 0 0 21 ナス 2006/6/20 熊本市 28 28 0 0 0 22 2006/10/27 人吉市 19 19 0 0 0 23 メロン 2006/5/26 八代市 27 27 0 0 0 24 2006/6/26 植木町 12 12 0 0 0 25 2006/7/13 山江村 24 24 0 0 0 26 2006/9/7 宇城市 18 18 0 0 0 27 2006/10/26 植木町 28 28 0 0 0 28 2006/10/27 人吉市 18 18 0 0 0 29 2006/12/13 熊本市 27 27 0 0 0 30 キュウリ 2006/6/29 上天草市 12 12 0 0 0 31 2006/7/13 あさぎり町 28 28 0 0 0 32 2006/9/8 玉名市 9 9 0 0 0 33 2006/9/15 阿蘇市 28 28 0 0 0 34 2006/10/26 植木町 29 29 0 0 0 35 2006/10/27 あさぎり町 30 30 0 0 0 36 スイカ 2006/6/7 益城町 26 26 0 0 0 37 トルコギキョウ 2006/6/29 天草市 30 30 0 0 0 38 トマト 2007/2/15 玉名市 11 11 0 0 0 39 2007/2/20 八代市 15 15 0 0 0 40 2007/2/20 八代市 30 30 0 0 0 41 ナス 2007/2/15 植木町 11 11 0 0 0 合計 804 804 0 0 0 不明 供試 虫数 No 採集作物 採集日 採集地点 a) a) a) a) a) a) a) 表 Ⅱ -1-1 熊 本 県 の 施 設 作 物 で 発 生 す る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ a)累 代 虫 識 別：採 集 後 ，1～ 10 か 月 累 代 飼 育 し た 後 の 成 虫 を 識 別 し た ．

17 バイオタイプ Q B JpL 1 トマト 2006/9/7 八代市 8 8 0 0 0 2 2006/9/7 八代市 10 10 0 0 0 3 2006/9/7 宇城市 16 16 0 0 0 4 ナス 2006/6/26 山鹿市 19 0 0 19 0 5 2006/7/13 山江村 1 0 0 1 0 6 2006/9/8 合志市 28 28 0 0 0 7 2006/9/8 植木町 22 22 0 0 0 8 2006/9/15 大津町 3 3 0 0 0 9 2006/10/26 山鹿市 30 30 0 0 0 10 2006/10/27 錦町 15 15 0 0 0 11 カボチャ 2006/6/7 益城町 24 23 0 0 1 12 2006/6/15 玉名市 28 28 0 0 0 13 2006/6/15 玉東町 4 4 0 0 0 14 2006/6/20 熊本市 26 26 0 0 0 15 2006/6/26 山鹿市 2 2 0 0 0 16 2006/6/26 宇城市 3 2 0 1 0 17 2006/6/27 合志市 6 6 0 0 0 18 2006/6/29 宇城市 28 28 0 0 0 19 2006/6/29 天草市 13 13 0 0 0 20 2006/7/6 合志市 29 29 0 0 0 21 2006/7/13 人吉市 1 1 0 0 0 22 2006/9/7 宇城市 3 3 0 0 0 23 2006/9/8 玉名市 19 19 0 0 0 24 キュウリ 2006/9/15 阿蘇市 1 1 0 0 0 25 2006/10/27 人吉市 4 4 0 0 0 26 ゴボウ 2006/6/20 熊本市 14 14 0 0 0 27 タバコ 2006/6/7 益城町 27 27 0 0 0 28 オクラ 2006/9/8 玉名市 5 5 0 0 0 29 サツマイモ 2006/9/14 熊本市 5 5 0 0 0 合計 394 372 0 21 1 不明 供試 虫数 No 採集作物 採集日 採集地点 a) b) b) c) 表 Ⅱ -1-2 熊 本 県 の 露 地 作 物 で 発 生 す る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ ａ ） 2 頭 に つ い て は mtCOⅠ 領 域 の 塩 基 配 列 解 析 で 識 別 し た ． ｂ ） mtCOⅠ 領 域 の 塩 基 配 列 解 析 で 識 別 し た ． ｃ ） mtCOⅠ 領 域 の 塩 基 配 列 解 析 で 識 別 で き な か っ た ．

18 3-2 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 か ら の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 採 集 (1)2005 年 の 調 査 2005 年 の バ イ オ タ イ プ 識 別 結 果 を 図 Ⅱ -1-4 に 示 し た 。熊 本 市 に 設 置 し た ト マ ト 苗 で 5～ 11 月 に 採 集 し た 178 頭 で は ， 10 月 の 採 集 個 体 で B が 2 頭 確 認 さ れ た が ， 他 は 全 て Q で あ っ た 。 玉 名 市 に 設 置 し た ト マ ト 苗 で は ， 5～ 11 月 に 182 頭 を 採 集 し た 。 識 別 結 果 は ， 10 月 の 採 集 個 体 で B が 1 頭 ，6 月 と 10 月 の 採 集 個 体 で JpL が 1 頭 ず つ 確 認 さ れ ，他 は 全 て Q で あ っ た 。 八 代 市 に 設 置 し た ト マ ト 苗 で 7～ 11 月 に 108 頭 を 採 集 し た が ， 全 て Q で あ っ た 。 ト マ ト 苗 を 設 置 し た 3 地 点 で ， 5～ 11 月 に タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 採 集 し た が ， 採 集 時 期 に 関 係 な く Q の 割 合 が 高 か っ た 。 ま た ， B は 2 地 点 ， JpL は 1 地 点 で 確 認 さ れ た が ， B， JpL と も 個 体 数 は 少 な か っ た 。 (2)2006 年 の 調 査 2006 年 の バ イ オ タ イ プ 識 別 結 果 を 図 Ⅱ -1-5 に 示 し た 。6 月 1 日 ～ 11 月 21 日 に ， ト マ ト 苗 に 寄 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 11 回 採 集 し た 。 地 点 A で 採 集 し た 90 頭 で は ， 8 月 10 日 の 採 集 個 体 で JpL が 1 頭 確 認 さ れ た が ，残 り は 全 て Q で あ っ た 。地 点 B で 採 集 し た 113 頭 で は ， JpL が 19 頭 (採 集 日 ・ JpL 頭 数 :6 月 14 日 ・ 2 頭 ， 8 月 10 日 ・ 1 頭 ， 8 月 23 日 ・ 4 頭 ， 9 月 8 日 ・ 6 頭 ， 9 月 22 日 ・ 1 頭 ， 10 月 11 日 ・ 3 頭 ， 10 月 29 日 ・ 2 頭 )確 認 さ れ た が ， 残 り は 全 て Q で あ っ た 。 地 点 C で 採 集 し た 42 頭 で は ， 6 月 14 日 の 採 集 個 体 で JpL が 1 頭 確 認 さ れ た が ， 残 り は 全 て Q で あ っ た 。 ト マ ト 苗 を 設 置 し た 3 地 点 で 6～ 11 月 に タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 採 集 し た が ，採 集 時 期 に 関 係 な く Q の 割 合 が 高 か っ た 。 ま た ， JpL が 3 地 点 で 確 認 さ れ た が ， B は 確 認 さ れ な か っ た 。 地 点 A，

19

B，C で の JpL の 識 別 割 合 は ，1.1％ ，16.8％ お よ び 2.4％ で あ り ，周 辺 に 雑 草 が 多 い 地 点 B で 高 か っ た 。

20

図 Ⅱ -1-4 野 外 の ト マ ト 苗 に 寄 生 す る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ

プ の 季 節 的 変 動 （ 2005）

21 図 Ⅱ -1-5 野 外 の ト マ ト 苗 に 寄 生 す る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ の 季 節 的 変 動 （ 2006） （ A)： 周 囲 が 施 設 栽 培 圃 場 の 地 点 ，（ B）： 周 囲 が 雑 木 林 の 地 点 ， （ C）： 周 囲 が 牧 草 地 の 地 点 ． JpL と 識 別 し た PCR 産 物 は ，調 査 日 ご と に 2 サ ン プ ル を 上 限 に mtCOⅠ 領 域 の 塩 基 配 列 解 析 で 確 認 し た ．

22 4 考 察 2004～ 2007 年 の 異 な る 時 期 に 熊 本 県 内 の 施 設 栽 培 7 作 物 の 41 地 点 か ら タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 採 集 し ， バ イ オ タ イ プ を 調 査 し た が ， 供 試 し た 個 体 全 て が Q で あ っ た 。ま た ，露 地 栽 培 8 作 物 の 29 地 点 か ら タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 採 集 し ， バ イ オ タ イ プ を 調 査 し た 。 そ の 結 果 ， 供 試 し た 個 体 群 の ほ と ん ど は Q で あ り ， わ ず か に JpL が 確 認 さ れ た が ， B の 発 生 は 確 認 さ れ な か っ た 。 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 に 寄 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ を 定 期 的 に 採 集 し ，バ イ オ タ イ プ を 調 査 し た が ，B や JpL は わ ず か で あ り ， ほ と ん ど が Q で あ っ た 。 こ れ ら の 結 果 か ら ， 熊 本 県 内 の 栽 培 作 物 に 発 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， 発 生 時 期 ， 地 域 お よ び 寄 主 作 物 に 関 係 な く ， 施 設 作 物 で は Q で あ り ， 露 地 作 物 で は Q が 優 占 し て い る と 考 え ら れ た 。松 浦 (2006)は ，宮 崎 県 内 の 14 市 町 で 採 集 し た タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の バ イ オ タ イ プ を 調 査 し ， Q が 県 全 域 に 分 布 し て い る と 示 唆 し た 。 本 研 究 の 調 査 結 果 と 同 様 な 傾 向 で あ り ， 九 州 地 域 で は Q が 広 く 分 布 し て い る と 推 察 さ れ る 。 本 研 究 で の B の 確 認 は ，2005 年 の 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 で 採 集 し た 3 頭 の み で あ り ， 施 設 作 物 お よ び 露 地 作 物 か ら の 採 集 で は 確 認 さ れ な か っ た 。 カ ボ チ ャ で は ， B の 幼 虫 寄 生 に よ る 白 化 症 の 発 現 が 知 ら れ て い る (松 井 ， 1995)。 ま た ， Q 寄 生 に よ る カ ボ チ ャ 白 化 症 の 発 現 能 力 は 非 常 に 低 く ， B と は 明 ら か に 異 な る (樋 口 ， 2006)。 本 研 究 で 採 集 に 用 い た 露 地 作 物 で は ，カ ボ チ ャ 13 圃 場 が 含 ま れ て い る が ，白 化 症 は 認 め ら れ な か っ た 。 こ の こ と は ， 露 地 作 物 で B の 発 生 が 少 な い こ と を 示 唆 し て お り ， 本 研 究 の 調 査 結 果 と 一 致 す る 。 小 林 (2007)は ， Q の 分 布 域 に つ い て 苗 の 移 動 に よ る 拡 大 を 指 摘 し て い る が ， 他 要 因 の 一 つ と し て 薬 剤 淘 汰 が 考 え ら れ る 。 Q は ， 一 部 の ネ

23 オ ニ コ チ ノ イ ド 剤 お よ び 合 成 ピ レ ス ロ イ ド 剤 等 の 感 受 性 が 低 く ， B と 比 べ て も 感 受 性 が 低 い 傾 向 が 報 告 さ れ て い る (Horowitz et al.，2003； 松 浦 ， 2006； 樋 口 ， 2006； 小 林 ， 2007)。 Horowitz et al. (2005)は ， Q と B の 混 在 し た 個 体 群 の 室 内 飼 育 に お い て ， 無 淘 汰 で 6 世 代 経 過 す る と B が 残 存 し ， ピ リ プ ロ キ シ フ ェ ン に 対 す る 感 受 性 は 高 く な る が ， 同 一 個 体 群 を ア セ タ ミ プ リ ド や チ ア メ ト キ サ ム で 淘 汰 す る と ，21 世 代 後 で は Q が 残 存 し ， ピ リ プ ロ キ シ フ ェ ン に 対 す る 感 受 性 は 低 い ま ま で あ る と 報 告 し て い る 。 熊 本 県 に お い て も 栽 培 作 物 で の 薬 剤 防 除 に よ り 感 受 性 の 低 い Q が 残 存 し ， 発 生 し て い る バ イ オ タ イ プ の 中 で Q の 割 合 が 高 く な っ て い っ た 可 能 性 が 考 え ら れ る 。 さ ら に ， B の 発 生 が 少 な か っ た 要 因 と し て ，B が 野 外 越 冬 で き な い た め (大 泰 司 ・岡 田 ，1996)，B の 越 冬 場 所 と な る 施 設 栽 培 圃 場 で の 冬 期 の 薬 剤 防 除 が 大 き く 影 響 し て い る こ と が 考 え ら れ る 。 露 地 作 物 か ら の 採 集 で は ， 3 地 点 で JpL が 確 認 さ れ た 。 そ の 一 つ で あ る 2006 年 6 月 26 日 に 山 鹿 市 の 露 地 ナ ス で 採 集 し た 個 体 群 は ，19 頭 全 て が JpL で あ っ た が ， 圃 場 で は 幼 虫 が 認 め ら れ な か っ た 。 し か し ， 2006 年 10 月 26 日 に 同 一 圃 場 で 再 度 採 集 し た と こ ろ ， 30 頭 全 て が Q で あ り ， 多 く の 幼 虫 が 確 認 さ れ た 。 山 間 部 の 露 地 ナ ス 圃 場 で あ る た め 周 辺 に 雑 木 林 や 雑 草 が 多 く ， 雑 草 等 に 生 息 し て い た JpL が 一 時 的 に 露 地 ナ ス へ 飛 来 し た と 考 え ら れ る 。こ れ と 同 様 な こ と が ，2006 年 の 野 外 に 設 置 し た ト マ ト 苗 か ら の 採 集 虫 の 識 別 結 果 か ら も 推 察 さ れ る 。 す な わ ち ， 地 点 A， B， C で は ， 周 辺 に 雑 草 が 多 い 地 点 B で JpL の 識 別 割 合 が 高 い 。 大 泰 司 ・ 岡 田 (1996)は ， B と JpL で は 好 適 な 寄 主 植 物 が 異 な り ， ス イ カ ズ ラ や セ イ タ カ ア ワ ダ チ ソ ウ 等 を JpL の 好 適 植 物 と し て 報 告 し て い る 。 雑 草 等 で 生 息 し て い る JpL は ， 周 辺 の 栽 培 作 物 に 飛 来 し

24

て い る が ， 定 着 は し に く い と 考 え ら れ る 。 そ の 理 由 と し て ， 作 物 に は JpL の 好 適 な 寄 主 が 少 な い こ と ，JpL の 薬 剤 感 受 性 が 高 い こ と 等 が 考 え ら れ る 。

25 第 2 節 熊 本 県 で の タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 野 外 越 冬 の 可 能 性 1 緒 言 熊 本 県 に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 発 生 は ，1990 年 に B，2004 年 に Q が 初 確 認 さ れ て い る （ 行 徳 ら ， 2008）。 Q の 侵 入 以 降 ， 本 県 の 農 作 物 に 発 生 し て い る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， 発 生 時 期 ， 地 域 お よ び 寄 主 作 物 に 関 係 な く Q が 優 占 し て い る と 考 え ら れ る（ 樋 口 ら ，2007）。Q は イ ミ ダ ク ロ プ リ ド ， チ ア メ ト キ サ ム な ど 各 種 の 化 学 農 薬 に 対 す る 感 受 性 が 低 下 し て お り ， 防 除 が 困 難 な こ と か ら 大 き な 問 題 と な っ て い る （ 遠 山 ら ， 2013）。 Lin et al.（ 2007） は ， 翌 年 の 農 作 物 に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 被 害 リ ス ク を 評 価 す る た め に は ， 冬 季 の 成 虫 ， 幼 虫 お よ び 卵 の 生 存 率 を 知 る 必 要 が あ る と 述 べ て お り ， タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 防 除 を 考 え る 上 で ， 野 外 越 冬 の 可 否 を 知 る こ と は 重 要 で あ る 。 B は 日 本 国 内 に お い て 野 外 越 冬 で き な い と さ れ て い る （ 松 井 ， 1995） が ， 栽 培 施 設 内 で 越 冬 し ， そ の 後 施 設 内 外 を 移 動 す る こ と で ， 周 年 発 生 す る こ と が 可 能 で あ る（ 杖 田 ら ，2007）。本 多（ 2008a）は ，Q の 野 外 越 冬 に つ い て ，B と 同 じ く 国 内 で は 困 難 と し て い る も の の ， 九 州 や 四 国 な ど の 温 暖 地 で は 検 討 を 要 す る と 指 摘 し て い る 。 ま た ， 飯 田 （ 2011） は ， 鹿 児 島 県 南 さ つ ま 市 や 高 知 県 南 国 市 の よ う な 温 暖 な 地 域 で は Q が 野 外 越 冬 す る 可 能 性 を 指 摘 し て い る 。 し か し ， こ れ ま で 日 本 国 内 に お け る Q の 野 外 越 冬 に 関 し て ， 具 体 的 な 調 査 事 例 の 報 告 は な い 。 そ こ で ， 各 発 育 ス テ ー ジ の Q が 寄 生 し た 植 物 を 用 い ， 熊 本 県 に お い て 野 外 越 冬 が 可 能 で あ る か 検 討 し た 。

26 2 材 料 お よ び 方 法 2-1 供 試 虫 供 試 し た Q は ， 2004 年 11 月 に 熊 本 県 合 志 市 の 熊 本 県 農 業 研 究 セ ン タ ー 内 の メ ロ ン か ら 採 集 し た 個 体 群 で あ る 。供 試 し た B は ，1991 年 に 熊 本 県 農 業 研 究 セ ン タ ー 内 の 栽 培 作 物 （ 作 物 不 明 ） か ら 採 集 し た 個 体 群 で あ る 。Q お よ び B の 累 代 飼 育 は ，25℃ ，16L8D に 設 定 し た 恒 温 室 内 に お い て ，キ ャ ベ ツ（ 品 種 ： 秋 徳 SP）を 寄 主 植 物 と し て 行 っ た 。本 個 体 群 に つ い て は ， mtCOⅠ 領 域 の 塩 基 配 列 の 違 い に よ る 識 別 法 （ 上 田 ， 2006； 三 浦 ， 2007） を 用 い て ， Q ま た は B で あ る こ と を 確 認 し た 。 2-2 雨 よ け ハ ウ ス に お け る バ イ オ タ イ プ Q お よ び B の 越 冬 熊 本 県 農 業 研 究 セ ン タ ー 内 に あ る ， ポ リ フ ィ ル ム を 天 井 の み に 被 覆 し た 雨 よ け ハ ウ ス 内（ 6×22m，図 Ⅱ -2-1(A)）に お け る Q ま た は B の 越 冬 の 可 能 性 を 明 ら か に す る た め ， 成 虫 ま た は 卵 ， 幼 虫 の 寄 生 株 を 設 置 し て 生 存 虫 の 有 無 を 調 査 し た 。 (1) 成 虫 9cm ポ リ ポ ッ ト に キ ャ ベ ツ （ 品 種 ： 金 系 201 号 ） 種 子 を 1 粒 ず つ 播 種 し ，25℃ ，16L8D に 設 定 し た 恒 温 室 で 管 理 し た 播 種 40～ 50 日 後 の キ ャ ベ ツ 苗 を 用 い た 。 プ ラ ス チ ッ ク 製 の 飼 育 箱 （ 34×26×34cm 側 面 は ゴ ー ス 張 り ， 図 Ⅱ -2-1(B)） に キ ャ ベ ツ 苗 を 2 株 入 れ ， そ こ へ 羽 化 後 7 日 以 内 の Q ま た は B の 成 虫 300 頭 を 雌 雄 混 在 で 放 飼 し た 。 放 飼 後 の 飼 育 箱 は 低 温 順 化 の た め 無 加 温 の ガ ラ ス ハ ウ ス に 3 日 間 置 き ， そ の 後 雨 よ け ハ ウ ス へ 移 動 さ せ た 。 試 験 は 3 回 行 い ， 雨 よ け ハ ウ ス へ の 飼 育 箱 の 設 置 は ，2007 年 12 月 10 日 ，2008 年 2 月 6 日 ，2 月 23 日 に 行 っ た 。 生 存 虫 の 調 査 は ， 原 則 7 日 間 隔 で 見 取 り 調 査 し た 。 放 飼 し た 成 虫 が キ

27 ャ ベ ツ に 産 卵 し ， 新 た な 羽 化 成 虫 が 出 現 し な い よ う に ， 約 1 か 月 ご と に 新 た な キ ャ ベ ツ 苗 を 入 れ る と と も に ， 古 い キ ャ ベ ツ は 茎 を 切 断 し て 数 日 後 に 除 去 し た 。 そ の 時 ， キ ャ ベ ツ 苗 を 見 取 り 調 査 し ， 羽 化 殻 が な い こ と を 確 認 し た 。 な お ， Q と B 成 虫 の 生 存 率 に つ い て は ， 調 査 日 ご と に Fisher の 正 確 確 率 検 定 で 比 較 し た 。 (2) 卵 お よ び 幼 虫 9cm ポ リ ポ ッ ト の イ チ ゴ 苗（ 品 種：と よ の か ）ま た は キ ャ ベ ツ 苗（ 品 種：金 系 201 号 ）4 株 を 飼 育 箱 に 入 れ て ，Q ま た は B 成 虫 を 雌 雄 混 在 で 100～ 400 頭 放 飼 し ， 25℃ ， 16L8D に 設 定 し た 恒 温 室 で 管 理 し た 。 放 飼 20～ 25 日 後 ，成 虫 を 除 去 す る と と も に 1/5000a ワ グ ネ ル ポ ッ ト に 移 植 し た 。 Q ま た は B が 寄 生 し た 苗 は ， 低 温 順 化 の た め 無 加 温 の ガ ラ ス ハ ウ ス に 3～ 5 日 間 置 き ，雨 よ け ハ ウ ス 内 へ 移 動 さ せ た 。雨 よ け ハ ウ ス へ の 供 試 苗 の 設 置 は ，2007 年 11 月 25 日 ，12 月 1 日 ，12 月 24 日 ，2008 年 1 月 13 日 お よ び 2 月 7 日 の 5 回 で あ っ た 。 な お ， 12 月 1 日 の 設 置 の み キ ャ ベ ツ 苗 で ， そ れ 以 外 の 4 回 は イ チ ゴ 苗 を 用 い ， 設 置 日 ご と の 供 試 株 数 は 3～ 10 株 で あ っ た 。 雨 よ け ハ ウ ス へ の 設 置 当 日 ， 全 葉 の 葉 裏 に 寄 生 す る Q ま た は B の 卵 お よ び 幼 虫 を 16 倍 率 の ル ー ペ を 用 い て 発 育 ス テ ー ジ 別 に 計 数 す る と と も に ， す べ て の 寄 生 部 位 が わ か る よ う に 黒 色 油 性 マ ー カ ー で 寄 生 葉 に 印 を 付 け た 。 初 回 調 査 以 降 ， 寄 生 虫 の 計 数 は 2～ 4 回 行 い ， 卵 お よ び 幼 虫 の 生 死 は 変 形 や 変 色 に よ り 判 定 し た 。 2008 年 4 月 初 め の 調 査 後 ，生 存 虫 が 寄 生 し て い る 可 能 性 の あ る 葉 を ゴ ー ス で 覆 い ， 25℃ に 設 定 し た 恒 温 室 へ 寄 生 苗 を 移 動 し た 。 そ の 後 ， 成 虫 が 羽 化 し た 場 合 ，三 浦（ 2007）の 方 法 で バ イ オ タ イ プ を 識 別 し た 。 ま た ，雨 よ け ハ ウ ス 内 の 高 さ 30cm の 位 置 に 温 度 デ ー タ ロ ガ ー（ お ん ど と り Jr.TR-52， T＆ D 社 製 ） を 設 置 し ， 1 時 間 間 隔 で 温 度 を 測 定 し た 。

28

な お ， 温 度 デ ー タ ロ ガ ー の セ ン サ ー に は ， 直 射 日 光 が あ た ら な い よ う に 通 気 性 を 確 保 し た 覆 い を 被 せ た 。

2-3 野 外 条 件 下 に お け る バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬

野 外 条 件 で Q が 越 冬 す る 可 能 性 を 明 ら か に す る た め に ， 卵 お よ び 幼 虫 が 寄 生 し た キ ラ ン ソ ウ Ajuga decumbens Thunb.（ シ ソ 科 ） を 用 い た

2 つ の 試 験 で 検 討 し た 。 な お ， 以 下 の 越 冬 試 験 は ， 熊 本 県 農 業 研 究 セ ン タ ー 内 の 露 地 圃 場 で 実 施 し た ，（ 図 Ⅱ -2-1(C， D)）。 試 験 1； 2008 年 10 月 10 日 ， Q が 多 寄 生 し た 1/5000a ワ グ ネ ル ポ ッ ト 植 え の ナ ス 10 株 が 置 い て あ る 無 加 温 の ガ ラ ス ハ ウ ス 内 に ， 1/5000a ワ グ ネ ル ポ ッ ト 植 え の キ ラ ン ソ ウ 8 株 を 設 置 し ， キ ラ ン ソ ウ に Q を 寄 生 さ せ た 。 11 月 26 日 ， 成 虫 を 除 去 し て Q の 卵 お よ び 幼 虫 が 寄 生 し た キ ラ ン ソ ウ 8 株 を 露 地 圃 場 に 設 置 し た 。 12 月 27 日 ， 枯 死 し た 1 株 を 除 く ， 7 株 の 全 葉 に 寄 生 す る 卵 お よ び 幼 虫 を 調 査 す る と と も に ， す べ て の 寄 生 部 位 が わ か る よ う に 黒 色 油 性 マ ー カ ー で 寄 生 葉 に 印 を 付 け た 。 そ の 後 ， 寄 生 虫 数 の 調 査 は ， 2009 年 2 月 23 日 ， 3 月 20 日 お よ び 4 月 1 日 の 3 回 行 い ，16 倍 率 の ル ー ペ を 用 い て 発 育 ス テ ー ジ 別 に 計 数 し た 。 な お 4 月 1 日 の 調 査 後 ， キ ラ ン ソ ウ を ゴ ー ス で 覆 い ， 25℃ に 設 定 し た 恒 温 室 に 置 い て 成 虫 を 羽 化 さ せ た 。 試 験 2；2008 年 9 月 30 日 ，Q が 多 寄 生 し た 1/5000a ワ グ ネ ル ポ ッ ト 植 え の ナ ス 10 株 が 置 い て あ る 無 加 温 の ガ ラ ス ハ ウ ス 内 に ，プ ラ ン タ ー 植 え キ ラ ン ソ ウ を 設 置 し ，Q を 寄 生 さ せ た 。11 月 11 日 ，Q が 寄 生 し た キ ラ ン ソ ウ 50 株 を 露 地 圃 場 （ 6×11m） に 株 間 45cm， 1 列 25 株 で 2 列 に 定 植 し た 。そ の 後 ，活 着 し て 生 育 で き た 17 株 を 調 査 株 と し て 用 い た 。 寄 生 数 調 査 は ， 1 回 に つ き 3～ 7 株 を 露 地 圃 場 か ら 抜 き 取 り ， 10～ 30

29 倍 に 拡 大 し た 実 体 顕 微 鏡 下 で 行 っ た 。 な お ， 調 査 は 12 月 29 日 ， 2009 年 2 月 25 日 ， 3 月 23 日 お よ び 4 月 3 日 の 4 回 で あ っ た 。 調 査 後 ， 寄 生 が 認 め ら れ た キ ラ ン ソ ウ に つ い て は ， 濡 れ た ろ 紙 を 敷 い た プ ラ ス チ ッ ク カ ッ プ に 入 れ ， 25℃ に 設 定 し た 恒 温 室 内 で 成 虫 を 羽 化 さ せ た 。 試 験 1，2 と も に 卵 お よ び 幼 虫 の 生 死 は ，変 形 や 変 色 に よ り 判 定 し た 。 ま た ， 成 虫 が 羽 化 し た 場 合 ， 三 浦 （ 2007） の 方 法 で バ イ オ タ イ プ を 識 別 し た 。露 地 圃 場 の 温 度 の 測 定 は ，地 上 30cm の 高 さ で 雨 よ け ハ ウ ス で の 調 査 方 法 と 同 様 に 行 っ た 。

30 定 植 圃 場 図 Ⅱ -2-1 タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 越 冬 試 験 の 様 子 (A)越 冬 試 験 に 使 用 し た 雨 よ け ハ ウ ス (B)成 虫 の 飼 育 箱 (C)バ イ オ タ イ プ Q の 野 外 越 冬 試 験 (D)野 外 越 冬 試 験 に 用 い た ワ グ ネ ル ポ ッ ト に 植 え た キ ラ ン ソ ウ

(D)

(C)

(A)

(B)

31 3 結 果 3-1 雨 よ け ハ ウ ス に お け る バ イ オ タ イ プ Q お よ び B の 越 冬 (1) 成 虫 冬 季 の 雨 よ け ハ ウ ス 内 に 設 置 し た キ ャ ベ ツ 苗 に お け る Q お よ び B 成 虫 の 生 存 率 を 図 Ⅱ -2-2 に 示 し た 。2007 年 12 月 10 日 に 設 置 し た 成 虫 の 生 存 率 は ，Q で は 設 置 13 日 後（ 12 月 23 日 ）で 20.3％ ，26 日 後（ 2008 年 1 月 5 日 ）で 9.7％ ，34 日 後（ 1 月 13 日 ）で 8.3％ と 徐 々 に 低 下 し ， 55 日 後 （ 2 月 3 日 ） は 0％ で あ っ た 。 一 方 B で は ， 13 日 後 で 29.0％ ， 26 日 後 で 1.7％ ，34 日 後 で 1.3％ ，42 日 後（ 1 月 21 日 ）は 0％ で あ っ た 。 設 置 26 日 後 ， 34 日 後 お よ び 42 日 後 の Q の 生 存 率 は ， B に 比 べ て 有 意 に 高 か っ た （ Fisher の 正 確 確 率 検 定 ，p＜ 0.05）。 2008 年 2 月 6 日 に 設 置 し た 成 虫 の 生 存 率 は ， Q で は 設 置 7 日 後 （ 27 日 後 で 0％ と 生 存 虫 が 確 認 で き な か っ た 。設 置 7 日 後 の Q の 生 存 率 は ， B に 比 べ て 有 意 に 高 か っ た （ Fisher の 正 確 確 率 検 定 ，p＜ 0.05）。 2008 年 2 月 23 日 に 設 置 し た 成 虫 の 生 存 率 は ， Q で は 設 置 8 日 後 （ 3 月 2 日 ） で 33.0％ ， 36 日 後 （ 3 月 30 日 ） で 15.3％ と 徐 々 に 低 下 し ， 69 日 後 （ 5 月 2 日 ） で 0％ と な っ た 。 一 方 B で は ， 8 日 後 で 18.0％ ， 36 日 後 で 5.3％ と 徐 々 に 低 下 し ，69 日 後 で 0％ と な っ た 。 設 置 8～ 57 日 後 の 8 回 の 調 査 で の Q の 生 存 率 は ， B に 比 べ て 有 意 に 高 か っ た （ Fisher の 正 確 確 率 検 定 ，p＜ 0.05）。 (2) 卵 お よ び 幼 虫 冬 季 の 雨 よ け ハ ウ ス 内 で の Q の 卵 お よ び 幼 虫 の 越 冬 数 を 表 Ⅱ -2-1 に 示 し た 。2007 年 11 月 25 日 ，雨 よ け ハ ウ ス 内 に 設 置 し た イ チ ゴ 苗 に は ， 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 991 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 そ の 後 の 寄 生 数

32 は 減 少 し ，2008 年 4 月 4 日 で は 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 8 個 体 と な っ た 。 4 月 4 日 か ら 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 す る と ，2 頭 が 羽 化 し て Q と 確 認 さ れ た 。本 試 験 で は Q の 越 冬 が 確 認 さ れ ，そ の 生 存 率 は 0.2％ で あ っ た 。 2007 年 12 月 1 日 に 設 置 し た キ ャ ベ ツ 苗 に は ，卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 1,809 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 そ の 後 の 寄 生 数 は 減 少 し ， 2008 年 4 月 1 日 で は 卵 お よ び 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 37 個 体 と な っ た 。4 月 1 日 か ら 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 す る と ， 1 頭 が 羽 化 し て Q と 確 認 さ れ た 。 本 試 験 で は Q の 越 冬 が 確 認 さ れ ， そ の 生 存 率 は 0.1％ で あ っ た 。 2007 年 12 月 24 日 に 設 置 し た イ チ ゴ 苗 に は ， 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 738 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 そ の 後 の 寄 生 数 は 減 少 し ， 2008 年 4 月 4 日 で は 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 33 個 体 と な っ た 。 4 月 4 日 か ら 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 す る と ，9 頭 が 羽 化 し て Q と 確 認 さ れ た 。本 試 験 で は Q の 越 冬 が 確 認 さ れ ， そ の 生 存 率 は 1.2％ で あ っ た 。 2008 年 1 月 13 日 お よ び 2 月 7 日 に 設 置 し た イ チ ゴ 苗 に は ， 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で そ れ ぞ れ 472 個 体 お よ び 84 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 そ の 後 の 寄 生 数 は 減 少 し ， 4 月 3 日 ま た は 6 日 か ら 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 し た が 羽 化 は 認 め ら れ な か っ た 。 冬 季 の 雨 よ け ハ ウ ス 内 で の B の 卵 お よ び 幼 虫 の 寄 生 数 を 表 Ⅱ -2-2 に 示 し た 。2007 年 11 月 25 日 ～ 2008 年 2 月 7 日 の 期 間 に ，雨 よ け ハ ウ ス 内 に 供 試 株 を 5 回 設 置 し ， こ の 5 回 の 試 験 に お い て 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 1,869 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 し か し ， そ の 後 の 寄 生 数 は 減 少 し ，2008 年 4 月 上 旬 か ら 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 し た が 羽 化 は 認 め ら れ な か っ た 。

33 (3) 雨 よ け ハ ウ ス 内 の 日 最 高 気 温 お よ び 日 最 低 気 温 の 推 移 2007 年 12 月 1 日 か ら 2008 年 3 月 31 日 ま で の 日 最 高 気 温 は ，5.2～ 27.0 ℃ で 平 均 14.4 ℃ で あ っ た （ 図 Ⅱ -2-3 ）。 日 最 低 気 温 は ， -6.5 ～ 12.2℃ で 平 均 1.9℃ ， 0℃ 以 下 と な っ た 日 が 40 日 あ っ た 。 ま た ， 最 寒 月 で あ る 2 月 の 日 最 低 気 温 は ， -6.5～ 4.2℃ で 平 均 -1.5℃ で あ っ た 。 3-2 野 外 条 件 に お け る バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬 野 外 条 件 に 設 置 し た ポ ッ ト 植 え キ ラ ン ソ ウ に お け る Q の 寄 生 数 を 表 Ⅱ -2-3 に 示 し た （ 試 験 1）。 2008 年 11 月 26 日 に 露 地 圃 場 へ 設 置 し た 供 試 株 は ，12 月 27 日 時 点 で 卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 300 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 し か し ， そ の 後 の 寄 生 数 は 減 少 し ， 2009 年 4 月 1 日 で は 2 ～ 4 齢 幼 虫 で 4 頭 と な っ た 。4 月 1 日 か ら 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 す る と ， 2 頭 が 羽 化 し て Q と 確 認 さ れ た 。本 試 験 で は Q の 野 外 越 冬 が 確 認 さ れ ， そ の 生 存 率 は 0.7％ で あ っ た 。 露 地 圃 場 に 定 植 し た キ ラ ン ソ ウ に お け る Q の 寄 生 数 を 表 Ⅱ -2-4 に 示 し た（ 試 験 2）。2008 年 11 月 11 日 に 露 地 圃 場 へ 定 植 し た 供 試 株 は ，12 月 29 日 に 調 査 し た 7 株 に お い て ，卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 509 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。2009 年 2 月 25 日 に 調 査 し た 3 株 で は ，卵 ～ 4 齢 幼 虫 の 合 計 で 41 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ ，調 査 後 に 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 し た と こ ろ ， 1 頭 が 羽 化 し て Q と 確 認 さ れ た 。 3 月 23 日 お よ び 4 月 3 日 の 調 査 で は ，3 齢 と 4 齢 あ わ せ て 3 お よ び 5 個 体 の 寄 生 が 認 め ら れ た 。 調 査 後 に 供 試 株 を 恒 温 室 で 管 理 し た と こ ろ ， 4 月 3 日 に 調 査 し た 供 試 株 の み 3 頭 が 羽 化 し て Q と 確 認 さ れ た 。 露 地 圃 場 の 日 最 高 気 温 お よ び 日 最 低 気 温 の 推 移 を 図 Ⅱ -2-4 に 示 し た 。2008 年 12 月 1 日 か ら 2009 年 3 月 31 日 ま で の 日 最 高 気 温 は ，5.0

34

～ 26.9℃ で 平 均 14.3℃ で あ っ た 。日 最 低 気 温 は ，-6.7～ 13.1℃ で 平 均 0.7℃ ，0℃ 以 下 と な っ た 日 が 61 日 あ っ た 。ま た ，最 寒 月 で あ る 1 月 の 日 最 低 気 温 は ， -6.6～ 10.5℃ で 平 均 -1.0℃ で あ っ た 。

35 図 Ⅱ -2-2 雨 よ け ハ ウ ス に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ 成 虫 の 生 存 率 （ 2007-2008 年 ） ● ： バ イ オ タ イ プ Q， ○ ： バ イ オ タ イ プ B． （ ） 内 の 数 値 は 雨 よ け ハ ウ ス へ の 設 置 後 日 数 を 示 す ． ＊ は Q と B の 生 存 率 に 有 意 差 あ り（ Fisher の 正 確 確 率 検 定 ，p＜ 0.05）

36 表 Ⅱ -2-1 雨 よ け ハ ウ ス に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬 数 （ 2007-2008 年 ） 卵 1齢 2齢 3齢 4齢 羽化 成虫 合計 2007/11/25 0 233 362 130 131 135 - 991 100.0 2007/12/29 34 110 85 53 44 100 - 392 39.6 2008/3/31 127 9 0 6 6 21 - 42 4.2 2008/4/4 131 2 0 1 0 5 - 8 0.8 2008/4/16 143 0 0 0 0 0 2 2 0.2 2007/12/1 0 1403 256 84 40 26 - 1809 100.0 2008/1/10 40 747 71 50 20 30 - 918 50.7 2008/4/1 122 35 0 0 0 2 - 37 2.0 2008/4/13 134 0 0 0 0 0 1 1 0.1 2007/12/24 0 136 260 99 149 94 - 738 100.0 2008/2/4 42 42 9 31 33 113 - 228 30.9 2008/4/4 102 10 0 0 6 17 - 33 4.5 2008/4/16 114 0 0 0 0 0 9 9 1.2 2008/1/13 0 185 189 35 39 24 - 472 100.0 2008/4/3 81 3 1 0 1 1 - 6 1.3 2008/4/15 93 0 0 0 0 0 0 0 0.0 2008/2/7 0 0 8 13 49 14 - 84 100.0 2008/4/6 59 0 0 0 0 0 - 0 0.0 2008/4/17 70 0 0 0 0 0 0 0 0.0 4回目 5回目 設置 回数 1回目 2回目 3回目 タバココナジラミバイオタイプQ 調査日 設置後 日数 生存率 （％）

37 卵 1齢 2齢 3齢 4齢 羽化 成虫 合計 2007/11/25 0 38 70 0 0 0 - 108 100.0 2007/12/29 34 24 25 3 0 0 - 52 48.1 2008/3/31 127 0 0 0 0 0 - 0 0.0 2008/4/4 131 0 0 0 0 0 - 0 0.0 2008/4/16 143 0 0 0 0 0 0 0 0.0 2007/12/1 0 296 205 14 0 0 - 515 100.0 2008/1/10 40 168 96 7 3 0 - 274 53.2 2008/4/1 122 9 0 0 0 0 - 9 1.7 2008/4/13 134 0 0 0 0 0 0 0 0.0 2007/12/24 0 48 95 150 79 11 - 383 100.0 2008/2/4 42 23 6 41 55 18 - 143 37.3 2008/4/4 102 3 0 0 0 0 - 3 0.8 2008/4/16 114 0 0 0 0 0 0 0 0.0 2008/1/13 0 287 381 12 1 0 - 681 100.0 2008/4/3 81 17 0 1 2 0 - 20 2.9 2008/4/15 93 0 0 0 0 0 0 0 0.0 2008/2/7 0 0 135 12 21 14 - 182 100.0 2008/4/6 59 0 0 0 0 0 - 0 0.0 2008/4/17 70 0 0 0 0 0 0 0 0.0 設置 回数 1回目 2回目 3回目 4回目 5回目 調査日 設置後 日数 タバココナジラミバイオタイプB 生存率 （％） 表 Ⅱ -2-2 雨 よ け ハ ウ ス に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ B の 越 冬 数 （ 2007-2008 年 ）

38

図 Ⅱ -2-3 雨 よ け ハ ウ ス に お け る 日 最 高 気 温 お よ び 日 最 低 気 温 の 推 移 （ 2007-2008 年 ）

39 表 Ⅱ -2-3 野 外 に 設 置 し た ワ グ ネ ル 植 え キ ラ ン ソ ウ に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬 数 （ 2008-2009 年 ） 卵 1齢 2齢 3齢 4齢 羽化 成虫 合計 2008/12/27 31 165 85 33 12 5 - 300 100.0 2009/2/23 89 13 0 8 3 0 - 24 8.0 2009/3/20 114 0 0 2 1 1 - 4 1.3 2009/4/1 126 0 0 2 1 1 - 4 1.3 2009/4/25 150 0 0 0 0 0 2 2 0.7 タバココナジラミバイオタイプQ 調査日 設置後 日数 生存率 （％）

40 表 Ⅱ -2-4 露 地 圃 場 に 定 植 し た ワ グ ネ ル 植 え キ ラ ン ソ ウ に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ Q の 越 冬 数 （ 2008-2009 年 ） 卵 1齢 2齢 3齢 4齢 合計 羽化 成虫 2008/12/29 48 7 341 75 45 8 40 509 - 2009/2/25 106 3 15 0 7 10 9 41 1 2009/3/23 132 4 0 0 0 1 2 3 0 2009/4/3 143 3 0 0 0 1 4 5 3 タバココナジラミバイオタイプQ 調査日 定植後 日数 調査 株数

41

図 Ⅱ -2-4 野 外 に お け る 日 最 高 気 温 お よ び 日 最 低 気 温 の 推 移 （ 2008-2009 年 ）

42 4 考 察 2007 年 か ら 2008 年 に か け て ， 熊 本 県 合 志 市 に あ る 雨 よ け ハ ウ ス 内 で は Q 成 虫 の 越 冬 は 認 め ら れ な か っ た 。 一 方 ， 卵 お よ び 幼 虫 は ， 生 存 率 が 0.1～ 1.2％ と 低 い も の の 越 冬 が 認 め ら れ た 。 2008 年 か ら 2009 年 に か け て ， 熊 本 県 合 志 市 の 露 地 圃 場 で Q の 卵 お よ び 幼 虫 が 寄 生 し た キ ラ ン ソ ウ に お い て ， 生 存 率 は 0.7％ と 低 い も の の 越 冬 が 認 め ら れ た 。 こ の こ と は ， こ れ ま で 未 確 認 で あ っ た 国 内 で の Q の 野 外 越 冬 を 初 め て 確 認 し た 事 例 と な る 。 ま た ， 雨 よ け ハ ウ ス 内 で の 調 査 で は ， Q の 越 冬 は 年 内 に 設 置 し た 寄 生 株 で 認 め ら れ た が ， 年 明 け の 1 月 お よ び 2 月 に 設 置 し た 寄 生 株 で は 確 認 さ れ な か っ た 。 雨 よ け ハ ウ ス に 設 置 し て か ら 7 日 間 の 日 最 低 気 温 の 平 均 値 を 2007 年 11 月 25 日 設 置 か ら 順 に 示 す と ， 5.3℃ ，1.3℃ ，6.5℃ ，0.2℃ お よ び － 2.7℃ で あ っ た 。一 般 に 休 眠 性 を 持 た な い 昆 虫 で も 低 温 順 化 に よ り 低 温 耐 性 が 高 ま る こ と か ら （ Salt， 1961），年 明 け の 設 置 で は 十 分 な 低 温 順 化 が で き ず 低 温 に 遭 遇 し た た め ， 越 冬 個 体 が 認 め ら れ な か っ た と 推 察 さ れ る 。 日 本 国 内 で の B の 野 外 越 冬 に つ い て は ，徳 島 県（ 中 野・貞 野 ，1994）， 香 川 県 （ 大 泰 司 ・ 岡 田 ， 1996）， 長 崎 県 （ 内 川 ・ 小 川 ， 2005）， 熊 本 県 （ 行 徳 ら ， 2008） で 調 べ ら れ ， 不 可 能 と 考 え ら れ て い る 。 我 が 国 で の B の 越 冬 は ， 気 候 が 温 暖 な 琉 球 諸 島 で は 野 外 で も 可 能 で あ る こ と が 示 唆 さ れ て い る （ 貴 島 ら ， 2011b）。 し か し ， 他 地 域 で は 冬 季 の 野 外 で ほ と ん ど 死 滅 す る た め ， 越 冬 は ト マ ト な ど の 栽 培 施 設 内 で 主 に 行 わ れ て い る と 考 え ら れ て い る（ 本 多 ，2006）。本 研 究 で B の 越 冬 が 雨 よ け ハ ウ ス 内 で 認 め ら れ な か っ た こ と は ， こ れ ま で の B が 野 外 越 冬 で き な い と す る 報 告 を 支 持 す る も の で あ る 。 飯 田 （ 2011） は ， Q の 野 外 越 冬 の 可 能 性 が B よ り 高 い こ と を 示 唆 し

43 て い る 。 本 研 究 で は ， Q の み 越 冬 が 認 め ら れ た こ と や 冬 季 に お け る Q と B の 成 虫 の 生 存 率 の 比 較 か ら ， 飯 田 （ 2011） の 報 告 と 同 じ く ， Q の 耐 寒 性 は B に 比 べ て 高 い と 考 え ら れ る 。 熊 本 県 の 栽 培 作 物 で 発 生 す る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ の 優 占 バ イ オ タ イ プ は ， Q の 侵 入 に よ っ て B か ら Q へ 遷 移 し て い る（ 樋 口 ら ，2007）。熊 本 県 に 発 生 す る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ は ， 優 占 バ イ オ タ イ プ が Q と な っ た こ と に よ り ， B に 比 べ て 野 外 で 越 冬 す る 可 能 性 が 高 い と 推 測 さ れ る 。 ま た ， 野 外 で 越 冬 試 験 を 行 っ た 2009 年 に お い て ，最 寒 月 で あ る 1 月 の 試 験 圃 場（ 熊 本 県 合 志 市 ）の 日 最 低 気 温 は ， 平 均 が -1.0℃ ， 極 値 が -6.6℃ で あ っ た 。 ト マ ト な ど の 施 設 栽 培 が 盛 ん な 熊 本 県 八 代 市 の 同 年 1 月 の 日 最 低 気 温 は ，平 均 が 2.6℃ ， 極 値 が -1.5℃ で あ っ た（ 気 象 庁 ，2009）。試 験 圃 場 が あ る 合 志 市 に 比 べ て 八 代 市 は ，日 最 低 気 温 が 平 均 で 3.6℃ ，極 値 で 5.1℃ 高 く ，寄 主 植 物 の 種 類 や 他 の 環 境 条 件 を 除 い て 温 度 の み で 推 察 す る と ， Q の 野 外 越 冬 の 生 存 率 が 高 い と 考 え ら れ る 。 こ の よ う に Q が 優 占 す る こ と で ， 地 域 に よ っ て は 野 外 で 越 冬 個 体 が 観 察 さ れ る 可 能 性 も あ る が ， 自 然 発 生 条 件 下 で の Q の 野 外 越 冬 は 国 内 で 観 察 事 例 が な い 。 ま た ， 熊 本 県 で は 温 暖 な 気 候 を 活 か し て ， 冬 春 作 の ト マ ト ， ナ ス な ど の 施 設 栽 培 が 広 く 行 わ れ て お り ， こ れ ら の 施 設 内 に お い て 冬 季 に Q の 継 続 的 な 発 生 が 確 認 さ れ て い る 。 こ れ ら の こ と か ら Q は B と 同 じ く 主 に 栽 培 施 設 内 で 越 冬 し ， 周 年 発 生 し て い る と 考 え ら れ る 。 そ の た め ， 施 設 内 部 か ら 外 部 へ の 成 虫 の 移 動 を 防 ぐ こ と は ， 本 種 の 生 活 環 を 断 つ 上 で 重 要 で あ る （ 杖 田 ら ，2007）。収 穫 終 了 後 ，施 設 内 の Q を 死 滅 さ せ る た め の 太 陽 熱 を 利 用 し た ハ ウ ス 密 閉 処 理 は ， 本 種 に 対 し て も 有 効 な 防 除 手 段 と 考 え ら れ る 。

44

-10℃ ，-6℃ ，-2℃ に 暴 露 し て 耐 寒 性 を 調 べ る と ，死 亡 個 体 が 急 激 に 増 加 す る 温 度 は ，卵 で は -10℃ ，幼 虫 お よ び 成 虫 で は -6℃ で あ る こ と を 報 告 し て い る 。 さ ら に ， 卵 の 耐 寒 性 は ， 幼 虫 や 成 虫 に 比 べ て 高 い と 述 べ

ら れ て い る （ Simmons and Elsey， 1995； Lin et al.， 2007）。 ま た ， B の 孵 化 直 後 の 1 齢 幼 虫 は ，5℃ で 4 日 間 の 低 温 処 理 に よ り 死 亡 率 が 高 く な る こ と か ら ，耐 寒 性 が 低 い と 報 告 さ れ て い る（ 大 泰 司・岡 田 ，1996）。 こ れ ら の 室 内 試 験 か ら B の 野 外 越 冬 は ，卵 の 状 態 で は 生 存 し て い て も ， 孵 化 直 後 に 死 亡 す る 可 能 性 が 考 え ら れ る 。 本 研 究 で の B の 越 冬 試 験 で は ，孵 化 幼 虫 の 死 亡 は 確 認 で き な か っ た 。し か し ，Q の 越 冬 試 験 で は ， 12 月 に 卵 の 状 態 で あ っ た 個 体 が ， 1 月 に 孵 化 し て 卵 殻 に 付 着 し た ま ま 死 亡 し て い る 1 齢 幼 虫 が 確 認 さ れ た（ 図 Ⅱ -2-5）。こ の こ と か ら ，孵 化 直 後 の Q の 1 齢 幼 虫 の 耐 寒 性 は B と 同 じ く 低 い 可 能 性 が あ り ， 今 後 の 検 討 課 題 で あ る 。 本 研 究 で の Q の 野 外 越 冬 試 験 に お い て ， 試 験 1 で 越 冬 が 確 認 さ れ た 2 個 体 は ， 2 月 23 日 の 調 査 時 で は 2 齢 ま た は 3 齢 で あ っ た 。 ま た ， 試 験 2 の 野 外 越 冬 試 験 に お い て ，2 月 25 日 の 調 査 で 1 頭 の 羽 化 成 虫 を 確 認 し て い る 。 こ の 成 虫 は 調 査 時 に 4 齢 幼 虫 で あ っ た 個 体 が 羽 化 し た も の で ， そ の 個 体 以 外 は 調 査 後 に 発 育 が 認 め ら れ ず ， 死 亡 し て い た と 考 え ら れ る 。 前 述 し た よ う に ， 卵 の 耐 寒 性 は 幼 虫 や 成 虫 に 比 べ て 高 い と さ れ て い る が ， こ れ は 短 期 間 の 低 温 処 理 で の 試 験 結 果 か ら 述 べ ら れ て い る （ Simmons and Elsey， 1995； Lin et al.， 2007）。 飯 田 （ 2011）

は ， 低 温 が 数 か 月 に 及 ぶ 野 外 調 査 で は ， 卵 や 成 虫 に 比 べ て 幼 虫 で 野 外 越 冬 す る 可 能 性 を 示 唆 し て い る 。 本 研 究 で も Q の 野 外 越 冬 に お い て 同 様 の 傾 向 を 示 し て い る が ， Q の 発 育 ス テ ー ジ と 耐 寒 性 の 関 係 に つ い て

45

図 Ⅱ -2-5 野 外 越 冬 試 験 に お け る タ バ コ コ ナ ジ ラ ミ バ イ オ タ イ プ Q の 1 齢 幼 虫 の 死 亡