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生物組織の光学顕微鏡および電子顕微鏡による対比観察

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Academic year: 2021

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学 .6.. ヨZ

東京女子医科大学学会

( 東 女 医 大 誌 第55巻 第6

号)

頁 551-556 昭和60年6月,

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回例会抄録

71 日時 会 場 昭和60年 2月21日(木〉午後 1時30分より 中央校舎

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階会議室 1.生物組織の光学顕微鏡および電子顕微鏡による 対比観察 (第一解剖)

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飯島 治之・串田つゆ呑 従来,生物組織における同一切片に対しての光学顕 微鏡および電子顕微鏡による対比観察は不可能であっ た. 今回,われわれが開発した親水性メタグリル樹脂に 包埋することにより,同一切片上の同一視野を光学顕 微鏡および電子顕微鏡により対比観察を行なうことが できた.この方法および観察結果について報告する. 材料はC3H系マウスの腎臓,小腸,顎下腺および精 巣を用いる.各組織は採取後, 3X3X5mmに細切し, 2.5%グルタノレーアルデヒド,または4%フォルムーアル デヒドー2%グルタノレアルデヒド混合液で固定し,水 洗,脱水を行なう.包埋は親水性メタクリル樹脂の HPMA, Quetol 523および疎水性メタクリル樹脂の MMAの混合樹脂液を用いる.その組成はつぎのとお りである.

HPMA 65ml, Quetol 523 10ml, MMA 25ml, QCU・

10.05g 本包埋法により作製した0.3-0.5μmの準超薄切片 は,種々の実験の結果, H.E染色およびPAS染色に よる染色性を獲得することができた.しかも, これら の光顕的染色切片は,すぐれた解像力を示し,光顕レ ベルにおいても細胞小器官などを鮮明に観察できた. なお,これらの比較的厚い切片は加速電圧200KVの電 顕的観察によりすぐれた立体像が得られた. 2.ヒト赤血球膜グリセルアルデヒド3-リン酸脱水 素醇素のnonenzymaticglycosylation (生化学)

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堀 川 博 朗 ・ 降 矢 焚 (国立病院医療センター〉木下忠雄 赤血球の膜結合酵素であるグリセルアルデヒド3ーリ ン酸脱水素酸素(G3PD)は解糖系酵素の一つであり D グリセルアルデヒド3-リン酸を酸化的にリン酸化し て 1,3-ジホスホーD グリセリン酸を生成する反応 を触媒する. ところで糖尿病患者ではHbAのサブユニットであ るβ鎖の NH2一末端のパリン残基がグルコースによ るnonenzymaticglycosylationを受け,その結果,電 気泳動やイオン交換クロマトグラフィー上でHbAと は挙動を異にする HbA,cと呼ばれるグリコヘモグロ ビンに変化する.現在,このHbA,cは糖尿病患者の長 期間の血糖コントローノレのーっと考えられているが演 者らはG3PDの比活性がHbA,c値と逆相関の関係に あることなどを報告してきた. 今回, Kantらの方法に従って調製した正常者の赤 血球膜を2.5mMの糖 (glucose,glucose-1-p, glucose 6-p, fructose-6-p, fructose-1,6-p2)' 0.5mM DTT, 1 m M EDTAを含む5mMリン酸カリウム緩衝液 (pH 7.4)中でincubation

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TC)し, G3PD活性を経時的 に 測 定 し た と こ ろ , 24時 間 後 に はglucose-6-p, fructose-6-p, fructose-1,6-p2で は 糖 無 添 加 の 対 照 に 比べ低下する傾向を示した.次にglucose-6-pで処理 し た 反 応 液 の 膜 お よ びincubation中 に 膜 か ら medium中に溶出したG3PDを単離しリジン残基のE NH2に結合している糖をSchleicherらの方法に従っ て〔ε N(L-furosyl-methyl)-L-lysineJ (furosine) としてHPLCで分析したところ,膜に結合している G3PDか ら 検 出 さ れ た . こ の 結 果 はnonenzymatic glycosylationを受けたG3PDは膜に結合し難くなる ことを示唆する.そこで;正常者および糖尿病患者の 赤血球を溶血し,膜結合,非結合G3PDについてfur -osineの検出を試みたのでその結果をも併せて報告す る. 3.尿中に見出される免疫抑制物質の検討 (微生物学教室)

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鎌 形 有 祐 ・ 内 山 竹 彦 ・ 若井真理子・吉岡 守正 (中央検査部〉清水喜八郎 緒言:生体の免疫応答は多様な調節因子により制御 されている.我々は正常マウス及び発熱患者尿中にマ ウス胸腺細胞の種々のmitogenCInte

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eukin(IL)・1,2 及びConA)に対する増殖反応を抑制する物質を見出

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