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管新生 関す 実 験的研究 有茎大 網 移植 け 浄化 抗炎 症 作用

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Academic year: 2021

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(1)

有茎 大網移植 浄 化 抗炎症作 用 管新 生 関す 実験 的研 究

金 沢 大 学 医学 部 外 科 学 第 講 座 (

:渡 辺 洋 字 数 授)

( 平 成

5

1

1 8 日

受 付)

胸 部 外 科 手術 後気 管 支 療 性膿 胸

縦 隔 炎治 療 ,

ま た

気管 支 形 成 術

肺 移 植 術

気 管 支 吻 合部縫 合

血 に よ る 不

良 肉 芽 発 生予 防, 感 染巣削 ヒ 抗 炎 症 作

用 や 血

管 新 生 機 能

有 茎 大網 片

多 用

さ れ て

.

しか し

,

大網機 能に つ い て

だ 明 ら か

さ れ

て い

.

こ でl 刺 激

し た

大網

か ら ど

よ う な

細 胞

遊 出

浄 化 炎 症作 用

発 揮 す

る か

,

ま た そ

時 大 網乳 斑

が ど

よ う

関係 す

る か

,

さ ら

大網

が ど

よ う

新 生

て い

く か な ど を

ら か に

目 的実 験 的研 究

.

な わ ち

.

N

e w

Z

e a

l

a n

d W hi

te

ギ5 0

, 有 茎 大網 片

容 器

隔 離

した

後 容

刺 激物 質

入 し

遊 出 す

細 胞

収 集 す

実 験

, 腹 腔 内 刺激 物 質

入 し

大網 乳斑

変 化

を み る

実 験

,

ま た

腹 腔 内 刺激 物 質

入 し た

後 大 網

管 造 影

変 化

観 察 す

実 験

,

そ れ

経 時 的

形 態 学 的 変 化

お よ び そ

磯 能 的

役 割 い て検 討

し た

. 刺激

し た

有 茎大 網 片

か ら

造 出

し た

細 胞 数

,

24

4 8

時 間

と し

増 加

, 以後 減 少

し た

. 細 胞 分 画 別

み る と

, 顆 粒 球

が 6

1 2

時 間

急 激増 加

, 大 食 細胞

や リ

増 加

し た

. 刺 激

し た

大網単 位 面 硬 あ

た り

め る 血

管 性 乳斑比 率

,

2 4

時 間

ま で

増 加

, 以 後減 少

し た が

,

管 性 乳 斑

, 時 間

増 加

し た

. 刺 激

し た

大 網

管性 乳斑 浅 層

い て

大食 細胞

全 観 察 期 間

じ て

も 多 く存 在

した が

, 経 時 的変 化

め ら れ な か

.

は1 2

時 間

か ら

増 加

し た

.

ま た 血

管 性乳 斑 深 層

い て

, 顆 粒

が 6

1 2

時 間

増 加

, 大食 細 胞

と リ

れ て

増 加

し た

.

管性 乳 動

い て

l 大 食細 胞

全 観 察 期 間

じ て

最 も 多く 存 在

した が

, 経 時 的変 化

め ら れ な か

. 顕 粒 球

わ め

な く

1

時 間経 過

増 加

し た

. 刺 激

した

大 網

管 造 影

で は

24

時 間胃 大 網 動静 脈沿

存 在 す

索 状月旨肪 鼠 織 内毛 細

胃 大網 動 静 脈

か ら

大 網 後 菓

分 岐 す

る 血

分枝

数 多く

み ら れ る よ う

な り

,

4 8

時 間

は さ ら

発 達

し た

分 枝

毛 細

管 網

め た

.

結 果

, 刺 激

し た

大網

か ら

進 出 す

細 胞

ほ 主 と し

管 性 乳 斑

か ら

供 給

さ れ

,

管 性 乳 斑

遊 出

し た

大 食 細胞

や リ

ン パ

わ れ

2

層 構 造

形成

し な が ら

成 長

,

ま た

,

管 性 乳 斑

遊 出

し た

大 食 細 胞

や リ

ン パ

大 網 腹 膜接 着 す

形 成

さ れ

, 感 染 巣浄化 抗 炎 症作

用 を

発 揮 す

る と

え た

.

ま た

, 刺 激

し た

大網

は 2 4

時 間

か ら

増 加

し て

,

毛 細

形 成 す

て 血

増 加

を は か り ∴

組織浄 化 作

用 や 血

管 新 生機 能

発 揮 す

る と

え た

.

K e

y

w or

d

s

p

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t

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10

g

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p

ha

g

e

胸 部 外 科手 術 後難 治 性 感 染症,

と く

術後 気 管 支 療 性 膿 胸

術 後 縦 隔炎

,

た ん

発 生す

る と

治療難渋

し た り

と が

, 患 者

転 帰

た ら

重 篤

合 併

.

胸 腔縦 隔

, 開 窓 循, 胸 郭 成 形術, 筋 肉充 填 術

な ど

治 療

な わ れ

た が

, 根 治 性

お よ び

愚 者 qu a

li

t y o

f lif

e

,

方 法 も 満 足

の で

は な

,

1 9 7 5

V i

r

k k

u

l

a

l )

下 葉切 除術 後 気 管 支療治療,

1 9 7 6

L

e e

2 )

術後縦 隔炎 有 茎大 網 片

用 し て

, 良好

結 果

報 告

以 来,

的 治癒

期 待

有 茎 大 網 移 植術

目 さ れ て

.

ま た

,

1 9 82

は Li

m a

気 管 支 形成 術

肺 移 植術

い て , 管 支 吻 合部縫 合

血 に よ る 不

良 肉芽 発 生予 防 手 段

と し て

有 茎大 網 片

実 験 的研 究

報 告

以 来, す ぐ

れ た

手 段

と し

臨 床 応 用

さ れ る よ

.

そ れ

以後, 浄 化 炎 症作

用 や 血

管 新 生 磯 能

有 茎 大網 片有用 性

数多

A b br evi a

t

io n s : P A S ,

p

e riodic a cid Schiff

臨 床 経 験

明 さ れ

て い

. こ の

よ う

臨床 的 研究

, 大網解 剖

大網 中乳 斑構 造

な ど

形 態学 的研 究

く か ら

な わ れ

.

し か し

, 有 茎 大 網 片

が ど

よ う

し て

浄 化 抗 炎症 作

用 や 血

管 新 生 機 能

発 揮

し て

る か な ど

機 能 面

か ら

検 討

.

こ で著 者

, 実 際刺激

し た

大網

か ら ど

細胞

造 出

浄 化 抗 炎 症 作

用 を

発揮

る か

,

ま た そ

時 大 網 乳斑

が ど

関 係 す

る か

,

さ ら

大網

が ど

新 生

て い

く か な どを 明 ら か

る 目

,

ギ を

研 究

.

な わ ち

, 有 茎 大 網 片

容 器隔 離

し た

後 容

刺 激 物 質

入 し

遊 出 す

細胞

収 集 す

実 験

, 腹 腔 内刺激 物 質

入 し

網 乳 斑変 化

を み る

実 験

,

ま た

腹 腔 内刺 激 物 質

し た

後 大網

管 造 影

行 な

変 化

観 察 す

実 験

作 製

,

そ れ

ぞ れ経 時 的

形 態学 的変 化

お よ び そ

機 能

役 割

検 討

した

.

(2)

有茎 大 網 移 植

浄化 抗 炎 症作

用 と 血

管新 生

対 象

お よ

び 方 法

. 大 網

お よ

び 乳

斑 の

般形 態

観 察

1

. 実 験 動物

体 重

2

.

5

k g

N

e w

Z

e a

l

a n

d W h i

te 雌 性

ギ ( 三

, 東 京)

2 羽 を 用

.

2

. 大網観 察

耳 介静 脈

か ら

ペ ソト パ ル ビ タ ル ナ ト

リ ウ

(

上 イ リ

, 米 国)

6 0

m g/

k

g

急 速

入 し て

深 麻 酔

屠 殺

, 手 術 台仰 臥位

固定

, 腹 部

中 切 開に て開 腹

し て

,

大網

お よ び

大 網 乳 斑 い て肉 眼 的観 察

し た

. 大 網

逝 出 細 胞

検 討

1

. 実験 動 物

体 重

2

.

4

2

.

7 k

g

N

e w

Z

e a

l

a n

d W hi

te 雌 性

ギ 6

を 用

.

2

. 実 験 系作 製

耳 介静 脈点 滴 路

確 保

,

パ ル ビ タ ナ ト リ

3 0

m g/

k

g

緩 徐

入 し

静 脈 内 全 身麻 酔

, 塩 酸

ヶ タ ミ(, 東 京)

1 0

m g/

h

r

持 続 点 滴 静 江

維 持

し た

補 液

は 5

% 乳酸

液 ( 大塚 製 乳 束 京)

5 血

/

k

g/

h

r

滴 静 江

し た

.

3 0

度 頭 高位

と し た

手 術 台

仰臥 位

固 定

, 腹 部

剃毛

した

. 腹 部

中 切 開

に て

開 腹

, 大網

露 出

し た

右 胃 大 網 動静 脈

胃 十指 腸 動 脈

か ら

分 岐 部 付 近

結 集 切 離

F i

g.

1

.

S

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l b

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):

S

, StO m a C

h

;

B

,

b

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e.

7 1

, 右胃 大 網 動 静脈

か ら

胃 壁 枚 数 本

結 染 切離

,

左胃 大 網 動 静 脈

温存

し た

有 茎 大網 片

作製

した

. 自作

隔 離 容 器

腹 腔 内

入 し

有 茎 大網 片

充 填

, 接 続

し た

採 取 用

ブ を

右 下腹 部

か ら

体 外

し て

固定

,

し た

( 図

1 )

.

ブ か ら

食 塩 水

1 0 0

m

l を

入 し

振 詮 後 採取

対照 (

0

時 間)

と した

. い て

O K ぺ32

( 中外 製 , 東 京

) 1 0 K E を

溶 解

し た

食 塩 水

1 0 0 血

入 し た

.

6

,

1 2

,

2 4

,

4 8

,

72

時 間 後大 網 浸 出液

1 0

m

l を

採 取

,

食 塩 水

1 0

m

l を

補 充

した

.

3

. 測 定

1

) 細 胞 数測定

採 取 液

1

m

l を

分離

,

イ ト

R

1 0 0 0

( 東 亜 医 用電

, 神 戸) に て細 胞 数

測 定

,

1 0 0

m

l

換 算

し て

総 細 胞

と した

.

2

) 細 胞 分 画測 定

採 取 液 中細 胞 分 画割 合

ト メ

F A C S

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B

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D i

c

ki

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I

m m u n o cy to metry

S

yste m s, カ リ

, 米 国) に て測定

し た

.

4

. 統 計学 的 検 討

られ た

成績

べ て平 均 値

±

標 準 偏 差 (sta n

d

a r

d

de v

i

at

o n,

S D

)

表 記

し た

. 平均 値

対 応

t 検 定

, 危険 率

が0

.

0 5

未満

統 計 学 的有 意 差 あ

り と

判定

した

.

. 大 網刺 激 時

乳 斑

形 態 学 的検 討

1

. 実 験 動物

体 重

2

.

4

2

.

7 k

g

N

e w

Z

e a

l

a n

d W hi

te 雌性

ギ3 6

.

2

. 実験 系作 製

塩 酸ケ タ ミ

2 5

m g/

k

g

筋 注

全 身麻 酔

右側 臥

と し

,

O K

4

3 2 1 0 K E を

溶 解

し た

食 塩 水

3 0 0

ml

左 F 腹

か ら

腹 腔 内

入 し

振 漁

し た

. 普通 飼料 自 由

に て 飼 育

,

6

,

1 2

,

2 4

,

4 8

,

7 2

時 間 後 , 後 述

ご と く

標 本

した

. 耳 介静 脈点 滴 路

確 保

, トパ ビ タ ル ナ

リ ウ

3 0

m g/

k

g

緩 衝

入 し

静脈 内

身 麻 酔

. 動物

手術 台仰 臥 位

固 定

腹部

剃 毛

,

iE

中 切 に て開 腹

し た

. ト パ ビ タ ナ ト リ ウ

6 0

mg/

k

g

急 速

入 し

深 麻 酔に て屠殺

, 左 右 大網 動 静 脈

棍 部,

ま た

同胃 壁 枝

胃 壁 近

結 紫 切離

, 大網

切 除

し た

3

. 標 本作 製

1

) 伸 展標 本作製

切 除

し た

大網

大 型

イ ド グ

(

7

6

×

5

2m m

) (

松 浪 硝

, 大 阪

) 上

伸 展

,

乾燥

し た

.

い て

50

希 釈

し た ギ

(

和光 純薬

, 大 阪

)

1

時 間 染色

,

2

3

間水 洗

し た

, 冷 風 乾燥

し た

.

2

) 切 片標 本作製

切除

し た

大網

か ら 血

管 性

お よ び

管性 乳 斑

,

1 0

% 中 性緩 衝 液 ( 武 藤 化学 薬 品, 東 京

)

入 し

,

6

時 間 固定

した

, い で

ご と

く 脱 丸

,

m 連 続 切 片

作 製

, pe r

i

o

di

c a c

id S

c

hiff

(

P A S

) 染 色

.

4

. 標 本観 察

1

) 伸 展標 本観察

刺激

した

大網単 位面 横 あ

た り

め る 血

管性

お よ び

性 乳 斑比 率変 化

め る た め

, 各 例

3

(3)

, 実 体 顕 微 鏡

て 6

拡 大

し た

写真

撮 影

し た

.

, 多 重露 出に て

方 形枠 (

1 5

×

1 5

m l m)

同時 撮 影

, 真枠 内紙 重 量

と 血

管性

ま た

管 性 乳斑

重 量

を 上 皿

天秤

L W

2 2 0 0

( 科 学,東 京)

測 定

, 大 網

単 位 面 積 あ

た り

め る

乳 斑比率 (

%

)

め た

.

2

) 切 片標 本観 察

i

.

管性 乳 斑 構 成 細 胞比 率

管 性 乳 動

, 毛 細

表 層 近 く

, 毛細

深 部構成 細 胞比 率

大 きく 異

な る

と か ら

,

管 性 乳 斑

浅 膚

深層

2

分 け,

そ れ

無 作 為

4

, 光 学 顕 微 鏡

に て 40 0

8 0 0

拡 大

, 大 食細 胞 (

P A S

性) 顆粒 球

細 胞 数

計 測

, 各 層 別 構 成 細 胞比 率

め た

.

ii

.

管 性 乳 斑 構 成 細 胞比 率

管性 乳 斑

, 無 作 為

4

視 野

, 前述

管 性 乳 斑

同様

に そ

構 成 細 胞比 率

め た

.

5

. 統計 学 的 検 討

ら れ た

成 蹟

べ て平 均値

標 準偏 差に て表 記

し た

. 平 均 検 定

に は 1 元

配 置 分 散分 析 法

を 用

, 危 険率

が0

.

05

統 計 学 的有意 差 あ

り と

判定

した

.

. 大 網 刺 激 時

の 血

管 新 生

検討

1

. 実 験 動物

体 重

2

.

5

2

.

6 k

g

N

e w

Z

e a

l

a n

d W hi

te 雌 性

ギ 6 羽

.

2

. 実験 系作 製

塩 酸ケ タ ミ

25

m g/

k

g

茄 注

身 麻 酔

右側 臥

と し

,

O K

4 3 2 1 0 K E を

溶 解

し た

食 塩 水

3 0 0

m

l を

左 下 腹

ら 腹腔 内

入 し

振 返

した

, 普 通飼 料 自 由 水に て

飼 育

,

6

,

1 2

,

2 4

,

4 8

,

72

時 間後, 後 述

ご と

く 実 験

. 耳 介静 脈点 滴 路

確 保

,

パ ル

ル ナ

ト リ ウ

3 0

m g/

k

g

緩 徐

入 し て

静 脈 内 全 身麻 酔

. 動物

手 術 台仰 臥位固定

, 腹部

剃 毛

し て

,

中 切 に て開腹

し た

. 抗 狭 間剤

と し

ト リ ウ

(

ノ ル

A

/

S

,

,

)

2 0 0

単 位/

k

g

静 江

し た

, 腹 部 大 動 脈

露 出

して

, 腹 腔 動脈 分 岐 部

お よ び

腹 腔動 脈 板 部

に 血

プ を か

. 腹腔 動 脈

か ら

岐す

総 肝 動脈

左 胃 動 脈

露 出

し て

結 熱

し た

. 左 胃 大 網 動 静 胃 壁 枝

胃壁 近 く

総 数 切 離

し た

,

5 F

r

ⅠV H 用

7 6 5 4 3 2 1 0

S U } 0

q

Z (

0 6 1 2 2 4 4 8 7 2 (

h

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F i

g.

2

.

C h

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m u

l

at

i

o n.

T h

e

d

ata r epr e s e nt m e a n

士S D

.

(

, 東 京)

腹 部 大 動 脈

か ら

腹腔 動 脈

経 由

し て

左 胃 大網 動脈

入 し て

固 定

し た

. ト パ ル ビ ル ナ ト

リ ウ

6 0

m g/

k

g

急 速

入 し

深 麻 酔に て屠 殺

した

. 腹 部 大動 脈

結 集

, 留 置

した

カ テ テ ル

か ら

ト リ ウ

2 0 0

単 位

え た

食 塩 水

2 0

m

l を

入 し た

,

6 0

W/v % 調 節

し た

プ P

(

イ ゲ

, 大 阪) 懸 濁 液

6 0

%

(

グ A G

,

,

ドイ

)

を 2

3 で

混 合

した

造 影 剤

を 2 0

か け て

緩 尉

入 した

. 左 胃 大 網 動 静脈

脾 臓

か ら

末 梢に て , 右 胃 大 網 動 静 脈

板 部

切 離

, 大 網

切 除

し た

.

3

.

管 造 影 写 真撮 影

切 除

し た

大 網

伸 展

,

線 撮 影 装 置

M G U

01

( 東 芝, 京) に て

O

m at

T L

(

,

, 米 国)

線撮 影 (

2 5 k V

,

1 6 0

m

A

s,

M

o ィ ル 使用)

し た

.

S

U

0

q

Z

2

.

(

X l

S

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Z

2

0 6 1 2

2 4 4

8 7 2 (

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4 8 7 2 (

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T h

e

d

ata r epr e s e nt m e a n

S D

.

(4)

有 茎 大網 移 植

浄 化 抗 炎症 作

用 と 血

管新 生

4

.

管 造影 写真観 察

2

.

3

拡 大

し た

写 真

撮 影

, 経 時 的形 態 学 的 変 化

した

.

. 大 網

お よ

び乳 斑

般 的 形 態

観 察

大 網

, 大宅 側

か ら は じ ま り

, 下行

した

後 反 転

し て 上

して

膵 臓 腹 側 面付 着

て い

. 脆 弱

裂 け

た め

, 慎重伸 展

観 察

し た

. 胃 大 蛮付 着 縁

膵 臓付 着 縁

の ほぼ 中 央胃 大 網 動 静 脈

横 走

お り

, 左 側

腹 腔 動 脈

か ら

分 れ

左 胃 動 脈

か ら

分 岐

∴脾 動 静 脈

.

ま た

右 側

胃 十指 腸 動 静 脈分枝

と な

て い

. 胃 大網 動 静 脈

7 3

と し て

な る た め

, 便 宜

, 腹 側

前 葉, 背 側

後 菓

し た

. 切 除

した

大 網前 葉

後 菓

広 げ

作 製

し た

伸 展 標 本

観察 す

る と

, 胃 大 網動 静脈沿索状存 在す

脂 肪 組織辺綾 部

お よ び

胃 大 網動 静脈

か ら

分 岐

し て

る 血

先 端 部

に リ

組 織様結 節 状

管 性 乳斑

多 数 並

ん で お り

, 胃 大網 動 静腋

か ら

内 部

入 し て

毛 細

管網

形成

て い

.

ま た

. 胃 大 網 動 静 脈

か ら

れ た

大網 腹 膜

斑 状

管性 乳 斑

散在

お り

,

前 葉べ て 多く

み ら れ た

.

. 大 網

遠 出細 胞

検 討

1

. 細 胞 数

刺 激

し た

有 茎 大 網片

か ら

遊 出

し た

細 胞 数 (×

1 0

T , 以 下 同

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