学位論文審査結果の要旨
所 属
三 重 大 学 大 学 院 医 学 系 研 究 科
甲 生 命 医 科 学 専 攻 病 態 解 明 医 学 講 座 腫 瘍 集 学 治 療 学 分 野
氏 名 堀 和 一 郎
審 査 委 員
主 査 伊 佐 地 秀 司 副 査 新 保 秀 人 副 査 吉 田 利 通
（ 学 位 論 文 審 査 結 果 の 要 旨 ）
Protective effect of edaravone for tourniquet-induced ischemia-reperfusion injury on skeletal muscle in murine hindlimb
著 者 ら は 論 文 に お い て 下 記 の 内 容 を 述 べ て い る 。
四 肢 骨 格 筋 に お け る 虚 血・再 灌 流 障 害
(I/R injury)は 、挫 滅 症 候 群 、コ ン パ ー ト メ ン
ト 症 候 群 、 駆 血 帯 障 害 、 遊 離 筋 肉 移 植 な ど で 引 き 起 こ さ れ 、 局 所 損 傷 の 増 大 、 全 身 合 併 症 を 引 き 起 こ す こ と も あ る が 、 有 効 な 治 療 手 段 は 未 だ な い 。 本 研 究 で は 、四 肢 骨 格 筋I/R injury
に 対 す る エ ダ ラ ボ ン(
ラ ジ カ ッ ト®)の 効 果 を 検 討 し た 。
目 的：駆 血 マ ウ ス の 骨 格 筋 を 用 い て
1)
エ ダ ラ ボ ン に よ る フ リ ー ラ ジ カ ル 除 去 効 果 の 組 織 学 的 評 価 、2)
脂 質 酸 化 損 傷 マ ー カ ー で あ るMDA (Malondialdehyde)
、酸 化 ス ト レ ス マ ー カ ー で あ るiNOS(Inducible nitric oxide synthase)を 用 い て 生 化 学 的 評 価 を 行
い 、 エ ダ ラ ボ ン のI/R injury
に 対 す る 有 用 性 を 検 討 し た 。方 法 ：
C57/BL6
マ ウ ス(8-10
週 齢 、 オ ス)
、22-28g、 40
匹 を 用 い 、 ペ ン ト バ ル ビ タ ー ル(50mg/kg)を 腹 腔 内 投 与 し て 麻 酔 し 、駆 血 30
分 前 に エ ダ ラ ボ ン(3mg/kg)ま た は 同 量 の 生 理 食 塩 水 を 腹 腔 内 投 与 し た 。 駆 血 は2007
年Crawford
に て 報 告 さ れ た 歯 科 矯 正 用 輪 ゴ ム を 使 用 し て 、 エ ダ ラ ボ ン 投 与 群(I/R+Ed
群)
と 生 食 投 与 群(I/R
群)
に 対 し 右 大 腿 部 を1.5
時 間 駆 血 し 、再 灌 流 後1
日 お よ び3
日 で 評 価 し た 。腓 腹 筋(GC)、前 脛 骨
筋(TA)を 採 取 し 、 組 織 学 的 お よ び 生 化 学 的 に 評 価 し た 。 組 織 学 的 評 価 は 、 HE
染 色 の 短 軸 像 、Histological damage score、筋 損 傷 率 で 評 価 し た 。 Histological damage score
は 、 組 織 破 壊 と 炎 症 を0-3
段 階 に 分 け て 合 計 で 評 価 し た 。 筋 損 傷 率 は 、McCormack
の 報 告 に 従 い 全 筋 線 維 数 分 の 損 傷 線 維 数 と し て 算 出 し た 。 生 化 学 的 評 価 は 、MDA
定 量 とiNOS
のWestern blotting
法 を 行 っ た 。結 果 ： 再 灌 流
3
日 目 のGC
は 、HE
染 色 に て 、I/R
群 で 著 明 な 炎 症 細 胞 浸 潤 を 認 め た が 、IR＋ Ed
群 で は 組 織 間 隙 浮 腫 所 見 を 認 め た も の の 軽 度 の 炎 症 細 胞 浸 潤 が 一 部 に 認 め ら れ る の み で あ っ た 。Histological damage score
は 、I/R
群 に 対 しI/R+Ed
群 で低 下 し た 。筋 損 傷 率 は 、再 灌 流
1
日 目 のI/R
群 に 対 しI/R＋ Ed
群 でGC、TA
と も 有 意 に 低 下 し た 。 再 灌 流3
日 目 も 、I/R
群 に 対 しI/R+Ed
群 で 有 意 に 低 下 し た 。 こ れ ら の 結 果 は 、 エ ダ ラ ボ ン がI/R injury
の 筋 保 護 効 果 を 有 す る 可 能 性 を 示 唆 し た 。 再 灌 流1
日 目 のMDA
は 、GC
で 、I/R
群 に 対 し 統 計 学 的 有 意 差 を 認 め な い がI/R＋ Ed
群 で 低 い 傾 向 に あ っ た 。TA で はI/R
群 よ りI/R＋ Ed
群 で 有 意 に 低 下 し た 。iNOS発 現 もI/R
群 よ りI/R＋ Ed
群 で 抑 制 さ れ て い た 。結 論 ： エ ダ ラ ボ ン 投 与 に よ り 筋 損 傷 率 の 低 下 、細 胞 膜 脂 質 過 酸 化 障 害 と 炎 症 細 胞 浸 潤 の 減 少 を 認 め た こ と か ら 、エ ダ ラ ボ ン の 骨 格 筋
I/R injury
に 対 す る 有 用 性 が 示 唆 さ れ た 。
本 研 究 は 、臨 床 応 用 可 能 な エ ダ ラ ボ ン の
I/R injury
に 対 す る 効 果 を 明 ら か に し た 論 文 で あ り 、 学 術 上 極 め て 有 益 で あ り 、 学 位 論 文 と し て 価 値 あ る も の と 認 め た 。BMC Musculoskeletal Disorders. 2013;14(113)
K.Hori, M.Tsujii, T.Iino, H.Satonaka, T.Uemura, K.Akeda, M.Hasegawa, A.Uchida, A.Sudo.
