論文 内 容の 要旨
乳 癌 治 療 に 関 わ る 患 者 の 時 間 的 ， 経 済 的 ， 精 神 的 ， お よ び 身 体 的 な 負 荷 は 非 常 に 大
き い ． 将 来 的 に も 乳 癌 患 者 は 全 が ん 患 者 の う ち の 多 数 を 占 め る た め ， 薬 物 療 法 を 主 軸
と す る 治 療 コ ン プ ラ イ ア ン ス や ア ド ヒ ア ラ ン ス の 向 上 お よ び 維 持 が 必 要 と な る ． 乳 癌
治 療 の 個 別 化 は ， そ の 目 的 を 達 成 す る た め に も 重 要 で あ る ． 乳 癌 治 療 の 個 別 化 は ，
HER2 を は じ め と す る バ イ オ マ ー カ ー 研 究 に よ っ て 進 歩 し た が ， 標 的 分 子 が 特 定 困 難
な 乳 癌 の 化 学 療 法 に お い て は ， 依 然 と し て 個 々 の 患 者 に 合 っ た 治 療 法 の 確 立 が 待 た れ
る ．
近 年 ， 腫 瘍 免 疫 の 観 点 か ら 癌 治 療 へ の ア プ ロ ー チ を 試 み る 研 究 が 進 ん で い る ． 中 で
も ， 癌 が 自 ら サ イ ト カ イ ン を 放 出 し ， 腫 瘍 免 疫 を 減 弱 さ せ る 報 告 や ， い く つ か の サ イ
ト カ イ ン 量 の 増 加 が ， 臨 床 病 期 や 癌 の 進 行 と 関 連 が あ る こ と も 示 唆 さ れ て い る ． 以 上
よ り ， サ イ ト カ イ ン は 癌 の 病 態 や 予 後 に 重 要 な 役 割 を 担 っ て い る も の と 考 え ら れ ， さ
ら に は 乳 癌 治 療 の バ イ オ マ ー カ ー と し て も 有 用 と 思 わ れ る ．一 方 ，乳 癌 治 療 薬 の 中 で ，
ア ロ マ タ ー ゼ 阻 害 薬（
AI）は 閉 経 後 ホ ル モ ン 感 受 性 乳 癌 患 者 の 治 療 に 用 い ら れ る ．AI
は ， 副 作 用 と し て 薬 剤 起 因 性 骨 関 節 症 状 を 高 頻 度 で 引 き 起 こ し ， 結 果 と し て 日 常 生 活
の 行 動 を 制 限 し
QOL を 低 下 さ せ る ． そ の 結 果 ， AI を 用 い た 治 療 を 中 断 せ ざ る を 得 な
い こ と も 少 な く な い ．し か し な が ら ，AI 治 療 に 関 連 し て 生 じ る 骨 関 節 症 状 の 根 本 的 な
メ カ ニ ズ ム は 明 ら か と な っ て い な い ．
以 上 の よ う な 背 景 を 踏 ま え ， 本 研 究 の 第 一 章 で は ， 乳 癌 患 者 か ら 摘 出 し た 乳 癌 組 織
を ，
Thermoreversible gelatin polymer（ TGP） ゲ ル を 用 い て 三 次 元 培 養 し ， 培 養 乳
N D N D N D N DN D N D
Fi g . 2 . C o mp a ri so n o f cy to k i n e co n ce n tra ti o n s i n su p e rn a ta n t o f th re e - d i me n si o n a l ly cu l tu re d b re a st ca n ce r a n d n o rma l ti ssu e s. Bre a st ca n ce r ti ssu e s ( can ce r ti ssu e s) o r n o r ma l ti ssu e s o f b re a st ca n ce r pa ti e n ts ( n o rma l ti ssu e s) w e re cu l tu re d f o r 6 d a y s in TG P g e l r e sp e cti v e l y, a n d th e cy to k in e co n cen tra ti o n s in sup e rn a ta n t w e re d e te rmi n e d b y CBA a ssa y p ro ce d u re s. Tw e n ty - o n e can ce r ti ssu e s an d e i g h t n o rma l ti ssu e s w e re e x a min e d . Th e me a n ± S D co n ce n tra ti o n s w e re i nd i ca te d . Th e cy to k in e co n ce n tra ti o n s d i d n o t si gn i fi ca n tl y d if f e r b e tw e e n ca n ce r ti ssu e s a nd n o rma l ti ssu e s. Th e f re qu e n ci e s o f th e e x p re ssi on of IFN - w a s si gn i fi ca n tl y d i ff e re n t b e tw e en th e can ce r ti ssu e s an d th e n o rma l ti ssu e s, a s a n al y ze d b y Ch i - squ a re te st (p =0.0052) . ND (n ot d etec te d) : Th e cytok in e co n cen tra ti o n s w e re un d e r e a ch d e te cti o n l i mi t.
＊
A B
Fi g . 6 . Co mp a ri so n f o r th e WS T- 8 a ssa y v a l u e s o f th re e - d i me n si o n a l ly cu l tu re d ti ssu e s b e tw e e n h o rmo n e - re ce p to r p o si ti v e a n d n e g a ti v e b re a st ca n ce r ti ssu e s. A; co mp a ri so n b e tw e e n ER( +) ti ssu e s ( n =1 3) an d ER(- ) ti ssu e s (n =8 ) . B; co mp a ri son b e tw e e n Pg R( +) ti ssu e s ( n =1 0) a nd Pg R( -) ti ssu e s (n =11 ) . A si gn i fi ca n t d if f e ren ce f o r th e WS T- 8 i nd i ce s w a s o b se rv e d b e tw e en Pg R( +) a nd Pg R( -) ti ssu e s, a s an a l y zed b y U np a i re d t te st w i th We l ch ’s co rre c ti o n (*p =0.0383) .
進 の 可 能 性 に つ い て 展 望 し た ． さ ら に 第 二 章 で は ， 閉 経 後 乳 癌 治 療 に 併 発 す る 骨 関 節
症 状 に 対 す る
vitamin E（ VE）の 効 果 と ，乳 癌 治 療 の 副 作 用 軽 減 を 目 的 と し た VE 投
Ta b l e 3 . R e l a t i o n s h i p b e t w e e n e s t r o g e n r e c e p t o r ( E R ) o r p r o g e s t e r o n e re ce p to r ( Pg R) e x p re ssi o n in ci d e nce a n d th e WS T- 8 a ssa y va l u e ( ind e x f o r t u m o r g r o w t h ) o f t h r e e - d i m e n s i o n a l l y c u l t u r e d b r e a s t c a n c e r t i s s u e s . WS T- 8 a ssa y v al u e f o r 3 D cu l tu red sa mp l e Hi g h e r Lo w e r to ta l Estro g e n re ce p to r ( ER) + 5 8 1 3 - 6* 2 8 to ta l 11 1 0 2 1 Pro g e ste ro n e re ce p to r ( Pg R) + 3 7 1 0 - 8 3 11 to ta l 11 1 0 2 1 Th e pa ti e n ts w e re g ro u p e d in to t h e h i gh e r a n d l o w e r su b j e cts e x p re ssi n g hi g h e r an d l o w e r WS T- 8 a ssay v a lu e s, re sp e cti v e l y, by th e me d i a n sco re (0 . 3 0 26 re a d b y a b so rb a n ce a t 45 0 n m) f o r th e re su l ts o f WS T- 8 a ssa y o f 3 D cul tu re d sa mp l e . On th e o th e r h a nd ，th e p a ti e n ts w e re di v i d ed in to th e ER p o si ti ve ( +) a nd ER n e g a ti v e ( -) o r Pg R p o si ti v e ( +) a nd Pg R n e g a ti v e ( - ) g ro up s . ER a n d Pg R o f p a ti e n ts’ ca n ce r ti ssu e w e re d e te c t e d by i mmu n oh i sto ch e mi ca l an a ly si s. S ta ti sti ca l a n al y si s f o r th e in ci d e n ce o f sub j e cts w i th ca n ce r ti ssu e s e x h i b i tin g th e h i g h WS T- 8 v a l u e s in v i t ro w a s p e rf o rme d b y Ch i - squ a re te st . T h e ER(- ) ti ssu e s e x hi b i te d si gn i fi can tl y hi g h i n cid e n ce o f t h e g re a te r WS T- 8 a ssa y - v al u e s (*p =0.0306) .
Ta b l e 4 . R e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e T N M s t a g e s a n d t h e i n c i d e n c e s o f c y t o k i n e s p ro d u cti o n i n cu l tu re me d i u m o f th re e - d i me n si o n a l ly cu l tu re d b re ast ca n ce r ti ssu e s.
Th e i n ci d en ce o f cy to ki n e in cu l tu red ca n ce r ti ss u e
TN M sta g e
P valu e S ta g e IIA O v e r sta g e IIB To ta l
IFN - N e ga ti v e Po si ti v e 7 7 4 2 11 9 p 0.05 TN F- Po si ti v e 3 5* 8 *p =0.0096 N e ga ti v e 11 1 1 2 IL- 2 N e ga ti v e Po si ti v e 1 0 4 3 3 1 3 7 p 0.05 IL- 4 N e ga ti v e Po si ti v e 1 4 0 0 6 2 0 0 n o t an a ly ze d IL- 6 N e ga ti v e Po si ti v e 5 9 5 1 1 0 1 0 p =0.051 IL- 1 0 N e ga ti v e Po si ti v e 1 0 4 5 1 1 5 5 p 0.05 IL- 1 7 A N e ga ti v e Po si ti v e 1 3 1 1 5 1 8 2 p 0.05 To ta l 1 4 6 2 0 Th e pa ti e n ts w e re d i v i d ed i n to p o si ti v e an d n e g a ti v e g ro up s f o r th e cy to k in e p ro du cti o n in cu l tu re me d i u m o f th re e -d i me n si on a l l y cu l tu re d b re a st ca n ce r ti ssu e s. Th e cu t- o ff l i mi ts o f cy to k i n e e xp re ssi o n s w e re th e me d i an o f e a ch cy to k i n e co n cen tra ti o n ( al l me d i an w a s 0 p g / mL) .
On th e o th e r h a nd , th e pa ti e n ts w e re d i vi d e d in to th e sta g e IIA a nd ov e r sta g e IIB g ro up s. Th e n , th e sta ti sti ca l a na l y si s w a s p e rf o rme d b y Ch i - sq ua re te st f o r th e in ci d en ce o f cy to k in e p ro d u cti on f ro m th e i r th re e - di me n si o na l l y cu l tu re d ca n ce r ti ssu e s in to cu l tu re me d i u m. T h e p a ti e n ts w i th sta g e s o v e r II B o f TN M sta g e e xh i b i te d si g ni f i can tl y hi g h e r in ci d en ce f o r th e TN F - p rod u cti on in th ei r th re e -d i me n si on a l l y cu l tu re d ti ssu e s (*p =0.0096) .
能 を 比 較 し た ． ホ ル モ ン 受 容 体
陽 性 癌 組 織 は ， 受 容 体 陰 性 癌 組
織 に 比 べ て 増 殖 能 が 低 か っ た
（
Fig. 6， Table 3）． ホ ル モ ン
受 容 体 陰 性 乳 癌 組 織 が ， 本 研 究
で 用 い た 三 次 元 培 養 系 に お い て
進 行 性 に 増 殖 で き る こ と を 示 唆
し た ． ま た ， 患 者 を 乳 癌 病 期 で
あ る
TNM 分 類 に よ り ス テ ー ジ
IIA ま た は IIB 以 上 の 2 群 に 分
け ， そ の 群 間 で 三 次 元 培 養 後 の
各 種 サ イ ト カ イ ン 産 生 の 有 無 に
つ い て 頻 度 解 析 を 行 っ た ．
IIB 以 上 の 患 者 で は TNF-産 生 の 頻 度 が 有 意 に 高 か っ た
（
Table 4）． こ れ よ り ， TNF-は 乳 癌 病 期 を 示 す バ イ オ マ ー カ ー と な り う る こ と を 示
唆 し た （
Fig. 6， Table 3）． ホ ル モ ン 受 容 体 陰 性 乳 癌 組 織 が ， 本 研 究 で 用 い た 三 次 元
培 養 系 に お い て 進 行 性 に 増 殖 で き る こ と を 示 唆 し た ． ま た ， 患 者 を 乳 癌 病 期 で あ る
TNM 分 類 に よ り ス テ
ー ジ
IIA ま た は IIB 以
上 の
2 群 に 分 け ，そ の
群 間 で 三 次 元 培 養 後 の
各 種 サ イ ト カ イ ン 産 生
の 有 無 に つ い て 頻 度 解
析 を 行 っ た ．
IIB 以 上
の 患 者 で は
TNF- 産
生 の 頻 度 が 有 意 に 高 か
っ た （
Table 4）． こ れ
よ り ，
TNF-は 乳 癌 病
期 を 示 す バ イ オ マ ー カ
ー と な り う る こ と を 示
唆 し た ．
第 二 章
閉 経 後 乳 癌 治 療 に 併 発 す る 骨 関 節 症 状 に 対 す る
vitamin E（ VE） の 効
果 と そ の 個 別 化 投 与 に 関 す る 検 討
閉 経 後 乳 癌 患 者 に お け る AI 起 因 性 骨 関 節 症 状 に 対 す る VE 投 与 の 有 効 性 ， お よ び
VE 投 与 が 血 中 女 性 ホ ル モ ン 濃 度 や 炎 症 性 免 疫 応 答 に 及 ぼ す 影 響 を 検 討 し た ． 対 象 患
Fi g . 8 . O ste o a r th ro p a th y sco re s ( n =5 1 ) a nd e stra d i o l co n ce n tra ti o n s i n a ro ma ta se i n h i b i to r tre a te d p a t i e n ts a f te r v i ta mi n E a d mi n i stra ti o n ( n =6 0 ) . ( A) A sta ti s ti ca l l y si gn if i can t d e cre a se i n th e me a n sco re s w a s o b se rv e d a f te r th e v i ta mi n E ad mi ni stra ti o n , a s co mp a re d to th e me an sco re s b e f o re ad mi n i stra ti o n , a s an a l y zed b y Wil co x o n te st (*p =0.0178) .
