フナ分離鱗での黒色素胞運動の解析と実験材料としての考察
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(2) Part. 1. フナ分離鱗での黒色素胞運動の解析. P. 1Av P 35.
(3) 目. 次. 1．序論. ”一・・ P 1. （2）測定方法. P. 1. 44 88. 2．研究方法 （1）測定原理. PPPP. II．材料と方法 1．材料と飼育. 0. III。実験結果 ．一■．。． P 13. 1．フナ分離鱗の黒色素胞の分布する鱗頂部の吸収スペクトル. と差スペクトル ’一… P13 （1）吸収スペクトル ●●9●”P13 （2）差スペクトル ●●’●’●P13. 2．フナ分離鱗の黒色素胞の分布しない鱗基部の吸収スペクト ルと差スペクトル ・■■■■・P13 3．濃環の異なるKイオンによるフナの黒色素胞凝集反応・一P16 4．Kイオンによるフナの黒色素胞凝集反応に対するフェ ントラミンの影響 e■。●●’P 16. 5．Kイオンによるフナの黒色素胞凝集反応に対するCaイ オンの影響 ●●○●’●P 19. 6．Naイオンによるフナの黒色素胞拡散反応に対するCa イオンの影…響 ○”●”P 19 7．Naイオンによるフナの黒色素胞拡散反応に対する二 価イオンの影響 ●●●’●●P20 IV．考察. P 24. V． 結論. P 30. 文献. P 31. 「資料」1．第36回日本細胞生物学会講演要旨集別刷・・… P 35 ※ 英文要旨 ・・・… P 71 ii＞.
(4) PART 1. 表のリスト. 表 1 塩類溶液組成. e．．oe一・ P 5. 図のリスト. 123456789. 図図図図図図図図図. ギンブナのウロコモデル. P s. 黒色素胞面積測定モデル 黒色素胞断面積と光学濃度. P6 P7 Pg Pg. 二波長測定法 フナ分離ウロコの吸収スペクトル変化. P12 P14. 分光光度匿計. ウロコ固定用サポーターとウロコ固定図. フナ分離ウロコと拡散一凝集時の差スペクトル変化・’・p14. フナ分離ウロコ基部の吸収スペクトル変化一・一一 p15. 図10 図11. フナ分離ウロコ基部の差スペクトル変化 ・・… ■■p15. 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのKイオンによる 凝集反応 ・・・・… p17. 図12. 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのKイオンによる 凝集反応に対するフェントラミンの影響 ・・・・… p18. 図13. 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのKイオンによる. 図14. 凝集反応に対するCaイオンの影響 ・・6・… p21 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのNaイオンによる. 拡散反応に対するCaイオンの影響 ・・・・… p22. 図15. 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのNaイオンによる 拡散反応に対する二等イオンの影響 ・・・・… p23. 図16. 生理的塩類溶液等の吸収スペクトル ・■e…・p25. iの.
(5) 房 工. コミュニケーンヨン乙な。て行り、博多織イ61（V9 、畜髪て塗（ prOtectiv cOlOratlOn）／ 多忍、識色ぐ. ，）や島類の婚衣（nuptial plumage ）な乙1・が る。老畝∫の体色変／しのま役乏担う効果器は色素 肥である2∼3）体色変でゆ1（t、9［、色町肥の蓮鋤移によ. 之塗じる丞い皮膚色の変仏（管理導的体色測6． hy s． iQ log ical COIOr change）乙．皮薦ifi. 色素量の彪減や色煮細躯の数の耀琢．｛（よ。て体老. 四獣錨繍鰍鶴謂藻綾齢鷺 . キし. 態系S素ののは網汰。．一のでぎ払乙尼 状￠二色肥∼噸一黙る鵬弓長仏ノこ測. の艀9類 、％易は第・陥⋮と5状面に 量の。. 星に院の色⊂2星5か臨濠循撮づこ. 動黒n黒煮れ段択段あn細の変グるの. 疲．イ乙（干て本、導負ワ柔本’色変で6． mOrphOlOgical i ， ， 一 x ． 2）．3）. つ. 罷31肋庄でる’稻と欠a加蔽の輿歴る ノP二色注aの ﹁ ︶ 煮 2 が 繭 の あ誤 二一 更副 皆な ♪の躯写乏い. 店赫♂色 （threatening c．） ノ th姻色 nuptia1. るる晶綿髪癒影勢体蔀欝. ’︵C数m助◎色. eCOgnitiOn C．）， 驚二丁・色（Warning C、），. g 福でる乙報鈴る賂い法 い●﹂c威 導 n色h 鯉Pミめにづ段状ざ法に勧あに二方 丞・g馬体a体の○告良薗わ5網∼翻耳てで間ジる 体亥二P一類畝るる一の形曲一一警報る段な第はな記44し活三朔4 ﹁学瑳dブ、づ5づ諺にな19三方定後定 狸 羅 m ♪ 尼 を ’ で 塗 s 差 脚 σ 下段角魏︵後る’久測 コ護。衡登る肥之y野際。−牛叫ぶ芸態崖5観量・直づ後ノて ・ P の 承 。 鰍縣にに状法一窮重艶よき是んレ・ ク 。 保 ﹁ 威 G あ 細. のに変﹁躯缶あ 法 d 乏 竹 ！ 卜 げ 欺 紫 い お ノやので P仏伯の1門下 承 わ 艮 下畑乏託段状．なは肌り存画吃冶 別 P。発る一β屡る一得てで在口峡ノ報 n変変色C煮色と に 色体︶ 佑 ・ 陀ピ開暴はあ毛老し論てが t今体二皮−創や釣e変造○激に分. 管物。体色バ変f6・9る現霧ぎ一般1（体色変で6と）｝ 。体’色亥イ乙は動物の重要な自己保存．動物相互間.
(6) 憾究とム陶乙θ亜翠でし’久㍗. 一拝硬 な一も乏紛 動あ ’苅’一9睡ヅド騰か応訟 運諭 肥蒐. しょて電づ方 時か素で豊肥 るのるづ 解玖 倉・色様肥煮 さ∫得赫 法にれ光石う に 、5 尋の’望’⋮’薫色 で本・解 方ムさを有ヲ 諾え 睨斜めソ色黒 9で隙定に 量彦 な’フ暗室の定 フ 更 ス開掬舵測 煮 ︷ 鱗 払黒の珍 乳鱗測酌 廻と イ 貢 拳 の 凌 頑く則任に量 簡・ンて反系で 色 葭 茎の て 突 二 碕 し 、負纏中鍾ての、分 度馬 横馬 ノ理・光色計 の で処♂のの鋒 具と骨5鱗5・回’一’ 飼る のスに膚膚記 ∼ 皮 回 へ診 る ク ヲニ！卜 ’ い 手 〃. 、 り. こロ宮て簿電鍵。 で葡る反二あ凶兜’い討 細に 専ト・しの乏る 該乏さ集のに炉勧を避ふ燦 の的 匁ク許と法率・報知に凝〃；と本構’光。惟導. 星’包孝肥，’下色薫舵、. 白色素肩乞の3緯類の色沖州ガx・・. 存在づろ。. B．） IE．） tv i8．）. 客レ藤法力過て記煮節りるσ弓・’素沁光垂事物・. カエ’鋳る湊町電鍵一よる赫ろづ色及分・綱生 労報が託づ光で光の75にu解つか黒いをと肉’ ・橘法電線の告の単一9ンてに療ヒの速箔的協熔 間傷定の光画回報で野︵オ颪的観tくの定自下し 爵画添いで欝6﹁奪視聴イバ、憂くの勿配測を’二. に！嶺の。計八ひ承鏡伊Kと定珍エ数煮教ζ漏る 勘甲て罵る色微なご微’の“を数以σ阿波こ悪づ’ 回しるい終る法 顕し舵な勧ε 富黒二う 新る. 米脊椎重刃物の馬丁肋，含手奴・、る果粒によ．て. 黒色素fiZ （rnelanOphOre ） ． 聴色素月乞（ xantho− phOre） ’ 赤色素月巳（ erythrphOre） ， 1白色素rahe. （1eucOPhOre），llfエ・色’蒙月z（irldOPhOre）の5 糎類に分類でれ訂）フプrs t・妬更骨魚噸の鱗・・、，. ・色窯月忌13，直後。“一斗loOノメm（黒色平角宅で）移度で， 論理しイ湊と赦，状静か∫蚤取で砥， 翻肥肉の乞煮黒：粒が. 2.
(7) 一着d・分布している状態（黒色素舵拡散状範）の鱒 に；？，細肥体（’i’IN：〉部）が薄イ6（約3〃m）つる・｝並. に色素界粒がヰ心音予ド募合つる）1穴態（黒色素肥〉疑集 状能）日脊ドし盛、細紀体併が厚く （約IO〃m）なヅ． 叔状静でt・’s薄く（拡散状熊め約2〃m〃・∫系勺0．5ノひml⇒ 17） なる｛多争息を 乙 る。. 体色愛化は色煮ne内票粒の細貝乞体乙枝状部との往 3） 復蓮勧に9ジ引さ起之てれる。. 5.
(8) n赫粁e方琢 り 赫料と今道. ク 聞︶看用± ’球徐割紅殺し乏. 戦磐蝋. 11合 合d容 0. vしム。で・めの瀞間溺籟 吻園部Kの乞. リ. 一図ル・4図 M︵りよ×︵. d亀．体m溶通馬 0夜クに8葎. 。. C. 4. ﾖ詳細驚⋮簸鴻難弊. つ s 沓お解、衰備婆挙挙便液㏄溶落と∼に−刈ブの白光5 O乙 、 貞﹂ ーオ αレソ∼て波・御ナ翫に揮言溶一03d1000量−応製支︶フ× 長 α ワ フ 2 に 呈 あ 及 フ ブ 菌 の の 類 乏 C K91て落表勧療本m穿10 ゐ 体四77で胡弓が水⇔’. 。 徐 近 プ る エ 園 博 ・ ・ 液／ 夜 m し ー フむ 曹 オム ∼ O 省 食 歩 ⊇ . 一︵用菱しべ二丁く剤練部し β2℃億Mて0き タUの作の醇 0 一﹁用製踏m. O H 生 KN 一 ﾅ0酒保たっ応応のを病 2 費 吻 ロ ナ り. 3α6. ，以でで室タ孝保匠県に験ぼ K、割たレの701。訪溢Pしアさ︵し ハ ゆ ン︵ークは惚回に間庫糟更ほ 石積し液13鴎夜，h S 用’きフ備 mプ期雰−垢廻桑爪弾の 触 体 壁磐 乙 しd ︵使は夫イ奉 ぎ 一 −C 薯 ／ a 控プ35と夏卵達良2一表だ 呂︶ ・ の 調 類 液 M 赫置 Cぎ’ρタ乏 野酬×置θ 装﹂タ鱗A類 ぼ 暑 轟 蕊 で 僻 し い 列 i d 一 に 即 下 m 暗 a ．鯉〇一 。跡沈糎 の 図 N 2 d ヨ o装た餌づ後水やか衡3 ・ 白 C3 5勺一5乙M ・・7里aI夜m処30斎今回2 ㎝ 那 × 化 フ σ＜ 水 引 、川 ノ餐乏∼︵ゐ 7一 壬r ・♪ バWサし面の. ブ下下リ一漁づ・んつ1随一に嗣. ブ脅・ワ257、琵糞掴詣果週，下面 ’で 籟M液常を. 。α. ’0. @ @ @ @ . @国. ︵. ∬ ≦永暦．2覧た亥倉二度き示のcaし引≦濾量K唇㈲≦働ーアと ω. ． 湿 し で づ仙’繰液劉d黒田黒クB − 用糟 。 日食 一 望．. いに調の5穿膏で袷鱗範生の吟階下の合溶燗分続橘リタ フ囲. はαアプ鴛験10し湿たり’ プ ， 厩 σ・ 旨 虚しは翻理蒼−o濃と容に液え光し出厚ルイ ノ は 皆 寅 細 . .
(9) τ . ゆlttji」鱒．‘亀b馬ABG. 6服・・轟t．，．逸．翼‘．．擬へρ8CP匠. 5丘・：…WW蠣 ∫霊. ＋．」爾姫坐魯4一三坐CεIF曲購し厚 3 卜．轟｛‘」！ttS．ε；・i・．手当・へ．le‘21EICISIellコにご”’. 1コ．Kし 一一轍三島儀 ・．. lt灘el’，禽甜‘」幽」∫一9．，（‘．古坐β‘PlelF；. 普D. （．9. 噸斜懸i灘欝（ Jl‘」．4ゐ3雪、」．4‘b．嵐． C. tltlgtleld：1elewptEIE. 図1 ギンブナのウロコモデル〈体長16cm） 本実験では側線上部2列目（A，B，C，D，E，F，G，a，b，c，d，e）， 3列目（A，B，C，D，E，F，G，a，b，c，d，e）のウロコ24放使用，. 塩類溶液組成. 表 1 1／7。5鰐. NaC1 朗. 生理的. ！00. 塩類湾. 崖／7．5闘. 置／11献. κc1皿1. CaC！ユ璽：. ．0κ ．. 128．0. 2. 2．6. 2．ノ. 液. ノ00. 一. ！3．1. 2．0. 75 ．2∫. 2．0 5σK. 50. 97．8 32．8. ！．8‘！32．4｝. 65陰．3. 25. ！．8 （！32． 4｝. 3．2．8 7∫. 2．0 ノ00K. ノ．8 （！32．4：，. 65．3. 50 2．o. 75κ. @0 @．！。8 ‘！32．4り ！！7．∫. 9．0. ！0. 25K. ノ． 8 （！329 9り. 130．0. 0. 2．0 10区. 瞬κ. 97．8. ！．8 （！32。4｝. 0. 0. ！00. 2．0. ノ30．6. ． ／．8 （！32．4，. 5.
(10) 図 2 分光光度言†（島津製作所 UV−300）. A．光源室. B．コントロールユニット C．第1分光器（入）波長ダイヤル D．第2分光器 （入）波長ダイヤル. E．大形卓上形X−Y記録計 F．第1資料室 G．第2資料室 H．検出器 1．データープロセッサ SAPCOM−1A. 6.
(11) 目 臼. マ 寸. 口 日. cq 一. 10血m （A）. （B）. （C）. 図3 ウロコ固定用サポーターとウロコ固定図 （A）Aタイプ. 中央は8×4m凪に穿つ．上下左右のウロコ支持板は幅lmm，厚さlmm． （B）Bタイプ. 中央は10×5mmに穿つ．上下左右のウロコ支持板は幅lmm，厚さlmm． （C）ウロコ固定図. ※ウロコ固定法 1） （1） （3）のウロコを上下の支持板にピンセットで固定する． 2） （2） （4）のウロコを左右の支持板にピンセットで固定し，. サポーターに納まらないウロコ基部はカミソリで切る．. 7.
(12) 突鹸：方♪云. 2. ’図表第8 法づ〃ノハ係揚濃乙ノ 味噌乙にと煙嵐並にでノにム以な 度．がし電光の馨︶し 蒐細る球ほ能参個’払熊∠乙’屋は の’を東 光るる例活畷エ光則定 を更イの多煮を2線状を︸ツ列響 工径係凝 収いな比のψ。ノ法蜜 数ノ例どう色究に直蕨みたノ2影 げし関︵ 吸てにに三毛みばの乙 ．の比ほを望済列フ庭∼しラ’に か昆の。 ぺはあ必ゆ昆た手はにm又の的 見仮飢が るつ・工︶. レ ポ. レ分。数幽叢魁鶴製篇. めな颪01略εでいぺ旧. ノ乙巳禎. 震 5 訳 悪用︵に・尼笥 α い 多 一 癖﹂6一電工つイ≠レ は診∠面 に さ ㎞ べ ． の − る 更ぎ 義 収 方 cε的仮 宕♪濃ノ︶ 勺糸爺∂’々に’ン射げな∠て 。づ蔽断 皮碁吸。一な例ルニ似とのの粒径に5イうがノ入かにのい 度例面の 濃がは罵ると比ゼ︶近る義定果直線か関よムラを見列診︵ 濃此断舵. 後藪L濃ダdで3秀液測距鼻∠に望x象に4薄し のに肥察. a象色 誘導蜘讐磁気鶴㍗難諌縫喫乞欄陥磁諜， 定 別0色蕪 しさ単対に一けあ往のが〆る︵ノかこ動呼ラ態巳が光収が 本き黒． 定強ほの一輪−狗の隔麟。につムノあ言えメ状。数刻吸ム でのう エ 測のレ︶m︵に無配はε綾例！うのノいの例のた担の入静一． り換云あ 埋名光卵痴態g 長 一 i 定 ＝ 一 邦 ン ム全 ’ノウよ置げで X で な ム 卿 繕 フ レ 波 6 c a 測 。 原紙の入ーー10 ． は に − 爆 レ状 あな ’全一為でノづ良にかの 定吸フノ合d’う っ U 本 ．o c． コラ葎尊翁ソと散に仮ッま42うと仮画壇わ い 叩 ． に 皮 。 メ し 測の2ち妄動てあ 配 電 ノ φ 拡 例 と ノ。繭メの祝婚’仁 心 、 ’ の這いどうづだ4ろうる最にも丈断陪し 光’わの跨’一 ’ ︵ る専 ω はな乏光従数 合 嫌 な 周 し 中 仮 志 ん X に ん 績 あ メ な の 青 い 定5柔.
(13) εO．一︶oe●cOO．Oり弗・。2. 醤翼謎隔番督蒙︵ ︵霧．o︶のめのO．011箪、 。︶一. ︵O︶ず。一. ︶脳製．蝦票︵. “、“““噂母ぐ、、ぐ“で. 灘. 蝉り. ゆ 一〇. n. ε。・．噂︶のめぬO．01一墾・・2. ︵ごoQ一. 鵠蒙‘. ︵コじ。。︶嶋ののO．011串三. 臨．面畷. 塁萎捲単. oつ. oo. ＝︶o㊤. ︵OO．一︶Nぐっ一〇．O“昨・・￡. ︵ごoo. ︵OO．こトト醐O．O“路・・2. ︵。。︶㎝醐. ︵8．eめ◎めO．O” oo．◎ dq。 。 2 鮒 響 ‘蒙. 爲︾eg一. 蛭巽曝難. 図ミ垢申挺装塁蘇四隈. 寸. 騒萎説擬. ＼ ＼＼誤. →→→→→. 八i → 蝋 瞭 “、 爪、 、、． 、→→︵駅勲曜︾ ︵駅繍K︶. →︵駅勲響 氣繍K︶. →→→→. → →. ミ鮎中艘亟粛粛紹縣面. ←←←. 一Ψ IIΨ. ←←←←. 乗趨K︾ §鞭噸︾. ←←←←. ーーΨ lIlΨ一懸氣隷く︶ 莱璽鰻︾. ←←←←. 製醜蝦⑪. 罎課蘇面囁惣⑮. 騒葬課難. §. ︵ごマ. ︵8．一︶．OOσ曙O．Oロ マO引ψ2. ︵ごO. 受算謎煽. 酪理粧毅り謹魑藝製醤面張. 澄巽籔甦．. 繋. 9.
(14) 1段循）の賜合LAL，面補比が2■の割・合になってい. るのに知し，0』．の狸論拠は2．06：1．00の刎・含にな る。妹船引縁にC。．C、，C。 Z誹蜜つると，黒色煮胞. 凝集およ偏ム徽の断面積yoと，黒色三塁潮瀬およa“ 拡散賄の0．D．比はよく近似つる。なお、老の鯉論」 の言丁半は3∼50／・て・わる。. 以S’の測定源理a用い，メラノソームの痩動に伴 なう面」禾婁変ゲ乙を0．D．変イ曾て“♪輿り陣し7乙。. にて打フ た。. 遠常三囲9墨画綱糸氏 F、σンフ。）ぎ力包してあ 22・一25。C に イ象つ。. 分畿. 、. 藁・矛付. 歩 . 温3. 石グ遇. 。をと承. ，分離鱗中の黒色素肥釈拡散. uヌス／▽ク ト 1レz》則定，レ， SAP. し るノ ゆ. ニル尽き継），だ注痢塞て・，控痙的. む り． づL9“マく25CK♪夜客i主入一ブip．. 疾灸；集、反プ犯（15．禾少イ麦ノ 5 分4麦， lo分. 雇スス へeク ト 1レ ぎ ♪則定：し ノ 同，置くに盆己 、・／ ム摯 ノ歪. 、則 則 あこ、 看 に 外 欠 笠に嵯国。に塩るににぎ・ん後 万、 R／ ／ つ ヨ に 分 背ま. 長 の 拡 的 ♂ の ぎ ．2 定 の 憎 い に 後 液 節 5一的あA先液三分. ︵. 測濾嶺集け稲分溶劇中．︽理タC本’ O 二面凝泉50類測鱗驚＝お留れ獲態嗣鈴瀬野即 勿 痛。でる“遍．離層・粛・鱗入ホ・状co・塩K後. り0. ら蓋レ. 裸博. ルトゼ 超ッき. に曽 。液究. 、、〆石. 儀て。麹ホ∼出づ類本 ヤ！. o. つの場一水ン。住散︶取図液一陣 ロ る ノ ゼ 5 の 膨 ︵ うる ︽一 気 拡 5 ミ ／餐ホ燗るで下るレ 6よ承づ通れン勺。きしかる類サ水づ中のセニリ髪収 ． 兼 ． 図 に ・ 定 て 入 こ ’5 2能 怪 説♪ つ 豆歩 た還ト液体・、ごとの吸 ︵ 亥は則し遠きしに素鰭容町触し毫・海全量いき後の 、、ノ こ〆 獄 芝 く プ尊轟 門 定 い駅前色朕類固下定のセ類外記細撒葎一. 劫鴛舗∬四一醜醐磁四州の訓野州. 一一. 矯撹診. たマ装 し閉群 施詳解. し轡. ノ 、／. 、沃. 摘出し，直5にを王望脅勺. ﾅ網ン5しる・容が. 麟醐 分涯雛鯉葬メ』ラノソー一一一ム分.
(15) で算崩し，差ス細クトル芝. 借）記￠象つる。 《｝前後におしブる箸吸収点と，. みフけ． 毘・色煮月乞の♪疑集に，. 反禦つる二，♪皮長ぎ来定づる。. 、△0．口．ぎ糸至ff vs白勺（タイムス. る。. 素鮪1拡散尿あの測庫鳳，フ. む 弁票，本蕊25Cの100 K》祇に10. 素絶霊）疑蕨状態（本纐銘で. 状熊払し葎）にし葎後，各 肉の反九開紹か. igれξレ散疲0％．. 豊が縛測. 長︶臼渡 波嶋集瀞 チ耀採の ’や ノ兇. ﾌを赫憎しじ遂 続中墨解長手同に. ユノ. 分．望軸 ’萱門漁でフ. 気高℃歪糞 一 てに 祈 ・ 鱒 二素照フし 閻色老行更揚あ庭. ヴ り川着. 波！艮の△0．［〕．ぎ隅. 20. 寵・集レ・堵件・キ・プ分掌試 鋳310 確異が定. 。ぺ萱一クに体モに分かし状反肥蘇のし玖り傭異 るス︶ダペ点全長一’体温のと素記後と力彪托た。 ゼ収態一ス収鱗波ンわ控保こ腋琶に分％のし︶フ糞 づ、畷状コ差吸♪ニや冷の間ノ墨黒的200こ認な鑑し. ク舗上ト近の’測離づ竃︽のし凝二4︾. 光A5反乏にてづ名鱗色焦 ・鍵鱗状の寒入が定 吸 引 い 銀 窯 た 選 ︵ ’ 7 竃 凝 り ’離徽’二’㌶属 のM犬ツ’敏用記のしの企彰は分壁織では場の レ㏄拡より毛ぎ・申出呼％せ九．。一・鱗手プ トpにルい最ド定鱗橘鱗重さ反た壕ヂよる入フ. 度差（△0．D．、拡散状熊一〉疑. 肩.
(16) 二波長測定法. 目 的 ◎ o 反 ウ応 ロ前 コ後. 反 反映 応ず 前る 後. ゆ. 操 作. 一波長ダブルビーム. 二 で波 最長 もの 敏決 感定 に. ﾉ 吸お 収け スる ぺ差 クス. の. メ. を. R吸収スペクトル （1）15秒後. トペ ル. ク 変 ト 動ル の. KC1保温後の分離ウロ. データープロセッサ. コ差スペクトル （1） 15秒後一 15秒後. 収. 点の検. 収変化. 吸. KCI保温後の分離ウロ. i2）5分後 i3）10分後 i4）20分後. の 測等 定吸. ノソ ームの. ラ. 記 録. （2）15秒後け5分後. i3）15秒後一10分後 （4）15秒後一20分後. 討. 吸光度 （面積変化）. o 記 黒丸 光. 二波長シングルピー 度 差. ム. （1）20分間. の ア. ナ. の経時的記録. 通常△340−290脇. 口. グ. Cf：生理活性物質の場合，UV吸奴があるので同様に二波長の設定を行う. 図6 二波長測定法. ／2.
(17) 皿. 実験. ／ フプ分離倭葬の黒色素肥の分布づb鱗頂評の 畷袖又入／Vクト↓レと差：ス．／Neクト1レ．. 黒換づ液4ト0. の交痂K︵ク0 芋餌分0後㌍の. 溶液の一。分ズ麟. 票 K乞弦0叉 ホ し リ ノ. 鱗㏄素7媛て. 存一塁図一鱗つ. 厩に黒⇔E離塁. 5 う 葎 経 3 分 に ゆ. 神直肥し︵プ集る た’に定後フ凝い ししん三分’の乙 出に及乏5の齢し. 、四時敦レ’︶紫苧. ル り 次疑トーE色威 、 、／ ／ 、、／ トよ散のクE5黒にレ硬ヵ脅︶のに旧い ク部漸漸押2一．募トス求5旺能滅吸並 留よ火素ス︵後ると7収茎・・ 素K零右 ス線最色眠後分訪過州吸ルか圧色0い最 七二ぎ黒吸砂20で経スのト紗︵黒10なに 娠ナ肥／の15ノ化聞差7クめ後。’し点. ︵. フ煮て鱗用︶変謄 図州後門た丘化収 D 滅ししる橘Eゆは2 ス直20めま変吸. ︵ . ク ト 1レ9， SAPCO三一／A 9絹w：i差．. た（図8）。 100Ks夜と反ノ旭し一it. tS （2E一一一3E） ， I O ／nx K’iYiz （・2E 一一一4E），. 蓬，潤れ診衆；差し引奪△0．［〕．慕ボ. ）疑集にイ半つ「乙，△0．D．が・歩淫メ10した。. Sる黒色煮犯の凝集反海の葡後ぞ，. 点鳳290tV 30Qnm19近て“あり． 磐 ヒ＝。一 ・7 tEX 340nmイ寸選して1｝ あ る 。. 2フナの分灘鍾轟の黒色素国包の分；布しない籔銑. 黒色素飽の分布つる丹頂静と同様に，黒老素干. 分痛しない下闇肋吸収ス硬7卜！レ9測定し芳X クトル9球め褒。 ioOK嵌乙戻恥く』雪後z，、肩尭蘇吸. も ス〈Fクト1レの変＝イtfもまみ5嬬しゴsかフ＃（図9．図10. り のべ嘔︶. 綿久吸10 素芳蘇図. ’老し尭ノ. 吾Pの 吸収スへ。ク ト 1レ と 差，スへ・ク ト 1レ．. ／5.
(18) 一 ●. 一 ■. 5. 2. ．q．O. O 9 ●. O 6 ●. 00 3. εEεε. 234・5. O. 300. dOO soo 600 Wavelength （nm）. 図7 フナ分離ウロコの吸収スペクトル変化 （ウロコ4放｝体長13．Ocn. o．ts o．星2 2ε一5ε （2011）. 6 o．eg. 6. 2E一・4e（艦。分⊃. ぐα。6 2E一・3E⊂5分，. 0．03 2ε一2ε（0分》. 0r 30e. 400 500 600. Wave童e跳gth （n皿）. 図8フナ分離ウ・コの拡散一凝難の差スペク. 桾ﾏ化. （ウロコ4枚）体長13・Oc” ／4.
(19) 竃．2. O．9. 負O e．6. O．3. 3e 〈E 5E. ze. o. 400. 2co 100 Wavelength （nm） 図 9. フナ分離ウロコ基部の吸収スペクトル変化 （ウロコ4放）体長13．Ocm. e．t2. e．os. 6 0’. ︵. @a．e6. O．03. 2ε一5ε（20分，. 2ε一4e（10分》. o. 2ε一3ε《S分，. 200. Joo 400 Wavelength （nm）. 図10 フナ分離ウロコ基部の差スペクトル変化 （ウロコ4放）体長13．Ocm り5.
(20) 3. 濃度の異なbKイオンによるフナ. の黒琶素. 員包凝集反施. ｝0分間25。Cの生唾的堰．頻疹液に保温し，・最大拡・散 粥（営門メ旅した黒！色1素月包の漁糞に・3農ノ斐の異なるKC1斗容. ｝夜，OK、10K，25K，50K，75K．｝00Kの，各ラ容〉赦（ 6纏類）8楠用さ’t［t，二波長測昆）kで測定した（入1. 540nm，八22gonm）。. lOOK液と、久《で《2G・分後．の♪1疑，集状態g橘・散．度0％ こし、各3農ノ麦のK♪夜の♪疑象ノ麦：≦刃ぐx）ta。逆の糸毎回，. OK，10K側て・し訴，鱗の△0．D。がw下刷づ“蒸・色素月宅の. 凝集反んLSL”el s Kなrc・，k。25 K液で時，2G分後に 75％の黒・多導電巳の♪髪乏叩肉ノも献thっ・た。50K）夜翻＼．．．，1．の 農度 の KC｝）｝各♪夜と 反施2 ぜ、bと ． ；0分そ麦に90へ！95シも. 黒・色素飽が凝，集した（重日）。. 4 Kイオンによるフプの1嚢色1素唐乞の♪疑．集反応ン 1：ご：之才づ・るブ：zントラミ♪ン〆）屡多響．. 黒琶索祀鍛匁拡徽状鮨の分離鱗耀．本に，50K液ac 50K十ブェントラミン（50 K液にプド㌧レナリンイ乍勤 牲神経。〈後容体の餌．堪創z，aあるフェントラミンEO．l mM添ガロ）液を、乏承，そ・烈反穴ン歪ぐ，裏色素絶♪疑集 反，応）に女絶つるフニ〔ントラミンので耳薯劾泉そ． 二濃長. 〉舅・庭法で測定しrc。二波長別定湯による黒琶煮舵蓮 郵の測定博，通當入、340nm．〈2290nmで・ある斌．フ. ェントラミン添加爵は八亀340nm、入2310nmで測定し 潅・。. 25Cの50 K）夜て・で呆》呈し】廷黒色煮野望、の，20分《灸の）疑：. ，集状態茎彬散度0γ。とした。OjmMのフェントラミ. ソ9加え犯50K十フエントラミン液て・・LEI，約70γ’，鏑. 後の｝尊墨がa5飢蓉（図12） ／6.
(21) 100. 一x一一x；’ x一一一x一一x−x. x. OK x. i．”s. . ︷2，. 8. 琴. 50 き. ’1. K. Time in. ∼7！. 20. 10. KKO O50. 0△. 。. o. κ. la一. 02. ［：・. 0△◎. @ @ @ @ @ @ト. 8. ／ox. O. v. ＼＼、、. ㎏. ＼. ＼. x. minutes. 図11 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソーームのKイオンによる凝集 反応（二波長測定による） （グラフの×，○，△，口，◎は，それぞれ平均値を示す。Temp． 23∼25C）. ／7.
(22) . お含. ’1. 6. o. 10 Time in minutes. 0. ン. κ. o. ラ. 、ミ. ぎ. Q 50. 0 肝 λン. ト. 営. 2. @き＼＼. ご. @ ＼ @ @ @ @ . ∼. 10i iO. 猷＼・＼. 100. 20. 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのKイオンによる凝簗反 応に対する込ントラミンの影響（二波長測定による） げラフの至・璽は・それぞれ鞠値と凝集度の標準偏差を示 り す。Temp．23∼25C） 50K （65．3皿M NaC1，65．3mM KC1，1．8mM CaCIA）. 50K十フzントラミン（65．3皿M NaCI，65．3皿M KC1，1．8mM CaC12，. 0．1mM＝ムントラミン） . ※25Cの生理的塩類溶液中に0．1mMの7＝ントラミンを加え，. 10分間保温後に0．1mMのフントラミンを加えた50K液で，20 分間保温し測定した。. ／8.
(23) 5 Kイオンによるフ：ノの黒・色素月乞〉疑集反、施に 文寸つるCaイfンの影響．. 乳液のしKAレ長＋散下津差液の 艦Kン宅。τ苛ぜca拡低凝なK％ 露、︸ 集の意04 ノ ニ く 甥をイか︶十オ鳶K宏凝％石と∼. 生瀦㎜禦瓢5。鰭蟹骸. 的獣類溶液中か1最早拡散功た態にあ々黒色煮泥. 50K）夜に保♪轟レ、里馬索6Zの♪疑集反ノもtC女づし. dンの影響ぎ二濃夜測足活（八1340nm，入2290. 測評しft。分』離飛跡は50 K液（L8mMのcaC l2ぎ ，50K−Ca3夜（50 KにCaC12をフrヌ添ヵロ），50 K. GEDτA ♪夜（ 50 K ヲ夜．にCaCl．玄 i7（一「Jf｝x．、刃a， ，さ s に ニ. ン苛レー ト試薬GEOTA x；mM添加） と差飢z“ 受くr長。. 一Ca＋GEi⊃TA履ぞ商用20・分・後の，1才色E素痔乞の凄乏．集 ， 捗、・零墨度0ツ∼とした650K♪夜の20’分そ麦v9糸タ14 集一f昏下 し 葎 。 ま r ， 50K −Ca亥夜の20／分・4麦で’・レま. の♪葵乏；集イ言容Mx“2s幽． k。50 K 3夜∠50 K−Ca 3夜. 意な差．はみsVxなかフ半壊℃、50K−Ca十GED− 50K液及伽50 K−Ca液xの間に1谷， ）乞訳冶れ i4ツ3の、有事差，桝誇づ永f：（図｝3）. 6 Naイkンitよbワプの黒色紫肥砿散浜鳶に 受す／／ る Caイ フr ン cP幡多響．. リ フブ齢の・分・：寓窪鱗925clOOK》授に10’分間イ呆＞Slし，黒 4vg匹敵E内寸〉疑集状態1：した後． Nacl（｝33 m lVl NaCl. 庵液），N cA Ci十Ca＞夜（130．6mMNaC】溶1液，L8m M. CaC12溶液9混含），NaCI十4Ca液G30．6mMNaC｝溶 ♪夜ノ 7。2mMCaC12》溢液5》浸・含） 、 NaCl十GEDTA；夜（. 132．8mMNaCD容液， LOmMGEDTA液E混合）と差水. 着il・（反応乏ゼ，二波長別定法（入640nm．八22gonm）. により）則是した。 25CのNaCI液に．分子葎1薫蕩丞イ呆）豆レ、20ノ分そ変の黒／色素 ぢ へ. 龍馬散釈態E縮墨染looo／eとしfi一。N aci＋GEP丁A液 ．では縞散9約32％餌薯レ煮，まfi一，庄婬豹堰類癒液 り9.
(24) 糸勺27：ン1診薯 し τ三 （ 図14 ） 。. に，・含ま凧るCaイズンの4情濃．度かは，同ホ象に拡va kK太. 7 Naイオンによるフブの星z色煮肥拡省交に如プ. 集C， 承︶ 凝吻q−そ㎜ や こノ. 余，悉え. あに燗. ンー。腕. 分＋炉叡. 煌Q縞. オ定ca θ保との約. しに風気ca・偏︽液︶. た 混洛旺ンA状応釘図 σにq＋総研徽瓦旺︵ aa E広 喋 ︶ 一￠ Lπ ， ノ ・た量NNイG才で十夜. 間 ＋MM長 比湿︹Uの十層目A塔. 保晦旺㎎G測. しG仏の仏一 ほ 温＋oq印定 てG液象液篭るむσ. ノにし. 黒鴇鴇訓 二液雛定離10約同 D十 ’ノ入 汐偽㎎測分度’！ いDに乏に散乙腱. 色液︵＋mo 価歪濡し鱗032縁. 馴 乙雀案％％に 素−一3匪M㎜ イ. 筋搬四. ’旦の 全M陶ca乙。手燭査 ノ ま し 兇mM∴認 芝分賦 ・だ散％ 温し拡35. 20. ｵGGMん 測 中 ．津 ンの全点舜窃. 状a石Gβ13をに. − . 丸. 。にMMm反ワ Cる た オ。 黒A罐が 承 ・a Tイ l 5のDジ薯 。25態mm 麗 よ 4 し N去加㎎2後旺み圏. oo. Kた印印爾感、彪 にめ老・隔紫㎎ρ5. 気’ 負 轟T AT AC 一︽し 液 彿のca十開疲胎ホ. 鷺幽禦. る二三イオンの影・響．. 20.
(25) 100. ︵渓︶ ①①﹂◎◎① O. 信O咽岨﹂①qの唱Q. 50. ’xXx〈Ri．X．×．Xti’×Xtt. tiL 5’ O K. o. 2. 50【層C8. o. S OK一 C‘十CEDTA. o. 10. 聖. Tirne in minutes. 図13 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのKイオンによる凝集 反応に対するCaイオンの影響（二波長測定による） T （グラフの玉垂9は，それぞれ鞠値と凝難の騨偏差 の を示す。Te叩．23∼25C） 50K （65．3皿M NaCl，65。3mM KCI，1．8mM CaC12） 50K 一一Ca （66．5mM NaC1，66。5mM KCI ）. 50K−Ca十GEDTA （66．4mM NaCl，66．4mM KCI，1．OmM GEDTA ）. 2り.
(26) 100. 50. τ憾グ. ︶＄・・。。∩ぎ噌・・①qの6. i／／／／i’／／i”aCi＋GEDTA. 0. 10. o. 20. Time in minutes. 図14 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのNaイオンによる拡散 反応に対するCaイオンの影響（二波長測定による）. （グラフの互杢・鱒は・それぞれの平均値と鰭度の標準 り 偏差を示す。Temp．23∼25C） NaCl十Ca （130．6mM NaC1，1ゆ8mM CaC1ユ） NaC1 （133．3mM NaC1）. NaC1十4Ca （130．6mM NaC1，7。2mM CaCID NaC1−IGEDTA （132．8mM NaC1，1．OmM GEDTA）. 22.
(27) 』，。＋GEDTA＋Ca. 100. ／i. ／ロ. A ：畠吝 。”. ロ. 甥お自. @50. b一. ．／2 ノ三 遍ノム. ’o. o. 10. 20. Time in minutes. 図15 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのNaイオンによる拡散 反応に対する二価イオンの影響（二波長測定による） （グラフの￠，巫Σは，それぞれの平均値と拡散度の難偏差 を示す。Temp。23∼25C） Na十GEDTA （132．8mM NaCl，O．5mM GEDTA） Na十GEDTA十Mg （130．6rnM NaC1，0．5mM GEDTA，1．8mM MgC12）. Na十GEDTA十Ca （130．6mM NaCl，0．5mM GEDTA，1。8mM CaC12）. 25.
(28) 考. ン ラノ で可夫剰保 ニメ素雄増過ぎ ラ御越ンには織 メ終 る 野 々 で 組 . 匹舵づラ総内層 主索塁メに体下. は 色 を の側生5. 素黒色鍛ρ越前’か. xas明5かになった，. 撫養溶液彗の祓収ス・ヤ 蓑調七子（図16）。 210nm柑盗． GE：DTA溶. ミン溶療は320nm穏豊一. ，脅。従。て，平更験 ノソー為の爵籟変化． る二波長9，重重鴬入、. エントラミン溶滅便用 波1長変イ吏曝し葎。. 色脅髪に吸医メラ測瞬廉密七一㎜触. 果．るとた乏につニノで・・樗各・関西早し0 素る下身酌収特楠ラノ・超レ重のプにん敏乙31. 粒酒壷蔀霧紫てン〆噸座粛粛うにた㎜. 含二かて’て線る性のこ回気はヲあうえフニ のラ色って・外いのある理影液トがメ把ρの. 痛ン、0い受訴羅219魑乳諭囲器機蓑劉ミ. 苞は削る波げ痢 ラ. 魑か3，フナの分激望鱗卜 面績変づ乙（拡散 凝集. 里鱒沢藩詫勧図鷺飢二融鞠端銘蜘. 老 か 特 線 る 7 素 ︶ 波 レ ・25量潔㎜入 ー イ ノ . 細論娼網野敷幅㌔獄響評 魏脚錬勤㌔驚理論諺㌦醐 町. . ’陀細類色類. に○補導の島、. 般吐琶充満や. 副ω里蒋動類. −a一睨温乳 はmト素変遷 ○ ︶rイ色のは 目chザ。堵ト e ∂ひ C︵ノる物イ・. 肥ラ一旦ヴ．う. 航聚メ5椎ノい. 難賜無権. 臼いてに伽 細 ︵てし︶よた素 紀し鵜驚育ま色. 細用呼y物ρの. ち . 素使が○動う物 色が老㎝椎い動. ・泊導d脊乏母 物単医mの能無. 動物 ．．下細の. 米動と陶工案傳. 24.
(29) ︵のロコ︽一，OTーー⊥︶ 弼票. 0．1皿Mフェントラミン O． 1 mM GEDTA. 133． 3 mM NaC1 133． 3 皿M KC1. 90． 9 mM CaCla. 200 300・ 400 Wavelength （nm）. 図 16. 生理的塩類溶液等の吸収スペクトル. 25.
(30) ノ. の紳関あづ単色 hK園主ぎ Kの力乙︵”m︶液・動イ得﹂ 放馬拡脈化拡 粒ノにでかの黒 d’交︵集 鶴塩の下魚重 ノでダ文W鱗β教K商K駅 a巣’後疑 がつメ論㎞離65K田・の累・♪馬蝉出にム 果ツ御縫糸佐の もノ 煮お椥神U経〃集嶺ボ S結く物ム 海な一の 分野25︵わム舵 か理螺放ンノ 色て勧学四馬斜 磐軽愚にンノ ノてな蓬ノ 客∵譜艶プ贔一図童β 湘7豊交律爪イ は取協伝ノ初 集解く85nOフ・図m・ソ影 し’黒蟻ノノ 能なのの自さコ んざで経ノ鉢 のぢた同デヲ 稻じ19 ・博mβ表ソ行 2 凝 乞肩更 ○ rる 反、黒の神ラ潮 ≠一 猛︵ 湘3 3 12・ラ平 衡め宕メァメ. 細に肥、 惟 の 含 ’. ラ へ と 看 か 反 ヒカメ乙 物 て 鬼◇かか’ ’盤素望聾心が 集勧るるメ殺素 貯塾色作系でと 凝にづ燕ノれ色げ解六一加集ヲ倉な中験 達っる端︶し 化加㊦ ン平静〃r の初咽さりさ黒概見β創が凝あま下肥実 伝．づ末酸用 愛卸解りの紬う輝 肥最作出審にの野のしノ隔る℃．3煮本 心るおのン作 色運α。ナ・︶媚づ18。 四て接放にかプさ35鹸塾二よ要るみ壱’ ．化ご維経ソに 体肥るレか梢有ウ色・庫・5︶づフ強下突∼のに偽あが黒は︶ ’も客神町菰π 的細いド祁木をい黒よにかン明ノの総て粥今ンがご撫鱗ん7惇ド態鷹ン盛 理るてア中ノ築でるに肥馬ワかは評しがかズ上全反離反黒馬熊状麦シ々 生よσノノは精華証素末プと果刺閣層衆ーイ以兇業事集−素鞍馬’ノン. のに今宮誉激踏空に、一脅しレ￠縮経伊壼紡麹K一万凝る凝は色散拡はデシ 類集定経ま剥回告ン5黒激ドブの紳幅紀資法の寂が’ようPa黒拡はてアノ 魚 疑 鶴、稗 表の胆気ー9か刺アご験の凛煮しの舵K集はに串︵の’でい︵ヂ ヘ ズ ノ . 搬篠挑戦晒塩蘇糀饗盆総論熊㈹鰭勧辣努癬齢ゴ. 拡縫与φ送﹁素駄イ神ぼ引イニのう歯黒Mで扶画才5 4瑠散るし. 26.
(31) け断工あ反 鯉ン全. し. ミ 殿ヨ 築δ苞しご ’ σタt効須璽い鰐・薯. にゴ∼宏κ二丁韓. 泌一舗ノ琶黒神ド遂胞ーン匹拶. 心’か集表恕ジ彪. 創レソ函杷志し籔に. 分ンM日ラ里“の健づノあ索ンニ心切. のン冶凝茸前帽フず 体ミな能鋤燈間ぎ撫. 論竈翻総髭輩無 二蕩辞湿熱魏難 那橿”㌧腋◎羅に外嗣口. ユ剤条 姻職口気 . ノ. ンドレ. ’劔確プ果 オイ・冠. し擢参β効σイ冠雪 用注在る宅葎賄コき 使’存す解フ・質修 をみの灼のかン形過 ︶な体にルなズ原透. M。啓た副肌イにや ㎞三訂反・∼K訓諭 G須β蕨ノみ’ノ構. ｿンし膜. ︵でに疑うは博’の. ン庭孤肥 . ヘノ. ミ観の博ロ影・ズ航肥 ラか体⑳7。がイ績細. 27. 散7・隔三体散凝か作るし朗作いあ デン3納は素て訊 処得イ、ソ顕 な篭. が ノ 4級レブi加島、べ／塁報究約係 いの観龍一化 る ホ 一 落 ユ る ん 出 〆 に 絋 ︽ ド﹁ e 受 ア ぜ 反 濡 鼠 Z ノ ♪ − レ タ乙ド代フ添翼イにノ乙廟でほて一雨細の定 乏〃OHサ育集∼動￠てn上るるプィ’煮にデ肥診滝本理で搬力微三二妥. 機 ル 飢 体二機はす、妾よ菓あ偽露骨プ“・ンイでプ〆琶告は70蹴る一寝に価で. 9腰口麻ンノラ＝るン容麗てエの歴本で竹いオ驚 ゲ 鴇 酢 ㌶ 淑 磁 ゑ ㌶ ㌘ 拷、ソントうきミ受素しブ％謁ρ纏外窃イゼ. ノ 黒 欲し作法オテ作窒分の彬濃い劒エンに報勘に凝るト害昼究汐長Caこ’ とのi用にカイカに引3ご縁周て作フミ瓠と︵体のいン阻妥萄あフてンリ. 蕨爪㎜巌乾よンノにラメ篠 容プン紫る分汐∼ 中心∵㍉￠ζ〆ブ勉×繍関 衡ンソ色い20工詔 体 認 h 二 性 3 ． る ン 卸ラ 疹 〆ベジ雲てでるは う ミ敷 ノ ア メ フ 叙︶づ充 垂寵︷デ減れ劇レノる承ξ局に糾 経 シ ー ア 下秦㎎ア・ ・ 、 構 露 終 鶉 5 め 一 し ゆ 神ギ・聖トソ貸M目動一反 需 え ン コL 刀鴛 不成変る牲ノノよ告心門∵募 三色i／ 望殉 ・ ♪. 7。.
(32) 9．ツつる働き9かている．まac，Caイオン受容蛋 自鰺∠紡合づることによ。て作用し筋収縮の謝御に 直拷関亭づb．レかし．非働閃細肥の細記運動Kあ、 レ1て．Cclイオンノリx’劒修ア困奇として関をレてレ｝るかご. うかにフ〉，ては，末た・統一酌な舵黒が箏得∫れていな. ）｝713） 工shibashi37）はCaイオンの；協殿膏」fメタ・カ. の黒色％肥1⊂微量注入レ，×ラノツームの彪寡ε観. 髪した．一力，ノ1、地脚根岩38♪5は，電顕糸瑚詞伯単. 玉9にメダカの星色素肥内Caイオンの分布Z観屡し（c 紡唄，黒包豪舵♪疑蕨硝1（は黒月乞内にCaイオンf取ジ. 込み託報老して），御彰ヂ・藤パの臼ま、黒手速漕 ぎソギトニン処理レ，細肥膜が一世嶺傷状態後壁♪夜 イ のC・A 7）オン乏直樗作膚fゼ煮場合，iOM♪ソ・下の濃度 で黒色煮紀は2疑瑳反応を弥／ダと報告していう。細肥. 外にCaイオン2添加レた場倉。、星色煮肥庭応観屡 ／外情で必てV）う卸巌ガ”’？博外液1（キレート剤9Nn え，オ墾端にCaイ／ン客低〈，｛鴛は欠総堂ぜ蒼煽’含. ヤ，諺半高濃度Caイitン溶淑中で・の黒色紫蘭の凝集 反ノも壼観屡レe。この側線鳳色煮紀内のcaイオンの 変化による直接的な影響でなく，神経乏なつる間接 朗作電であると報告して）る・ 本石が究の糸壱泉は， Ish｝bash13vや藤、井）4？sの報. 告S女循し，微量のCaイオンが黒色馬肥の繧．動1（関 下して・・ると7S之ろ．づ5めS．槍離鱗単色廉配の. ♪疑集に響いて，．正常有＞i穴態で225×10M（KCI双as・. NaC l澹液中に混入さ颪て・・う量）のCcAが凝寡：fJgA望つ ると才荏〉劉乏畝ろ。. ノけ備・根痔38㌧t9電顕雀露i（わて，×効の 黒色踏肥拡徹爵｛（Caイズンが細胞外へM出願asる乙. 挿している＿fO 1齢・藤バ％〔9ク・。a・一尾. 亦八の黒色、豪月乞ぎ奪い，）ノぞトニン処狸によ，て細. flZl19．の開平躯娼畑つぐ，Caイオンの影響E観糊し. へお 早糸色果，IO M〃＼よ．のCaイオンでt才側傾反ノ砧熔生u’る｝乙. 28.
(33) 本拡颪は ノ の さで 訓肥入 度 る孝混 濃 い色に 高 て蕪中！ ⇔. 畝の液 が 蒼 で 鱗 渥る’. 舌離dあな 報分㎞ で に 燃 ／ −鯉か. 果フM必3 縮 な げが明. 在幣Xンが ・正92オと. 反 Lイ己 ．相5−cqろ. るにか量の6 切う果微♪薯 てよ結に量但 レののんうを 老つレ究反い回. 報研散て紘. 29.
(34) T 継論 光電記金衆畝のかとつとして二波長）則定法≦試de， フノのネ甲糸至分ジ布分離葎姦内の黒色象月乞運，劒に関つるド解. 漸を竹．fc．その穐集，次の二乙献明∫ひにな．■：． ／ フプ・分離魚轟黒色煮肥の二波長〉刻定で口，孟常八、. 340nm，λ2290nmの二劇甚て・ラ則定できる。UV畷収 愚管乏用〉，る揚合し9、新f”一にメ波咲の設定力肋る乎 で’あソ，例え‘ゆ，7エントラミン便圃の場、台｛s入. 540nm，入2310nmの二波長2設定し測定醒しf、. ゆも. 1♂ こノ. もノ葦 乏 ’ メ 反。’ 集るり 疑あ♂. 、／. 一 るびて よ熱度 ても農 一 ンがの ブエン ィ八プ. K︶イ ． KK の O 縄50博4. 煮︵肥柔. 老M煮を. 黒m琶、描. 鱗93里皮 窪 5の集 傷 6 分低プ凝 プ最プ有 フ， 的 憾た稀. 2. 3 ブプ分離鉱黒色素肥ig・． O．lmM7エントラミン. の諭恕狸UO分間）で約70％弟後凝集が懊嗜杢九 る。. 4フブ分離重義黒・色・案網（守．2Xlσ6M移摩のCaづズ ン1：よ・て2疑一寡2糸切2％穆宅｛敵る。 5 フプ分禽潅魚忌日・色孝月乞の拡蕎欠は、 2Xl〔56M以，仁の. Caイオンが筆戦であるが．庄鯉的場剛胆激に倉9. り . 灰・るCa・イ ．オ ン の♪農ノ亥 の 4イ名 （ 7，2 X lO M ） に な る こ. 拡散乏約307⊇阻薯ざ下る，. 50.
(35) 文. 献. 1） Parker，G．H．．： Animal Col・our Changes and. Neurohttmours，1948，. Cambridge University PreSs． 2） Bagnara，J．T． ，．，Hadley，M．E： Chromatophores. 1973，Pren七ice Hu11，Eng．1ewood Cliffs New. and Color Change， Jersey．. 3）藤井良三：色素細胞，1976，東京大学出版会．. 4）藤井良三：色素細胞の運動とホルモン情報，P51−67，1981，. 井上昌次郎，「ホルモンとかたち」，学芸出版センター 5） Kama da，T． and Ki’． n． Q・ s，’ i． ta， H． ： Movement of granules in fish. melanophores，P484一 492，1944，Proc． Japan Acad． 6） Novales，R．R． ’and Novales，B． ： The effects of osmotic pressure. and calcium deficieney on the response of tissue−cultured 皿・1…ph・r・・t・m・1…cyte二・七i囲・tihg h・r皿・・e，5，P568−576， 1965，Gen． Comp． Endocrinol．. 7）藤井良三，宮下洋子：画像情報処理システムによる色素胞反応の記録 ．P129−140，1978，「乱訴医科大学医学進学課程紀要」第19巻．. 8）藤井良三，宮下洋子：色素細胞の運動性反応の定量的測定，P24−25， 1979，「テレコ’，■一 ．二arrス」，NO 13。. 9）藤井良三，宮下洋子：動物皮膚中における色素細胞の分布・大きさの 解析，P25一・26，1979，「テレコ・ニュース」，NO 13． 10） 13izu皿e，K．，．Lerner，A．B． and Fitzpatrick，T．B．：‘ln vitro. bioassay ’lfor the melanocyte一 stimulating hormone，P553−560， 1954， fEndocrinologyl ，54．. 3り.
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(39) 資. 料.
(40) 資料 1. s. A−19 フナ分離鱗での黒色素胞運動の二波長測定による解析 ○鈴木 洋，稲葉耕三 兵庫教育大学・fl然系・細胞生尋学教室. 色素胞運動の測定法として．邑素胞の頃径や！本の枝状部の長さを記録し，色素 層粒の移動距離の変化を測定す．る方法や，透過光量から測定する光電記録法などが ゆ 一般的に行なわれている。本実験では分離鱗標本上の全黒色素胞の運動変化を定量 的に測定し．うる二波長分光測光法を試み，さらに黒色素胞の運動に対するイオンや 薬物の作用を検討した。. 材料と方法 体長12。0∼13．Ocmのギンブナ．CarassiUS auratus且angsdorfii の側線上部2、3列目のほぼ同面積を示す分離鱗を用いた。各濃度のKC星溶液は淡水. 魚類用生理食塩水の体積割合を標雌とし．133mMNaCl溶液と133mMKC1溶液の容量 を100として，置33mMKCI溶液の容量割合によってOKヤ100K液と呼称した。通常 KCI溶液100容量にっき9且mMCaClaを2容量加えtc。分離鱗標本を支持するためのサ ポーターはプうス．チック板で製作した。鱗の大きさによって，プラスチック板に穿 つ光路の面積は量0×5皿皿，8×4mmの2種類を縷備しteサポーターは石英セ．，y．に ロ 入れ，撹伴装置付きセルホルダーにセットし25Cでインキュベートした。分光光度 計はデーター処躍装置を備えtc島津製のU，V 一300を使用した。測定1方法 ギンブナ. の分離鱗を且0夢間25Cの生理食塩水中に浸し拡散状顧にさせr各濃度のK液や薬物 中にインキュベー トし凝集反応を測．定する。拡散反応の測．定は分離鱗を100K twに10. 分間浸して凝興状態にし・各濃度のイオンや薬物中にインキ瓶ぺ印トする．・ ゆ ド. 結果と考察 Kによる黒色素果粒凝集反応は，差吸収スペクトルの結果から二波 長測光法で通常入，一340nm，入2−290nmにすると，黒色素果粒反応に伴う面積変化 （自動面積計による）と平行し．た測定値が得られた。なお，黒色素胞の存在しない 鱗の基部では・反応の前後で差吸収スペクトルに変化はみられない。黒色紫果粒の. 凝集反応に対する肋影翻K縦よるフナ分離鱗にtS atる黒色素彙粒の完全な凝集 ぐ 反応には最低65皿当量のK （50K液）が必要ごあり，33m当量（25K液）では凝輿. 匿が低下し，13皿当量（10K液）以下では凝集はみられなかった。分離鱗をフsン トラミン（0．1mM》で10間前処理すると，50K液による凝集反応に60％前後の阻害 が観察された。黒色素果粒の拡散反応に対するC♂の彫響：L8m M CaChを含む且33面M NaCl溶液と反応させた20分後の拡散度を．童00％と．すると，0．9皿M∼3．6m MのCaChを. 含む等張卑塩液ではほぼ1・・％拡散するが，C轟含まない133・M laCl溶液中で反応 させた場合，拡散は．約30％低下した。生理食塩水に含まれるC♂の4倍濃度に当る7．2 歯．. mMCaClaを含む溶液中．では，拡散を約30％阻害した。今後は黒色素胞の運動に対す る生理活性物賢や阻害剤の作用について，さらに検討を加えたい。. 参教献（’） N＃良三「鱗細胞」． ﾋ諺郭学出版会1977’. 一71一. 55.
(41) 目 次. 1．はじめに. ・・・… P 36. II．顕微鏡観察法による黒色素胞の観察と測定の実験 ・・・…. P 37. 1．材料と飼育 2．実験方法. P 37 P 37. （1）顕微鏡一VTRによるフナの分離鱗黒色素胞 凝集反応の観察. P 37. （2）顕微：鏡一写真一面積計による分離鱗黒色素胞 凝集反応の測定. P 37. 3。結果と考察 4．結論. P 42. III．体色変化と黒色素胞運動の教育への応用. P 48. 1．フナの分類と分布 2．小学校における教材としての応用. P 48. 3．中学校における教材としての応用 4．高等学校における教材としての応用. P 57. P 46. P 48. P 57. IV．おわりに. ・・一・・ P 61. 謝辞. ・・・… P 61. 文献. ・・・… P 62. ii）.
(42) 「資 料」. 1．第7回日本科学教育学会年会論文集別刷 ・・・・・… P65. 2．100K液中におけるフナ分離鱗の黒色素胞凝集度比較 （自動面ee tと二波長測定による） ・・・・・… P66. 3．顕微：鏡視野内におけるフナ分離鱗中の黒色素胞数（表）・… P67 4．顕微鏡視野内（0．64m皿）におけるフナ分離鱗中の 黒色素胞数（グラフ） ・・… t・・P68 5．鱗内黒色素胞分布領域面積 ・・・・・… P69. 6．フナの体長と麟面積 ・・・・・… P70. iiiJ）.
(43) PART II 表の「リスト. 表表. 1 フナの名前と分布 ・・・… 一 P49. 2 小学校2年理科教科書に記載されている，水中. 表表. 動吻教材とその取りあつかい ・・・・・… P50. 3 フナの生活からみた教材 ・… ■… P51. 4 中学校第2分野理科教科書に記載されている， 教材とその取りあつかい ・・・・・… p59 表. 5 高等学校「生物1」教科書に記載されている，教 材とその取りあつかい … …・・p60. 図のリスト. 図図. 1234一b67 只V・ Qソ. 図図図図図図図. 図10. 摘出ウロコ標本観察支持板. p 38. 顕微鏡一VTR観察装置. P 39. 摘出ウロコ標本観察容器. P 40. 顕微鏡一義真面映装置. P 41. Kイオンによる黒色素胞の凝集反応. P 43. e・・・… @ b 1） 44 フナの体色変化と色素胞の運動 分離ウロコ黒色素胞中のメラノソームのKイオン. による凝集反応 ・一・一・・p45. フナの体色変化の授業展開例 ・eee・・eep52 フナの体色変化観察用水槽 ・・・・… ．p53 フナの体色変化 e・・■“ee・p54. iV？.
図
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