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断に最も有用性が高いと考えられた。
NormaIsubjects
（4=n 7
）
600
００４
コョ）ご一ン一一。⑯①Ｅ訂匡山
200
急性心筋梗塞３２症例、肝疾患５０症例、健常人４７例を対象にした血清TLMDH活性 と総ＡＳｒ(I当ASD活性の関係をＨｇ､１７に示す。'1当ASrr活性は急性心筋梗塞、肝疾患
において上昇するが、′ＰＭＤＨ活性は急性心筋梗塞症例のみ著しい上昇がみられた。さ らにＦ１９．１７には示さなかったがｍ－ＭＤＨ活性も同様の傾向が認められた。'ＰＭＤＨと '1砦ASrは、臓器分布や細胞内局在性が類似しているが、′ＰＭＤＨは急性心筋梗塞の診
Liverdiseases
（5=n 0
）
ＡＭＩ
( n
= 3 2
）
Fig.１７.ComparisonofMDHandASTactivitiesinserumofpatientsw
diseases．
□ ； A S T , ■ ； Ｍ Ｄ Ｈ , ＊ ＊ ＊ S i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s f r o m A M １ ，
ＮＳ.；nce．fferentdificasigniNotｈＡＭＩａｎｄｌｉｖｅｒ p
<
0
．００１，
3 ２
Marker
急性心筋梗塞の２５症例についてミオグロビン49)、ＣＫ，ＣＫ－ＭＢ，pyruvatekinase (PK)50)、ｃ－ＭＤＨ，ｍ－ＭＤＨ、c-ASr，m-ASr51)、LD-120)の発症からの経時変化を検
討した。この結果、Ｔａｂｌｅ７に示すように、ミオグロビン、ｃ－ＭＤＨ、ｍ－ＭＤＨ，ＣＫ－
ＭＢ，ＣＫ，ＰＫ、c-ASfr，m-ASfr，ＬＤ－１の順にピーク値に到達した。また、正常範囲 内に復するのはＣＫ，c-ASI､、m-ASTよりもｃ－ＭＤＨ，ｍ－ＭＤＨの方が早い傾向がみら れた。cytosol由来の酵素よりもミトコンドリア由来の酵素がおくれて上昇する傾向に あり、これは細胞が障害されるとまず最初にcytosol由来の酵素は容易に逸脱するが、
ミトコンドリアの破壊に達するまで時間がかかることに起因するものと考えられる。
Ｔａｂｌｅ７.ChangesincardiacmarkerproteinsafteronsetofAMl
6 . 0 -2 4 . 0 ( 1 2 . 7
） 3 . 0 -3 0 . 1
（）2.71 8 . 3 -3 0 . 0 ( 2 0 . 5
） 8 . 3 -3 0 . 0 ( 1 9 . 5
） 8 . 3 -4 6 . 0 ( 2 4 . 5
） 3 . 5 -5 9 . 0 ( 2 8 . 3
） 8 . 3 -3 5 . 0 ( 2 2 . 0
） 1 4 . 0 -6 4 . 0 ( 3 2 . 0
） 1 . 5 -1 4 . 0
（）58.
DurationofeIevated
v a I u e ( d a y
）
Timetoreachmaximum
v a l u e s ( a v e r a g e , h o u r
）
－３３－
3-3-2-2.急性心筋梗塞におけるＭＤＨの有用性の評価
４５４４５６４２５ ３３３３３３３州Ⅱ
ｃ－ＭＤＨ ｍ－ＭＤＨ ＣＫ ＣＫ－ＭＢ ｃ－ＡＳＴ ｍ－ＡＳＴ ＰＫ ＬD-1
Myoglobin
しかしながら、Ｆｉｇ．１８に示すように、急性心筋梗塞の中でＲＣＡ部位の梗塞(右側壁）
での壊死が強い症例では、ｍ－ＭＤＨはｃ－ＭＤＨ活性との上昇とピーク到達時間はほぼ同
時間になった。
▲ 8 ハ
０
０００６４２
の①．－ｍン①○匡①』①↑の』』①ＱＱ．↑○の①｜Ｑ三コ三 ｌｌｌｌｌ
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‘ ＄ ０ －
－ －
1 ０ ２ ０ ３ ０ ４ ０ ５ ０ ６ ０ ７ ０
T i m e ( h o u r
）
Ｆｉｇ．１８．ＣｈａｎｇｅｓｉｎＴ－ＭＤＨ，ｍ－ＭＤＨ，myoglobin，ＣＫ,T-ASTandm-MDHactivitiesin
serumafteronsetofchestpainO；ｍ－ＭＤＨ，●；Ｔ－ＭＤＨ，□；m-AST，■；T-AST，△；ＣＫ，▲；myogIobin．
さらに、これらの症例について再潅流療法の成功（１７例)、不成功(８例)でのＭＤＨ 活性の差異について検討した。Fig.１９に示すように、'ＰＭＤＨ活性のピーク値の比較
では、再潅流療法の成功と不成功に差は認められなかったが、ｍ－ＭＤＨのピーク値の比 較では有意差が認められ(ｐ＜0.002)、１００Ｕ/Ｌ以上の高値を示したのは不成功の５例
であった。また、ｍ－ＭＤＨと'ＰＭＤＨの比率〔(ｍ－ＭＤＨ/'ILMDH)×100%〕で比較す
ると、さらに大きな差が見られ、成功例では一例を除いて全てが１５％以下であったが、
－３４－
至った。
ＮＳ､、 ｐ＜0.002 ｐ＜0.001
F i g . １ ９ s f u l ( １ s u c c e s t s w i t h p a t i e n e r u m o f i e s i n s c t i v i t . M D H a ７ I c e s s f u r u n s u c a s e s ) o c
( ８iousrfpere)esasc n t h e r a p y , a f t e r a c u t e m y o c a r d i a l i n f a r c t i o nま◎三×（工ロ三‐ヒエロ芝‐Ｅ）
－コ一つ）の①一一一ン一一。、エロニ‐』
００３２
（ミコ）の①重ン一一。⑮工口三‐Ｅ不成功例では全てが１５％以上を示し、１５％を越えた９例中、６例が予後不良で、死に
opoorprognosis
－３５－
1 ０
(+）（-）
r e p e r f u s i o n (+）（-）
r e p e r f u s i o n
（+）（-）
r e p e r f u s i o n
3-4.考察
ＭＤＨ活‘性の吸光度増加法による従来の測定法は、内因性の乳酸とＬＤＨの存在により β-NADが還元され正の干渉を受ける。Ｗｏｎｇら47)は３７℃で１時間予備加温したり、
過剰のＬＤＨを添加してＬＤＨ反応を平衡状態にすることで影響を回避している。著者
はＬＤＨの阻害剤であるオキザミン酸を添加することにより予備加温時間を省略し、しかも測定時間１０分で済む簡便法を開発した。ｍ－ＭＤＨ活性測定の場合には、オキザミ
ン酸を添加しなくてもＬＤＨ活性をＧＨＣｌが完全に失活させるため45)、影響を受けない。
ＭＤＨアイソザイム測定のｐＨと活性について検討したところ、ｍ－ＭＤＨ、ｃ－ＭＤＨと
もにｐＨ10.2～10.6で最大活性が得られた。これはＷｏｎｇら47)の報告したｐＨ９．２と
異なる結果であった。本法は至適条件の検討から、Ｗｏｎｇらの方法に比べてc-MDHで
は１．５倍、ｍ－ＭＤＨでは１．９倍の感度で測定できた。また、ｍ－ＭＤＨの測定系では、DBSSとＣＴＡＢはｍ－ＭＤＨを阻害するが、ＧＨＣｌはｍ－ＭＤＨの活性をほとんど阻害せ ずｃ－ＭＤＨのみを完全に阻害し、マトリックスの影響をほとんどうけないため、安定し た測定が可能である。ＭＤＨは同一の２個のサブユニットからなる２量体である。
GHClは、ｍ－ＭＤＨを阻害しない程度の濃度を添加した条件下では、ｃ－ＭＤＨの２量体 のゆるい開裂を起こして立体構造の変性をおこし活性を阻害するものと考えられる45)。
本法による'ＰＭＤＨおよびｍ－ＭＤＨ測定用試薬の一般的性能は、再現性、直線性、
相関性に優れ、共存物質は溶血検体以外の影響を認めず、さらに、ＧＨＣｌのｃ－ＭＤＨに 対する活性阻害率は99.6％以上であり、ＭＤＨアイソザイム(ｃ－ＭＤＨ，ｍ－ＭＤＨ)を特 異的に分別定量可能なことから、日常検査に充分適用できる方法であると考えられる。
ＦＭＤＨは心疾患、肝疾患、筋疾患、腎疾患で上昇するが、特に急性心筋梗塞で著し く上昇した。しかも、ＣＫ、ＣＫ－ＭＢよりも早期にピークを迎え、異常高値の持続時間
はミオグロビンよりも長いため測定時期を逸する心配も少なく、急性心筋梗塞の早期診
断マーカーとして有用であると考えられた。再潅流療法の成否の判定ではTLMDHよりｍ－ＭＤＨの方が診断的有用性が高く、ｍ－ＭＤＨ/'ＰＭＤＨ比は１５％を越えると死亡率 が高い。このことは、電気泳動法でｍ－ＭＤＨのバンドが出現すると死亡率が高いとい
うGarbusら43)の報告と一致する。ｍ－ＭＤＨの逸脱パターンはm-ASrと類似した挙動
を示すが、m-ASTよりも高値となり早期に上昇し、異常値の期間が短い。同じミトコ
－３６－
ンドリア由来の酵素でありながら、細胞からの逸脱パターンが異なることは今後、急性 心筋梗塞の機序を解明する上で重要な手がかりになるものと考えられる。
3-5.小括
ＭＤＨ活性測定の従来法は、内因性のＬＤＨの影響を回避するために１時間の予備加 温が必要あり、また、感度が低くＭＤＨアイソザイムのｍ－ＭＤＨを測定できなかった。
著者は、ＬＤＨ阻害剤であるオキザミン酸を用いて予備加温を省略し、至適条件を設 定することにより１０分で測定可能なＭＤＨ迅速測定法を開発した。さらにこの測定試 薬にＧＨＣｌを加えることで検体中のｃ－ＭＤＨを特異的に阻害し、ｍ－ＭＤＨのみを測定 できるＭＤＨアイソザイム測定法も開発した。これらの方法は、再現性、直線性、相関 性に優れ、共存物質の影響もほとんど認められず、測定時間が短いため自動分析機に適 用し多数検体の処理が可能である。
ＭＤＨ活性は心疾患では心筋梗塞のみが上昇し疾患特異性が高いが、肝疾患では急性 肝炎以外の慢性疾患でも上昇し、疾患特異性はみられなかった。さらに、ｍ－ＭＤＨも心 筋梗塞で高値を示し、ｆＰＭＤＨに対するｍ－ＭＤＨの比率が１５％を越えると死亡率が高
く、再潅流療法が不成功の例にこの傾向がみられた。このことは、細胞の強い障害のた め細胞膜だけでなく、壊死がミトコンドリアまで達して大量のｍ－ＭＤＨが逸脱したこ
とを示唆し、心筋梗塞による細胞障害の程度や予後の推定に有用と考えられる。
－３７－