閉塞性黄痘解除 後 復 関す 実験的研 究 胆汁排泄能回 過程

金沢大学十 全 医学 会 雑 誌 第

9 1

巻 第

3

号

4 2 9

^‑

4 51 (1 9 82

)

_{42 9}

閉塞性黄痘 解 除後^の胆 汁排泄 能 回復過程^に関す^る実験 的研究

金

沢

大 学 医学 部 外 科学 第^二講座

(

主

任

^: 宮崎 逸 乗 数按

)

小 田 切 春 洋

( 昭

和^{5 7}年¹

月

^{2 0}

日

受 付

)

閉塞 性 黄痘 解 除 後

の

病 態

を

知

る

目 的

で

実 験 的に

ラ

ッ

ト を

使

用 し

, 胆道 閉 塞

と

閉塞 解除

を

行っ

た

. 胆 道閉塞 嵐 ¹

日

,

3 日

,

7 日

,

14 日

,

2 1 日

^の各期^に閉塞

を

解 除

し

, 胆 道 内

圧

, 時間 当

り

胆 汁排 泄 鼠 径 静 脈的

イ

^ン

ド

^シ

ア

^{ニ ン}

グ リ

^{ー ン}

i n d

o cya n

i

n e gr e e n(

I C G

) 投 与後^の胆 汁 内

I C G

濃 度及

び 回

収 率

を

検 索

し た

｡

ま た

, 生化 学 的血 液 検 査, 走 査電

子

顕微 鏡^に

よ る

形 態 ( 主に毛細 胆 管)

^{を も}

合

せ

検 索

し た

^.

さ ら

^に胆道 閉 塞解 除 ( 閉塞

7 日

目に解 除) 後,

3 日

,

7 日

,

21 日

^の各 期^{に つ い}

て も

同様

の

検 索

を

行っ

た

.

そ

の緑 乳 以 下^の知見

を

得

た

. 血 清

ビ リ

^ル

ビ

ン凰 血 清γ一gl^{uta m}y

l

tr a n sp^ep t

id

a s e (γ^‑

G T P

) 値, 胆 汁

^{a l k}

^a

^li

^{n e}

p

h

o sp

h

ata s e(

A ト

p) 値, 胆 汁

ビ リ

ル

ビ

ン値

は

閉塞

7 日

目

で ピ

^ー

ク

に達

し

, 以 後模 造^い傾 向

を 示 し た

^. 胆 汁

γ‑

^{G T P}

^値

^は

^{閉 塞 期 間}

^の

^延長に

^{よ り さ ら}

^に著明^に

上

昇

し た

. 血 清

A l

^‑p 値

は

下 降

し

^･

た

. 閉塞解 除 後

の

胆 汁

A 卜

p値

は正

常^に復

さ

ず横這^い傾 向

を 示 し た が

,他

の

値

は

解 除後

3 日

目

で 正

常 値

に

回復

し た

.胆 道 閉塞 解 除 直後^の胆汁 排 泄能

を

閉塞 期 間別^に

み る と

, 胆 道 内圧

は

閉塞

3 日

目

で ビ

^ー

タ

に達

し

,

そ の

後 高値

を

保 持

し た

.

掛 十排 泄量

と I C G

濃 度

と

の間に

は

逆 相 関

^{を み た}

^.

す な わ ち

, 胆 汁 排 泄 量

は

閉 塞解 除 直後 閉 塞期 間

の

長

さ

に

よ

^っ

て

増加

す る

傾 向

を示 し た の

^に対

し

,

I C G

濃度

は

閉塞 期 間

と と も に

低 下

し た

.

I C G

回収 率

^は

閉塞

1 日

目

で す で

に

64

%

に

低 下

し た が

,

2 1 日

目

で も 6 1

%

ど

, 閉塞 期 間

と

相 関

^{しな か}

^っ

^た

. 解 除 後^の

I C G

回収 率

は

,

3 日

目

6 8

%,

7 日

目

7 5

%,

2

1

日

目

86

%

と

徐

々 に 回

復^に向っ

た

. 毛 細胆 管

の

形 態

は

, 閉塞

と と も に

拡 張,

蛇行

し

, 側杖, 憩室

の

形 成

を み

^m

i

c r o v

illi

の消 失

を み た

. 閉塞 解 除

と と も

^に急速^に回復

し た が

, m

i

c r o

v i 11i

の

出現^に

は

時間

を

要

し た

.

Ke

y

^{w o r}ds O bs

t

r u c

t

iv ej^{a u ndic e, B ile c a n alic ulu s}, M ic r o villu s_,

B ilia r

y

Indo c

y

^{a n}in e Gr e e n, Sc a n ni^･n

g

^ele c

t

r o n mic r o s c o

p y

閉塞性 発症 患 者^に対

し

根 治 手 術

あ る

^い

は b

y‑p^{a S S}

手術

^{な ど}

胆道

ド

^レ

ナ

^ー

ジ

手 術^に

よ

って閉塞

を

解 除

^{し た}

場合, 順当

な

減黄 効 果

を 示 す

の

が

普通

で

あ

る が

, 時に

は

減発効果

が

得

ら れ ず

不 幸

な

転帰

を と る

症 例^に

し

ば

し ば

遭遇

す る

こ

と が あ る

.

こ

のよ う

^に適切

な

胆 汁 路

^を

得^{て い}

る

に

も か か わ ら

ず 費痘

が

遷延

す る 理

由

と し て

, 従来

よ り

臨 床 的^に胆 道 感 染症, 胆汁性 肝硬 変 払 ^い

わ ゆ る

肝 内胆 汁

う

^っ滞症

な どが

原因^で

あ る

^{こ こ}

と が

指 摘

さ れ て

い

る

.

し

か

し

, 閉 塞性発症

の

減資効 果

を

論 ず

る 上 で

基 本

と な る

胆 汁排 泄 能^{に つ い}

_{て さ え}

_,

_{と く}

に

胆

道 閉塞 解 除後^の胆 汁 排泄 能

の

回

復過程

を

検 討

し た

研 究

が

少

な ぐ

⁾²⁾, 不 明

な

部分

が

多^い現 状

か ら

, こ

れ ら の

病 態解 明

は

遅

れ

て い

る

.

そ

こ で_, 著 者

は

閉塞 性 黄痘解除 時

の

胆 汁排 泄能

の 回

復 過程

を

追 求

す る

こ

と を

目 的

と し て

,

ま

ず胆 道 閉塞 解 除 直後^の胆 汁 排 泄 能

が

閉 塞 期間^に

よ

っ

そ ど の よ

う

な

影 響

を う け る か

, つい

で

胆 道 閉塞 解 除後

の

胆 汁 排泄 能

が ど

の

よ う な

過 程

で 回

復

し て

い

く か を

検 討

す る た め

, 実 験 的^に

ラ

ッ

ト を 用

^い

て

胆管

^を

閉塞

し

, 胆 道 閉塞 解 除 前 後に

わ た

って_, 血清

な ら び

に胆 汁の生化 学 的検 査, 胆 汁排 泄 能

の

検 索

を

行^っ

た

.

な

^お血 清, 胆 汁

の

生 化 学 的 検 査

と し て は ど リ

^ル

ビ

ン

や

胆 管酵 素^の測 定

を

中 心

と し て

, 胆 汁 排 泄能

^の

検 索^に

は

, 胆道 内 凪 時 間当

り

胆 汁 排 泄量

を

測 定

し

,

さ ら

に

イ

ン

ド

^シ

ア

^ニン

グ リ

^ー ン

I

n

d

｡^.

E x

p

^eri m e n

t

al S

t

ud

_y

o n

t

he R e c o v er

y

Pr o c e s s of B ile E x c r e

t

io n af

t

er Rele a s e fr o m

O bs

t

r u c

t

iv e J^{a u n}dic e･ S hu n

y

^o O

t

agi ^{ri , D e}

p

^{a r}

t

m e n

t

of Su r

g

^{e r}

y

(

^II

)^, (^{D ir e c}

^t

^{o r : P}r of. I.

M i

_y

_{a z a}ki)^{, Scho o}l of M edicin e, Ka n a z a w a U niv e r si

_{t y}

.

cya n

i

n e

G

r e e n(

I C G

)

を

利 用

し て そ れ が

胆 汁 中^に出 現

す る

推 移

を

観 察

し た

｡

一一

方, 胆 汁 排 泄路

と な る

胆 管

の

形態 学 的 変 化

が

胆 汁 排 泄能^に

ど

の

よ う な

影 響

を及 ぼ し て

^い

る

^か

を

知

る た め

, 走 査電

子

顕 微 鏡

を 用

^い

て

肝 外 胆 管

な ら び

^に肝内 毛細 胆 管^の微 細 構 造^の観 察

を あ わ せ て

行っ

た

.

そ

^の結 果, 閉 塞性 発 症 解 除後^の胆 汁 排 泄能

回

復 過 程

に つ い

て

,

2

^｡

3

の興味 あ

る

知見

を

得

た

の

で

報 告

す る

.

対 象

お よ び

方 法

Ⅰ

. 実験 方 法

1

^. 実験 動物

雄

ウ

イ ス

タ

^ー 系

ラ

ッ

ト

( 体 重

2 5 0

^〜

3 0 0

g)

を

使

用 し た

.

2

. 胆 道 閉塞

ラ

ッ

ト お よ び

開基 解 除

ラ

ッ

ト の

作 成

エ ^ー

テ

^ル麻 酔 下^に

て

開 腹

し た

.

ま

ず 肝十^二指 腸間 膜

を

剥 離

し

, 総胆 管

の

肝 側

1

/

3 の

部 位 ( 左 主膵 管

が

総 胆 管^に合流

す る

部 位)

よ り

肝 憫

で

総 胆 管 前壁

^を

切 開

し

,

ア ト

^ム静 脈

カ テ

^ー

テ

^ル

4

号

を

挿

入 し た

. こ

の

総 胆 管 内

カ テ

^ー

テ

ル

は

,肝 管 分 岐下

お よ び

挿

入

部

に て 6

^‑

0

絹 糸

を

用い 二重結賛同定

し

,十^二指 腸 側

は

綜 染 後離 断

し た

.

カ テ

^ー

テ

^ル

の

他 端

は

腹 膜

よ り

筋 層

を

貫

き

皮 下

に

誘 導

し

,

十 分余 裕

の

あ

る

長

さ

( 約

5

c m)

を

残

し て

切 断

し た

.

そ

の断端

は

加 熱溶 解

し

閉 塞

さ せ

皮下^に

埋

没

し た

.

胆道 閉 塞解 除

ラ

ッ

ト は

閉 塞

7 日

目

で

再 開腹

し

, 前^に 埋 没

し た カ テ

^ー

テ

ル断端

を

解放

し

, 別

の

筋層

を

通

し

腹 腔 内

で

空 腸^に誘 導

す る

^こ

と

^に

よ り

作 成

し た

.

Ⅰ Ⅰ

. 検 査 項

目 な ら び

^に方 法

以

上 の

実 験 動物

に

つ い

て

以 下に

示 す

検 索

を

行^っ

た

.

胆道 閉 塞期 間

と

解除 直後

の

胆 汁 排 泄能

七 の

観 察^{に つ い}

て は

, 閉 塞後

1 日

,

3 日

,

7 日

,

14

日,

2 1 日 の

各 時 期

に行^い,

さ ら に

胆道 閉 塞解 除 後

^の

胆汁 排 泄 能

の 回

復 過 程

に

つ い

て は

, 種

々

の生 化学 的検 査

が ピ

^ー

ク に

達

し て そ の

後 横 道^い

を 示 し た

閉 塞

7 日

目

の ラ

ッ

ト を

選

び

, 解 除後

3 日

,

7 日

,

21 日

目

の

各時 期^に観 察

した

.

1

^. 血 清 生化 学 的検 査

(

1

) 血 清 総

^{ビ リ}

^ル

^ビ

^ン値(

D i

a z o 反応,

以

下 血 清

ビ

備

と

略

す

)

(

2

) 血 清

A l k a l i

n e p

h

o sp

h

ata s e (

K i

ng ^‑

K i

ng 法,

以下 血 清

^{A 卜}

p値

と

略

す

)

(

3

) 血 清γ^‑ g

l

uta my

l

tr an S

p

^{ep t}

id

a s e 値 (

O

r

l

o w ^‑ s

k i

変 法, 以下 血 清γ

‑

G T P と

略

す

)

2

. 胆 汁 中生 化学 的検 査

胆 汁 中 生化 学 的検 査

は

, 次^に述^べ

る

胆 道 内 圧 測定 後

に 1

時間^に

わ た り

採 取

し

^, 以 下に つ い

て

述^べ

る

寧^日に一

つ い

て

測 定

を

行^っ

た

.

な お ∴

測定 法

は そ れ ぞ れ

血清

の そ れ

に準

じ た

.

(1

) 胆 汁 中^ビ値 (

2

) 胆 汁 中

^{A l}

‑ p値 (

3)

胆 汁 中γ･^‑

^{G T P}

^値

3

^. 胆 汁排 泄動態^に関

す る

検 索

胆 汁 排 泄態

を

知

る

目 的で

以

下の項 目につ いて検索

を

行っ

た

.

(

1

) 胆 道 内 圧 (

2

) 色 素 排 泄 開始 時 間 (

3

) 時 間 当

り

胆 汁排 泄

量

(

4

) 胆 汁中

I C G

濃 度

(

5

) 胆 汁 中

I C G

排

泄

量,

I C G 回

収 率

な

^お, こ

れ ら の

測 定

方

法

は

次^の

よ う

に行^っ

た

.

すな わ ち

,

2 5

%

ウ

^レ

タ

^ン(

0

^.

5

m

l

/

1 0 0

g 体 重)

の

腹腔内投 与に

よ る

麻酔 下^に, 皮 下^に

埋 没 さ れ て

あ^っ

た カ テ

^ーテ ル

を

取

り

出

し

,

す で

に閉塞

さ れ て

^い

た

末端

を

切断

し

,

5

号

カ テ

^ー

テ

ル に接 続

し た

. 胆 汁

を カ テ

^ー

テ

^ル内に満

た し

,

た だ ち

^に

カ テ

^ー

テ

ル

を

垂 直^に

^{し て 5}

分間観察の

後,

そ

の高

さ を

胆道 内圧

と し た

^.

胆 道 内

圧

測 定後,

う

^っ滞

し た

胆 汁

を

排

す る た め

, l

時間 胆 汁

を

採 取

し て

^か

ら

, 尾 静脈

よ り I C G

(

2

mgハ

00

g 体 重)

を

注

入 し た

^. 注

入

後 胆 汁 中^に

I C G

^の緑色色素

が

出 現

す る ま で の

時 間

を

色 素 排 泄 時間

と し た

. 着色後

8

時 間^に

わ た り 1

時 間

ご と

に胆 汁 排泄 量

と I C G

濃度

^を

測 定

した

^. こ

れ よ り 8

時 間 分

の

全

I C G

童

を

算出

してIC G

排 泄 量

と し

,

そ れ を

投 与 量^で除

し た も の を I C G 回

収率

と し た

.

な お

, 胆 汁 排 泄

量 と I C G

排 泄 量^{に つ い}

ては

両 者

と も

体

重 1 00

g 当

た り の

畳

と し て

表

示 した

^..

I C G

濃 度 測 定 法

は

, 胆 汁

0

^.

1

m

l

^に

9

^.

9

^m

l

の蒸留水

を

加

え 1 0 0

倍^に希 釈

し た

後,

そ

の

1

m

l

に生 食水

2

m

l を

加

え 3

m

l

の検 体

を

作 成

し た

.生食 水

^{を ブラ}

^{ン ク}

^とし

て B

^{e c}

k

m a n n 吸光 度 計^に

て

, 波長

8 0 5

n m に

.

^{お ける吸}

光 度

^を

測定

した

.

そ れ か ら

,

予 め

作成

し た

検

量

線^に

よ り I C G

濃 度

を

算 出

し た

.

4

^. 走査 電

子

顕 微 鏡^に

よ る

観察

エ ^ー

テ

^ル麻酔 下^に

て

開腹,門脈

よ り 1 8 ゲ

^ー

ジ

^ハ光針

を

挿

入 し

,

プ

^ロ

カ イ

^ン

と

^ヘパ

リ

^ン

を

加

え た

生食水^{に て} 濯流 洗 浄

し た

^{. つ い}

で 4

⁰

C

^に冷 却

し た 1

%

グ

^ル

タ

^ル

ア

ル

デ

^ヒ

ド

^に

て

濯流 固定

を

行^っ

た

. 褐色 固 定化

した

衡 肝 臓

は

左 葉 内側 区 域

を

, 総 胆管

は そ

^の

ま ま

摘出

し た

.

肝 臓

は 2

^×

2

^×

2 0

^{m m}

の

小 片^に

し

, 総 胆 管

は

^4￠

C

p

h

o sp

h

ate ^‑

b

u

f f

e r液 (

P H

⁼

7

^･

4

) ^で十分 洗浄

し た

後

5

×

5

m m

の

小片^に

^し

^, 再

び 4

⁰

C 2

^.

5

%

グ

^ル

タ

^ル

ア

ル

ヂ

^ヒ

ド で 2

時 間 固定

し た

. 続^い

て

,

3 0

分 間p

h

o sp

h

ate

‑

b

u

ff

e r液

で

洗浄 後

1

%

オ

^{ス ミ}

ウ

ム酸^に

て 2

時間国定

し た

.

そ の

後, エ

チ

^ル

ア

ルコ ^ー ル に

よ る

系列脱水 臨 界 点 乾 燥

を

経

た

後滞小 片

は d i

gi^t

^{a l f}

^{r u ctu r eに て}割新

し

,

そ の

断 面

を

, 総 胆 管

は そ

^の

ま ま

白 金^パ

ラ ジ ウ

^{ム に}

閉 塞 性 黄痘 解 除 後^の胆 汁排 泄能

_{4 3 1}

よる

蒸着

を

施 し,

日 立 H A

^‑

1 0 0

塾走 査電

子

顕 微 鏡^{に て}

そ の

形態

を

観察

し た

｡

成 績

Ⅰ

^.

血

清 生化 学 的検 査

乱

^{A ft}

^{e r}

^{b iI}

^e

●

d

u c

t

o

b

s

t

r u c

ti

o n Bir血

b

iR

m

g

/

^{d 1}

7 2 1 0 8 6

4

2

∪

6

0 5

0

4 0 3

0

2 0 1 0

Ob s

t

･

J 1 3 7 1 4 2 1

d ay

の)

⁽

⁷

^{) (}

⁷

^{) (}

⁷

^{) 川 (}

⁵

^{) (}

⁵

⁾

^帽

^也

1

.

血

清^ビ

リ

ル

ビ

ン値

血 清総

ビ

値

の

推 移

は

閉塞 後

24

時 間( 以 下, 閉 塞

1 日 と

表 現

す る

)

で 5

^.

0 2

±

1

.

6 1

mg/

dl (

m e a n

±S

^.

E

)^.

と

軽 度

^上

昇

し

,閉塞

3 日 で 7

^.

8 5

±

1

^.

5 0

m g/

dl と

急 上昇

し た

. 閉塞

7 日 で は 10

^･

3 9

±

1

^.

9 3

^mg/

dl と

pe a

k

に達

し た

. 閉塞 前^に比^べ有 意

の

差

を

示

し

.

^た

^.

^そ

^{の後 閉塞}

^{1 4 日}

b .

A ft

er re

J

e a s e o†o

b

s

t

r u c

ti

o n

Bi

r

血

^b

i

n

m

g

/

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で は 8

^.

6 4 ±1

^.4

6

^m g/

dl

, 閉 塞

2 1 日 で は 9

^･

8 9 ±2

^･

4 3

m g畑

と ほ ぼ

平行

を

保^っ

た

( 図

1

^{‑ a})･

閉 塞解 除 後

は

,

3 日 で 0

^･

1 7 ± 0

^･

1 4

^m g/

dl と

急 激^に低 下

し

, 閉塞 解 除 前^に比^べ有 意

で

あ^っ

た

0

7 日 で 0

^･

1 4 ± 0

.

04

m g/

dl と な り

,

2 1 日

^に

は 0

･

0 3 ±0

^･

01

m g/

d l と

完 全に

正

常 値^に復

し た

( 図

1

^‑

b

) .

2

^. 血清

A 卜

p 値

閉塞

1 日 で 2 7

^■

0 3 士1 0

^･

3 3

u

と

急 上 昇

し た が

^, 閉 塞

3 日 で は 2 9

^.

2 5 ±19

^.

1 1

u

と

変

り な く

^, 閉 塞

7 日

に

は 4 9

^.

7 4 ±7

^.

0 6

u

と

pe a

k

に達

し た

.

そ の

後 閉塞

1 4 日 で 3 8

^.

16 ±1 8

^.

74

u, 閉 塞

2 1 日 で 2 4

^･

7 7 ±11

^･

0 8 と

減 少 傾

向

を 示 し た

( 図

2

^{‑ a}).

閉 塞解 除後

は

,

3 日 で 8

^･

8 4 ±4

^･

8 1

u

と ほ ぼ 正

常

と な り

,

7 日 お よ

び

2 1 日 で は そ れ ぞ れ 12

^･

1 3 ±8

^･

74

u お

よ

a.

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^.

7 6

±

2

^.

9 3

^u

と 正

常域^にあ^っ

た

( 図

2

^‑

b

)

3

^. 血清 γ

‑

G T P

値

閉 塞 前

の

血 清γ^‑

G T P

値

は 0 で

あ

る

･ 閉塞

_{1 日 では} 5

^.

0

±

5

^.

O

u,

3 日 で は 1 6

^.

6 ±1 2

^･

3

u,

7 日 で は 12

.

3

士

1 0

^.

O

u,

14 日 で は 2 4

^･

0 ±1 1

･

1

u,

2 1 日 で は 1 0

･

5

±

3

^.

8

u

と か な り ば ら

^つ

き が あ

っ

た が 上

昇傾 向

を示 した

( 図

3

‑ a).

閉 塞解 除 後^,

^{3 日 で は 5}

^･

^{7 ±0}

^･

³

^u,

^{7 日 で は 5}

^･

^{6 ±4}

^･

¹

u,

2

1 日

で は 4

^.

2

±

2

^.

O

u

を 示 し

, 完 全^に

0

に

は

戻

ら な か

っ

た

( 図

3

^‑

b

).

Ⅰ Ⅰ

^.

胆

汁 中 生 化学 的検 査

1

. 胆汁 中^ビ値

正

常

の

胆汁 中

^ピ

値

は 0

^.

3

4 ±

0

^■1 4 m g/

d l で あ り

潤 峯

1 日 に は 2 7

^.

2 3 ±2

^.

5 8

m

g

/

dl と

急 上昇

し

,

以

後

_{3 日 で}

b^.

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