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Ferrlcyanノ還元一一脱色＝ヨル糖定量法 1・
血糖定量法二就テ
金澤鰐科大字馨化學教室（主任岩崎教授）
助手 大 石 太
Taro α∫〃ガ
郎
（昭和15年2月15日受附 特別掲載）
内 容 抄 録
Fe「「icyan−AZMニヨル糖定量法ノ研究カラ出護シタ モノデ，Ferricyan一加里ノ糖二依ル還元一1溌色ヲ利用 セル血糖定量法デアル．
山口，一定量ノ糖二丁リ完全二還元一脱色セラル可キ
漉性一Ferricyan一加里量ヲ経験的二決定シ，之二未知 ノ被槍血液除二二濾液（糖液）ヲ混ジテ還元ヲ行ハシ メ，而テソノ脱色二要スル糖液量ヲ求メ，棚テ血糖量 ヲ知ル法デアル．
1．緒言，本法ノ原理並ビニ特徴 II．本法成立二三スル諸富験
1． 経験的一才歯，性i−Ferricyan一力口里溶液 2．還元（加熱）時聞ノ決定
III．實施法 1．試 藥 2．器 具
目 次
3．實 施 i 除蛋白 ii糖ノ定量 a 〔豫備試験〕
b 〔本試験〕
IV．本法ノ正確度 V．．結 語
1．緒言，本法ノ原理並二特徴
1929年Hawkins， van Slyke（1）（？）等；ノ、，＿定條
件ノ下糖ニヨル：Ferricyanノ還元一脱色二要スルー
〃時間 カラ血糖，並二尿糖ヲ求メル方法ヲ褥テ 之等ヲ護表シタ．帥一定量ノ：Ferricyan一加里溶 液二封シ未知ノ而モ過i剰量ノd−Glukose含：有液
（血液，糖尿）ヲ投ジ100。C．加i熱裡二還元ヲ行ハ シメ，最初ヨリ遽二還元一・EE色セシメラル・迄 ノ時闇ヲ讃取リ，之ヲ氏等ノEichkurve二照合
シテ湖テ被槍液ノ糖量ヲ求メントスルモノヂァ
ノレ．
之元ヨリ創意二富ム方法ナルハ言ヲ侯タヌ
ガ，併シ此ノ法二於テ遺憾ナルハ，：Ferricyanノ 還元一脱色瓢ヲー瞬ノ間二決スル事ヲ至難トス ルニアル．鼓二余ハ既二完成獲表シタ：Ferricyan AZM＝
ヨル糖定量法（3）〈4）研究ノ途吹偶々還元二當ツテ
［ 258 ）
三二其ノ．淺絵一：Ferricyanノ色調ヲ見ルコトヨリ 略々糖量ヲ推測シ得ルノ事實ヨリ，Ferricyanノ 還元一巡色目要スル〃糖液量 ヨリ其ノ糖量ヲ知
ルノ方法成立ノ可能性ヲ見タ．
一方之叉完成獲表セル超微量一，微量一，Halb−
mikro一， Makro−Ferricyan−AZM（5）ノ何レモが示 スソレ等ノ理論値ヘノー致，並二：Ferricyan−
AZM一糖測定法二於テ藤田一岡本等（6》ノPhos−
phatpufferヲ探り容レタ滴性一Ferricyan一加里液 使用ノ下デハ糖量ト消費一：Ferricyan量トガ正比
ヲナスノ三門等が相倹ツテAi ＝，一定糖量 二 匹敵シ之ニヨリ過不足ナク完全二還元一脱色セ
ラル・：Ferricyal〕量ヲAzotometrisch二二メ得 ベキ必然性ヲ見，實験的二此ノ量ヲ決定シタ．
カクスル事ニヨリ只藪本ノ試験管ヲ使用スルノ ミ，i操作極メテ簡箪，而モ相當正確二考量ヲ求 メ得シメルー定量法が完成セラレタ．
本法ハ口羽・s ：Ferricyan−AZM一品測定法ヲ試 験管ヲ用ヒテ（Azotometerヲ用ヒヌ）ノ再現ヂ アル．帥漉1生一Hydrazlnヲ用ヒテノAZM一實施 二換フルニ試験管内容ノ現ハス脆色ヲ見直チニ 其ノ糖量ヲ求メントスルモノデアル．
而シテ實際本法ハ其ノ多クノ鐵ヲ同法二範ル 所がアツタ．
余ハ叙上ノ原理ニヨル糖定量法トシテ先ヅ
血糖法ヲ試ミ之ヲ得タ．以下之ニツキ述べタイト思フ．
II．本法成立呂關スル諸即興
1．経験的歯性一Ferricyan一加里溶液 超微量一，乃至Makro一：Ferricyan−AZM二於テ ノ、Ferricyan一力窮鼠ノ、 n／1600溶液1．Occヨリ1）／10 溶液1．Occ二至ル濃度二於テ其ノ與ヘルN2一瓦斯 容が遍ク定量的デアルコトが既二明カデアル．
他方，：Ferhcyan−AZ M一血糖法＝於テ 糖量：
α一β値 ハKonstantナルコトモ知ラレテヰル．
而シテ 糖量・α一β値 ハ超微：量一，微量：一：Ferri−
cyan−AZM ＝於テ幾何量ノ：Ferricyan一加里が與 フベキ：N2一瓦斯容二相當スルカバ容易二之ヲ知 り得ルワケデアル．
實際余ハ此ノ量ヲ標準トシテ實験ヲ行ヒ，本
法二於テハ0．10179／dl滴性一Ferricyan一加里溶液 ノ1・Occガアタカモ100γ一d Glukoseニヨリ完全 二丁元一脱色セシメラル・ヲ見タ．
而シテ0．10179／d1：Ferricyallkali一溶液1．Occハ 微量一Ferricyan−AZM＝ヨレバN2一瓦斯トシテ 正二17・30mm．3ヲ與フベキデ，之ハFerricyan一一 血糖法ノソレ帥，17．25mm3ニー一致スル．
2．還元（加熱1時間ノ決定
實験ノ結果，還元時間ハ100。C．5分ニチハ 不足，10分以上ナラバ可ナルコトヲ知ツタ．本 法二於テハ之ヲ15分間行フコト・定メタ．
III．實
1．試藥
i）除蛋白用（藤田一岩竹）（7）
八難：三鴇轡定量用
B． 1．1 n一1 aOH
ii）経験的滴性一Ferricya11一力哩一溶液
暦 法
1難需i欝欝
褐色瓶二容レ冷暗所措置クコト，
陳奮ナルモノハ用二郷iエヌ．
iii）KB一飽和食盤水 11
（ 259 ］
852 大 石
Kahlbauln一製分析用食盤ヲ用フ．
iv）NaF一国
2．器具
i）還元月」試験管，附Kappe・（第1圖）
：Ferricyan−AZM一調測定法ノソレト同型 同大，之ニー定ノ目盛（2cc並二6cc）ヲ附 シタモノ無色，硬質硝子製（20×110mm）
Kappe （22×30mm）
第1圖 還元用試験管，附Kappe
ii）同試験管豪
還元二四ツテ其ノマ・Wasserbad二嵌込
ム様二作ラレタノヲ至便トスル．iii）Wasserbad，附Glasglocke
iv）小漏斗，及ビ無友濾紙（Schleicher u・
SchUll No．590）……（藤田一：岩竹）
v） liN［esspipette 1．Occ， 2．Occ， 5．Occ
3．實施
i．除蛋白 藤田一岩竹法二範ルコト、シタ．
三角コルベン」二試i藥一Aヲ16・Occ探り之二 2．Occノ激語血液ヲ加へ，ヨク混和少時放置ス
ル．次ヂ5〜10分遠心器ニカケ，更＝濾紙ヲ以
テ濾過スル．此ノ濾液ハ原血液ノ10倍稀繹トナツテヰル（α）．
別＝試i藥一Aヲ32．Occ，水4．Occ，試藥一：B 4・Occ ヲ混和シ同様濾過シタモノヲ作ル（β）．
ii．糖ノ定量
糖ノ定量操作ハ〔豫備試験〕並二〔本試験〕二分
タレル．
a．〔豫備試験〕
〔豫備試験〕ハ次表二從テ操作スル．
（％）
第1表 豫備試験ノVersuchsanordnung：
試 験 管No，
血汲濾液（・・）cc 除E試藥一濾液（β）cc 滴性一K3Fe（CN）6cc KB−NaClgesUtt． cc
血糖量mg％
1 II 1旺 正▽
0．5 P．5 P．0 R．0
0．75 P．25 P．0 R．0
1．0
@ 1．0
@ 1．0
1．25 O．75 P．0 R．0
200 133 100 80
五二就キ柳力説明．スレバ，試験管壷二並列セ
シメタ4本ノ還元用試験管ノ夫々二血液濾液
（のヲMesspipetteヲ用ヒテ表示ノ如ク05cc，
0・75cc，1・Occ，1・25ccト探りユキ，次デ濾液（β）
ヲ順次之二期ヘテ各試験管ノ目盛〃2 迄充ス．
之二滴性一Ferricyan一加里1容液1．Occ宛ヲ加へ，
更二KB一罪和食盤水ヲ注加シテ何レモ目盛 6 二達セシメル．
［ 260 ）
第2表 本試験ノVersuchsanordnun9：
（ct］
（［ ）
（Y）
（o ）
血糖量200mg％ヨリ大ナル場合
試験管N・・i・・
血液一濾液（ct）cc 除E試藥一濾液（6）cc 漉面一K3：Fe（CN）6cc KB−NaClgeslitt． cc
O．3 1．7 1．0 3．0
血糖量mg％ 1 333
II 1
O．35 1．65 1．0 3．0
286
IIIi
O．4 1．6 1．0 3．0
250
IVノ
O．45 1．55 1．0 3．0
222
面面試験ノ（1）ト（II）ノ間二脱色鮎アル場合
試 験 管No．
血液一濾液（ct）cc 除E試藥一濾液（β）cc 磁性一K3Fe（CN）6cc KB−NaClges． cc
血糖量mg％
1ノ
O．55 1．45 1．0 3．0
182
II i
O．60 1．40 1．0 3．0
167
IUi 1 IVi
O．65 1．35 1．0 3．0
154
O．70 1．30 1．e 3，0
1i，，
同ジク（II）ト（III）ノ閻
試 験 管No・
血液一濾液（ct）cc 除E一難一濾液（β）cc 漉ll生一K3Fe（CN）c，cc KB．NaClges． cc
血糖量mg％
Ii
O．80 1．20 1．0
30
125
コ口 i
O．85
115
1．0 3．0
118
［1［i i ［V！
O．90 1．10 1．0 3．0
111
O．95 1．05 1．0 3．0
105
同ジク（HI）ト（正V）ノ間
試 験 管No・
血液一濾液（Ct）cc 除E試藥一濾液（β）cc
：（SS性一K 3Fe（CN）e，cc KB一一NaClges． cc
血1糖量m9％
Ii
1．05 0．95 1．0 3．0
95
II！
1．10 0．90 1，0 3．0
91
皿！
1．15 0．85 1．0 3．0
87
［Vi
1．20 0．8 1．0 3．0
83
〔・〕1血灘8・m・％・リi」・ナ・甥合
｝ 一 ＿ 一
@ ， 皿 @ 一噌一殉一一一 一『 一｝r一一『π一一 寧 一｝ 一一 一一＿＿ ＿ 一
試 験 管：No． 1！ u！ Iliノ IV！
血液一濾液（雲）cc 1．30 1．35 1．40 1．45
除E試藥一濾液（β）cc 0．7 0．65 0．6 0．55 漉油一K3Fe（CN） 3cc 1．0 1．0 1．0 LO
KB−NaC】gesatt． cc 3．0 3．0 3．0 3．0
血糖量mg％ 77 74 71 69
［ 261 ）
854 大 石
次デ充分二回旋其ノ内容ヲヨク混和セシメタ
試験管ノ夫々二K：apPeヲ冠シ煮沸Wasserbad
申二15分間加熱セシメル．
還元完了スレバ，試験管ヲ其ノ毫ノマ・引ア ゲテ冷却，蝕二各試験管中其ノ内容ノ脱色完全 ヂ，之二隣レルハ最幽微黄色ヲ呈シテヰルモノ ヲ見出スノデアル．
総テノ試験管（内容）ガ脱色シ去りタル場合ニ ハ被槍血糖量ハ200mg％ヲ超工，逆二其ノ何レ モガ：Ferricyan功n里ノ黄色ヲ留ムル場合ハ血糖
量ハ80mg％以下ナリト知ル可ク，叉例ヘバ第
II號管ハ無色，第；1一管ハ幽微黄色ヲ呈セル場 合ハ血糖：量ガ200〜 133mg％ノ間二四ルヲ知ル 如キヂアル．何レニセヨ〔豫備試験〕ニヨリ被槍血液ノ含糖
量ヲ四々知ルコトヲ得ルガ，更二此ノ試験管ヲ 標準ニシテ〔本試験〕ヲ行フ．
b．〔本試験〕
〔本試験〕ハ大略第2表ノ如キ範園二於テ分
チ得ル五ツノ場合ノ其ノ何レカヲ行フコト・ナリ，之ニヨリ更S眞血糖値二近ヅクコトが出來
ノレ．
還元二二ト共S，〔二二試験〕二二テ見出シタ ルト同様，隣i接セルハ幽微黄色ヲ留メ自ラバ完 全二脱色セル試験管ヲ求メ，之ヨリ血糖：量ヲ知 ルワケデアルガ，本法二於テ眞ノ脱色黙ハ恒二 省該試験管ト隣接シ未ダ微黄色ヲ留メテヰル試 験管ノソレノ間二四スルト考フルが合理的ナル
ヲ以テ，之等爾試験管ノ示ス糖量ノ不均値ヲ以 テ本法ノ與ヘル血糖：量ト定メルコ1・・スル．
IV．本法ノ正確度
余ハ本法ノ正確度ヲ槍スノセ爲二，家兎血液二 就テ本法トFerricyan−AZM一血糖法トヲ並ビ行
ツテ血糖値ヲ求メタガ，其ノ結果ハ次表二示ス 如クヨクー一致スル．
第3表 本法ノ正確度
（家兎血液二就キ本法トFerricyan−AZM一血糖法トノ比較試験）
1 II 1【1 IV
家兎：N犠
縁x方法
血糖量mg％ 血糖量mg％ 血糖量mg％ 血糖量mg％
本 法 97．5 89．0 93．0 93．0
Ferricyan−
̀ZM一血糖法
τ 97．7
P196．5孕均97。5 o1198．3
査呼物8＆4
認1二握均957 P認1：9鞠899
V． 結
本法一点施頗ル簡便，且相當高度ノ正確度ヲ 有スルーi新血糖定量法ヂアル．語
禰筆二三ミ本研究ヲ補助セラレタ小林二男氏ノ 御厚志二感謝ノ意ヲ表スル．
文
1） J． A． Hawkins， J， Biol． Chem・ 84， 69， 1929．
2） Hawkins−van S1yke， J． Biol． Chem， 81，
459，1929． 3）大石太郎，アツオトメトリー第 9報．本誌，本町．4）同人，アツオトメトリー
獄
第10報．本誌，本四． 5）同人，アツオトメト リー第8報．本誌，本號，
Bioch． Z． 225， 368， 1930．
Btoch． Z． 242， 43， 1931．
6）籐田，岡本，
7）藤田，岩竹，
［ 262 ］
