泌尿器科領域に於けるピロフォスファターゼの組織化学 Title的研究第 1 報 : 健康成熟家兎に於ける泌尿生殖主要臓器内活性分布に就いて Author(s) 鮫島, 博 Citation 泌尿器科紀要 (1958), 4(4): Issue Date URL htt

Title

泌尿器科領域に於けるピロフォスファターゼの組織化学

的研究 第1報:健康成熟家兎に於ける泌尿生殖 主要臓器内

活性分布に就いて

Author(s)

鮫島, 博

Citation

泌尿器科紀要 (1958), 4(4): 187-196

Issue Date

1958-04

URL

http://hdl.handle.net/2433/111598

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Departmental Bulletin Paper

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b87 泌 尿 紀 要4巻4号 昭 和33年4月

泌 尿 器 科 領 域 に於 け る ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ

の 組 織 化 学 的 研 究

第1報

健 康 成 熟 家 兎 に於 け る泌 尿 生 殖

主 要 臓 器 内 活 性 分 布 に 就 い て

久留米大学医学部泌犀器科学教室(主 任 重松教授)

助 手

鮫

島

博

Histochemical

Studies

on Pyrophosphatase

in Urological

Field

Report I. Activity

of Pyrophosphatase

in Normal Rabbits

Hiroshi SAMESHIMA

Department of Urology, Kurume University School of Medicine

(Director : Prof. S. Shigematsu.)

The activity of pyrophosphatase

was not distinctly known in our urological field

because we had no methods for its histological demonstration.

Last year, Maeda successed in it. I tried to observe the pyrophosphatase activity in

various urological organs of normal rabbits by use of Maeda's method.

Consequently, the results obtained were as follows.

Pyrophosphatase Type I.

Kidney : Renal corpusle, renal capsule, epithelium of glomerulus and basement

mem-brane of it showed the weak positive reaction, but proximal and distal convoluted tubule

often showed the weak positive reaction too. Interstitial

tissue was always negativ.

Endothelium of blood vessel was mild positive.

Testis : Spermatogonia, spermatocyte,

and spermatid always showed the positive

reaction and Sertoli's supporting cells were often positive. Interstitial cells and connective

tissue were shown almost negative reaction.

Epididymis

In efferent ductule and duaus epididymis, their epithilium cells were

always shown positive. Interstitial connective tissue was negative while circular smooth

muscle layer was always mild positive.

Seminal vesicle : Mucous membrane was positive and lamnia propria was mild

posi-tive, but outer capsule being always negative.

Prostate : Glandular epithelium showed always the strong positive reaction, but

inters-titial tissue and fibrous connective tissue were always negative.

Pyrophosphatase Type II.

Kidney : Renal corpuscle, renal copsule, epithelium of glomerulus and basement

mem-brane of it always showed the strong positive reaction.

Type II in proximal and distal

convoluted tubule was stronger than Type I.

In the testis, epididymis, seminal vesicle, and prostate, I could not recognize the

essential difference between Type I and Type II. Consequently, I know that the activity

of pyrophosphatase

distributes

more widely than that of phosphomonoesterase

and has

more important significance in the metabolism of animal or human body.

188

第1章

緒

鮫 島一 泌 尿 器 科 領 域 に於 け る ピ ロ ブォ ス ブvタe-一ゼ の組 織 化 学 的 研 究(第1報)

言

フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ と は 種 々 の 燐 酸 エ ス テ ル を 加 水 分 解 す る酵 素 の 総 称 で あ つ て,作 用 す る基 質 特 異 性 に よ つ てphosphomonoesterase, polyphosphatase,phosphodiesterase,Meta-phosphatase,pyrophosphatase,等 に 区 別 さ れ,叉 至 適 水 素 イ オ ン 濃 度 に よ つ て も,酸,ア ル カ リ.中 性 の3種 に 区 別 さ れ る事 は 周 知 の 事 実 で あ る1,2〕.此 の 中 通 常 フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ と 呼 ば れ る も の はphosphomonoesteraseで あ つ て こ れ に 関 し て は1907年 に 鈴 木 等 が 米 及 び 小 麦 の 糠 の 中 に イ ノ ジ ツ ト燐 酸 塩 で あ るphytin を 分 解 し 無 機 燐 を 遊 離 せ し め る所 の 酵 素phy-taseが 存 在 す る 事 を 始 め て 報 告 し,次 でMc CallumandHart(1908)カ ミ動 物 組 織 内 に も 同 様 の 酵 素 が 存 在 す る 事 を 発 見 し て 以 来 そ の 生 化 学 的 研 究 は 盛 と な り始 め た の で あ る が,1923 年 に 至 つ てRobison等 が フ ォ ス フ ァ ク ー ゼ が 生 理 的 化 骨 機 転 に 於 て 重 要 な 役 割 を 演 じ て い る 事 を 提 唱 し,そ の 後 数 多 くの 実 験 が こ れ を 実 証 す る に 及 ん で 益 々 注 目 を 惹 くに 至 つ た の で あ る.然 し生 体 に 於 け る フ ォ ス フ ァ ク ー ゼ の 意 義 は 荷 広 範 で あ つ て,最 近 の 組 織 化 学 的 研 究 の 進 歩 に よ つ て そ れ が 生 理 的 病 理 的 機 転 に 重 要 な 役 割 を 演 ず る こ と が 明 確 と な り つ つ あ る 現 況 で あ る.特 に 吾 力秘 尿 器 科 領 域 に 於 て は そ の殆 ど の 器 官 に 多 量 の フ ォ ス フ ァ ク ー ゼ を 証 明 し,就 中 腎 皮 質 の そ れ は 尿 生 成 に 関 与 す る も の と さ れ て い る. 即 ち 組 織 化 学 的 研 究 の 結 果 細 尿 管 に 於 け る フ ォ ス フ ァ ク ー ゼ の 存 在 部 位 が 明 か に な り而 も そ れ が 腎 機 能 の 充 進 或 は 減 弱 に 関 連 し て 増 加 或 は 減 退 す る 事 実 か ら,腎 機 能 を 形 態 学 的 に 追 究 す る 途 が 開 か れ た わ け で あ る.そ の 他 膀 胱,睾 丸,睾 上 体,前 立 腺,等 に も 多 量 に 存 在 し そ の 機 能 の 充 進 或 は 減 退 と 一 連 の 関 係 を 持 つ て い る の は 甚 だ 興 味 深 い も の で あ る. 次 に ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ に 就 い て で あ る が,前 述 の 如 く フ ォ ス フ ァ ク ー ・ゼが 泌 尿 器 科 領 域 内 臓 器 に 多 量 に 存 在 し而 も そ の 機 能 的 方 向 に 大 き な 影 響 を 持 つ て い る な ら ば 当 然 ピ ロ フ ォ ス フ ァ ク ー ゼ の 存 在 価 値 も 考 え ら れ て 然 る べ き で あ ろ う こ れ に 関 し て は1922年 にRocheが 動 物 の 組 織 内 に 於 け る そ の 独 立 性 を 発 見 し て 以 来 BamannandGalleを 始 めNorbergSumn-er,J.Bそ の 他 の 研 究 者 が そ の 至 適 水 素 ・fオ ン 濃 度 及 び 酵 素 作 用 の 賦 活 並 に 阻 害 効 果 等 の 発 表 を 行 つ て 来 た の で あ る が,残 念 乍 ら 各 研 究 者 の 完 全 な る意 見 の 一 致 を 見 る 迄 に は 至 つ て い な か つ た.故 に そ の 存 在 価 値 即 ち 吾 が 領 域 に 於 け る 臓 器 は 勿 論 の こ と,そ の 他 の 臓 器 組 織 内 で も 如 何 な る 役 割 を 果 し て い る も の か 知 る よ し も な か つ た の で あ る.然 し 乍 ら1950.年 よ り1953年 に 至 る研 究 に よ つ て,至 適 水 素 イ オ ン濃 度 の 相 違 に よ る3種 の 酵 素 が 区 別 さ れ,最 近 で は 夫kI 型,H型,及 び 皿型 と呼 ば れ る に 至 つ た.然 し 多 数 の フ オ ス フ ア ク ー ゼ 群 の 組 織 化 学 的 証 明 法 が,久 保 ・高 松,Gomori,武 内,そ の 他 の 入k に よ つ て 発 見 さ れ て い る に も拘 ら ず,ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ に 就 い て は 完 全 な 方 法 は .見当 ら ず,高 松 の 有 機 ピ ロ燐 酸 エ ス テ ル の 水 解 に 関 与 し た も の に 就 い て の 試 み と,石 川 そ の 他 に よ る 無 機 ピ ロ 燐 酸 酵 素'に就 い て の 試 み が あ る の み で あ つ た.

1955年 に 至 り前 田 は ピ ロ燐 酸 鉄 錯 塩 を基 質 と

して 用 い る事 に よ りほ ぼ 完 全 な る証 明 法 の考案

に 成功 した.こ れ は前 述 の 如 くピ ロ燐 酸 鉄 錯 塩

を基 質 と して 用 》・,酵 素 活 性 の あ る組 織 片 を作

用 せ しめ る と ピ ロ燐 酸 結 合 が 水 解 され て ピ ロ燐

酸 量 の減 少 と共 に 鉄 イオ ンが遊 離 し,そ の鉄 イ

オ ン が燐 酸 鉄 或 は 水 酸 化 鉄 と して切 片上 に沈 澱

す る の で この鉄 塩 を 組 織 化 学 的 に 証 明 し よ う と

す る も の で あ る.前 田 は倫 又 ピ ロ燐 酸鉄 錯塩 が

ピ ロフ オ ス フ ァクPゼ の 基 質 とな り得 るか 否 か

に就 い て詳 細 に 検討 して い る.

即 ち水 素 イ オ ン濃 度 の変 動 に よ る活 性 分布 の

変 動,及

び 阻 害 剤 の 影 響 に 就 い て 多角 的 検討 を

加 え た結 果,Roche,RocheandTho3iそ

の

他 の入 々 の認 め る如 く,ピ ロ燐 酸 鉄 錯 塩 を基 質

とす る場 合 は基 質 が ピ ロ燐 酸 自身 で あ る場 合 に

は 及 ぱ な い に して も樹 十 分 に燐 酸 の 遊離 す る事

が 明 か と な つ た の で あ る.故 に私 は此 の 組織 化

学 的 証 明法 を現 在 に於 け る最 も妥 当 な る もの と

鮫 島一 泌 尿 器 科 領 域 に 於 け る ピ ロ ブォ ス ブァ タ ー ゼ の組 織 化 学 的 研 究(第1報)

して泌 尿 器科 領 域 の諸 臓 器 の該 酵 素 活 性 の分 布

状 態 並 に 各種 疾 患 に 際 して の そ の変 動 を 明 か詳

せ ん と し,先 づ 成 熟 家 兎 に於 け る活 性 分 布 を詳

細 に検 討 した後 に,実 験 的 に 障 碍 され た臓 器 並

に臨淋 摘 出臓 器 に 就 い て 同 様 の 検 索 を行 い,各

疾 患 に際 し同酵 素 の分 布 の変 動 と病 変 との間 に

何 等 か の 関係 を見 出 さん と試 み た 次第 で あ る.

第2章

ピ ロ フオ ス ファ ター ゼの 組 織 化 学

的証 明手 技

ピ ロ フォ ス ファ タ ー ゼ の独 立性 が 発 見 され て以 来, 至 適水 素 イ オ ソ濃 度 に よ り3種 の酵 素 が 区 別 され,現 在 で は夫 々1型,皿 型 及 び 皿型 と呼 ば れ て い る事 は 緒 言 に於 て述 べ た通 りで あ る が,前 田 の実験 に もあ る如 くマウ スに 於 て 皿型 と 皿型 と の間 に 酵 素活 性 分 布 に関 して質 的 な差 は認 め られ ず,従 っ て 実 際的 に は 恰 も フォ ス ファ タ ーゼ が酸 性 と アル カ リ性 に分 け られ てい る如 く此 の場 合 も1型(ア ル カ リ)豆 型(酸)と 分 け るのが 好 都 合 と思 わ れ るの で 夫 々 の証 明 手 技 を 紹 介 す る. 第1項 ピ ロフ ォ ス フ ァ ター ゼ1型 の 組 織 化学 的 証 明 手 技 (1)新 鮮 な 臓 器 切片 を0.9%食 塩 加5%中 性 フオ ル マ リyで1時 間 固 定. (2)0.9%食 塩 水 で10∼20分 水 洗. (3>凍 結 切片 とし,切 片 は0.9%食 塩 水 に移 す (4)切 片 は 遊 離 の ま ま次 の基 質液 に移 し37。Cで 3時 間. 基質 液 の作 り方 … … ピ ロ燐 酸 ソー ダ(Na4P2C>T・ 12H20)1,19を 水 に 溶 か し,塩 化 第 二 鉄(FeC13・ 6H20)0。61gを 水 に 溶 か した もの を加 え,生 じた 白色 沈 澱 が溶 け る迄 過剰 に な らな い様 に注 意 し乍 ら 濃厚 炭 酸 ソpダ 溶 液 を加 え,次 で 稀 塩酸 でpH7.2 ∼7 .3(ガ ラ ス電極pHメ'タ'で 測 定)と し, O・.99の 塩 化 ナ トリウ ムを 加 え 溜 水 で全 量 を100cc とす る,用 時 新 製.使 用 直 前 に此 の液50ccに10% 硝 酸 マ グネ シウ ム或 は 塩 化 マ グ ネ シ ウム1ccを1 滴宛 徐 々に加 え る.マ グネ シ ウム塩 を急 速 に 加 え る と急 速 に大 量 の沈 澱 を生 じ て結 果 が 良 くな い. (5)切 片 を取 出 し て20∼30分 間0.9%食 塩 水 で充 分 に水洗 す る. (6)切 片 を ガ ラ スに貼 っ て 自然 乾 燥. (7)酸 性 硫 化 ア ンモ ンの非 常に うす い 液(O.9%食 塩 水50ccに 数 滴)に 短 時 間 ひ た す.此 の時 切 片 の陽 性部 位 に 緑 が あ らわ れ る, 189 ⑧ 手早 く水 洗,ア ル コ ール脱 水,バ ル サム 封 入, 切 片 に生 じた 硫 化 鉄 の色 は比 較 的 短 時 間 で提 色す る か ら,脱 水,封 入 を 出 来 る だ け手 早 く行 っ て鏡 検 す る 。陽 性 部 位 は 深緑 色乃 至 淡 緑 色 を呈 す る.対 照 標 本 は 基 質 液 に マ グ ネ シ ウム賦 活 剤 を加 え な い もの に つい て 同様 に操 作 し て作 る. 第=項 ピ ロフ ォ ス7ア ター ゼ 皿型 の 組織 化 学 的 証 明 手 技 (1)新 鮮 な臓 器 切片(4)を5%中 性 フオ ル マ リソで 1∼6時 間 固 定. (2)溜 水 で10∼15分 水 洗. ㈲ 凍 結 切 片 とす る. r41切 片 は 遊 離 の ま ま次 の基 質 液 に 移 し37。Cに 1時 間. 基 質 液 の作 り方 … … ピ ロ燐 酸 ソー ダ1.1gを 水 に 溶 か し,塩 化 第.二鉄0.61gを 水 に溶 か した もの を加 え る.十 分 混 和 し て か ら沈 澱 を 遠 心 分離 す る,上 清 を 捨 て沈 渣 に 少量 の 水 を加 え沈 渣 を混 和 した後,濃 厚 炭 酸 ソー ダ溶液 を赤 褐色 の透 明 液 が得 られ る迄 加 え る.出 来 た 透 明液 に稀 塩 酸 をi数滴 づ っ 注意 深 く加 え てpH4.7∼5.0(ガ ラス電 極pHメ ー タ ーを用 う) とす る.pH7.0以 下 に な る頃 か ら薄 い 混 濁 を生 じ, 暫 く放 置す る と消 失 す る.全 量 を 溜 水 で100ccと し, 2∼3時 間放 置 し てか ら使 用 す る.作 つ た ピ ロ燐 酸 鉄 錯 塩 溶液 に等 量 の0.5モ ル 酷 酸 ・酷酸 ソe-Of緩 衝 液(pH4.7∼5.0)を 加 え る'尚 ピ ロ燐 酸 鉄錯 塩 液 が 永 続 性 の混 濁 を生 ず る場 含 に は,pHを6.0位 に と どめ,緩 衝 液 のpHを や や酸 性 側 に し て等量 混 合 液 のpHが4.7∼5.0に な る様 に す る. (5)溜 水 又 は 等 張 食塩 水 で10分 間 水 洗. ⑥ 切 片 を ガ ラ スに貼 っ て 自然 乾 燥. ・(7)酸 性硫 化 ア ソモ ソの うす い 液 に 短 時 間 ひ た す. ⑧ 手 早 く水洗,ア ル コール 脱 水,以 下1型 の場 合 と同様 に行 う 陽 性部 位 は深 緑 色 乃 至 淡 緑 色 に 酋 色 す る.対 照 標 本 は 基 質 液 に0.3%の 割 に弗 化 ソP・ダを 加 えた もの に つ い て 同様 に操 作 す る.

第3章

健 康成 熟家 兎に楚け る1型 の活性

分布 につい て

第1項

実験動物及び実験方法

健康成熟雄牲 家兎 の体重2kg内 外の ものを選び,約

1週 聞飼育 して異 常なき事を確めた後 に屠殺 し,速 か

に所要 の臓器を摘出 して第一章に述べ た如 く固定以下

190 鮫 島一 泌 尿 器 科 領 域 に於 け る ピ ロ フォ ス ファ タPゼ の 組 織 化学 的 硯究(第1報)

の操作 を行い鏡検観察を行 うと同時に必 要あれ ば顕微

鏡写真 の撮影を行った.

第2項

腎臓に於け る活性分布

腎 臓 に於 て は一 股 に皮 質 に強 く陽 性 を呈 す る部 が 多 い とさ れ て い るが,1型 で は マル ピ ギ氏 小体 の毛 細1血 管 内 被,糸 球 体 上 皮,基 底 膜,ボ ーマ ソ氏 嚢上 皮 は何 れ も弱 陽性 乃 至 は痕 跡 的 に 陽性 を示 す に過 ぎず,糸 球 体 の 嚢 間腔 は陰 性 で あ る.然 し細 尿 管 主 部 の上 皮 細 胞 で は極 め て強 く出現 し,之 は移 行 部 まで 明 瞭 で あ る. 主 部 で は直 部,曲 部 共 に強 陽 性 で その 基 底 膜 も又 弱 陽 性 を 呈 す る.ヘ ンレ氏 係 蹄,中 間 部,集 合 管部 で もそ の上 皮細 胞 に弱 く出現 す る事 が あ るが,細 胞 間 質 は陰 性 の事 が 多 い.間 質 結 締 織 は殆 ど陰性 を呈 す る もの の 様 で あ る. 血 管 壁 内 被細 胞 は 何 れ の部分 も弱陽 性 乃 至 は 中 等度 陽 性 を 呈す る 。乳 頭 部 の上 皮細 胞,及 び 間 質 は全 く陰 性 を呈 す る. 第3項 睾 丸 に於 け る活性 分 布 精 細 管 に 於 て は,精 上 皮,基 底 膜 共 に 陽 性 を 示す. 即 ち 精 祖 細 胞,精 母細 胞,精 娘細 胞 は陽 性.セ ル ト リ 氏 細 胞 は 時 に 弱陽 性 を呈 す る事 が あ る.間 細胞 及 び疎 性 結 合 組織 は殆 ど陰 性 で あ る。血 管 壁 内 被 細 胞 は殆 ど 常 に 弱 陽 性 を呈 す る.睾 丸 白膜 も痕 跡 的 陽 性 を呈 す る 事 が 多 い.畢 丸網 は概 ね 陰 性 で あ るが 時 に は 痕跡 的陽 性 を 呈 す る場 合 も認 め られ る. 第4項 睾 上体 に於 け る活性 分 布 輸 出小管,睾 上 体 管 共 にそ の 上 皮細 胞 及び 基 底 膜 は 陽 性 及び 弱 陽 性 を呈 す る.5こ 輸 出 小管 に於 て は 固 有膜 の平 滑 筋線 維 に痕 跡 的 陽性 を呈 す る事 が多 い.畢 上体 管 に於 け る輪 走平 滑 筋 層 に於 て も同様 で あ る.間 質結 合組 織 は 陰 性 で あ る.血 管 内 被細 胞 は 常に 弱 陽 性 乃至 は 痕 跡的 陽 性 を 示 し陰性 の事 は な い.管 内腔 では 恐 ら く上 皮 細 胞 の脱 落 した もの と思 わ れ る もの に陽 性 を 示 した のみ で あ る. 第5項 精 嚢 腺 に 於 け る活性 分 布 粘 膜上 皮 細 胞 は 陽i生で あ るが,粘 膜 固 有層 で は弱 陽 性 又 は 痕跡 的 陽 性 で,稀 に 陰性 を呈 す る事 もあ る.平 滑 筋線 維 は弱 陽 生乃 至 は 痕 跡的 陽 性を 示 す が 外膜 は 殆 ど常 に陰 性 であ る. 第6項 前立 腺 に於 け る活性 分 布

腺上皮細胞 は強陽性又 は中等度陽 生を示す.前 立腺

小 管 に於 け る上 皮 細 胞 も同様 の事 が 多 い.聞 質 は殆 ど 常 に陰 性 で あ るが,平 滑 筋 線維 の 部 は所 に よ り痕跡 的 陽 性 を示 す こ とが あ る.線 維 性 結 締 織 は概 ね 陰 性 であ る,

第4章

健 康 成 熟 家 兎 に於 け る ∬型 の 活性

分 布 に つ い て

第1項

実験動物及び実験方法

第3章 と同 様 で あ る.

第2項

腎臓に於け る活性 分布

一一一Wt的に 皮 質 に 陽 性 を呈 す る部 が多 い事 は1型 の場 合 と同 様 で あ る.然 し糸 球 体 に於 ては1型 と異 り,毛 細 血 管 内 被,糸 球体 上 皮,或 は ボ ー マ ソ氏 嚢 上 皮で は 強 陽 性乃 至 は 中等 度 陽 性 を 呈 す る.基 底 膜 も同様 で あ る事 が 多 い.細 尿 管 主 部 の上 皮細 胞 が強 陽 性 を 示す の は1型 と同 じで,皿 型 に於 て も 移 行 部 まで 明瞭 で あ る.集 合管 部 で は1型 に比 べ てそ の上 皮 細胞 の或 る部 分 で ゃ や 強 く陽 性 を呈 す る部 が あ るが,一 股 的 に皮質 に は 比 べ られ な い,間 質 結 締 織 が陰 性 で あ るの は1型 と同 じ く,叉 血管 内被 細 胞 は1型 が多 く痕助 的 陽 生を 呈 す る のに 対 して弱 陽 性 を 呈 す る場 合 が比 較 的 多い, 乳 頭 部 上 皮 細 胞,聞 質 は1型 と 同 様 に概 ね 陰 性で あ る. 第3項 睾 丸 に 於 け る活性 分 布 精 細 管 に於 て は 精 上 皮,基 底 膜共 に1型 よ りやや 強 い陽 性を 示 す.即 ち精 祖,精 母 細 胞 は 中等 度 陽 性 で, セ ル ト リ氏 細 胞 も弱 陽 性 を 呈 す る事 が多 い.間 細 胞 及 び 疎 性 結 合組織 は 同 様 に 陰 性 の事 が多 い.血 管 壁内 被 細 胞 も同 じ く弱 陽 性 を 呈 す る.睾 丸 白膜 は1型 よ りや や 強 く陽 性 を呈 す る もの の様 で あ る.睾 丸 網 は 時 に痕 跡 的 陽 性 を呈 す る事 が あ るが概 ね 陰性 で あ る,

第4項

睾上体 に於け る活性 分布

輪 出 小管,畢 上 体 管 共 に そ の 上 皮細 胞,基 底 膜 は1 型 に比 べ 弱 陽 性 乃 至 痕 跡 的 陽 性 を 示 す に 過 ぎな い.然 し 固 有 膜 中 の平 滑 筋 線 維 及 び 翠 上 体 管 に 於 け る輪 走平 滑 筋 層 で は1型 と同程 度 或 は や や 強 い 陽 性 度 を 示す. 間 質 結 合組 織 は 陰 性 の事 多 く,」血管 壁 内 被 細胞 は1型 と同檬 に弱 陽 性 乃至 は 痕 跡的 陽 性 を 示 し てい る.管 内 腔 は 全 く陰性 で あ る.

第5項

精嚢腺に於け る活性 分布

粘膜上皮細胞は1型 の陽性に対し強 陽性を呈 し,粘

膜 固有層 も陽性を呈す る.平 滑筋線 維1型 と比べ ると

鮫 島 一∠泌 尿 器 科 領 域 に於 け る ピ ロ ブォ ス ファ タe-Aiの 組織 化学 的 研 究(第1報) い さ さか 陽 性度 が弱 い.外 膜 は 概 ね 陰 性 で あ る.

第6項

前立腺に於け る活性 分布

1型 と本質 的 な 差異 は殆 ど認 め られ な い.即 ち腺 上

皮細胞,前 立腺小管上皮細胞 は強 學性叉は中度陽 性,

聞質は殆 ど陰性であ るが,平 滑筋線維 は弱陽性乃至は

痕跡的陽性を示す ことが多い.

第5章 ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ と フ ォ ス フ ¶

オ モ ノエ ス テ ラー ゼ との 比 較

第三,四 章 に て前 田 の創案 せ る ピ ロ フナ ス フ7タ ・一 ゼ1及 びll型 の組 織 化 学 的 証 明 法 を 用 い て の成 熟 雄 性 家 兎 の泌 尿 生 殖 主 要 臓 器 の活 性分 布 状 態 を 比 較 的 詳細 に検 討 した が,本 章 で は それ と フ オ ス フオ モ ノエ ステ ラーゼ の活 性 分 布 とを 比 較 検 討 し てみ たい. アル カ リ及 び 酸 フ オ ス ファ タPゼ の活 性 分布 は緒 言 に於 て も言及 した 如 く数 多 くの研 究 者 に よつ て実 験 さ れ多 くの 発 表 が 見 られ る ので あ るが,或 は 酸 叉 は ア ル カ リの一 方に 偏 し,或 は又 可 成 り略 述 され て い て泌 尿 生 殖系 臓 器組 織 に於 け る詳 細 な 報告 は原 に よ る睾 上 体 のアル カ リフオ ス ファ タ ーゼ のみ の様 に 見 受 け られ る そ の他 高 松 は 哺 乳 動物 の正 常諸 臓 器 組 織 に 於 け る ア ル カ リフ オ ス ファ タ ー ゼの分 布 を系 統 的 に,比 較 的 詳 細 に述 べ,文 田 上 は酸 フオ ス ファ タ ー ゼの組 織 内分 布 に就 い て述 べ て い る の で,そ れ らの 成績 と私 の成 績 を 比較 検 討す る事 とす る. 第1項 ア ル カ リ ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ と ア ル カ リ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ に 就 い て 前 田 に よれ ば フオ ス ファ タ ー ゼ と ピ ロ フオ ス ファ タ {ゼ の活性 分 布 は ,小 腸腺細胞,赤 血球,筋 線維,血 管 壁 等 を除 け ば 反 応 の強 弱 に 相 対的 な差 が見 られ るだ け で本質 的 に は余 り大 き な差 は ない とし て い る.事 実 腎臓 に於 て も一股 的 に 皮 質 に 多 い点 は 同様 で,や や異 る部 として は糸 球 体 に 於 て フォ ス ファ タ ー ゼは 殆 ど陰 性 なの に対 し,ピ ロ フォ ス ファ ター ゼは 弱 陽 性 を呈 す る し,又 へyレ 氏係 蹄,中 間 部,集 合管 部 で も前 者 は 全 く陰性 なの に対 し後 者 では 弱 陽 性 乃 至 は 痕 跡 的 陽 性 を呈 す る点 で あ る.細 尿 管 主部 の上 皮 細 胞 が 中 等 度 陽 性,又 は 強 陽性 を 呈 す る事.乳 頭 部 で は 陰 性 で あ る事 は両者 全 くr致 す る.又 後 者 では 血管 壁 内被 細 胞 に弱 陽性 乃至 は 痕跡 的 陽 性 を 呈 す る が前 者 は 陰 性 な る 点 も 異 る. 畢 丸で は 本質 的 な差 は認 め られ な い.畢 上体 で は原 に よれば 成熟 家 兎 の場 合 に 限 り輸 出小 管,睾 上体 管 の 上皮細 胞 は 両者 共 に陽 性,輪 状 筋 層 も共 に 弱 陽 性,疎 191 性 結 合 組 織 は共 に陰 性,血 管 内被 細 胞 は共 に弱 陽 性, 時 に 陽 性 と両者 可成 り一 致 した 成績 が得 られ てい る. 第2項 酸 ピ ロフ ォ ス7ア ター ゼ と酸7オ ス ファ ター ゼ に 就 い て 泌尿 生 殖 各臓 器 組 織 に於 け る酸 フォ ス ファ タ ーゼ の 詳 細 な 発 表 は余 り見 られ な い の で,そ の ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ρゼ との比 較は 後 日機 会 を得 て行 い度 い と考 え る が 前 田 及 び 田上 に よれ ぽ,前 立腺 で は殆 どそ の差 は な い もの の様 で あ るが 腎臓 殊 に糸 球 体 及 び 畢 丸 で は多 少 の差 が認 め られ る.

第6章

総括及び考按

フ ォ ス フ ァ タ ー ゼが 燐 酸 の代 謝 に密 接 な 関係

を 有 す るの み な らず,燐 酸 と結 合 し得 る種 汝 の

化学 物 質 の代 謝 に関 与 して い る事 は 今更 述 べ る

迄 もな い 事 で あ る.然

らば ピ ロ燐 酸 は如 何 か と

云 う に,そ れ は ピ ロ フォ ス フ ァ ター ゼ の存 在 が

ピ ロ燐 酸 を し て燐 酸 の代 謝 プ ー ル と して意 義 あ

ら しめ て い る と思 考 され る の で あ る.

私 は ピ ロ フ ォ ス フ ァ タ ー ゼ を証 明 す る原理 と

して,ピ

ロ燐 酸鉄 錯 塩 を基 質 と して 用 い酵 素 活

性 の あ る組 織 片上 で燐 酸 鉄 又 は水 酸 化 鉄 塩 と し

て組 織 化 学 的 に 証 明 す る前 田氏 法 に従 つ て吾 汝

の領 域 に於 け る臓 器 組 織 内 の該 酵 素 の活 性 分 布

を検 討 した の で あ るが,こ れ は種 々 の疾 患 に際

し フォ ス フ ァ ター ゼ の 消長 に或 る意 義 が認 め ら

れ る の と同様 に ピ ロフ ォス フ ァ ク ー ゼ の消 長 が

あ る生 理 的 意 義 の解 明或 は 又 病 的 機 転 の解 明 の

一 助 とな るの で は な い か と云 う考 え の前 提 と し

て正 常 時 に於 け る そ の分 布 を知 る事 が絶 対 の条

件 で あ る為 に 行 つ た もの で あ る.

私 の得 た 成 績 で は先 づ ピ ロフ ォス フ ァ ク ーゼ

活 性 の 強 い部 はそ の臓 器 の機 能 的 活動 の 旺 盛 な

部 位 で あ る事 が明 か とな つ た.即 ち 此 の 事 実 は

前 田 も述 べ て い る如 くピ ロ燐 酸 は 呼 吸酵 素 活 性

の 強 い細 胞 に生 成 す る可能 性 が 強 い とい う事 を

暗 示 し て い る もの と思 わ れ る.而 も∴ 般 的 に ピ

ロフ ォ ス フ ァ タ ー ゼ の活 性 が そ の分 布 範 囲が 広

い事 は そ の事 実 が即 ち生 体 内 で種 々 の機 序 に よ

り生 成 され る ピ ロ燐 酸 が燐 酸 の 代 謝 プ ー ル とし

て の 意 義 を 持 つ こ とに な る と 思 わ れ る の で あ

る.

192 鮫 島 一 泌 尿 器 科 領域 に於 け る ピ ロ ブォ ス ブ7タFゼ の 組 縫 化 学 的 研 究(第1報)

私 の得 た 成績 を総 括 的 に 述 べ て み る と,先 づ

腎臓 に於 て は 糸球 体 の 各部 では1型 が 弱 く 皿型

に 強 い の に対 し,主 部 上 皮 細 胞 及 び 移 行 部 迄 で

は1型 の 方 が や や 強 い.叉 ヘ ン レ氏 係 蹄,集 合

管部 で はll型 の方 が や や 強 い.そ

の他 で は著 し

い差 は認 め られ ず僅 か に 血 管 壁 内被 細 胞 でll型

が や や 強 い 程 度 で あ る.

睾 丸 に て は 本 質 的 な 差 は殆 ど見 られ ず,睾 上

体 に て も同 様 の 事 が 云 え る.強 い て求 めれ ば僅

か に 輸 出 小 管 及 び 畢 上 体 管 の上 皮 細 胞 が1型 に

強 く,輪 走 平 滑 筋 層 で 皿型 が や や強 い程 度 で あ

る.

精 嚢 腺 で は上 皮 細 胞 層 で僅 か に 皿型 が強 く,

粘 膜 固 有 層 で も 皿型 の方 が や や強 い.平 滑 筋線

維 も 皿型 に 強 い のは 他 の臓 器 組 織 の平 滑 筋 層 に

於 け る場 合 と同様 で あ る.

前 立 腺 で は腺 上 皮 細 胞 そ の他 に著 しい差 異 は

認 め られ な い.

以 上 の事 実 が 種 汝 の重 要 な意 義 を包 含 して い

る事 は疑 う余 地 の な い事 で あ るが 中 で もそ の機

能 的 方 向 の一 つ の指 針 とな り得 る とい う事 は明

か に老 え られ る事 で あ る.例 え ば 腎臓 に於 て 最

も重 要 な役 割 を演 ず る もの の 一 つ で あ る細 尿 管

殊 に そ の主 部 で は1,皿

型 共 に 強 い陽 性 を 示 し

て い る とい う事 実 も興 味 深 い.

荷 又 フォ ス フ ァ クー ゼ活 性 は成 熟 例 よ り も幼

弱性 に 強 く,此 の事 か ら発育 期 の細 胞 に 多 量 に

出現 して,発 育 の 完 成 と共 に 漸 次 減 少 す る事 実

が認 め られ て い るが,こ れ は 発育 の為 の物 質代

謝 が 盛 に行 わ れ て い る事 を 示 す も の で そ の際 に

燐 酸 エ ステ ル そ の他 の代 謝 も之 に 関 与 し て い る

と考 うべ きで あ ろ う し,ピ

ロフ ォ ス フ ァ ク ー ゼ

に 就 い て もか くの 如 き状 況 は充 分 に 考 え られ る

もの で あ る.

第7章

結

論

私 は 前 田 の創 案 に な る ピ ロ フォ ス フ ァタ ー ゼ

の組 織 化学 的 証 明法 を健 康 雄 性 家 兎 の泌 尿 生 殖

臓 器組 織 に 応 用 し,そ の 活 性分 布 の範 囲 を 明 か

に す る事 に よつ て,そ の 存 在 が生 体 の生 理 的 並

に病 的 機 転 に果 す役 割 を解 明 す る一 つ の前 提 を

な す とい う考 え 方 の基 礎 を固 め,更 に フォ ス フ

オ モ ノェ ス テ ラ ー ゼ の活 性分 布 よ り荷 広 範 な牙

布 を な す事 を知 りそ の燐 酸代 謝 に 対 す る重 要 性

を更 め て認 識 す るに至 つ た の で あ る.

(欄筆す るに当 り終始御 懇篤なる御指導 と御校閲を

賜った恩師重松教授に深甚 なる謝意を捧 げる と共に種

々御助言を頂いた元本教室助教授,高 橋 博士に感謝 の

意を表す る次第である.)

本諭文の要 旨は第十回久留米 医学会総会にて発表 し

た.

主 要 参 考 文 献

1)赤 松=化 学 実 験 法,第2部,第12巻(微 生 物 及 酵 素 実 験 法)587,昭22. 2)市 川=細 胞 化 学,そ の 理 論 と 術 式,357,195 3. 3)Roche,J.=Biochem.Jり16=809,1922. 4)Bamann,EalldGalle,H.:Biochem,Z., 293:1,1937. 5)Norberg,BActachem.Secand.,4:6 01,1950. 6)Sumner,J.B.=ChemistryandMethod ofEnzymes.,931953. 7)久 保 ・高 松:日 病 会 誌,40:1,昭26. 8)GomeriG.=Proc.sec.Exp.Bio1.Med., 42:23,1939. 9)Gomeri,G:MicroscopicHistochem-istry.;Chicago.172. 10)武 内=医 学 と 生 物 学,3:279,昭19. 11)武 内:同 上,5=158,昭20. 12)高 松 ・他1満 医 附 録 号,215,1942. 13)石 川 ・他:目 病 会 誌,40168,1951. 14)前 田:十 全 医 誌,57:1330,1955. 15)Roche,J.Thoai,N.and1)urand,J.: compt,rend.,217119,1943. 16)Romeis,B:Taschellb,mikroskop,Te-chnik;13Auflage,Berlin,343. 17)Roche,J.andBandoin,」.:compt,re-nd,soc,bio1。,137;245,1943. 18)飯 沼=新 し い 組 織 学 研 究 法,221,1955. 19)原=皮 と 泌,14:6,436,昭27. 20)高 松:東 京 医 新 誌,3181=841,昭15. 21)田 上=熊 本 医 誌,29:5,610,昭30. 23)C.Allen:TheKidney,Grune&Strat-ion,NewYork,1951.

鮫 島 一 泌 尿 器 科 領 域 に 於 け る ピ ロ ブ ォ ス フ ァ タt・・R1rの組 織 化 学 的 研 究(第1報) Fig、1.ActivityofPyrophosphataseonKidney ig3

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194鮫 島 一 泌 尿 器 科 領 域 に 於 け る ピ ロ プ ォ ズ ブ ァ タ ー ゼ の 組 織 化 学 的 研 究(第1報) Fig.3.ActivityofPyrophosphataseonEpididymis 1_{- ∼} _∼ _{一_、} ∼ri ∼ 一∼馳・.∼ '＼_、 ＼RabbitL、  、.■、 Portion∼ 一∼ w"買 「「几「内'幽r

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鮫 島 一泌 尿 器科 領 域 に於 け る ピ ロ フ ォ ス ファ タ戸 ゼ の組 織 化 学 的 研 究(第1報)195

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196鮫 島一 泌 尿 器 科 領 域 に於 け る ピ ロ フ'tス フ7タPゼ の 組 織 化学 的 研究(第1報)

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★ 麻 酔 力 は コ カ イ ン の1000倍

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