4
4
原 著 ( 東 女 医 大 誌 第5
5
巻 第3
号)
頁2
8
4
-
2
9
7
昭和6
0
年3
月jマウス陸上皮の微細形態の性周期的変化
一腫上皮の角化と
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頼粒の消長一
東京女子医科大学第二解剖学教室(主任飯沼守夫教授〉 カタ ギリ ノブ コ イイ ヌマ モリ オ片 桐 展 子 ・ 飯 沼 守 夫
(受付昭和5
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年1
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月2
7
日〉Ultrastructural Study o
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緒 言 マウスやラットの睦上皮は性周期に伴って形態 的に変化する.すなわち，発情間期では粘液細胞 が表層を被い全く角化していないが，発情期では 粘 液 細 胞 は 存 在 せ ず 角 化 し た 重 層 肩 平 上 皮 で あ る1)-7) 睦 上 皮 は 発 情 前 期 に 中 間 層 の 細 胞 が 増 殖 し形態的に変化して角化細胞に分化し，表層の粘 液 細 胞 の 下 層 に 角 化 し た 重 層 肩 平 上 皮 が 形 成 さ れ，やがて粘液細胞は剥脱する.発情期の睦上皮2
8
4
は一般の角化重層扇平上皮8ト川と同様の形態的特 徴を有し，また，性周期に伴う陸上皮の変化を観 察すると基底細胞が表層に向って移動し有株層， 頼粒層を経て角化細胞に変化する一連の角化過程 が観察される11) マウスやラットは睦上皮の表層 が 角 化 細 胞 で 被 わ れ る 発 情 期 に 排 卵 し 交 尾 す る凶.げっ歯類の腫上皮の性周期に伴う変化は卵 巣ホルモンの周期的変動によって影響されること から，卵巣除去後の成体や幼若な個体に卵巣ホルモンを投与して腫上皮の形態変化を観察した多数 の報告がある叫-22) しかし，正常な性周期におけ る腔上皮の徴細形態23)27Lなかでも角化していな い睦上皮が角化する過程については報告が少なく 不明な点が多い. Membrane coating頼 粒 (MCG)は，多くの角 化および非角化の重層肩平上皮に存在する頼粒で いろいろな名称で呼ばれている8)-10)28) 角化上皮 のMCGは内部に特異な層板構造を有するが，非 角化上皮の MCG~.こは層板は認められない.いず れも有線細胞内に現われ頼粒層で細胞間瞭中にそ の内容が放出される.アカゲザルの腔上皮は角化 重層肩平上皮で、げっ歯類のように粘液化すること はないが性周期に伴って上皮の厚さが変化する. この中間層の細胞内にMCGが存在しMCGの内 容は超薄切片では網状構造を示すが29)30) 凍結割 断像では細胞間際中にMCGの層板が明瞭に認め られた31) け守っ歯類の睦上皮の超薄切片の観察で はMCGは 認 め ら れ な い か15)32) あるいはMCG の 存 在 に つ い て 全 く 触 れ ら れ て い な い13)17)21ト24)27) ところでEliasら(1977)33)は数種 の角化上皮を凍結割断し角化上皮にみられる細胞 間結合を観察した際，マウス睦上皮に層板を有す るMCGを報告した.しかし，彼らはMCGの存在 を 単 に 示 し た だ け で ， マ ウ ス 陸 上 皮 が 性 周 期 に 伴って変化することや， MCGが性周期のどの時 期およびどの細胞層にみられたかなどについて全 く触れていない. 本研究において
dd
系マウス陸上皮の正常な性 周期における徴細構造の変化を観察し腫上皮の角 化過程を明らかにした.特に腫上皮にMCGが存 在することおよびMCGの消長に周期的変化が認 められたので、報告する. 材料と方法dd
系マウスの成熟雌(体重2
0
g
r
以上〉を用い睦 脂膏検査によって3
田以上発情期を繰り返した個 体40匹を選んだ.エーテル麻酔下で、開腹して睦を 取り出し，睦の中央部を細切して2%
四酸化オス ミウム (O.lMリン酸緩衝液pH
7.3)34)で2
時間 固定，エタノーノレで、脱水後エポン包埋35)した.LKB
ウ ル ト ラ ミ ク ロ ト ー ム で 厚 さ0.5-1μmの -285轡
(
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8
⑨
D P E M Fig. 1 A schematic drawing illustrating the cyclical change of vaginal eithelium of the dd mouse during estous cycle. Cells marked by obli. que lines contain membrane coating granules and cells marked by dots contain keratohyalin granules. BC， basal cell; CC， comified cell; D， diestrus ; E， estrus ; GC， granular cell ; L， neutro. philic leucocyte ; M， metestrus ; MC， mucous cell ; P， proestrus; SC， spinous cell. 切片を作成しトルイジン青溶液で染色後，Sne
1
l
4 ) の 記 載 に 従 っ て 性 周 期 を 決 定 し た . 超 薄 切 片 は2%
酢酸ウラン水溶液と水酸化鉛36)で染色し， 目 立llDまたは12A
型電子顕徴鏡で観察した. 結 果dd
系マウスの性周期を発情前期，発情期，発情 後期，発情間期の4期に分ける.睦上皮は発情前 期の初期に角化しはじめ(Fig. 3a)，発情期は角化 重層肩平上皮から成る(Fig. 10a)が，発情後期に なると角化細胞や角化しつつある細胞が剥れ落ち (Fig. lla， 13a)，発情間期には3 - 4層の細胞層 から成る (Fig.2
)
.
正常な性周期における陸上皮 の形態変化を徴細形態の観察結果に基いて模式図 (Fig.1)に示した.membrane coating頼 粒 (MCG)は発情前期から発情後期まで腫上皮が角 化している期間に観察された.A
.発情間期
腫上皮は全性周期中で最も薄く，表層の粘液細胞層，中間層，基底層から成る
(
F
i
g
.2
)
.
いずれ の 細 胞 に も 角 化 の 兆 候 は 認 め ら れ な い . ま たMCG
はどの細胞内にも存在しない.粘液細胞は 多量の粘液滴を含み，発情間期と発情前期の腫上 皮の表層に存在する.B
.
発情前期の初期 表層の粘液細胞の直下にある細胞はやや肩平で 細胞内に小形のケラトヒアリン頼粒(KG)
や細胞 の長軸方向に走向するトノフィラメントを含有し 頼粒細胞の特徴を現わし始めている(
F
i
g
.3
a
，3
b
)
.
KG
は限界膜をもたない球形の頼粒で、高電子 密度の内容から成り周囲にリボゾームが密集して おり(
F
i
g
.3
c
)
，トノフィラメントの束とは無関係 に細胞質内に散在する(
F
i
g
.3
b
)
.
MCG
は頼粒細 胞およびその下に位置する2-4
層の有蘇細胞の 細胞質内に認められるくF
i
g
.3
b
の企).しかし，MCG
は発情期の有東京細胞に比べ数が少なく内部 の層状構造は不明瞭で、ある(
F
i
g
.3
C).C
.
発情前期の半ばから発情期 腫上皮は発情前期の半ばになると有腺層と頼粒 層はそれぞれ厚さを増し，頼粒層の上に角化層が 分化する.典型的な発情前期の睦上皮は表層の粘 液細胞層とその下の角化した重層肩平上皮から成 り，後者は一般の角化上皮にみられる細胞層(基 底層，有車車層，頼粒層，角化層〉を全て備えてい る(
F
i
g
.4
)
.
基底層から上層に向うにつれて細胞 は様々な形態変化を経て角化細胞に分化し，その 角化過程においてMCG
が出現しかっ消失する. 表層の粘液細胞の下層に充分に角化した重層肩平 上皮が完成すると粘液細胞は剥離し角化層が睦腔 面 に 裸 出 し て 発 情 期 の 角 化 重 層 平 上 皮 に な る(
F
i
g
.
1
0
a
)
.
基底層から角化層までの各層の細胞 の徴細形態は発情前期と発情期はほぼ同様である ので一括して記載する. 基底層の細胞は睦上皮に垂直な長軸をもっ円柱 形で基底膜に接している(
F
i
g
.5
)，比較的大きな 卵形の核が細胞の中央に位置し，核上部にゴルジ 装置，核周囲部にミトコンドリア， トノフィラメ ント，粗面小胞体， リボゾームが散在する.基底 細胞のすぐ上にある細胞は立方形で，徴細形態は 基底細胞とほぼ同じである.これらの細胞内にはMCG
は認められない. 基底層に近い下層の有線細胞は多角球形で細い 細胞質の突起によって隣接細胞と互いに複雑に依 合し，細胞間にデスモゾームや裂隙結合がよく発 達している(
F
i
g
.6
b
)
.
球形の核は細胞の中央に位 置し明瞭な核小体を有する(
F
i
g
.6
a
)
.
MCG
は細 胞内に散在している(
F
i
g
.6
a
の円内入有東京細胞 は上層へ移動するのに伴い腫上皮に平行な長軸を もっ紡錘形や，やや肩平な形に変わる(
F
i
g
.7
a
)
.
上層の有牒細胞とそれに接する頼粒細胞の細胞内 には層板構造がよく発達したMCG
が多数存在す る(
F
i
g
.7
a
，7
b
，8
a
)
.
MCG
は球形または長楕円形 の大きさ0.1-0.5μm
径の単位膜に囲まれた頼粒 で，内部に特異な層板構造を有するのが特徴であ る(
F
i
g
.7
b
，8
b
)
.
層板構造は高電子密度の暗調層 と低電子密度の明調層(
F
i
g
.8
b
のT)
の規則的な 積み重なりから成り，暗調層は更により厚い層(
F
i
g
.
8
b
のι
〉とより薄い層(
F
i
g
.8
b
の.!J，.)が識 別され，これらは中間に明調層を挟んで一つおき に交互に配列している.MCG
の層板構造に平行 な断面は切断面のレベルによって様々な電子密度 の内容を含んだ頼粒として観察される(
F
i
g
.7
b
)
.
層板構造は1
個のMCG
内にl
セット以上含まれ ることが多く，それらは互いに異なる方向に配列 しており(
F
i
g
.8
c
)
.
1
個のMCG
内に層板と層板 に平行に切断されて無構造に見える部位(
F
i
g
.8b
の*)が観察される.MCG
は有親細胞が上層にな るほど増加し，それとともに細胞の腫腔側の細胞 膜周縁により多く集まるようになり9 その分布に 明らかな極性が認められる.すなわち，上下に相 接する細胞では上層の細胞の下面にはMCG
はほ とんど存在しないが下層の細胞の上面には多数集 合して対称的な分布を示す(
F
i
g
.7
a
，8
a
)
.
頼粒層の細胞は有頼層の細胞より更に扇平にな り，高電子密度のKG
の存在が特徴で，細胞質内 にトノフィラメントが増加する.有練細胞に接す る頼粒細胞内に小形で球形のKG
がトノフィラ メントとは無関係に散在性に出現する(
F
i
g
.8
a
)
.
KG
は周囲にリボゾームが密集している.KG
の 数と大きさは頼粒細胞がより上層へ位置するのに 伴い増加する(
F
i
g
.8a
，9
a
)
.
角化層に近い上層の頼粒細胞ではトノフィラメントが密に分布するよ うになり，球形の
KG
はトノフィラメントの束の 聞に埋もれるようになる.また， トノフィラメン トの束の上に不整形のKG
が沈着し(
F
i
g
.9
a
)
，ト ノフィラメント間のKG
との癒合がしばしば観 察される.頼粒細胞聞は隣接細胞との帳合は少な くなるがデスモゾームと裂隙結合によって結合し ている(
F
i
g
.9
c
)
.
MCG
は表層側の細胞膜周縁に 分布し，デスモゾームや裂隙結合のない部位で細 胞膜と癒着して内部の層板構造を細胞間陳に放出 し(
F
i
g
.9
b
，1
0
c
)
，MCG
は上層の頼粒細胞内に認 められなくなる.放出されたMCG
の層板構造は 細胞膜に対して様々な角度で存在し，層板の規則 的な積み重なりは細胞間隙中でしばらく残存するC
F
i
g
.
9
c
，1
0
c
)
が，角化層に近づくにつれてノミラ パラに崩れ細胞間隙中に拡がるC
F
i
g
.1
0
d
)
.
頼粒細胞は急激な形態変化をして角化細胞へ移 行する.角化層を構成する角化細胞は細胞質がケ ラチンフィラメントで充たされ核や小器官をもた ないC
F
i
g
.1
0
b
)
.
角化細胞の細胞膜はその内側の 全周に一様な幅の周縁帯が形成されて肥厚し，顎 粒細胞とは明らかに異なり角化層と頼粒層の境界 は判然としているC
F
i
g
.1
0
d
)
.
発情期では角化層 は最も厚くなり腫上皮の厚さのほぼ1
/
3
を占める(
F
i
g
.
1
0
a
)
が，他の層とは異なり角化層の上部と 下部の細胞との聞に微細形態の差異はほとんど認 められない(
F
i
g
.1
0
b
)
.
穎粒細胞から放出されたMCG
の層板は下層の角化細胞間ではその形態が まだ保持されるC
F
i
g
.1
0
e
)
が，上層では次第に崩 壊して不明瞭となり認められなくなるC
F
i
g
.1
0
0
.
D
.
発情後期 発情後期になると表層から細胞が個々にまたは 塊状で剥れ落ち，睦上皮は次第に薄くなる.多数 の白血球が睦上皮内に侵入し腫上皮を通過して腫 腔内に現われる(
F
i
g
.l
l
a
，l
l
b
)
.
角化層と頼粒層 の一部の細胞が剥脱して表層に頼粒細胞が裸出す る時期では，表層やその下層の細胞内にKG
とMCG
がまだ存在しC
F
i
g
.l
l
b
，1
2
a
)
，MCG
の内部 に層板構造が認められるものC
F
i
g
.1
2
b
)
と認めら れないものがある.更に頼粒細胞が剥れ落ち，表 287 層に紡錘形で電子密度の低い細胞質をもった細胞 が裸出するようになるとくF
i
g
.1
3
a
，1
3
b
)
，MCG
はどの細胞内にも認められなくなる.表層の細胞 は中央部に卵形の核を有し，少数のトノフィラメ ント，短い粗面小胞体， ゴノレジ装置， ミトコンド リアなどと， しばしば変性したKG
を含む(
F
i
g
.
1
3
b
)
.
表層と中間層の細胞内に大小の小胞や空胞 状の構造が観察されるC
F
i
g
.1
3
b
の企). 考 察 げ、つ歯類の腫上皮はエストロゲンによって角化 し13) 22)， プ ロ ゲ ス テ ロ ン に よ っ て 粘 液 化 す る剛山η19) この2
種のホノレモンの血中濃度は周 期的に変化しエストロゲンは発情間期の後半から 急激に増加して発情前期に最も高くなり，その後 急速に減少して発情期から発情間期にかけて低レ ベルになる凶37ト39)dd
系マウスの腫上皮は発情 前期の初期に角化しはじめ発情前期の半ばには角 化した重層肩平上皮が完成し発情期に最も強く角 化している.しかし，発情後期になると表層から 細胞が剥れ落ち角化しつつある細胞も失われる くF
i
g
.
1).正常な性周期において腫上皮はエスト ロゲンの血中濃度の変動にやや遅れるがこれに対 応して角化する.このずれは基底層の細胞がエス トロゲンの影響下で角化しはじめ角化細胞になる までの時聞を示している.発情前期の終りではエ ストロゲンの急激な減少と対称的にプロゲステロ ンが急激に増加し12)38)39) プロゲステロンはエス トロゲンと桔抗的に作用する結果29)40) 基底細胞 の増殖と角化細胞への分化が抑制され，また，完 成した角化上皮はその形態を保持できなくなり角 化しつつある細胞も含めて多量の細胞が急速に剥 離し脱落するものと思われる.dd
系マウスの発情期の陸上皮では基底層から 表層へ細胞が移動するにつれて次第に細胞の形態 が変化し角化細胞に分化するが，本研究において この一連の角化過程を観察し， トノフィラメント の著しい増加，細胞間結合の変化，MCG
とKGの 出現と消失，角化細胞に特有な周辺帯やケラチン フィラメントの形成など様々な徴細形態の変化を 認めた.陸上皮の角化に伴い変化するこれらの徴 細形態は他の角化上皮において角化過程にみられる徴細形態の変化と同様であるか10) なかでも
MCG
の存在がdd
系マウス陸上皮に確認され，そ の形態的特徴，分布，消長などが明らかになった.dd
系マウス睦上皮のMCG
は内部に層板構造が 明瞭に認められたほか，有蘇細胞内で出現しやが て表層側の細胞膜周縁に移動することや，頼粒細 抱では細胞膜に癒着し内部の層板を細抱間瞭に放 出し，層板は細胞聞に拡散して角化層で消失する などの特徴を示した.これらの特徴は口腔上皮な どの非角化上皮にみられるMCG
拘 41)よりは，皮膚 などの角化上皮のMCG
の特徴に近い28)42) 正常 な性周期におけるdd
系マウスの角化した腫上皮 は単に光学顕微鏡レベルで、重層肩平上皮の形態を 示すだけではなく，MCG
の存在によって明らか なように微細形態レベルにおける角化の過程も他 の角化上皮と同じであることが明らかになった.MCG
はdd
系マウスの腫上皮が発情前期から 発情後期にかけて角化している期間に観察される が発情後期の後半と発情間期には認められない.MCG
の特徴である内部の層板構造は低倍率の観 察では認めにくく，高倍率の観察でもMCG
の切 断面によっては内部の層板が常に認められるとは 限らなし、28)42) 更に腫上皮が角化しはじめる時期 と角化しなくなった時期のMCG
は内部に典型的 な層板が観察されないことが多い.本研究では内 部に層板を認めた場合にMCG
とみなしたので， 性周期中でMCG
が存在する範囲は実際より狭く なっていると思われる.産生された初期にMCG
の内部に層板が観察されないのはMCG
がゴルジ 装置でゴルジ小胞として作られた後で細胞周縁に 移動するにつれて内部に層板が形成されMCG
と して成熟するため9)43)ではなし、かと推測される.一 方，発情間期にみられる粘液細胞の粘液滴もコ守ル ジ装置で作られる44) このことは腫上皮細胞のゴ ルジ装置は性周期の異なる時期には粘液滴あるい はMCG
を産生することになる.発情間期から発 情前期へ移行する時期を境に，プロゲステロンの 血 中 濃 度 が 減 少 し エ ス ト ロ ゲ ン の 上 昇 が み ら れ12)39L これらのホルモンの影響によって腫上皮 細胞は粘液細胞への分化を止めて角化細胞へ分化 しはじめる.そしてゴノレジ装置も粘液滴の産生を やめてMCG
を産生するように機能を転換させる と考えられる.この時期は腫上皮細胞の内外の環 境は不安定で既に産生されたゴルジ小胞は粘液滴 またはMCG
としてそれぞれの形態的特徴を現わ すまで成熟することができず，未熟なあるいは中 間の形態に留まるのではなし、かと考えられる.同 様に発情後期の終りは腔上皮細胞が角化から粘液 イヒへ分化を転換する時期にあたり， この時期の細 胞内にみられる小胞または空胞は未熟なMCG
と 粘液滴が混在すると思われる.MCG
は細胞聞の接着，細胞表面の被覆，上皮の 透過性の障壁，細胞の剥離に関与するなど様々な 機能が推定されているト川制41)叫.MCG
の内容物 が均質でなく層板構造を示すことからその成分は 単一ではなく，従って複数の機能をもつことが推 測される.dd
系マウスの睦上皮のMCG
の典型的 な形態は腫上皮が最も強く角化している時期に最 も明瞭に現われ，数も多く，細胞間際中でも放出 された層板が顕著に認められた.角化細胞は完成 と同時に剥落する運命にあり，特にdd
系マウス の腔上皮は発情後期に急速にかつ多量に剥脱する が，この角化細胞の剥離にMCG
の層板が関与し ていることが推察される.dd
系マウスの発情期の腫上皮は完全に角化し た重層扇平上皮であり，皮膚などの他の角化上 皮砂川と同様の徴細形態を示した.しかし，一般に 角化上皮は基底細胞の増殖と表層からの細胞の脱 落が平衡し常に一定の厚さを保ちながら角化して いる.これに対してdd
系マウスの腫上皮は発情 間期には全く角化していない細胞から成り，やが て発情前期になると角化の諸段階を経て次第に厚 くなり角化した重層肩平上皮が形成されるが，完 成した角化上皮はそのまま保持されることはなく まもなく剥脱して失われ， この点他の角化上皮と の著しい差異を示す.げっ歯類の腫上皮のように 角化していない上皮が短期間に角化上皮になる角 化過程は一般の角化上皮では通常みられない.上 皮が未分化の状態から角化する過程は幼若マウ ス21聞や成熟個体問の卵巣除去後ホノレモン投与に よる腫上皮の角化，胎児の表皮の発生45)創傷治癒 過 程46)などで報告されている.エストロゲン投与
15)お よ び 器 官 培 養 に よ る 睦 上 皮 の 角 化32)ではMCG
は認められなかったが，マウスの皮膚の創 傷治癒過程46)ではMCG
が出現し，これらではい ずれも有練細胞，頼粒細胞，角化細胞が段階的に 分化する.ラット胎児の表皮の形成過程では細胞 内にトノフィラメントが形成され，MCG
ついでKG
が出現しMCG
には出現の初期から層板が認 められる45) 正常な性周期においてdd
系マウス の腫上皮が未角化の状態から角化する過程は表皮 の発生の場合と同様の経過を経るように思われ る.腫上皮のMCG
は発情前期の初期に有線細胞 内に認められるが，その以前には確認できなかっ た.しかし，発4情期においてもMCG
が頼粒細胞の 下層にある有腕細胞内に既に存在することや角化 が下層から上層へ細胞が移動するのに伴って進行 することから，MCG
は角化過程の初期にKG
よ り先に出現することは明らかであり，腫上皮の角 化ではMCG
を有する有東京細胞が分化し，その後 に頼粒細胞が分化すると考えられる.マウス胎児 の表皮の場合は比較的ゆっくりした経過で角化す るのでMCG
やKG
など小器官が分化していく状 態を順次観察できる.これに対してマウスの睦上 皮は1
日以内の極めて短期間に著しい細胞増殖と 急速な分化47)によって角化することと粘液化と角 化を交互に繰り返すことから，産生された初期のMCG
に層板構造を認めにくくMCG
の出現時期 を明確にできないばかりかその存在すら見落さ れ，これまでマウスやラットの腫上皮の角化過程 にMCG
が認められなかったので、はないかと思わ れる.しかし，著者ら48)によって，IVCS
マウスの 睦上皮にもMCG
が観察されたので、他系統のマウ スや他のげっ歯類の腫上皮においても角化する時 期にMCG
が出現するものと思われる. 結 語 正常な性周期におけるdd
系マウス腫上皮の角 化 過 程 と そ の 聞 に お け る membranecoating頼 粒(MCG)
を電子顕徴鏡で観察した.腫上皮は発 情間期では3-4
層の細胞から成りその表層は粘 液細胞で占められ全く角化していないが，発情前 期の初めになると中間層の細胞が増殖し上層へ移 動するにつれて形態的に変化して角化しはじめ る.下層の細胞は細胞間結合が発達し細胞質内に トノフィラメントが増加，MCG
が現われて有東京 細胞に分化する.有藤細胞の上層では小形で球形 のケラトヒアリン頼粒が形成されて頼粒細胞に分 化する.発情前期の半ばには頼粒細胞は小器官を 失ない細胞質がケラチンフィラメントに充たされ た角化細胞になり，角化した重層肩平上皮が形成 される.粘液細胞が剥離して発情期になると角化 層は腫腔面に裸出するとともに厚くなる.MCG
は内部に特有な層板構造を有する限界膜に囲まれ た頼粒で，性周期中で腫上皮が角化している期間 に認められる.充分に角化した腫上皮ではMCG
は下層の有隷細胞内に現われ，細胞が上層に移動 するにつれて腫腔側の細胞膜周縁に分布するよう になる.頼粒細胞ではMCG
は細胞膜と癒合して 内部の層板構造を細胞間際に放出し，放出された 層板構造はばらばらになって細胞間隙中に拡が り，角化細胞間で崩壊して認められなくなる.発 情後期の表層から細胞が次々に剥れ落ちて頼粒細 胞が腫腔面に裸出する時期では，残存する細胞にMCG
やKG
がまだ認められる.しかし，更に細胞 が剣離して有株細胞が表層に現われる時期になる とどの細胞にもMCG
は認められない.睦上皮は 正常な性周期において発情前期に角化するが，角 化した睦上皮の徴細構造およびその角化過程にみ られるMCG
の 動 態 は 他 の 角 化 上 皮 と 同 様 で あ る 文 献 1)Allen，
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Explanation of figures
Fig. 2 Diestrus. The vaginal epithelium consists of a basal (BO， an intermediate(IL) and a superficial mucous celllayer (ML). x500. L， vaginallumen.
Fig. 3a Early proestrus. The vaginal epithelium begins to keratinize. A granular CGO and a spinous (SO layer differentiate under the mucous cell layer (MO. Compare with Fig. 2. x500. BL， basallayer.
Fig. 3b Early proestrus. Electron micrograph showing keratinizing cells and upper mucous cells in the vaginal epithelium. Keratohyalin granules(t) appear in granular cells (GC) underlying mucous cells (MC) which contain mucous droplets (MD). Membrane coating granules(企)are found in the spinous CSC) and the granular cells. x 7.000. F， tonofilament; M， mitochogdrion; MCN， nuc1eus of mucous cell; rER， rough endoplasmic reticulum; SCN， nuc1eusof spinous cell.
Fig. 3c Early proestrus. High magnification of electron micrograph showing keratohyalin granules (KG) in a granular cell (GC). KG is spherical in shape， associated with numerous ribosomes and can be easily recognized by high electron density of the content.Membrane coating granules(ム)are observed in the spinous cell (SC). X 25.000. D， desmosome; F， tonofilament; IC， intercellular space; rER， rough endoplasmic reticulum.
Fig. 4 Mid.proestrus. A fully keratinized stratified squamous epithelium is located under the superficial mucous celllayer (MO. Itconsists of a basal (BO， a spinous (SO， a granular (GL) and a comified layer (CL). X500. Fig. 5 Mid-proestrus. Basal cells are connected with neighbouring cells by desmosomes (D) and interdigitations
(ID)， and with the basal lamina (BM，ム) by hemidesmosomes (t). x 8.400. F， tonofilament; G， Golgi apparatus; LD， lipid droplet; M， mitochondrion; N， nuc1eus; Nu， nuc1eolus.
Fig. 6a Mid-proestrus. The lower spinous cells are connected with adjoining cells by numerous desmosomes (D). Membrane coating granules
C
i
n circ1es) distribute di妊uselyin the cytoplasm. X 12.600. F， tonofilament ; G， Golgi apparatus; M， mitochondrion; N， nuc1eus; N u， nuc1eolusFig. 6bEstrus. High magnification electron micrograph showing junctions between spinous cells. Processes (marked by asteritics) of left spinous cell interdigitate to those of contiguous spinous cells. N umerous des -mosomes (D) and gap junctions (....) are found between adjoining cells. X 48.000.
片 桐
・
飯 沼 論 文 付 図
I
片 桐
・
飯 沼 論 文 付 図
I
I
I
-CJ
、
0'>
intercellular space;
*
shows MCG.Fig. 10a Estrus. The vaginal epithelium is a keratinized stratified squamous epitheiium. It consists of a thickened comified (CL)，a granular (GL)， a spinous (SL) and a basal layer (BL). x 500.
Fig. 10b Estrus. The cytoplasm of flattened comified cells (CC) are almost occupied by abundant keratin filaments and do not contain other organelles. x 7，000.
Fig. 10c Mid.proestrus. Discharged membrane coating granules (MCG， if)in the intercellular space between granular cells (GC) reveals a distinct lamellar pattem. The other MCGs in the intercellular space(1')and in the cytoplasm(*) are cut obliquely and therefore no lamellae are visible. X 84，000.
Fig. 10d Estrus. Lamellae (1')of membrane coating granules within the intercellular space between the granular and the comified cells. The cell membrane of the comified cell is thickened by a marginal band (ム).X84，000. Fig. lOe Estrus. Lamellae (*) of membrane coating granules within the intercellular space of comified cells (CC).ムshowsamarginal band. X 84，000目 Fig. 10f Estrus. In the upper comified layer， discharged lamellae(企)of membrane coating ganules within the intercellular space of comified cells (CC) are dissociated. The cell membranes of comified cells(ム)thicken. X 84，000. Fig. lla Early metestrus. Comified cells(↑) are sloughing off from the surface of vaginal epithelium. Granular cells are partially exposed to the luminal surface(企).x500. BL， basal layer; GL， granular layer; NL， neutrophilic leucocyte ; SL， spinous layer. Fig. llb Early metestrus. Electron micrograph showing comified cells (CC) still retained in the superficiallayer in Fig. l1a. A large number of neutrophilic leucocytes (NL) characterized by a lobulated nucleus is seen b巴tweenthe granular cells (GC).X 6，000.
Fig. 12a Early metestrus. The cells， located under3~4 cell layers from the supermost cells shown by an arrowhead in Fig. l1a， still contains keratohyalin granules (KG) and membrane coating granules(ム).x25，600 F， tonofilament; IC， intercellular space; M， mitochondrion; N， nucleus; rER， rough endoplasmic reticulum. Fig. 12b Early metestrus. Membrane coating granules (MCG，企)in the cell in Fig. 12a. Lamellar structure of
MCG is obscure. x50.000‘
Fig. 13a Late metestrus. X500. BL， basal layer; NL， neutrophilic leucocyte; SL， spinous layer. Fig. 13b Late metestrus. Superficial cells are provided with stubby microvilli (
