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犬の去勢が体組成に及ぼす影響に関する研究

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(1)

犬の去勢が体組成に及ぼす影響に関する研究

日本大学大学院獣医学研究科獣医学専攻 博士課程

小林豊和

(2)

< 目次 >

緒言

p. 1

研究

1

重水希釈法を用いた犬の去勢による体脂肪ならびに体組成の比較に

関する研究

p. 5

背景

p. 6

材料および方法

p. 7

結果

p.10

考察

p.12

小括

p.15

研究

2 CT

と体脂肪測定ソフトを用いた犬の去勢による体組成変化の比較に

関する研究

p.23

背景

p.24

材料および方法

p.26

結果

p.29

考察

p.30

小括

p.34

研究

3

犬の去勢が脂質代謝関連物質に及ぼす影響に関する研究

p.46

背景

p.47

材料および方法

p.50

結果

p.53

考察

p.56

小括

p.58

総括

p.71

謝辞

p.72

引用文献

p.73

(3)

緒 言

肥 満 は 身 体 へ の 脂 肪 組 織 の 過 剰 な 蓄 積 と 定 義 さ れ 、 犬 の 一 般 的 な 栄 養 異 常 の 1 つ と さ れ て い る

[1]

。 人 に お い て は , 肥 満 に よ る 様 々 な 健 康 障 害 が 数 多 く 報 告 さ れ て い る 。 特 に 、 Ⅱ 型 糖 尿 病 、 高 血 圧 症 、 高 脂 血 症 、 心 疾 患 の 発 生 と 密 接 に 関 連 す る た め 、 肥 満 は 健 康 管 理 上 で 最 も 重 要 な 危 険 因 子 の 1 つ で あ る と 認 識 さ れ て い る

[2, 3]

。犬 や 猫 に お い て も 肥 満 に よ る 健 康 障 害 は 、 骨 関 節 炎 、 呼 吸 器 異 常 、 グ ル コ ー ス 不 耐 性 と 糖 尿 病 、 高 血 圧 症 、 難 産 、 心 臓 機 能 不 耐 性 、 腫 瘍 の 発 生 率 の 増 加 、 麻 酔 リ ス ク の 増 加 な ど が 指 摘 さ れ て い る

[1, 4]

人 と 同 様 に 犬 お よ び 猫 の 肥 満 も 、 摂 取 カ ロ リ ー が 消 費 カ ロ リ ー を 上 回

る こ と に よ り 発 症 す る と 一 般 的 に は 認 識 さ れ て い る 。 肥 満 状 態 の 犬 と 猫

で は 、 寿 命 短 縮 と 代 謝 性 疾 患 が 高 率 に 発 生 す る と い わ れ て い る

[5]

。 イ ギ

リ ス で 実 施 さ れ た 最 も 規 模 の 大 き な 臨 床 研 究 で は 、

11

ヶ 所 の 獣 医 診 療 施

設 の

8,268

頭 の 犬 の う ち 、

2.9%

は 過 度 の 肥 満 、

21.4

% は 肥 満 、 す な わ ち

24%

に 体 重 の 超 過 お よ び 外 見 的 に 肥 満 と 判 断 さ れ た 個 体 が 存 在 し た と 報

告 さ れ て い る

[6]

。ま た 、米 国 の 大 規 模 な 臨 床 研 究 で は 、60 ヶ 所 の 動 物 病

院 か ら 集 め た 約

23,000

頭 の 犬 の デ ー タ う ち 、

25%

に 体 重 の 超 過 ま た は 外

見 的 に 肥 満 で あ る と 判 断 さ れ た 個 体 が 存 在 し た

[7]

。 さ ら に 、 猫 に お い て

も 、 前 述 の イ ギ リ ス に お け る 臨 床 研 究 で は 、 獣 医 師 の も と に 来 院 し た

2,000

10,000

頭 の う ち 、

25%

が 体 重 過 剰 か 肥 満 で あ っ た と 報 告 さ れ て い

[8]

。 こ の よ う に 、 小 動 物 開 業 獣 医 師 の も と に 来 院 す る 犬 や 猫 の 約

1/4

(4)

2

こ る こ と が 指 摘 さ れ て い る

[7, 9]

人 の 肥 満 は 、 カ ロ リ ー の 過 剰 摂 取 、 運 動 不 足 、 代 謝 性 疾 患 の 二 次 的 作 用 が 主 な 原 因 で 発 症 す る 。犬 や 猫 の 場 合 、こ れ ら の 原 因 に 加 え て 、去 勢 ・ 避 妊 に よ る 性 ホ ル モ ン 濃 度 の 変 化 が 肥 満 の 発 症 要 因 と な る こ と が 知 ら れ て い る

[2, 10]

。 小 動 物 臨 床 の 分 野 に お い て 去 勢 ・ 避 妊 を 受 け る 動 物 の 割 合 は 、 世 界 的 に 増 加 傾 向 に あ る

[11]

。 日 本 の 内 閣 府 の 統 計 で は 、

2012

年 現 在 、日 本 で 実 施 さ れ て い る 去 勢・避 妊 は 全 飼 育 頭 数 の 約

48%

に 上 る

[12]

。 主 な 去 勢 ・ 避 妊 の 実 施 の 理 由 と し て は 、 望 ま な い 繁 殖 や 、 性 ホ ル モ ン に 起 因 す る 疾 患 の 回 避 、 生 殖 活 動 に 伴 う 様 々 な 問 題 行 動 を 回 避 す る こ と な ど が 挙 げ ら れ て い る

[11]

。近 年 、問 題 行 動 回 避 の た め に は 去 勢 ・避 妊 の 時 期 は 性 ホ ル モ ン に 暴 露 さ れ る 前 が 良 い と さ れ 、

6

9

ヶ 月 齢 で 手 術 を す る ケ ー ス が 増 加 し て い る

[11]

Edney

等 は 、 去 勢 ・ 避 妊 し た 犬 の 肥 満 発 生 率 は 2 倍 以 上 に 上 昇 す る と 報 告 し て い る

[6]

。 術 後 に 容 易 に 肥 満 に な る 要 因 と し て 、

Jeusette

[13]

は 、 雌 の ビ ー グ ル

4

頭 を 用 い た 研 究 で 、 卵 巣 摘 出 後 の エ ネ ル ギ ー 代 謝 量 は 術 前 と 比 較 し て 、 約

30%

減 少 す る こ と を 挙 げ て い る 。

こ れ ら の 先 行 研 究 が 示 し て い る よ う に 、 獣 医 領 域 に お け る 去 勢 ・ 避 妊

に 関 連 す る 肥 満 研 究 で は 主 に 体 重 変 化 の み を モ ニ タ ー し て お り 、 体 組 成

変 化 に 着 目 し た 研 究 は 少 な い

[10, 14]

。一 方 、人 で は 予 防 医 療 の 見 地 か ら 、

肥 満 は 重 要 な 研 究 課 題 の 一 つ で あ り 、 そ の 内 容 は 体 重 の 増 加 で は な く 体

脂 肪 量 の 増 加 に 着 目 し た 報 告 が 多 い 。な ぜ な ら 体 脂 肪 量 の 変 化 に よ っ て 、

脂 肪 細 胞 か ら 分 泌 さ れ る ホ ル モ ン や サ イ ト カ イ ン な ど の 分 泌 量 が 変 化 す

る か ら で あ る

[15]

。 こ れ ら の 脂 肪 細 胞 由 来 伝 達 物 質 の 分 泌 量 の 変 化 が 、

人 で の 研 究 に お い て 様 々 な 疾 病 の 発 症 と 深 い か か わ り を 持 つ こ と が 知 ら

れ て い る

[16]

。 元 来 ,「 太 る 」 こ と が 原 因 で 引 き 起 こ さ れ る と さ れ て い た

(5)

疾 病 に も 、 こ れ ら の 脂 肪 細 胞 由 来 伝 達 物 質 の 分 泌 量 の 変 化 が 原 因 で 発 症 す る 疾 病 が あ る こ と も 明 ら か に さ れ て い る

[17, 18]

( 図

1

)。

こ の よ う な 背 景 か ら 、 本 研 究 で は 犬 の 去 勢 が 体 脂 肪 量 お よ び 体 組 成 の

変 化 に 及 ぼ す 影 響 に つ い て 研 究 し た 。 更 に 、 去 勢 に よ っ て 犬 の 身 体 に 悪

影 響 が 生 じ る の で あ れ ば 、そ の 影 響 を 最 小 限 に 抑 え る こ と を 目 的 と し て 、

去 勢 を 実 施 す る 時 期 に つ い て も 検 討 し た 。

(6)

1.

脂肪細胞由来伝達物質

Ob esity, D ia b ets, an d A d ren al D iso rd ers. Gra ves, T. K . 2 0 1 0   Revisio n

Lep tin Co m p rem en t Fa cters

A d ip sin M IF, M CP-1

R esistin IL-6 + sR IL-1 , IL-1 0 , IL-1 8

TN Fα + sR

PA I-1

H ap to g lo b in , SA A

Tissu e Fa cto r Stero id s

TGFβ A d ip o n ectin

N GF A SP

N EFA

A n g io ten sin o g en

IGF-1

VEGF PG

Fat

(7)

研究 1

重水希釈法を用いた犬の去勢による体脂肪ならびに

体組成の比較に関する研究

(8)

背 景

先 行 研 究 が 明 ら か に し て い る よ う に 、 犬 や 猫 で は 去 勢 後 、 体 重 が 増 加 す る こ と が 知 ら れ て い る

[6, 7, 8]

。し か し 、体 脂 肪 量 や 体 組 成 に 着 目 し た 研 究 は 、獣 医 領 域 で は 少 な い

[10, 14]

。体 脂 肪 量 な ら び に 体 組 成 の 変 化 に 関 す る 研 究 は 、 予 防 医 学 の 見 地 か ら 、 今 後 獣 医 領 域 で も 重 要 視 さ れ る べ き 課 題 の 一 つ で あ る と 推 測 さ れ る 。

ま た 、 多 く の 獣 医 師 が 犬 に 去 勢 を 実 施 し て い る の が 現 状 で あ る が 、 も

し 去 勢 に よ っ て 犬 の 身 体 に 好 ま し く な い 影 響 が 生 じ る の で あ れ ば 、 そ の

影 響 を 最 小 限 に す べ き で あ る と 考 え る 。 そ こ で 、 本 研 究 で は 未 性 成 熟 期

お よ び 性 成 熟 期 の 各 時 期 に お け る 去 勢 に よ る 体 脂 肪 量 お よ び 体 組 成 の 変

化 を 、 術 後

1

年 間 に わ た り 測 定 し , 検 討 し た 。 体 組 成 の 測 定 に は 、

Son

等 の 原 理 を 応 用 し た 重 水 希 釈 法 を 用 い た

[19, 20, 21]

(9)

材 料 お よ び 方 法

供 試 犬

本 実 験 に は 一 般 家 庭 で 飼 育 さ れ 、 飼 い 主 が 去 勢 手 術 を 希 望 し た 雄 犬

13

頭 を 用 い た 。 供 試 犬 の プ ロ フ ィ ー ル を 表

1-1

に 示 し た 。 す べ て の 供 試 犬 は 一 般 身 体 検 査 、血 液 生 化 学 検 査 お よ び

CBC

検 査 に お い て 異 常 を 認 め な か っ た 。 供 試 犬 を 去 勢 の 実 施 時 期 に よ っ て 未 性 成 熟 群 ( 生 後

5

ヶ 月 齢 、

n=5

) と 性 成 熟 群 ( 生 後

1

歳 齢 、

n=8

) の 二 群 に 分 け 、 そ れ ぞ れ 去 勢 を 実 施 し た 。 体 重 お よ び 体 脂 肪 率 は 、 去 勢 直 前 お よ び そ の

1

3

6

12

ヶ 月 後 に 測 定 し た 。

給 餌 方 法

未 性 成 熟 群 に は 生 後

1

歳 齢 ま で は サ イ エ ン ス ダ イ エ ッ ト パ ピ ー

384kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ・コ ル ゲ ー ト ㈱ 、東 京 )、ま た は ア イ ム ス 子

犬 用(

375kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、神 戸 )の ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し

た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 要 求 量 を (

RER=70BW3 / 4

) を 求

め 、 月 齢 に よ っ て 推 奨 さ れ て い る 一 日 当 た り エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

~6

ヶ 月

齢 :

3.2RER

6~12

ヶ 月 齢 :

2.4RER

) を 算 出 し て 決 定 し た 。 生 後

1

歳 齢

以 降 は サ イ エ ン ス ダ イ エ ッ ト ア ダ ル ト (

377kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ ・

コ ル ゲ ー ト ㈱ 、 東 京 )、 ま た は ア イ ム ス 成 犬 用 (

363kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、 神 戸 ) ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時

エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

RER=70BW3 / 4

) を 求 め 、 運 動 量 や 生 活 環 境 に よ っ て

(10)

8

377kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ・コ ル ゲ ー ト ㈱ 、東 京 )、ま た は ア イ ム ス 成 犬 用(

363kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、神 戸 )ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

RER=70BW3 / 4

) を 求 め 、 運 動 量 や 生 活 環 境 に よ っ て 一 日 当 た り エ ネ ル ギ ー 要 求 量(

1.6~2.0RER

)を 算 出 し 、 決 定 し た 。 試 験 期 間 中 は 、 給 与 量 を 一 定 に 保 っ た ( 表

1-2

)。

去 勢

麻 酔 前 の 準 備 と し て 橈 側 皮 静 脈 に

22~24G

留 置 針 に て カ テ ー テ ル を 設 置 し 、シ ュ ア プ ラ グ( テ ル モ ㈱ 、東 京 )を 接 続 し た 。麻 酔 前 投 薬 と し て 、 硫 酸 ア ト ロ ピ ン (

0.025mg/kg

) を 背 側 頚 部 に 皮 下 投 与 し た 後 、 塩 酸 ミ タ ゾ ラ ム(

0.1~0.2mg/kg

)お よ び 酒 石 酸 ブ ト ル フ ァ ノ ー ル(

0.1~0.2mg/kg

) を 静 脈 内 (

IV

) に 投 与 し た 。 次 い で 、 プ ロ ポ フ ォ ー ル (

4mg/kg

IV

) に よ る 麻 酔 導 入 を 行 っ た 後 、気 管 内 チ ュ ー ブ を 挿 管 し 、イ ソ フ ル ラ ン(

1.5%

) と 酸 素 (

2

/min

) の 吸 入 に よ り 麻 酔 を 維 持 し た 。 麻 酔 中 の 呼 吸 管 理 は 、 動 物 用 自 動 呼 吸 器 (

compos

β

EV

、 ㈱ メ ト ラ ン 、 川 口 ) を 用 い た 。 麻 酔 後 、 陰 嚢 上 部 を 切 皮 し 睾 丸 を 摘 出 す る 術 式 で 、 去 勢 を 実 施 し た 。

体 脂 肪 測 定

体 脂 肪 率 お よ び 体 脂 肪 量 は 重 水 希 釈 法 に よ っ て 測 定 し た

[19, 20, 21]

重 水 (

D2O

) は 脂 肪 以 外 の 組 織 に 均 一 に 分 布 す る 非 放 射 性 同 位 元 素 で あ

り 、体 内 で 代 謝 さ れ ず 無 害 で 測 定 し や す い た め 、標 識 物 質( ト レ ー サ ー )

と し て 適 し て い る 。 先 ず 血 中 に 自 然 に 存 在 し て い る 重 水 量 を 測 定 す る た

め に 、 橈 側 皮 静 脈 ま た は 頚 静 脈 よ り 採 血 し 、 血 清 を 分 離 後 、 冷 凍 保 存 し

た 。 そ の 後 、 重 水 (

D2O

0.2g/kg

) を 背 側 頚 部 に 皮 下 投 与 し た 。 重 水 を

投 与 し た 2 時 間 後 に 再 度 採 血 し て 、 血 清 の 分 離 後 、 冷 凍 保 存 を 行 っ た 。

(11)

重 水 濃 度 の 測 定 に は 質 量 分 析 計 (

20-22 Isotope Ratio Mass Spectrometer

SerCon LTD

Cheshire

) を 用 い た 。 測 定 は

Son

等 の 方 法 に 準 じ て 行 っ た

[19, 20]

。測 定 さ れ た 血 清 重 水 濃 度 と 体 重 か ら 、次 の 計 算 式 に よ り 体 脂 肪 率 お よ び 体 脂 肪 量 を 算 出 し た 。

体 水 分 量

kg

= 体 重 ×

0.2 /

血 清 重 水 濃 度

%

×

10

除 脂 肪 量

kg=

体 水 分 量

/ 0.732

体 脂 肪 率

%=

( 体 重 − 除 脂 肪 量 ) ×

100 /

体 重 体 脂 肪 量

kg=

体 重 × 体 脂 肪 率

テ ス ト ス テ ロ ン の 測 定

血 中 テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 、

EIA

法 で 測 定 し た 。 測 定 は す べ て の 個 体 に お い て 、 去 勢 手 術 直 前 、 手 術

1

週 間 目 、 2 週 間 目 、

4

週 間 目 の そ れ ぞ れ の 時 期 に 橈 側 皮 静 脈 ま た は 頚 静 脈 よ り 採 血 し て 実 施 し た 。

本 研 究 の 統 計 処 理 に は 、

Student’s t-test

を 用 い て 行 い 、

p

0.05

を 統

計 的 に 有 意 差 あ り と し た 。

(12)

結 果

去 勢 に 伴 う 血 中 テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 の 変 化

手 術 直 前 の テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 、 未 性 成 熟 群 で は

1.07

±

0.57ng/ml

で あ っ た が 、 性 成 熟 群 は

5.74

±

1.09ng/ml

で 有 意 に 高 値 を 示 し た (

p

0.01

)。 手 術 後

1

週 間 目 の 未 性 成 熟 群 の テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 、

0.32

±

0.07ng/ml

ま で 減 少 し , そ の 後 も 同 様 の レ ベ ル を 維 持 し た 。 一 方 、 性 成 熟 群 の テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 、 同 様 に

0.87

±

0.29ng/ml

ま で 減 少 し 、 そ の 後 も 同 様 の レ ベ ル を 維 持 し た 。 両 群 の う ち 、 性 成 熟 群 の テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 、 手 術 直 前 と 手 術 後 1 週 間 目 の 間 に 有 意 な 減 少 を 認 め た (

p

0.01

)( 図

1-1

)。

去 勢 に 伴 う 体 重 、 体 脂 肪 量 、 除 脂 肪 量 の 変 化

未 性 成 熟 群 は 、 成 長 に 応 じ て 体 重 の 増 加 が 認 め ら れ た 。 体 重 の 平 均 値 は 去 勢 手 術 時 に は

7.5

±

2.5kg

で あ っ た が 、手 術

6

ヶ 月 目 に は

11.1

±

3.1kg

、 手 術

1

年 目 に は

11.6

±

3.6kg

に そ れ ぞ れ 増 加 し た ( 図

1-2

)。 去 勢 手 術

6

ヶ 月 目 の 除 脂 肪 量 と 体 重 は 、去 勢 手 術 時 を

1

と す る 相 対 値 で 比 較 す る と 、 そ れ ぞ れ

1.36

1.53

に 増 加 し て い た 。 ま た 手 術

1

年 目 に は 、 そ れ ぞ れ

1.44

1.59

で 、手 術

6

ヶ 月 目 と 変 化 は な か っ た( 図

1-3

)。そ の 一 方 で 、 体 脂 肪 量 は 、 体 重 、 除 脂 肪 量 の 増 加 に 比 べ て 、 著 し く 増 加 が み ら れ た 。 手 術

6

ヶ 月 目 の 体 脂 肪 量 の 相 対 値 は

2.11

1

年 目 は

2.12

に 上 昇 し た( 図

1-3

)。 ま た 、 体 脂 肪 率 は 手 術 時 の 平 均 値 が

22.7%

で あ っ た の に 対 し 、 手 術

6

ヶ 月 目 に は

30.3%

に 増 加 し た ( 図

1-2

)。

性 成 熟 群 で は 、食 事 の 給 与 量 を 手 術 後 か ら 一 定 に 保 っ た と こ ろ 、手 術

1

年 目 ま で 体 重 お よ び 除 脂 肪 量 に 大 き な 変 動 は 認 め ら れ な か っ た 。 体 重 の

(13)

平 均 値 は 、 去 勢 手 術 時 は

14.0

±

9.1kg

で あ っ た が 、 手 術

1

年 目 は

15.5

±

9.5kg

で あ っ た ( 図

1-4

)。 体 重 お よ び 除 脂 肪 量 の 手 術

1

年 目 の 相 対 比 は

そ れ ぞ れ

1.12

1.02

で あ っ た 。 一 方 、 体 脂 肪 量 の 手 術

1

年 目 の 相 対 比

1.53

で あ っ た( 図

1-5

)。体 脂 肪 率 は 去 勢 手 術 時 の 平 均 値 が

20.6%

で あ

っ た の に 対 し 、手 術

1

年 目 に は

27.7%

に 上 昇 し た

(

1-4)

。去 勢 前 後 の 体

脂 肪 率 の 上 昇 に は 、 有 意 差 が 認 め ら れ た (

p

0.01

)。

(14)

考 察

近 年 、 人 に お い て 脂 肪 細 胞 か ら 分 泌 さ れ る さ ま ざ ま な メ デ ィ エ ー タ ー が 疾 病 と 深 い か か わ り を 持 つ こ と が 明 ら か に な り 、 さ ら に そ れ ら の 分 泌 が 体 脂 肪 量 の 増 減 、 つ ま り 肥 満 や 痩 せ に 伴 っ て 変 化 す る こ と が 明 ら か に な っ て き て い る

[15, 16, 17, 18]

。 こ の こ と は 、 体 脂 肪 量 の 変 化 を 知 る こ と が 、 予 防 医 学 上 極 め て 重 要 で あ る こ と を 意 味 し て い る 。 肥 満 の 原 因 は 基 本 的 に は 人 と 犬 で 同 じ で あ る が 、 犬 で は 去 勢 や 避 妊 と い っ た 特 有 の 原 因 が そ れ ら に 加 わ る 。 そ こ で 本 研 究 で は 、 性 成 熟 状 態 の 異 な る 犬 を 去 勢 し 、 体 組 成 な ら び に 体 脂 肪 量 の 変 化 を 検 討 し た 。 こ れ ま で に 、 去 勢 後 の 体 重 増 加 に 関 す る 報 告 は い く つ か 存 在 す る が 、 体 脂 肪 量 変 化 に 関 す る 報 告 は ほ と ん ど な い

[10, 14]

。人 の 医 療 で は 、体 脂 肪 の 測 定 に は い く つ か の 方 法 が 用 い ら れ て い る 。 本 研 究 に お い て 採 用 し た 重 水 希 釈 法 は 、 二 重 エ ネ ル ギ ー

X

線 吸 収 分 析 法(

DEXA

)と な ら び 、体 脂 肪 量 測 定 の 標 準 法 と し て 知 ら れ て い る

[21]

。重 水 希 釈 法 の 犬 で の 使 用 例 は 少 な い が 、

Ishioka

[22]

は こ の 方 法 に よ る 犬 の 体 脂 肪 量 測 定 に つ い て 報 告 し て い る 。 こ の こ と は 、 犬 に お い て も 重 水 希 釈 法 に よ る 体 脂 肪 量 測 定 が 有 効 で あ る こ と を 示 し て い る 。

人 に お け る 研 究 で は 、 性 腺 機 能 低 下 症 の 男 性 で は 体 脂 肪 の 有 意 な 増 加

が み ら れ 、 そ の 症 状 は テ ス ト ス テ ロ ン の 投 与 に よ っ て 減 少 す る こ と が 報

告 さ れ て い る

[23]

Mauras

[24]

は 、 ゴ ナ ド ト ロ ピ ン 放 出 ホ ル モ ン ア ナ

ロ グ の 投 与 に よ っ て 若 齢 健 常 成 人 の 血 中 テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 を 低 下 さ せ 、

体 脂 肪 率 の 上 昇 と 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 消 費 量 の 低 下 を 引 き 起 こ す こ と を 証

明 し た 。 獣 医 学 領 域 で は 同 様 の 研 究 は 見 当 た ら な い が 、 本 研 究 に お い て

性 成 熟 前 ( 生 後

5

ヶ 月 齢 ) に 去 勢 を 実 施 し た 群 で は 、 生 後

1

歳 齢 の 体 脂

(15)

肪 率 が 平 均

30.3%

で あ っ た 。 そ の 一 方 で 、 性 成 熟 群 の 去 勢 直 前 の 体 脂 肪 率 は 平 均

20.6%

で あ っ た 。 よ っ て 生 後

1

歳 齢 時 の 体 脂 肪 率 は 、 未 性 成 熟 群 が 性 成 熟 群 よ り も 統 計 的 に 有 意 に 高 値 を 示 し た (

p

0.01

)。 こ の こ と か ら 、 犬 に お い て も 雄 性 ホ ル モ ン の 影 響 に よ り 、 体 脂 肪 の 蓄 積 す る 量 が 人 と 同 様 に 変 化 す る こ と が 推 察 さ れ た 。

テ ス ト ス テ ロ ン は 男 性 に お い て 、 体 脂 肪 を 減 ら し 基 礎 代 謝 を 高 め る 作 用 を 有 す る と 推 測 さ れ て い る

[25]

。 こ れ ら の 人 の 研 究 結 果 か ら 、 本 研 究 の 性 成 熟 群 に お い て は 血 中 テ ス ト ス テ ロ ン が 減 少 す る こ と に よ り 、 筋 肉 量 す な わ ち 除 脂 肪 量 が 減 少 す る こ と が 予 想 さ れ た 。 し か し 、 性 成 熟 群 は 手 術 1 年 目 ま で 体 重 お よ び 除 脂 肪 量 に 大 き な 変 化 は 認 め ら れ ず 、 体 脂 肪 量 の み が 有 意 に 上 昇 し た 。 す な わ ち 筋 肉 量 の 明 ら か な 減 少 は 認 め ら れ な か っ た 。 そ の 理 由 と し て 考 え ら れ る の は 、 供 試 犬 は 一 般 家 庭 で 飼 育 さ れ て い る が 運 動 量 が 日 常 的 に 多 く 、 適 度 な 運 動 に よ る 筋 骨 格 刺 激 に よ り 、 筋 肉 量 が 維 持 さ れ た 可 能 性 が 考 え ら れ た 。 そ の 一 方 で 未 性 成 熟 群 で は 、 除 脂 肪 量 も 成 長 に 伴 い 増 加 し た が 、 体 脂 肪 量 の 方 が 著 し い 上 昇 傾 向 を 示 し た 。 生 後

1

歳 齢 で 比 べ る と 、 生 後

5

ヶ 月 齢 で 去 勢 を し た 未 性 成 熟 群 の 体 脂 肪 率 は 、 未 去 勢 の 性 成 熟 群 の 体 脂 肪 率 を 大 き く 上 回 っ た 。 未 性 成 熟 群 の こ の よ う な 体 組 成 の 変 化 は 、 成 長 期 に テ ス ト ス テ ロ ン の 影 響 を 受 け な か っ た こ と が 原 因 で あ る 可 能 性 は 十 分 に 考 え ら れ た 。

獣 医 療 に お い て は 、 ペ ッ ト と し て 飼 わ れ て い る 犬 や 猫 に 対 す る 去 勢 ・

避 妊 が 一 般 的 に 行 わ れ て い る 。 な ぜ な ら 、 中 性 化 を 行 う こ と に よ っ て 、

性 ホ ル モ ン に 関 連 の あ る 疾 病 の 予 防 や 、 繁 殖 行 動 に 関 連 す る ス ト レ ス を

(16)

14

ス ト ス テ ロ ン 濃 度 が 低 下 す る こ と に よ り 、 骨 格 筋 量 が 減 少 し 、 体 脂 肪 量

が 増 加 す る 、 サ ル コ ペ ニ ア 肥 満 と 呼 ば れ る 病 態 が 問 題 視 さ れ て い る

[26]

獣 医 療 分 野 で は 同 様 な 報 告 は な い が 、 去 勢 の 弊 害 を 少 な く す る た め に は

術 後 に 運 動 を 積 極 的 に 取 り 入 れ て 、 筋 肉 量 の 維 持 、 増 進 に 努 め る こ と が

大 切 で は な い か と 示 唆 さ れ た 。

(17)

小 括

本 研 究 で は 、 犬 に お い て 去 勢 に よ り 体 脂 肪 率 が 上 昇 し 、 体 組 成 が 大 き く 変 化 す る こ と を 重 水 希 釈 法 を 用 い て 明 ら か に し た 。

供 試 犬 を 生 後 5 ヶ 月 齢 で 去 勢 を し た 未 性 成 熟 群 と 生 後

1

歳 齢 で 去 勢 し

た 性 成 熟 群 に 分 け 、去 勢 に よ る 体 組 成 の 変 化 の 比 較 を 試 み た 。そ の 結 果 、

未 性 成 熟 群 の 方 が 体 脂 肪 量 の 上 昇 率 が 高 い 傾 向 が 認 め ら れ た 。

(18)

表 1-1. 供試犬のプロフィール

未性成熟群 (n=5)

供試犬番号 犬種 体重(kg)

1 ボーダーコリー 8.5

2 ミニチュアダックスフント 5.0

3 ジャックラッセルテリア 7.0

4 ミニチュアシュナウザー 5.6

5 ボーダーコリー 11.2

性成熟群 (n=8)

供試犬番号 犬種 体重(kg)

1 アメリカンコッカースパニエル 9.3

2 ゴールデンレトリーバー 29.3

3 ミニチュアダックスフント 7.3

4 エアデールテリア 20.5

5 ミニチュアダックスフント 4.0

6 雑種 23.3

7 キャバリア 8.1

8 ウェルシュコーギー 10.4

(19)

表 1-2. 未性成熟群と性成熟群における給餌方法

* 生後

12

ヶ月迄は子犬用ドッグフード、それ以降は成犬用ドッグフードを給与した

RER=70BW3/4

未性成熟群

給与量(RER)

6 ヶ月まで 3.2

6-12 ヶ月 2.4

12 ヶ月以降 1.6-2.0

性成熟群

給与量(RER)

12 ヶ月以降 1.6-2.0

(20)

18

1-1.

未性成熟群と性成熟群における去勢後のテストステロン濃度の変動

0

1 2 3 4 5 6 7 8

手術日 術後1週 術後2週 術後4週

テストステロン(ng/ml)

未性成熟群 性成熟群

(21)

1-2.

未性成熟群における去勢後の体重および体脂肪率の変動

0.0

5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0

手術前 1ヶ月 3ヶ月 6ヶ月 12ヶ月

体 重 ( kg) / 体脂肪 率( %)

体重(kg) 体脂肪率(%)

(22)

20

1-3.

未性成熟群における去勢後の、体重、除脂肪量、体脂肪量の相対比

0 0.5 1 1.5 2 2.5

手術前 1ヶ月 3ヶ月 6ヶ月 12ヶ月

相対値(手術前=1) 体重比

除脂肪量比 体脂肪量比

(23)

1-4.

性成熟群における去勢後の体重および体脂肪率の変動

0.0

5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0

手術前 1ヶ月 3ヶ月 6ヶ月 12ヶ月

体重(kg)/ 体脂肪率(%)

体重(kg) 体脂肪率(%)

(24)

22

1-5.

性成熟群における去勢後の体重、除脂肪体重、体脂肪量の相対比

0 0.5 1 1.5 2 2.5

手術前 1ヶ月 3ヶ月 6ヶ月 12ヶ月

相対値(手術前=1)

体重比 除脂肪量比 体脂肪量比

(25)

研究 2

CT と体脂肪測定ソフトを用いた犬の去勢による

体組成変化の比較に関する研究

(26)

背 景

肥 満 の 診 断 は 、 犬 に お い て は 犬 種 や 年 齢 、 性 別 に よ る 体 格 の 違 い が 著 し い た め 、 そ の 判 定 が 難 し い 。 臨 床 の 現 場 に お い て は 一 般 的 に

Body Condition Score

BCS

) や

Muscle Condition Score(MCS)

が 、 肥 満 度 の 判 定 に 用 い ら れ て い る 。

BCS

は 体 脂 肪 を 評 価 す る 方 法 で 、胸 部 の 皮 下 脂 肪 を 中 心 に 触 診 を 行 い 、 5 段 階 ま た は 9 段 階 の レ ベ ル 分 け で 肥 満 度 を 評 価 す る も の で あ る 。 一 方 、

MCS

は 目 視 検 査 並 び に 側 頭 骨 、 肩 甲 骨 、 腰 椎 お よ び 骨 盤 の 触 診 に よ り 評 価 す る 手 法 で あ る

[27]

。 筋 肉 量 の 減 少 は 体 力 、 免 疫 機 能 に 悪 影 響 を 及 ぼ し 、 人 で は 死 亡 率 に も 影 響 す る こ と が 報 告 さ れ て い る

[28, 29]

。 犬 に お け る

MCS

の 判 定 は 、 現 在 開 発 と 検 証 の 段 階 に あ る 。 し か し 、 こ れ ら の 方 法 に よ る 肥 満 度 の 判 定 は 、 測 定 者 の 経 験 や 主 観 に 左 右 さ れ 、 必 ず し も 客 観 的 な デ ー タ と は 成 り 得 な い 。 ま た 、

BCS

は 触 診 と 視 診 か ら 判 定 を 下 す た め 、 人 で 問 題 視 さ れ て い る 内 臓 脂 肪 の 有 無 を 判 定 す る こ と は 難 し い 。

科 学 研 究 と し て 犬 の 体 格 を 測 定 す る 方 法 と し て は 、

MRI

CT

、 超 音 波 画 像 診 断 、体 内 水 分 濃 度 グ ラ フ 、ア イ ソ ト ー プ 希 釈 法 に よ る 体 内 水 分 量 、 体 内 総 カ リ ウ ム 量 、生 物 電 気 的 イ ン ピ ー ダ ン ス 、

DEXA

( 二 重 エ ネ ル ギ ー

X

線 吸 収 分 析 法 ) な ど が 実 施 さ れ て い る

[30]

( 表

2-4

)。

人 の 医 療 に お い て は 、 体 脂 肪 量 並 び に 体 脂 肪 率 の 測 定 に

CT

が 一 般 的

に 用 い ら れ て お り 、そ の 有 用 性 が 評 価 さ れ て い る

[31, 32]

。日 本 で は メ タ

ボ リ ッ ク シ ン ド ロ ー ム 検 診 の 実 施 に 伴 い 、

CT

用 の 体 脂 肪 測 定 ソ フ ト ウ ェ

ア ー が 多 く の 病 院 で 導 入 さ れ て い る 。 そ の 一 方 で 、 獣 医 療 で は

CT

を 使

用 し た 体 脂 肪 の 測 定 は 、現 在 の と こ ろ 臨 床 の 現 場 で は 実 施 さ れ て い な い 。

し た が っ て 、

CT

デ ー タ を 利 用 し た 犬 の 体 脂 肪 測 定 の 専 用 ソ フ ト は 開 発 さ

(27)

れ て い な い 。

そ こ で 本 研 究 で は 、 人 で 用 い ら れ て い る 体 脂 肪 測 定 用 ソ フ ト を 犬 に 用

い て 、 そ の 有 用 性 を 検 討 し た 。 ま た 同 時 に 、 雄 犬 に お け る 去 勢 後 の 体 脂

肪 の 増 加 に 注 目 し 、去 勢 時 と 術 後 1 年 目 の 体 組 成 の 変 化 を 、

CT

な ら び に

人 用 体 脂 肪 測 定 ソ フ ト を 用 い て 比 較 、 検 討 を 行 な っ た 。

(28)

材 料 お よ び 方 法

供 試 犬

本 実 験 に は 一 般 家 庭 で 飼 育 さ れ 、 去 勢 手 術 を 希 望 し た 3 頭 を 用 い た 。 犬 種 は ミ ニ チ ュ ア ダ ッ ク ス フ ン ト 、 ウ ェ ル シ ュ コ ー ギ ー 、 エ ア デ ー ル テ リ ア で 、す べ て の 供 試 犬 は 一 般 身 体 検 査 、生 化 学 検 査 お よ び

CBC

検 査 に お い て 異 常 を 認 め な か っ た 。供 試 犬 の プ ロ フ ィ ー ル は 、表

1

に 示 し た( 図

2-1

)。

す べ て の 供 試 犬 は 生 後 1 歳 齢 で

CT

撮 影 と 去 勢 を お こ な っ た 。 更 に そ の 1 年 後 に

CT

撮 影 を お こ な っ た 。

給 餌 方 法

試 験 期 間 中 は サ イ エ ン ス ダ イ エ ッ ト ア ダ ル ト (

377kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ ・ コ ル ゲ ー ト ㈱ 、 東 京 ) ま た は ア イ ム ス 成 犬 用 (

363kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、 神 戸 ) の 2 種 類 の ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 要 求 量(

RER=70BW3/4

)を 求 め 、運 動 量 や 生 活 環 境 に よ っ て 一 日 当 た り エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

1.6

2.0RER

) を 算 出 し た 。 各 供 試 犬 は 試 験 期 間 中 を 通 じ て 、 給 与 量 を 一 定 に 保 っ た 。

麻 酔 管 理

麻 酔 前 の 準 備 と し て 橈 側 皮 静 脈 に

24

22G

留 置 針 に て カ テ ー テ ル を 設 置 し 、シ ュ ア プ ラ グ( テ ル モ ㈱ 、東 京 )を 接 続 し た 。麻 酔 前 投 薬 と し て 、 硫 酸 ア ト ロ ピ ン(

0.025mg/kg

)を 皮 下 投 与 し た 後 、塩 酸 ミ タ ゾ ラ ム(

0.1

0.2mg/kg

) お よ び 酒 石 酸 ブ ト ル フ ァ ノ ー ル (

0.1

0.2mg/kg

) を 静 脈

内 に 投 与 (

IV

) し た 。 次 い で 、 プ ロ ポ フ ォ ー ル (

4mg/kg

IV

) に よ る 麻

(29)

酔 導 入 を 行 っ た 後 、 気 管 内 チ ュ ー ブ を 挿 管 し 、 イ ソ フ ル ラ ン (

1.5%

) と 酸 素 (

2 l/min

) の 吸 入 の よ り 麻 酔 を 維 持 し た 。 麻 酔 中 の 呼 吸 管 理 は 手 動 で 行 い 、

CT

画 像 撮 影 中 は 呼 吸 バ ッ ク に よ り 、 供 試 犬 の 息 止 め を 行 っ た 。 去 勢 手 術 の 実 施 に も 同 様 の 麻 酔 を 施 し 、 呼 吸 は 動 物 用 自 動 呼 吸 器

compos

β

EV

、 ㈱ メ ト ラ ン 、 川 口 ) を 用 い て 管 理 し た 。

去 勢 手 術

麻 酔 後 、 陰 嚢 上 部 を 切 皮 し 睾 丸 を 摘 出 す る 術 式 で 、 去 勢 を 実 施 し た 。

CT

撮 影 条 件

撮 影 に は

16

列 マ ル チ ス ラ イ ス

CT

Aquilion 16

、東 芝 メ デ ィ カ ル シ ス テ ム ズ ㈱ 、 大 田 原 ) を 用 い た 。 撮 影 は 管 電 圧

120kV

、 管 電 流

200mA

、 撮 影 ス ラ イ ス 厚

1

2m

に 設 定 し た 。 撮 影 中 は 供 試 犬 を 腹 臥 位 に 保 定 し た 。

画 像 処 理

撮 影 さ れ た 画 像 は 、

CT

撮 影 装 置 に お い て 再 構 成 関 数

FC10 ORG

に て 再 構 成 し た 後 、画 像 処 理 ソ フ ト ウ ェ ア ー(

AZE Virtual Place Plus

AZE

㈱ 、 東 京 ) に 転 送 し た 。 画 像 デ ー タ は 、 最 終 的 に 人 用 体 脂 肪 解 析 ソ フ ト

AZE Virtual Place Lexus

AZE

㈱ 、 東 京 ) を 用 い て 解 析 し た 。 解 析

に あ た っ て

CT

値 を −

190/

30HU

に 設 定 し 、脂 肪 領 域 の 範 囲 を 定 め た 。本

研 究 に お い て 評 価 の 対 象 と す る

CT

断 面 像 は 、 先 行 研 究 を 参 考 に し て 胸

椎 (

T6

T9

T12

) と 腰 椎 (

L3

L5

) と し た

[22]

CT

画 像 に お い て 、

(30)

28

体 脂 肪 測 定

CT

を 撮 影 す る 前 日 に 、 重 水 希 釈 法 に よ る 体 脂 肪 測 定 を 行 っ た 。

本 研 究 の 統 計 処 理 に は 、

Student’s t-test

を 用 い て 行 い 、

p

0.05

を 統 計

的 に 有 意 差 あ り と し た 。

(31)

結 果

供 試 し た

3

頭 の 全 例 で 、 去 勢 後 1 年 目 で 体 重 お よ び 体 脂 肪 率 は 上 昇 し た 。

CT

画 像 に お い て

T6

T9

T12

L3

L5

の 各 部 位 の 断 面 に お け る 体 脂 肪 量 を 測 定 し た と こ ろ 、 去 勢 後 1 年 目 で 皮 下 脂 肪 量 は 有 意 に 増 加 し た

p

0.01

) ( 表

2-2

2-3

)。ま た 、重 水 希 釈 法 で 求 め た 体 脂 肪 率 の 上 昇 と 、

CT

で 測 定 し た 体 脂 肪 量 の 上 昇 に は 、 有 為 な 相 関 が 認 め ら れ た ( 図

2-1

)。

内 臓 脂 肪 は

L3

断 面 の み 有 意 に 上 昇 が 認 め ら れ た (

p

0.05

)。

T6

お よ び

T9

断 面 に お い て は 、 全 脂 肪 面 積 に 対 す る 胸 腔 内 脂 肪 が 占 め る 割 合

(%visceral fat)

は 、 有 意 (

p

0.05

) に 減 少 し た 。

L3

お よ び

L5

断 面 に お

い て は 全 脂 肪 面 積 に 対 す る 腹 腔 内 脂 肪 が 占 め る 割 合 は 概 ね 減 少 し た が 、

有 意 差 は 認 め ら れ な か っ た 。 す な わ ち 、 こ の 結 果 は 腹 腔 内 お よ び 胸 腔 内

脂 肪 の 上 昇 率 に 比 べ て 、 皮 下 脂 肪 の 上 昇 率 が 有 意 (

p

0.05

) に 高 い こ と

を 示 し て い る 。去 勢 後 1 年 経 過 時 の 胸 部 か ら 腹 部 の 特 に

T9

T12

L3

面 の 領 域 で 、 皮 下 脂 肪 の 上 昇 率 が 高 か っ た 。 ま た 腹 部 断 面 (

L3

L5

) に

限 っ て は 、腹 側 よ り も 特 に 背 側 で 皮 下 脂 肪 の 蓄 積 が 顕 著 で あ っ た( 図

2-2

)。

(32)

考 察

獣 医 学 領 域 で は 、 去 勢 後 に 脂 肪 蓄 積 量 が 増 加 す る こ と は 、 経 験 的 に 知 ら れ て い る 。 例 え ば 、 産 業 動 物 で あ る 牛 や 豚 に 対 し て 去 勢 を 行 う こ と に よ っ て 脂 肪 の 蓄 積 が 増 加 し 、 結 果 と し て 肉 質 が 柔 ら か く な る と の 報 告 が あ る

[33]

。本 研 究 で は 、犬 に お い て も 去 勢 後 に 体 脂 肪 が 増 加 す る こ と を 、

CT

お よ び 人 用 体 脂 肪 解 析 ソ フ ト を 用 い て 初 め て 実 証 し た 。ま た 本 研 究 で は

CT

画 像 解 析 に よ り 、 人 と は 異 な る 犬 特 有 の 体 脂 肪 の 付 着 部 位 が 明 ら か に な っ た 。 人 で は 一 般 的 に 、 肥 満 に よ っ て 皮 下 お よ び 腹 腔 内 に 脂 肪 蓄 積 が お こ る が 、 臨 床 的 に は 腹 腔 内 へ の 脂 肪 の 蓄 積 が 特 に 問 題 視 さ れ て い る

[30, 31]

。 一 方 、 本 研 究 に よ り 、 犬 で は 肥 満 に よ り 腹 部 背 側 の 脂 肪 の 蓄 積 が 、 最 も 顕 著 で あ る こ と が 明 ら か と な っ た ( 図

2-2

)。 す な わ ち 、 す べ て の 個 体 の 腹 部

CT

断 面 像 か ら 、 腹 側 面 に 比 べ て 背 側 面 で の 脂 肪 蓄 積 が 最 も 増 加 す る こ と を 、 本 研 究 は 初 め て 明 ら か に し た 。

ま た 、 犬 で は 腹 部 背 側 に 存 在 す る 腹 膜 ラ イ ン が 、 人 と 比 較 し て 明 瞭 に 描 出 さ れ な い こ と が 判 明 し た( 図

2-2

)。

CT

を 利 用 し た 人 の 体 脂 肪 解 析 ソ フ ト は 、 一 般 的 に 腹 腔 内 ( 内 蔵 ) 脂 肪 と 皮 下 脂 肪 を 自 動 的 に 分 別 す る 機 能 を 持 つ 。 そ の 際 に 、 腹 部 背 側 の 腹 膜 ラ イ ン の 存 在 が 重 要 と な る 。 人 は こ の 腹 部 背 側 の 腹 膜 が 明 瞭 に 描 出 さ れ る こ と と 、 腹 膜 と 皮 下 脂 肪 の 間 に 筋 層 が 存 在 す る た め に 、 体 脂 肪 解 析 ソ フ ト に よ り 、 自 動 的 に 皮 下 脂 肪 と 腹 腔 内 脂 肪 の 分 別 が 可 能 と な っ て い る 。 し か し 、 犬 に お い て は 、 背 側 の 腹 膜 ラ イ ン が 明 瞭 で は な い と い う 解 剖 学 的 な 特 徴

[34, 35]

に よ り 、腹 部 背 側 部 の 皮 下 脂 肪 と 腹 腔 脂 肪 の 自 動 分 別 認 識 が 困 難 で あ っ た 。 よ っ て 、 本 研 究 で は 腹 部 背 側 の 腹 膜 ラ イ ン の 描 出 を 手 動 で 行 っ た 。

本 研 究 で は 、 人 で 問 題 視 さ れ て い る 腹 腔 内 脂 肪 は 、 去 勢 後 1 年 経 過 し

(33)

た 犬 で は 、皮 下 脂 肪 に 比 べ て 各 断 面 で ほ と ん ど 増 加 し な か っ た 。し か し 、 そ れ ら の 断 面 の う ち 第 三 腰 椎 断 面 (

L3

) の み 、 全 例 で 内 臓 脂 肪 率 は 上 昇 し て い た 。

CT

を 利 用 し た 人 の 肥 満 度 判 定 は 、臍 部 位 の 腹 部 横 断 面 で の 皮 下 お よ び 腹 腔 内 の 脂 肪 の 蓄 積 状 態 を 判 断 し て い る

[32]

。 犬 に お い て 臍 の 部 位 は 犬 種 に よ っ て 個 体 差 は あ る が 、 お お む ね 第 三 腰 椎 断 面 付 近 と 一 致 す る 。 し た が っ て 本 研 究 に お い て も 、 第 三 腰 椎 で の

CT

断 面 像 を 腹 腔 内 脂 肪 の 判 断 断 面 と し て 用 い た 。

犬 の 肥 満 度 判 定 の 基 準 は 、現 在 ま で の と こ ろ

BCS

以 外 に は 明 確 に は 定 め ら れ て い な い

[27]

。 本 研 究 に よ り 、

CT

を 利 用 し た 肥 満 度 判 定 の 際 に 、 第 三 腰 椎 断 面 (

L3

) で の 判 定 が 有 用 で あ る こ と が 明 ら か に な っ た こ と か ら 、 今 後 こ の 部 位 で の 内 臓 脂 肪 の 蓄 積 が 、 肥 満 度 判 定 の 指 標 の 一 つ に な る こ と が 期 待 さ れ る 。

一 方 、 皮 下 脂 肪 蓄 積 に 関 し て は 、 本 研 究 で は

T9

T12

お よ び

L3

各 断 面 領 域 で 、 脂 肪 蓄 積 の 上 昇 率 が 高 か っ た 。 小 動 物 臨 床 分 野 で は 日 常 の 診 療 に お い て 、視 診 な ら び に 触 診 を 主 体 と し た

BCS

を 用 い て 肥 満 度 の 判 定 を 行 っ て い る が 、 そ の 際 に は 胸 部 肋 骨 部 位 の 触 診 が 重 要 と さ れ て い る

[27]。し か し 、本 研 究 の 結 果 か ら L3

部 位 の 背 側 の 皮 下 脂 肪 の 付 着 状 況 も 触 診 で 確 認 し 、 統 合 的 に

BCS

の 判 定 を 行 う べ き で あ る と 考 え ら れ た 。

Ishioka

[22]

は 人 の

CT

値 で は な く 犬 固 有 の

CT

値 を 設 定 す る こ と で 、

重 水 希 釈 法 に よ っ て 測 定 さ れ た 体 脂 肪 率 の 増 加 と 、

CT

の 画 像 と の 相 関 が

得 ら れ た と 報 告 し て い る 。 本 研 究 で は 人 の 肥 満 度 判 定 に 一 般 的 に 用 い ら

れ て い る

CT

値 ( −

190/

30HU

) で 測 定 し た と こ ろ 、 体 脂 肪 率 の 上 昇 と の

(34)

32

て い な い 。 そ の 理 由 と し て は 、 高 額 の 撮 影 費 用 と 全 身 麻 酔 の 必 要 性 が 挙 げ ら れ る 。人 で は 肥 満 度 判 定 に は

CT

MRI

DEXA

に よ る 体 脂 肪 率 測 定 な ど が 一 般 的 に 用 い ら れ て お り 、 そ れ ら の 分 析 結 果 に は 強 い 相 関 性 が 示 さ れ て い る

[30, 31]

。 獣 医 領 域 で は 猫 の 肥 満 度 判 定 に 関 し て の み 、

CT

MRI

DEXA

を 用 い た 報 告 が あ る

[36]

。 一 方 、 獣 医 臨 床 で 一 般 的 に 用 い ら れ て い る

BCS

に よ る 肥 満 度 判 定 は 、特 殊 な 器 具 を 用 い る 必 要 も な く 全 身 麻 酔 の 必 要 も な い が 、 個 人 の 主 観 に 左 右 さ れ 、 客 観 性 に 乏 し い と い う 難 点 が 指 摘 さ れ て い る 。 本 研 究 で は 、 す べ て の 個 体 に 内 臓 脂 肪 の 増 加 が 認 め ら れ た が 、そ れ ら は

BCS

の 増 加 と い う 変 化 に は 表 れ な か っ た 。

BCS

は 体 表 面 の 触 診 に よ り 肥 満 度 を 判 定 す る 方 法 で あ る た め , そ の 判 定 結 果 は 皮 下 脂 肪 の 量 に 依 存 す る 。し た が っ て

BCS

で は 内 臓 脂 肪 の 動 向 を 反 映 さ せ る こ と は 出 来 な い 。 人 で は 内 臓 脂 肪 の 増 加 が 、 生 活 習 慣 病 を 悪 化 さ せ る 要 因 と 見 な さ れ て お り 、 内 臓 脂 肪 の 蓄 積 に は 注 意 が 必 要 で あ る こ と が 知 ら れ て い る

[5]

。 本 研 究 で は 対 象 と し た 犬 は 2 歳 齢 と 若 齢 と い う こ と も あ り 、 内 臓 脂 肪 の 増 加 は 、 皮 下 脂 肪 の 増 加 ほ ど 顕 著 で は な か っ た 。 し か し 、特 に 腹 部 に お け る 内 臓 脂 肪 は 増 加 傾 向 に あ り 、犬 で も 加 齢 に 伴 い 、 内 臓 脂 肪 の 増 加 が 予 想 さ れ た 。 今 後 、 中 高 齢 犬 に 対 し て 本 研 究 と 同 様 に

CT

な ら び に 人 用 体 脂 肪 解 析 ソ フ ト を 用 い る こ と に よ り 、犬 の 内 臓 脂 肪 と 生 活 習 慣 病 の 関 係 を 検 討 す る こ と が 可 能 と 思 わ れ た 。

本 研 究 で は 、 重 水 希 釈 法 に よ る 体 脂 肪 率 の 測 定 も 同 時 に 行 っ た 。 そ の

結 果 、 ど の 個 体 も 緩 や か で は あ る が 、 体 脂 肪 率 の 上 昇 が 認 め ら れ た 。 ま

BCS

に よ る 肥 満 度 判 定 で も 、評 価 の ラ ン ク が 変 わ る 程 の 変 化 は 認 め ら

れ な か っ た 。一 方 、

CT

画 像 に よ っ て 、容 易 に 腹 部 背 側 の 皮 下 脂 肪 の 顕 著

な 増 加 を 判 断 す る こ と が 出 来 た 。特 に 内 臓 脂 肪 の 増 加 は 、

CT

所 見 で な け

れ ば 見 出 す こ と の 出 来 な い 所 見 で あ っ た 。 本 研 究 で は 、 そ れ ぞ れ の 犬 に

(35)

1 歳 で 去 勢 を 実 施 し 、 1 年 経 過 し た 時 点 で 肥 満 度 を 比 較 し た 。 し か し 、

人 で 肥 満 な ら び に 内 臓 脂 肪 の 蓄 積 が 生 活 習 慣 病 を 引 き 起 こ す 危 険 因 子 と

し て 問 題 視 さ れ る の は 、 日 本 の 厚 生 労 働 省 の 報 告 に よ る と 主 に 中 高 齢 以

降 で あ る

[29, 37, 38]

。 犬 種 に よ り 異 な る が 、 一 般 的 な 犬 の 中 高 齢 は 7 歳

以 降 で あ る と さ れ て い る 。 犬 で も 中 高 齢 で は 内 臓 脂 肪 の 蓄 積 が 顕 著 に な

る 可 能 性 は あ る が 、 現 段 階 で は 証 明 さ れ て い な い 。

(36)

小 括

本 研 究 に お い て 、 人 用 体 脂 肪 測 定 ソ フ ト が 犬 に も 応 用 可 能 で あ る こ と

を 明 ら か に し た 。ま た 、

CT

と 人 用 体 脂 肪 測 定 ソ フ ト を 用 い て 、犬 の 去 勢

に よ る 体 組 成 の 変 化 を 明 ら か に し た 。 そ の 結 果 、 若 齢 犬 の 肥 満 に お い て

は 、内 臓 脂 肪 よ り も 皮 下 脂 肪 の 蓄 積 が 顕 著 で あ る こ と が 判 明 し た 。特 に 、

腹 部 背 側 (

L3, L5

) の 皮 下 脂 肪 の 蓄 積 が 顕 著 で あ り 、 こ の 部 位 の 触 診 が

BCS

に よ る 測 定 で は 有 効 な 判 断 材 料 と な る こ と を 、 本 研 究 は 明 ら か に し

た 。

(37)

2-1.

供試犬のプロフィール

供試犬番号 犬種 性別 体重(kg)

1 エアデールテリア ♂ 20.5

2 ウエルッシュコーギー ♂ 10.4

3 ミニチュアダックスフンド ♂ 7.3

(38)

36

2-2. CT

による去勢前後の体脂肪量および内臓脂肪率の比較

1 2 3

Before After Before After Before After

皮下脂肪 (cm

2

)

T6 14.6 25.0 9.8 30.4 15.9 35.0 T9 11.8 30.7 11.0 31.1 15.3 38.0 T12 8.5 29.8 10.4 28.5 12.5 34.8 L3 17.1 42.2 15.2 41.5 9.2 31.4 L5 22.2 36.4 19.2 39.9 11.0 33.2

内臓脂肪 (cm

2

)

T6 4.6 5.8 4.7 5.0 3.5 4.1 T9 5.1 4.7 4.9 4.8 3.6 6.8 T12 14.3 7.0 4.2 15.8 7.5 9.0 L3 9.5 19.5 13.4 30.6 17.2 24.8 L5 5.3 10.0 10.0 7.3 9.7 18.6

体脂肪(cm

2

)

T6 67.7 24.1 45.8 52.7 102.5 64.6 T9 40.9 36.6 63.8 59.4 112.0 80.0 T12 24.3 26.6 51.3 32.5 149.4 100.5

L3 72.7 29.1 62.8 69.7 214.6 144.6 L5 45.9 41.6 80.8 76.4 261.4 180.5

内蔵脂肪率(%)

T6 24.0 18.8 32.4 14.0 18.0 10.5 T9 30.2 13.2 31.0 13.3 19.2 15.2 T12 62.7 19.1 28.8 35.7 37.4 20.5 L3 35.9 31.6 46.8 42.4 65.2 44.1 L5 19.3 21.6 34.3 15.5 46.9 35.9 体重 (kg) 20.5 20.6 10.4 11.3 7.3 8.6 体脂肪率(%)

*

19.0 21.0 21.7 24.1 19.0 30.2

*

重水希釈法により測定した

(39)

2-3. CT

による供試犬の平均値による去勢前後の体脂肪量および内臓脂肪率の比較

平均値

t-test Before After

皮下脂肪 (cm

2

)

T6 13.4 45.2 **

T9 12.7 49.9 **

T12 10.5 46.5 **

L3 13.8 57.6 **

L5 17.5 54.7 **

内臓脂肪(cm

2

)

T6 4.3 7.4 NS

T9 4.6 8.1 NS

T12 8.7 15.9 NS

L3 13.4 37.4 ***

L5 8.3 17.9 NS

内蔵脂肪率 (%)

T6 24.8 21.7 ***

T9 26.8 20.8 ***

T12 42.9 37.6 NS

L3 49.3 59.1 NS

L5 33.5 36.5 NS

体脂肪 (cm

2

)

T6 72.0 70.7 NS

T9 72.2 88.0 NS

T12 75.0 79.8 NS

L3 116.7 121.7 NS

L5 129.4 149.3 NS

体重(kg) 12.7 20.3 NS

体脂肪率(%)

*

19.9 37.7 NS

*

重水希釈法により測定した

** p<0.01

*** p<0.05

(40)

38

2-4.

体組成の各種測定法

名称 測定法の説明 簡便性 信頼性

密度法 体密度から脂肪量・除脂肪量の占める比率

を推定する × ○

インピーダンス法

身体に微弱な電流を流し、抵抗を測定する ことにより体内水分量を推定し,除脂肪量 を求める

二重エネルギーX 線法

2 種類の X 線を照射した際の減衰係数から 脂肪量、骨塩量およびそれ以外の軟部組織 量を求める

× ○

重水希釈法

既知量の重水を投与し、均一に希釈された 後、その体液の一部を採取・測定し、分布 容積を求める

× ○

キャリパー法 キャリパーを用いて皮下組織の厚みを測

定し,体密度を推定する ○

画像診断法(超音波) 超音波診断により体内の各部位の皮下脂

肪厚を測定する ○

画像診断法(CT)

CT

により脂肪断面積を測定する × ○

(41)

Before surgery After surgery

T6

2-1-1. T6

断面における体脂肪面積と体脂肪率との相関図

y = 1.8462x - 15.155 r = 0.78

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

15 17 19 21 23 25 27 29 31

Fat area measured by CT (cm2 )

Body fat ratio measured by DOD (%)

T6

(42)

40

Before surgery After surgery

T9

2-1-2. T9

断面における体脂肪面積と体脂肪率との相関図

y = 2.3668x - 25.279 r = 0.82

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

15 17 19 21 23 25 27 29 31

Fat area measured by CT (cm2 )

Body fat ratio measured by DOD (%)

T9

(43)

Before surgery After surgery

T12

2-1-3. T12

断面における体脂肪面積と体脂肪率との相関図

y = 2.1422x - 17.832 r = 0.70

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

15 17 19 21 23 25 27 29 31

Fat area measured by CT (cm2 )

Body fat ratio measured by DOD (%)

T12

(44)

42

Before surgery After surgery

L3

2-1-4. L3

断面における体脂肪面積と体脂肪率との相関図

y = 2.7689x - 17.043 r = 0.57

0 10 20 30 40 50 60 70 80

15 17 19 21 23 25 27 29 31

Fat area measured by CT (cm2)

Body fat ratio measured by DOD (%)

L3

(45)

Before surgery After surgery

L5

2-1-5. L5

断面における体脂肪面積と体脂肪率との相関図

y = 2.3712x - 16.22 r = 0.78

0 10 20 30 40 50 60

15 17 19 21 23 25 27 29 31

Fat area measured by CT (cm2 )

Body fat ratio measured by DOD (%)

L5

(46)

44

Before surgery After surgery

T6

T9

T12

2-2-1.

胸部における

CT

画像による去勢前後の体脂肪量の比較

(47)

L3

L5

2-2-2.

腰部における

CT

画像による去勢前後の体脂肪量の比較

関心領域を

-190/-30HU

に設定して

T3, T6, T9, L3

および

L5

断面で、

CT

を用いて計測

した。赤の領域は皮下脂肪を示し、青の領域は内臓脂肪を示す。

(48)

46

研究 3

犬の去勢が脂質代謝関連物質に及ぼす

影響に関する研究

(49)

背 景

人 で の 研 究 に お い て 、精 巣 の

Leydig

細 胞 よ り 産 生 さ れ る 雄 性 ホ ル モ ン の 本 態 で あ る テ ス ト ス テ ロ ン は 、高 齢 男 性 で は

1

年 に

1%

ず つ 血 中 濃 度 が 低 下 す る と 報 告 さ れ て い る

[39]

。過 負荷 にさら され た骨格 筋が顕 著 に 肥 大 す る 際 、 筋線 維の基 底膜 と形質 膜の 間に局 在す る筋衛 星細 胞が極 め て 重 要 な 役 割 を 果 た す こ と が 知 ら れ て い る が

[40, 41]

、テ ス ト ス テ ロ ン に は こ の 筋 衛 生 細 胞 数 を 増 加 さ せ る 作 用 が あ り 、 テ ス ト ス テ ロ ン レ ベ ル 低 下 を 伴 う 性 腺 機 能 低 下 症 患 者 や 、 高 齢 者 に テ ス ト ス テ ロ ン を 投 与 す る と 、 筋 肉 量 や 筋 力 が 増 加 す る こ と が 知 ら れ て い る

[42]

。 下 垂 体 や 精 巣 の 疾 患 な ど に よ り テ ス ト ス テ ロ ン が 欠 乏 す る よ う な 状 況 に お い て は 、 骨 格 筋 量 が 低 下 す る こ と 、 さ ら に 、 こ の よ う な 状 況 に お い て テ ス ト ス テ ロ ン を 投 与 す る こ と に よ り 、 骨 格 筋 量 が 増 加 す る こ と が 報 告 さ れ て い る

[43, 44]

。 ま た 、 前 立 腺 患 者 に 対 し ア ン ド ロ ゲ ン 除 去 療 法 を 行 う こ と に よ り 、 体 脂 肪 量 、 体 重 は 増 加 し 、 骨 格 筋 量 は 低 下 す る こ と が 知 ら れ て い る

[45, 46]

。 一 方 、 牛 に お け る 去 勢 後 の 肉 質 の 変 化 に つ い て の 報 告 が あ る が

[33]

、 犬 猫 な ど の 小 動 物 領 域 で は 性 ホ ル モ ン と 骨 格 筋 量 に 関 す る 報 告 は 少 な い 。

近 年 、 人 の 医 療 で は サ ル コ ペ ニ ア 肥 満 が 注 目 を 集 め て い る 。 サ ル コ ペ

ニ ア は 、 筋 肉 量 低 下 お よ び 筋 力 、 身 体 機 能 の 低 下 と 定 義 さ れ

[47]

、 サ ル

コ ペ ニ ア 肥 満 は 、サ ル コ ペ ニ ア と 肥 満 の 両 者 が 合 併 し た 状 態 で あ り 、

Lim

等 は 、 サ ル コ ペ ニ ア 肥 満 は 単 な る サ ル コ ペ ニ ア や 肥 満 と 比 べ て 、 メ タ ボ

リ ッ ク シ ン ド ロ ー ム の リ ス ク が 高 い と 報 告 し て い る

[26]

。 サ ル コ ペ ニ ア

(50)

48

の 結 果 、 体 脂 肪 量 は 更 に 増 加 し 活 動 性 が 低 下 す る こ と か ら 、 更 な る 筋 肉 量 の 低 下 が 引 き 起 こ さ れ る と い う 悪 循 環 が 懸 念 さ れ て い る 。 男 性 に お い て は 、 血 中 テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 の 低 下 が サ ル コ ペ ニ ア の 発 症 と 関 連 し て い る こ と が 、 多 数 の 研 究 で 報 告 さ れ て い る

[49, 50]

肥 満 に お け る ホ ル モ ン や サ イ ト カ イ ン の 分 泌 量 の 変 動 に 関 す る 研 究 が 、 人 で は 多 数 報 告 さ れ て い る 。 な ぜ な ら ば 、 こ れ ら の 分 泌 量 の 変 化 が 、 生 活 習 慣 病 な ど の 様 々 な 疾 病 の 発 症 と 関 連 し て い る こ と が 明 ら か に さ れ て い る か ら で あ る

[15, 16, 51]

。 サ ル コ ペ ニ ア お よ び サ ル コ ペ ニ ア 肥 満 に お い て も 、 そ の 発 症 の メ カ ニ ズ ム を 究 明 す る 観 点 か ら 、 ホ ル モ ン や サ イ ト カ イ ン の 変 動 に 着 目 し た 研 究 が 多 数 報 告 さ れ て い る

[17, 52]

一 方 、 獣 医 療 の 分 野 で は 去 勢 は 一 般 的 に 行 な わ れ て い る が 、 去 勢 後 の ホ ル モ ン や サ イ ト カ イ ン の 変 動 に 関 す る 報 告 は 少 な い 。

Fukuda

[53]

は 犬 に お け る 研 究 で 、 精 巣 を 摘 出 す る こ と で 血 中 テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 低 下 し 、 骨 密 度 が 低 下 す る 可 能 性 を 示 唆 し て い る が 、 骨 格 筋 量 の 変 化 に 関 し て は 検 討 さ れ て い な い 。 そ こ で 、 本 研 究 で は 、 犬 の 去 勢 後 の 体 組 成 の 変 化 な ら び に 体 組 成 に 影 響 を お よ ぼ す こ と が 知 ら れ て い る 、 ホ ル モ ン や サ イ ト カ イ ン の 血 中 濃 度 の 変 化 に つ い て 検 討 し た 。 人 に お け る 研 究 で は 、 様 々 な ホ ル モ ン や サ イ ト カ イ ン が 体 組 成 に 影 響 を 及 ぼ す こ と が 知 ら れ て い る が 、 本 研 究 で は レ プ チ ン 、

IGF-1

、 成 長 ホ ル モ ン (

GH

) お よ び イ ン ス リ ン に 着 目 し 、 そ の 変 動 を 検 討 し た 。

レ プ チ ン は 脂 肪 細 胞 よ り 分 泌 さ れ る 食 欲 抑 制 ホ ル モ ン で 、 人 で は 体 脂

肪 率 の 上 昇 と 正 の 相 関 を 示 す こ と が 知 ら れ て お り 、 イ ン ス リ ン 同 様 に 血

糖 値 を 低 下 さ せ る

[54]

IGF-1

GH

の 作 用 に よ っ て 肝 臓 で 産 生 さ れ る 、

イ ン ス リ ン 様 成 長 因 子 で あ る 。 骨 格 筋 や 骨 の 成 長 を 促 進 し 、 人 で は 体 脂

肪 率 と 負 の 相 関 を 示 す こ と が 知 ら れ て い る

[52]

。 成 長 ホ ル モ ン の 主 な 作

(51)

用 は 若 齢 動 物 に お け る 成 長 を 促 進 す る こ と で あ る が 、 筋 肉 量 の 増 加 、 体

脂 肪 量 の 減 少 、 骨 の 石 灰 化 に も 関 与 し て い る 。 人 と マ ウ ス に お け る 研 究

で は 、肥 満 状 態 で は 血 中 の 成 長 ホ ル モ ン 濃 度 の 低 下 が 認 め ら れ て い る

[55, 56]

。人 に お け る 研 究 で は 、肥 満 や 内 臓 脂 肪 の 蓄 積 に よ り イ ン ス リ ン 抵 抗

性 が 生 じ 、 そ の 結 果 脂 質 代 謝 異 常 の 発 症 を 引 き 起 こ す こ と が 知 ら れ て い

[57]

(52)

材 料 お よ び 方 法

供 試 犬

本 研 究 に は 、研 究

1

と 同 じ

13

頭 の 雄 犬 を 用 い た 。供 試 犬 の プ ロ フ ィ ー ル を 表

3-1

に 示 し た 。 す べ て の 供 試 犬 は 一 般 身 体 検 査 、 血 液 生 化 学 検 査 お よ び

CBC

検 査 に お い て 異 常 を 認 め な か っ た 。供 試 犬 を 去 勢 の 実 施 時 期 に よ っ て 未 性 成 熟 群 ( 生 後

5

ヶ 月 齢 、

n=5

) と 性 成 熟 群 ( 生 後

1

歳 齢 、

n=8

) の 二 群 に 分 け 、 そ れ ぞ れ 去 勢 を 実 施 し た 。 去 勢 直 前 お よ び そ の

1

3

6

12

ヶ 月 後 に 、 体 重 、 体 脂 肪 量 お よ び 除 脂 肪 体 重 を 測 定 し た 。 同 時 に 採 血 を 行 な い 、 関 連 物 質 の 血 中 濃 度 を 測 定 し た 。

給 餌 方 法

未 性 成 熟 群 に は 生 後

1

歳 齢 ま で は サ イ エ ン ス ダ イ エ ッ ト パ ピ ー

384kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ・コ ル ゲ ー ト ㈱ 、東 京 )、ま た は ア イ ム ス 子 犬 用(

375kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、神 戸 )の ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 要 求 量 を (

RER=70BW3 / 4

) を 求 め 、 月 齢 に よ っ て 推 奨 さ れ て い る 一 日 当 た り エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

~6

ヶ 月 齢 :

3.2RER

6~12

ヶ 月 齢 :

2.4RER

) を 算 出 し て 決 定 し た 。 生 後

1

歳 齢 以 降 は サ イ エ ン ス ダ イ エ ッ ト ア ダ ル ト (

377kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ ・ コ ル ゲ ー ト ㈱ 、 東 京 )、 ま た は ア イ ム ス 成 犬 用 (

363kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、 神 戸 ) ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

RER=70BW3 / 4

) を 求 め 、 運 動 量 や 生 活 環 境 に よ っ て 一 日 当 た り エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

1.6~2.0RER

) を 算 出 し て 決 定 し た 。 な お 生 後 1 歳 齢 以 降 は 給 与 量 を 一 定 に 保 っ た 。

一 方 、 性 成 熟 群 に は 、 試 験 期 間 中 は サ イ エ ン ス ダ イ エ ッ ト ア ダ ル ト

(53)

377kcal/100g

日 本 ヒ ル ズ・コ ル ゲ ー ト ㈱ 、東 京 )、ま た は ア イ ム ス 成 犬 用(

363kcal/100g P&G

ア イ ム ス ㈱ 、神 戸 )ド ッ ク フ ー ド を 給 餌 し た 。 給 与 量 は 体 重 か ら 安 静 時 エ ネ ル ギ ー 要 求 量 (

RER=70BW3 / 4

) を 求 め 、 運 動 量 や 生 活 環 境 に よ っ て 一 日 当 た り エ ネ ル ギ ー 要 求 量(

1.6~2.0RER

)を 算 出 し 、 決 定 し た 。 試 験 期 間 中 は 給 与 量 を 一 定 に 保 っ た ( 表

3-2

)。

去 勢

麻 酔 前 の 準 備 と し て 橈 側 皮 静 脈 に

22~24G

留 置 針 に て カ テ ー テ ル を 設 置 し 、シ ュ ア プ ラ グ( テ ル モ ㈱ 、東 京 )を 接 続 し た 。麻 酔 前 投 薬 と し て 、 硫 酸 ア ト ロ ピ ン (

0.025mg/kg

) を 背 側 頚 部 に 皮 下 投 与 し た 後 、 塩 酸 ミ タ ゾ ラ ム(

0.1~0.2mg/kg

)お よ び 酒 石 酸 ブ ト ル フ ァ ノ ー ル(

0.1~0.2mg/kg

) を 静 脈 内 (

IV

) に 投 与 し た 。 次 い で 、 プ ロ ポ フ ォ ー ル (

4mg/kg

IV

) に よ る 麻 酔 導 入 を 行 っ た 後 、気 管 内 チ ュ ー ブ を 挿 管 し 、イ ソ フ ル ラ ン(

1.5%

) と 酸 素 (

2

/min

) の 吸 入 に よ り 麻 酔 を 維 持 し た 。 麻 酔 中 の 呼 吸 管 理 は 、 動 物 用 自 動 呼 吸 器 (

compos

β

EV

、 ㈱ メ ト ラ ン 、 川 口 ) を 用 い た 。 麻 酔 後 、 陰 嚢 上 部 を 切 皮 し 睾 丸 を 摘 出 す る 術 式 で 、 去 勢 を 実 施 し た 。

体 脂 肪 測 定

体 脂 肪 率 お よ び 体 脂 肪 量 は 重 水 希 釈 法 に よ っ て 測 定 し た

[21, 22, 23]

重 水 (

D2O

) は 脂 肪 以 外 の 組 織 に 均 一 に 分 布 し , 非 放 射 性 同 位 元 素 で あ

り 、体 内 で 代 謝 さ れ ず 無 害 で 測 定 し や す い た め 、標 識 物 質( ト レ ー サ ー )

と し て 適 し て い る 。 先 ず 血 中 に 自 然 に 存 在 し て い る 重 水 量 を 測 定 す る た

(54)

52

重 水 濃 度 の 測 定 に は 質 量 分 析 計 (

20-22 Isotope Ratio Mass Spectrometer

SerCon LTD

Cheshire

) を 用 い た 。 測 定 は

Son

等 の 方 法 に 準 じ て 行 っ た

[21, 22]

。測 定 さ れ た 血 清 重 水 濃 度 と 体 重 か ら 、次 の 計 算 式 に よ り 体 脂 肪 率 お よ び 体 脂 肪 量 を 算 出 し た 。

体 水 分 量

kg

= 体 重 ×

0.2 /

血 清 重 水 濃 度

%

×

10

除 脂 肪 量

kg=

体 水 分 量

/ 0.732

体 脂 肪 率

%=

( 体 重 − 除 脂 肪 量 ) ×

100 /

体 重 体 脂 肪 量

kg=

体 重 ×体 脂 肪 率

テ ス ト ス テ ロ ン の 測 定

血 中 テ ス ト ス テ ロ ン 濃 度 は 、

EIA

法 で 測 定 し た 。 測 定 は す べ て の 個 体 に お い て 、 去 勢 手 術 直 前 、 手 術

1

週 間 目 、 2 週 間 目 、

4

週 間 目 の そ れ ぞ れ の 時 期 に 橈 側 皮 静 脈 ま た は 頚 静 脈 よ り 採 血 し て 実 施 し た 。

脂 質 代 謝 関 連 物 質 の 測 定

レ プ チ ン 、

IGF-1

、イ ン ス リ ン お よ び

GH

の 血 中 濃 度 は 、キ ッ ト を 用 い て

ELISA

法 に よ り 測 定 し た 。測 定 は す べ て の 個 体 に お い て 、去 勢 手 術 直 前 お よ び

1

3

6

12

ヶ 月 後 に 、 橈 側 皮 静 脈 ま た は 頚 静 脈 よ り 採 血 し て 実 施 し た 。

本 研 究 の 統 計 処 理 に は 、

Student’s t-test

を 用 い て 行 い 、

p

0.05

を 統

計 的 に 有 意 差 あ り と し た 。

図 1.   脂肪細胞由来伝達物質
表 1-1. 供試犬のプロフィール 未性成熟群  (n=5)  供試犬番号  犬種  体重(kg)  1  ボーダーコリー  8.5   2  ミニチュアダックスフント  5.0   3  ジャックラッセルテリア  7.0   4  ミニチュアシュナウザー  5.6   5  ボーダーコリー  11.2   性成熟群  (n=8)  供試犬番号  犬種  体重(kg)  1  アメリカンコッカースパニエル  9.3  2  ゴールデンレトリーバー  29.3  3  ミニチュアダックスフント  7.3  4
表 1-2.  未性成熟群と性成熟群における給餌方法 *  生後 12 ヶ月迄は子犬用ドッグフード、それ以降は成犬用ドッグフードを給与した *  RER=70BW 3/4 未性成熟群  給与量(RER) 6 ヶ月まで 3.2 6-12 ヶ月 2.4 12 ヶ月以降 1.6-2.0 性成熟群 給与量(RER) 12 ヶ月以降 1.6-2.0
図 1-2.  未性成熟群における去勢後の体重および体脂肪率の変動0.05.010.015.020.025.030.035.0手術前1ヶ月3ヶ月6ヶ月 12ヶ月体重(kg)/ 体脂肪率(%)体重(kg) 体脂肪率(%)
+7

参照

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