考   察

シベ リア産お よび本邦産 (北海道産

,長

野県産

)と

供試 した産地 の異 な るカラマツ材 の 水抽 出物 には

I共

通 してア ラ ビノガラクタ ンが主要構成成分 として合 まれ ていた。各 々の 水抽 出物 におけ る全糖量

i中

性還 元糖 の糖組成

,ウ

ロン酸量に著 しい相違が認 め られなか った ことか ら

,水

抽 出物 に 占めるアラ ビノガ ラクタ ンの割合は

,産

地 間で大 きな相違 はな いと考 えられ る。 しか し

,水

抽 出物 の収率が シベ リア産 で約

10%,本

邦産が約

5%で

あるこ とか ら

,シ

ベ リア産カラマツ材 におけるアラ ビノガラクタ ンの合有率は

I本

邦産 カ ラマツ 材 の^2倍以上であると考 え られ る。カ ラマツ材 のアラ ビノガラクタ ンの合有率 は

,カ

^ラマツ

Ｃ 駕

■ ヽ こ Ｐ 声

﹈

︼ ｏ 卜   ゝ Ｈ 巧   引 ω

︼ 引 ｏ ｏ ヽ 周

400

300

200

100

ConcentratiOn of added KWE(%)

Fig.  Ⅱ―‑11.  Relationships between added amount of KWE in PDA medium and Шycelial dry weight of edible mushrooms incubated incubated for ten dayst

Legends i O:HIRATAKE(P.Ostr92ι

EPs),         

● :ENOKITAKE(F.79′_Ertwipes)

△ :YANAGIMATSUTAKE(Л .りFFЛJr2θθβθ), A I SHIITAKE (と ^{.θ」οJ9♂}),

□ :NAMEKO(P.コ_β〃

94o),      ￨￨:MAITAKE(♂

.i〔饂 」9sコ

).

Note: The vertical bars represent standard deviation.

‑ 29 ‑

40o

奮 器 Ｅ ヽ こ

目

∞

・出 ０ 卜   ゝ Ｈ 巧   引 ω

・Ｈ

﹁ ｏ ｏ ゝ Σ

300

200

100

Concentr

10       15 ion Of added KWE(%)

Fig. Ⅱ―‑12.  Relationships between added amount of KWE in PD medium and mycelial dry weight of edible mushrooms incubated incubated for ten days.

Legends:O:HIRATAKE(P.Os材

留 ιrd)・

     

^●

:ENOKITAKE(F.79カ

ιlipθs)

△ :Y△NAGIMATSUTAKE(】_{.θ /′ fЛ}Jraσθβθ

), A :SHIITAKE(と

^{.θ」οJ9s),}

□ :N△MEKO(P.コβ〃θb),       1日  :MAITAKE(fぅ ^{とて甑 」ο}

s2).

Note l The vertical bars represent standard deviation.

０    

´

Ｒ ｖ     ａｔ

材の樹種

,樹

齢

,年

輸幅

,樹

高 に よって異 な る (C6tё

 et al.11966,1967;C6tё

^・Time―

H,1967)が ,本

実験 におけ るアラ ビノガラクタ ンの合有率の相違 は

,樹

種 による違 いが 大 きな要因であると推察 され る。

カラマツ水抽 出物 中のフェノール成分の合有量は

,シ

ベ リア産 と本邦産では大 き く異な り

,本

邦産 にはシベ リア産の3.5倍 余 りのフ ェノール成分が合 まれていた。 また

,北

海道産 のフ ェノール成分 には長野県産 には見 られない高分子量の成分が存在 していた。一般 に樹 木抽 出成分 には

,そ

の樹種 固有の代謝産物が合 まれてお り (今村 ら

,1983),特

^に樹皮や

材の温水抽 出物 ・酢酸エチル抽 出物 ・タ ンエ ン類 は

,材

を識別す る上 で指標 とな る ことが 報告 されている (岸 本 ら

,1979,1981)。

したが って

,カ

ラマツ材 の樹種

,生

育立地条件 の違 いは

,微

量成分 である水溶性 フェノール成分の形成 に影響 を及ば して いるもの と考 え

られ る。

      

^フ

シベ リア産

,北

海道産

,長

野県産の いずれの産地 にお いて も

, 

ヒラタケ

iエ

ノキ タケ〕

シイタケ と供試 した3菌種 に対 してカラマツ水抽 出物 を添加す るに したが い

,菌

糸体重量は 増加 し

,特

^に5〜

15%の

添加濃度 で顕著 な増加 を示 した。一方

:菌

糸体伸長量 は

10%以

上の 添加濃度では

,供

試 した3菌種すべてにおいて抑制 された。 この ように

10%以

上の添加濃度 では

,菌

糸体 の伸長成長 と重量成長に対 して全 く逆 の作用 を示 した。食用 きの この子実体 発生 には

,ホ

ダ木 や培養基 内の菌体量が関与 し

,菌

体量が多 いほ ど子実体発生量 が増 える ことが知 られている (Tokimoto・

Fukuda,1981,Ohga,1990a)。

また

,木

粉培地 の伸長 試験 と子実体形成試験 では

,両

者 の結果 は必 ず しも一致 しな い ことが指摘 されて いる (有 田 ら

,1969)。

これ らの ことは

,菌

糸体 の総成長量 を現す菌糸体重量 は伸長成長量 よ りも 子実体形成 の状況 を反映 している ことを示唆 している。 したが って

,い

ずれの産地 のカラ マツ水抽出物 も子実体形成 を促す ことが期待 できる。 この点 については

1第 ^V章

で検討 を イ〒う。

菌糸体重量成長 に対 して

,1〜3%の

添加濃度 では産地間で成長量 に差 が生 じなか ったが^,

‑ 31 ‑

5%以

上の添加濃度 では産地間で著 しい差 が生 じた。 いずれのカラマツ水抽 出物 も主要構成 成分がアラ ビノガ ラクタ ンであ り

,抽

出物 中の糖関連成分はほぼ 同様 な傾 向を示 した こと か ら

,産

地 間におけ る添加効果 の差 には

,糖

関連成分以外 の物質 の関与 が推察 され る。

シベ リア産カ ラマツ水抽 出物 は

, 

ヒラタケ

iエ

ノキ タケ

iヤ

ナギマツタケ

,シ

イタケ^! ナメコ

,マ

イタケ と供試 した6菌 種全 ての食用担子菌 に対 して

, PD培

地

,PDA培

^地のい

ずれの培地 において も菌糸体重量成長 に顕著 な促進作用 を示 した。カ ラマツ内樹皮 の温水 抽 出物 は

,エ

ノキ タケ

,ナ

メコ

, 

ヒラタケ

,キ

クラゲ

,ア

ラゲキ クラゲに対 して顕著 な成 育抑制作用 を示す こと (善木 ら

,1984)か

ら

,カ

ラマツ材 の水抽 出物 は, 内樹皮温水抽 出 物 とは化学組成が異 な ることが示唆 され る。

スギ

, 

ヒノキ

,ア

カマツの 内樹皮温水抽 出物 は

,キ

クラゲ

,シ

イタケの成育には促進作 用 を示すが

, 

ヒラタケに対 しては成育抑制作用 を示 している (善本,1984)。 。 また

, 

^シイ

ノキ辺材部 の熱水抽 出物 はシイタケには成育促進作用 を示すが

,ナ

^メコ

, 

ヒラタケに対 し ては成育抑制作用 を示 している (松尾

,1957)。

一般 に

,樹

木心材 の温水抽 出物 は

,食

用 担子菌の成長 に対 して抑制作用 を示す場合が多 く

,例

外的にブナ心材がナメコ

, 

ヒラタケ に対 して

, 

ミズナラ心材が シイ タケに促進作用 を示 す ことが報告 されて いる (高畠,1987, 1989)。 カラマツ材 の製材鋸屑 は大部分が心材か ら生 じていることを考慮 に入れ ると, シ ベ リア産カラマツ水抽出物 が供試 した6菌種全 ての食用担子菌に対 して顕者な促進作用 を示 す ことは

,樹

木心材 の水抽 出物 として極 めて特異的 であ り

,カ

ラマツ水抽 出物 には

[特

定 菌種 に限定 され る ことのな い

,広

範 囲な担子菌 の菌種 に共通 して作用す る成育促進成分の 存在が示唆 され る。

5。

  

結

 

^論

シベ リア産

,北

海道産

,長

野県産 と産地 の異 な るカ ラマツ材水抽 出物 につ いて

,化

学組 成 を検討 した ところ

,い

ずれ も主要構成成分 は共通 してアラ ビノガラクタ ンであ り

,糖

関 連成分 は産地間で顕著な差 が認 め られなか った。 しか し

,全

フェノール量 は

,本

邦産 (北

海道産

,長

野県産

)で

は

,シ

ベ リア産の約3.5倍 の合有量 を示 した。三産地のカラマツ水抽 出物 につ いて

: 

ヒラタケ

,エ

ノキ タケ

,シ

イタケと三菌種 の食用担子菌の菌糸体成長 に及 ぼす影響 を検討 した ところ

,い

ずれのカラマツ水抽 出物 も供試 した三菌種全 てに対 して添 加量が増加す るに したが い菌糸体重量は顕者 に増加 した。^1〜

3%の

添加濃度 では産地 間で 添加効果 に差 が生 じなか ったが

,5%以

上の添加濃度 では菌種 に応 じて産地間で差 が生 じた。

シベ リア産カラマツ水抽 出物 につ いて

, 

さ らにヤナギマツタケ

,ナ

^メコ

,マ

イタケ と対象 菌種 を増や して食用担子菌 の菌糸体成長 に及ぼす影響 を検討 した ところ

,全

ての菌種 で寒 天

,液

体

,木

粉 と物理条件 の異 な るいずれの培地 にお いて も

,菌

糸体成長 に顕著 な促進作 用 を示 した。

第 Ⅲ草

 

ヒラタケ菌 によるカ ラマ ツ水抽 出物 の資化性 と菌体外 酵素 の産 出

前章 にお いて

,カ

ラマ ツ水抽 出物 は ヒラタケ

,エ

ノキ タケ

,シ

イ タケ等 の有用 な食 用担 子 菌 の菌糸体成 長 に顕著 な促進作 用 を示 す ことを見 いだ した。 また

,カ

ラマ ツ水抽 出物 の 主要 構成成 分 は

,水

溶性 多糖 類 の ア ラ ビノガ ラク タ ンで あ る ことを明 らか に した。

シイ タケ (吉田 ら

,1987)i 

ヒラタケ (吉 田 ら

,1986),エ

ノキ タケ (Kitamoto・ ^Cru―

en,1976)に

お いて

,栄

養成 長 の段階 で菌 糸体 の発 育 に ともな い培地 中の炭素源 が トレハ ロー ス

,グ

リコー ゲ ン等 の多糖類 に変換 され て菌糸体 中に蓄積 され る ことが知 られ て いる。

この ことか ら

,カ

ラマ ツ水抽 出物 中のア ラ ビノガ ラク タ ンは培地 中の戊素 源 として資化 さ れ て い る可能性 が あ る。培 地 成分 は菌 糸体 成長 を左 右 し

, 

これ に付 随 して菌体外酵 素活性 も変 化 す る ことが シイ タケ (池ヶ谷 ら

,1993), 

^ヒラタケ (岩原 ら

,1983)で

報 告 され て いる ことか ら

,カ

ラマ ツ水 抽 出物 の添加 は食 用担子 菌 の菌体外酵 素活性 に も影響 を及 ば し て いる可能性 が あ る。

そ こで

,本

章 ではカ ラマ ツ水抽 出物 として水抽 出物 の調製 が容易 な シベ リア産 カ ラマ ツ 材 の水抽 出物 (以下

,KWEと

略す る。

)を

用 い

,KWEの

添加 に よって菌 糸体 重 量 の増 加 が最 も顕著 であ った ヒラ タケ菌 につ いて

l KWEお

よびその主要成 分 で あ るア ラ ビノガ ラク タ ンを添 加 した培地 での菌 糸体重量及 びフ ェノール酸 化酵素

,多

糖 分解酵素 の活性 を 測定 し

,菌

糸体成 長 お よび菌体 外 酵素活性 に及 ばす

KWEと

ア ラ ビノガ ラクタ ンの影響 を 検討 した (高 畠 ら

,1995)。

1.カ

ラマツ水抽 出物の資化性

1.1 

_{材料 お よび方法}

(1)供

試菌

当セ ンター保存菌株 である ヒラタケ PFθ^prOと,s οstrθttιps(」

acq:Fr.)Kummer.

Po‑03菌

株 を供試 した。なお

,接

種源 として供試菌 を

MYA培

地 で^24℃ にて6日 間平面 培養 した後

,コ

ルクボーラーで直径^5mmに打 ち抜 いたデ ィスクを用 いた。

(2)カ

ラマ ツ水抽 出物

前章^1・ 1で 記述 した シベ リア産 カ ラマ ツ (肋^rデχ ^dP。

)の

製材 鋸屑 よ り調製 した粉 末状 の カ ラマ ツ水抽 出物

(KWE)を

供 試 した。

(3)供

試培地

基 本培地 には

,ア

スパ ラギ ン・グル コー ス培地

(AsG培

地

)を

用 いた。

AsG培

地 の 組成 は

,Glucose 20g, L― Asparagine 2g,MgS04'7H200.5g,K2HP040.46g,

KH2P 04 1g,ThiaminttHC1 0,lmg,蒸

留水

lLで

あ る。

AsG培

地 よ リグル コー スを 除 いた培地 をア スパ ラギ ン培 地

(As培

地

)と

し

,AsG培

^{地 と}

As培

地 に

KWEお

よび ア ラ ビノガ ラク タ ン (Sigma社製

l minimum98%(TLC),以

^下

AGと

略す る。

)を

添 加 し

i lN― HClで p H5.5に

調製 して供試培 地 とした。

KWEお

よび

AGの

添 加量 は

W/V

比 で

0.5,1,2,3,5,10,15%と

した。 なお以下

,AsG培

^地

,As培

地 に

KWEを

添加 した培地 を

KWE― AsG培

地

,KWE― As培

地 と表示 し

,ま

た

, AsG培

地

,As培

地 に

AGを

添 加 した培地 を

AG― AsG培

地

:AG― As培

地 と表 示 す る。

(3)菌

糸体 の培養 お よび菌 糸体 重量 を測定

供試培地^20mとを100ml容三 角 フ ラス コに分注 し,121°

Cに

て15分 問滅 菌 し

,供

試 菌 を接種 した。培養 は124°

Cに

て10日 間静置培養 を行 った。培養後

,菌

糸体 を濾別 し

,温

水

,冷

水 で順 次洗浄後

,菌

糸体 の乾 燥 重量 を沢J定 した。

(4)グ

ル コー ス と還 元糖 の定量

培地 中の グル コー ス量 は

POD― GOD法 (Trinder,1969)を

用 い

,波

長505nmの吸光 度 か ら測定 した。還 元糖 量 は

,供

試培地 お よび培養濾 液 を加 水分解 してSomogyi一Nelson法

(Somogyi,1952)に

よって測定 した。

1.2  

結

  

果

KWEお

よびその主要構成 成分 であ る

AG,KWEの

構成 単糖 であ るア ラ ビノー ス (以 下

,Araと

略す る。

),ガ

^{ラク トー ス} (以下

,Calと

略す る。

), 

^{さ らに}

KWEの

糖 組成 の 割合

(Ara:Gal=12:88,重

^{量 比}

)(高

畠 ・水 本

,1994)に

従 って

,Araと

Galを 混 合 した混

‑ 35 ‑

合糖 (以下

, Ara+Galと

略す る。

)の

^{それぞれ を}

AsG培

地 に添加 して ヒラタケ菌 を培養 し

,菌

糸体重量 を測定 した。その結果 を^Fig.Ⅲ

‑1に

示す。

KWE― AsG培

地 では

,菌

糸 体重量は

KWE添

加の増加 に ともな って著 し く増加 した。

KWEの 5,10,15%添

加培地で は

,菌

糸体重量 はそれぞれ無添加培地

(33.2mg/flask)の

5.1倍 (168.2Ⅲ

g/flask),8.6倍

(286.8mg/flask),9.6倍

(317.2mg/flask)と な った。

AG― AsG培

地 では

,AG添

加 濃度が

3%ま

で

,添

加量の増加 とともに菌糸体重量 は増加 し

,無

添加培地 の2.3倍 (74.9mg

/flask)と

な った。 しか し

, 

さらに

AGの

添加濃度 を高 くす ると菌糸体重量は漸減 し

,添

加濃度

10,15%で

は

,無

添加培地 の1.7倍 前後 とな った。

Ara,Calお

よび Ara+Gal添 加培地 では

,い

ずれ も添加す るに従 い菌糸体重量は漸減 し

,15%添

加 区では無添加培地 の2/3〜¹ /2と なった。 この ように ヒラタケ菌糸体成長 に対 して

,KWEと

その構成糖 の作用 は

,全

く逆 の傾 向を示 した。また

,AGは

促進作用 を多少示 したが

,KWEの

よ うな顕著 な促進 作用は示 さなか った。

庚素源 としての

KWEの

資化性 を他 の炭素源 と比較す るために

,Tableユ

^ー1に示す各種 炭素源 を供試 し

,基

本培地 である

AsG培

地 のグル コース

(2%(W/V))と

置 き換 えて菌糸 体重量 を測定 した。その結果 を^Table皿

‑1に

_{示す。マ ンノース}

,グ

^{ル コース}

,可

溶性デ ン プ ンで良好 な成長 を示 し

,次

いでガラクツ ロン酸が良好であった。

KWE関

連 の単糖類 で ある

Ara,Gal,Ara+Galで

は

,キ

ンロース・ ラク トース

,シ

ュク ロース とともに菌糸体成長 量が劣 り

1 

ヒラタケ菌 に とって資化 し難 い炭素源であった。また

,KWEや ^AGは

グル コ ースの40〜

50%の

成長量 とな り

,フ

ラク トース

,マ

ル トース とともに供試 した反素源の中 では

,中

庸 な成長量 を示 した。

炭素源 としての

KWEの

添加濃度 と ヒラタケ菌糸体 の成長量 との関連性 を検討 す るため に

,AsG培

地 か らグル コースを除 いた

As培

_{地 にグル コース・}

KWE,AG,Ara,Cal,

Ara+Galを

_{添加 し}

,そ

れぞれの培地 で ヒラタケ菌 を培養 した。その場合の結果 を^Fig.Ш ― 2に示す。Glu添 加培地 では濃度

2%で

_{最大 とな り}

,そ

れ以上添加 して も

,菌

糸体 の重量 は逆 に減少 した。 これ に対 して

KWE― As培

地 では

,KWE添

加濃度 が高 くな るに従 って^,

ドキュメント内 食用担子菌の成育に及ぼすカラマツ水抽出物の影響に関する研究 (ページ 31-40)