細 菌 の 合 成 培 地 に 関 す る 研 究
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(2) 90. 仲. 最 終 培 養 菌 を 遠 心 沈 澱 して 集 菌 しM/50燐 (0.85%. NaCI加)に. て2回. 洗 滌 後,菌. 西. 酸 緩 衝液. 弘. 孝. 用 い た.. 体 を 同 上組. 第2章. 成 の 緩 衝 液 に浮游 させ た もの を 静止 菌 浮游 液 と して 用 い た.菌. 第1節. 量 決定 は光 電 比色 計 に て 測定 し標準 曲線. に 対 比 し て 決 定 し た.02消. succinate,. 継 代 培養 に依 る菌 の 発 育 度 に 就 い て. 費 量 の 測 定 はWarburg. 第 二 編 に 於 て 得 た 実 験結 果 を基 に して,第1表. 検 圧 計 を 用 い 常 法 に 従 つ た.そ の 際 の 基 質 はglucose, lactate,. glutamateの. 実 験 成 績. 代 表 的 な もの の み. に. 示 す 如 き各 菌 に 夫 々適 す る窒 素源 加 合成 液 体培 地 を. 第1表. 添加 窒 素源 は 下 記 の 通 り略 号 に て示 した. PL-valine:. Val.. PL-tryptophau: 作 成 し,こ. L-proline: Try.. Sal.. L-glutamicacid:. PL-phenylalanine. れ を 継 代 培 養 し た. Staphylococussを. くす べ て の 菌 に 於 て は,す た.. Pro.. enteritidis及. Phe. 除. べ て10代 ま で 可 能 で あ つ びSal.. typhi. muriumに. 於 て は継 代 を 重 ね るに従 つ て 徐 々に発 育 増 強 を 来 し た. Sal. paratyphi. Bに. 向 に 見 ら れ た が,そ. の 他 の 菌 に於 て は発 育 の増 強 は. 全 く見 ら れ ず,む. 於 て も僅 か な が ら 増 強 の 傾. し ろ3〜4代. が 認 め ら れ た二, Staphylococcus に 於 て は 発 育 不 良 の 為6代. 2). に於 て 減 弱 す る結 果 aureus及. びalbus. に て 中 止 し た.. 合 成 培 地 発 青 菌 のO2消. 費 量 に就 て. 上述 の継 代 培 養 に よ つ て 得 られ た 菌がBouillon 培 地 に発 育 した 菌 と酵 素 活 性 に於 て 差 が 存 在 す るか ど うか を追 求 す る為 に行 つ た実 験 結 果 は 第2表 に 示 す 如 くで あ る.即 ち各 菌株 と も2〜3の. 例外はあ る. Glu.. L-cystine:. L-aspartic. acid.. 特 にStaph. Sal.. Cys.. Asp.. albusで. glycine:. nicotinic. acid:. はlactate,. 質 と し た 場 合 に 著 明 にO2消. glutamatcを. 他 の 基 質 で は 変 化 が な か つ た. Sal. typhi. typhi A. Sal.. 575,. Sal.. typhi. paratyphi. B,. 57R,. Sal.. びalbusに. 於 て は す べ ての 基. 質 に つ い て 合成 培 地継 代菌 は酸 化 能 の低 下 を来 し,. para Cに. て は 何 れ の 基 質 に 於 て も 合 成 培 地 継 代 菌 はBouillor 培 地 発 育 菌 に 比 し てO2消 が,た. だSal.. typhi. 質 と す る 場 合,. 費量 が低 下 を 来 して い る. 57Sに. Sal.. typhi. 基 質 と す る 場 合 に,同. 於. け るglucoseを. 57Rに. 基. 於 てLactateを. 程 度 か,む. しろ増 加 して い る. 結 果 が 得 ら れ た. Sal. た,即. typhi. muriumで. は 特 異 的 な 結 果 が 得 られ. ち 合 成 培 地 継 代菌. がlactate,. 照 に比 してO2消. aureus及. Sal.. paratyphi. 酸 化 能 は 著 明 に 増 加 を 来 して い る.. Staph.. 基. 費 量 が 減 少 して い る が. glutamateで. 費 量 の 減 少 を 来 し,酵 素 活性 度 の. Nic.. は 半 減 し た.. enteritidisで. が 合 成 培 地 にて 継 代 培 養 した 菌 は 環 境 不 良 の 為 か対. 低 下 が 窺 は れ る.以 下 各 菌 に つ い て 詳 述 す る.. Gly.. Sh.. は 減 少 し て い る に 反 し て,. sonneiに. 於 て もglueose,. 能 が 対 照 に 比 して 亢 進 に 於 て はglucose,. glucoseの. glutamateの. し て い る.. lactate,. succinate. Sh.. succinateに. 孵化. flegneri 対. 2a. して は.
(3) 細 菌 の合 成 培 地 に関 す る研究 第2表. 各 種 基 質 に 於 け る細 菌 の 酸 素 消 費量 O2消 費量 μ1. 91. typhi. muniumは5,. り,適. 応 的 な 発 育 増 強 と考 え られ る.そ. 於 て は,長 ず,栄. 6代. 頃 よ り発 育 度 を 増 して 居 の他の菌に. 期 継 代 を 行 つて もか か る現 象 は 認 め られ. 養 要 求 性 に 差 異 が 存 す る 為 と 考 え られ る が,. そ の 詳 細 は 明 か に し得 な か つ た.何. れ に して も実験. 成 績 に 示 し た 如 くStaphylococcusを. 除 い た他 の 菌. で は夫 々の 菌 で化 学 的 組成 の はつ き りした 簡単 な液 体 合 成 培 地 に 継 代 可 能 で,し あ る為,発. か も か な りの 発 育 量 が. 育 菌 を用 いて 細 菌生 理 の研 究 を 行 い 得 る. こ と が 分 つ た. 緒 言 に 述 べ た 如 く継 代 方 法 に よ つ て 酵 素 的 性 状 の 異 る こ と は 当 教 室 に 於 て も 牛 田8),戸 が 報 じ て い るが,著. 部9),田. 中4)等. 者 の実 験 に 於 て 得 られ た菌 に就. て も 一 般 酵 素 活 性 に 変 動 が 見 出 さ れ た. Staphylococcusで. は 発 育 が 非 常 に 悪 く,従 つ て. 著 者 の 行 つ た 全 基 質 に 於 て,活. 性 度 の 低 下 が 見 られ. た. Salmonella属 菌 量. 湿 菌 量 に てStaphylococcus及. 殆 ん ど の 基 質 に 対 す る 酵 素 活 性 度 は 低 下 して お り,. は10mg/cup.. 条 件{. Sal.. enteritidis.. 57S.. 57R.. Sal.. Paratiphi. Sal. typhi. を2ce宛 基 質:終. 酵 素 形 成 に 要 す る栄 養 素 も し くは 発 育 素 が 充 分 で な. typhi. い と 思 わ れ る.し Aは6mg/cup.. paratyphi. B.. C.. glucoseに Sal. ,. c.と. な しP.. muriumで. は. 対 す る活 性 度 が 著 明 に 増 加 し て い るが, 含 む為 に適 応 的 に活 性 度 が. glutamateに. 対 して,. Sh.. sonneiで blex. 2aで. は は. 生 理 H.. 37.5℃lhr.. glutamateに. 対 して 著 明 な 活 性 度 の 増 加 が 見 ら れ る. か らや は り 合 成 培 地 中 にglucose又 acidが. 合 成 培 地継 代 菌 は 極 度 に 活 性度 を失 うの に 反 して glutamateに. typhi. 増 加 して い る と 考 え られ る. Shigella glucose,. 基 質0.3ccに. か しSal.. 基 礎 培 地 中 にglucoseを. muriumは3mg/cup.. 食 塩 水 を 加 え 全 量 を3c. 7. 2. Sal.. 使 用. 濃 度10‑2Molの. で は 継 代 培 養 に は 充 分 耐 え 得 る が,. びShigella. はglutamic. 存 在 す る 為 の 適 応 的 な酵 素 活 性 に依 存 す る. と 思 惟 さ れ る.. 対 す る活 性 度 は2倍 以 上 の 亢進 を来 た 結. した.. 論. 著 者 は 教 室 保 存 の11種 の 細 菌 に 就 て,ア. 総 括 及 び 考 按 著 者 は教 室 保 存 の11株 の細 菌 に就 て 窒 素源 に主 眼 を お い た液 体 合成 培 地 を調 整 し,こ れ等 に長 期 継 代 培 養 を 行 い発 育 量 の 増 減 を 観察 し,そ れ 等 に発 育 し. ミ ノ窒 素. 源 に 主 眼 を お い た 液 体 合 成 培 地 に10代 培 養 を 行 い 発 育 量 の 変 動 を 観 察 し,そ. れ 等 の 菌 の酵 素 活 性 度 の 変. 化 を 追 究 し た. 1.. Staphylococcus以. 外 の 菌 は2,. 3の. ア ミ ノ酸. た菌 の 主 要 基 質 に対 す る酵 素 活 性 の 変 動 を追 求 し,. を 含 む 簡 単 な 液 体 合 成 培 地 に10代 継 代 培 養 が 充 分 可. 上 記 の成 績 を得 た.. 能 で あ り,し. 細 菌 の 合成 培 地 の研 究 に 当 つ て は3代 継 代 を 目標 に して 判定 を行 うのを 常 識 と し, 3代 目発 育 可能 な らば,以 後 は殆 ど発 育 可能 と考 え られ る.然 しそ の. か も収 量 は可成 多 い 為生 理 研 究 に使 用. し得 る. Sal. enteritidie及. びSal.. typhi. muriumで. は 継 代 を 重 ね る に つ れ て 適 応 的 に 発 育 増 加 を 認 め た. 2.. 液 体 合 成 培 地 継 代 発 育 菌 に 就 てglucose,. 後 の 発 育 の量 的関 係 を 観 察 す る場 合,液 体 合 成培 地. lactic acid,. sucinicc. acid,. glutamic. に 対 す る適 応 的 な 発 育度 の増 加 或 は逆 に な ん らか の. に 於 け る酵 素 活 性 度 をWardurg検. 要 因 に よ る発 育 の低 下 等 が 考 え られ る.著 者 の 行 つ. 02消. た10代 継 代 観 察 で は, Sal. enteritidie及 びSal.. 活 性 度 の 低 下 を 来 し た.但. 費 の 面 よ り比 較 す る に,一. acid. 4基 質. 圧計を用いて 般 に 対 照 に 比 して. しSal.. typhi. 57S,.
(4) 92. 仲. Sh.. flex.. び,. Sh.. 2aに. 於 け るglucoseに. sonnliに. 西. 弘. 対 す る活 性度 及. 於 け るglucose,. glutamic. 孝. 稿 を終 るに 当 り終 始 御懇 篤 な る御 教 示 を 戴 き,御 校 閲 を賜 つ た 恩 師村 上栄 教授 に 心 か ら深 謝 致 し ます.. acid,. に 対 す る 活 性 度 は 適 応 的 に 増 強 し た 結 果 が 得 ら れ た.. 文 1) Stephenson, 1311,. M.. al.. Biochem.. J.,. 31,. Biochem.,. 4,. 5). 仲 西:岡. 山 医 学 会 雑 誌,第71巻,. 6). 仲 西:岡. 山 医 学 会 雑 誌,第71巻,. 7). Umbreit.. 1937.. 2) Waring, 75,. et.. 献. W. S. et.. al.:. Arch.. 1944.. W.. niques. 3). 戸 部:岡. 4). 田 中 他:第31回. 山 医 学 会 雑 誌,第70巻,. 3565,. 8). 1958.. and. 牛 田:岡. W.. et,. Tissue. al.:. 73〜79, 81〜88,. 1959. Manometric. metabolism.. 山 医 学 会 雑 誌,. 1959.. Tech. 1949,. 69,. 611,. 1957.. 日本 細 菌学 会 発 表. Studies. on. Part. the. III. Synthetic. Study. by. Media. of. serial. the. or. Culture. metabolism. trnsfer. on. of. the. of. the. some. Bacteria. bacteria. synthetic. cultured. fluid. media. By. Hirotaka. Department. of. Microbiology,. Okayama. (Director:. Using the on. eleven. fluctuation the. species of. synthetic. the. fluctuation. ten. generations. 1). all. study. the. growth. of. its. In. the. light. activity. to. four. bacteria. cultured. cultured. normally.. But sonnei. the to. except. It. substrates, in. the. i.e.. activities. of. glucose. and. Sal. glutamic. that typhi. 57 acid. on. media. activity. of. and. the. author. through. ten. contents,. Shigella risen.. be. observed generations. and. Sal.. so. enteritidis of. investigated. succesfully species. it. of. was. suitable. Sal.. typhi. and. through amino. acids.. preparation murium. that. transfers.. acid,. the. few. abundant,. by. cultured. simply. manometer,. lactic. were. paper,. nitrogen. could. progress. fluid. S. School. transfer. amino. fairly. Warburg•Ls. glucose,. synthetic. Generally,. the. by. serial. contained. observed. with. 02-uptake. preceeding. by. Staphylococcus. was. was. the. its. Medical. Murakami). bacteria.. media. yielded. increased of. of. fluid. amount. in. carefully. activity. bacteria. University Sakae. cultured. prepared. metabolism. bacteria. bacteria. synthetic. cellular. of. 2). of. the. Dr.. described. of. enzyme. species. Prof.. bacteria. media. the. on the. for. of growth. fluid of. The. Moreover,. the. NAKANISHI. the. succinic ssrial. former flexineri. author. acid trasfers. was. and. to. the. glutamic. with. reduced 2 a. compared. that than. glucose. acid, of. that and. the of. that. enzyme of bacteria. the. latter.. of. Shigella. the. ..
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