ヒ ト消 化 管 か らのHorseradish Peroxidase の 吸 収 の 細 胞 化 学 的研 究
29
0
0
全文
(2) 1330. 松. 腸 粘 膜 に 損 傷 を 与 え な い よ う に,粘 150mgのHRPを. 本. 昭. 膜 面 に 近 接 させ. 生 理 的 食 塩 水 に 溶 解 し た も の を,. 郎 incubationを. 行 わ な か った 実 験 で は,い ず れ の粘 膜. 上皮 に お い て も,反 応 生 成 物 は 全 く認 め られ な か っ. 連 続 的 に 粘 膜 面 に で き る だ け 同 一 範 囲 と 思 え る個 所. た.更 に どの実 験 の場 合 も,粘 膜 上 皮 細 胞 に形 態 的. に 注 入 した.. 変 化 は認 め られ な か っ た.. 後 日,. 20分 後 に そ の 粘 膜 面 よ り生 検 を 行 っ た.. Duodeno‑fiberscope検. に し て,十. 二 指 腸 粘 膜 を採 取 し た.更. fiberscope検. の3%グ. 固 定 後,更. に 細 切 し,. 間 固 定 し た.次. に,pH. ℃ の 温 度 で 放 置 し,翌. mical. Company,. Tris‑HClバ. St.. 1%過. Louis,. ッ フ ァーpH. incubate後,続. 皮細 胞 のbrushborderは,. コジ ル バ. 7.6に. け て,こ. ー に て数 回洗 っ たの ら,. 間 固 定 し た.以. ー ル に て 脱 水 し ,酸. 化 プ ロ ピ レン に て 処 理 後,. た.. ロナ ー. 後 エチ ル ア ル コ Epon. Thick. sectionは,無. toluidine. blue染. 色 を 行 って 光 顕 的 に 観 察 し. Thin. sectionは,. 製 し,HRP反. HRP生. MT‑1に. て作. 応 生 成 物 を 明 瞭 に 区 別 す る 為 に,無 染. 色 又 は,軽 HU‑11電. 染 色かある. Porter‑Blum. 度 に 酢 酸 ウ ラ ニ ル に て 染 色 を 行 い,日 子 顕 微 鏡 で 観 察 し た.対. 立. 照 群 と し て は,. 理 的 食 塩 水 溶 液 の 代 り に,生 理 的 食 塩 水 の み. を 注 入 し て 得 た 組 織 片,お. よ びHRP生. 溶 液 を 注 入 し た が, incubateを. 理 的食塩水. 行 って い な い組 織 片. 更 に絨 毛 の 吸 収 上 皮 細 胞 に は,特 に 多 量 のHRP 反応 生 成 物 の 為 に,胞 体 が一 様 に均 一 に濃 染 して い る細 胞 が認 め られ る.こ の細 胞 で は, brush の 部 分 も濃 染 して いて,周. border. 囲 の細 胞 間 隙 に もHRP. 反応 生 成 物 が 認 め られ る(図2).回. 腸吸収上皮細胞. で は,杯 細 胞 が 多数 認 め られ る が,杯 細 胞 の 分 泌 液 は, HRP反. 応 生 成 物 の 為 濃 染 して い る.又 杯 細 胞 周. 囲 の細 胞 間 隙 に もHRP反 1,. 応 生 成 物 が認 め られ る(図. 3).. 十 二 指 腸:十 二 指腸 粘 膜 上 皮 で も,回 腸 と殆 ど, 同様 の所 見 が 認 め られ た.吸 収 細 胞 表 面 に, HRP反 応 生 成 物 を認 め,細 胞 のbrush. borderは. 帯 状 に濃. 染 して認 め られ る.上 皮 細 胞 胞 体 に もHRP反. 応生. 成 物 は存 在 し,上 皮 細 胞 間隙 に は,特 に著 明 に反応. に つ い て 実 験 を 行 っ た. III. 膜 固 有 層 に存 在 す. (図3).. 包 埋 し た.. い は,. 応 生 成 物 は,細 胞 基. る赤血 球,顆 粒球 系 の 白血 球 も反応 生 成 物 を認 め る. び15分 間inc. ル 酢 酸 緩 衝 液 で1時. 応 生 成物 は,上 皮 細 胞. 固 有層 全 体 に存 在 す る(図1).粘. コ ジ ル バ ッフ ァ 7.2ベ. 応 生 成 物 の 沈着 が存 在 す. 底 膜 を濃 染 し,更 に 下 部 結 合組 織 に認 め られ,粘 膜. 溶 解 し たmediumで. 1%OsO4のpH. 応 生 成 物 の為. 応 生 成 物 の 小 滴 を認 め た.上 皮 細 胞. 下 部 に 多 く認 め られ る. HRP反. Missouri)を10mlの. に0.1Mカ. 体 内 にHRP反. る.こ の細 胞 間 隙 のHRP反 Che. HRP反. 濃 染 し,帯 状 を呈 して い る.更 に回 腸 上皮 細 胞 の胞. 間 隙 に は,著 明 なHRP反. の 新 しい 液10mlに0.1mlの. た9).lncubation後. 812に. 間4. (Sigma. 酸 化 水 素 水 を 加 え た 液 中 で,再. ubateし. の 温 度 に て約. 5mgの3,3'‑dia. tetrahydrochloride. 応 生 成 物 が認 め られ た.更 に杯 細 胞 表 面 付. 近 に は特 に反 応 生 成 物 が 多量 に認 め られ た.粘 膜 上. の 液 中 に 約24時. 間 室 温 で,. 内 腔 に 注 入 した の ちに 得 た 組織 で,. コ ジル バ ッフ. 日 更 に こ の 新 し い 液 に て,数. 回 洗 っ た の ち,約30分 minobenzidine. 4℃. 入実験. 粘 膜 上 皮 細 胞 表 面 付 近 の 腸 管 内 腔 お よ び細 胞 表 面 に HRP反. ち に4℃. 7.4の0.1Mカ. ツ フ ァ ー で 数 回 洗 っ た の ち,こ. B) HRP注. 回腸: HRPを. 様 に し て,. ら れ た 組 織 片 は,直. ル タ ール ア ル デ ヒ ド, 0.1Mカ. ァ ー で20分. 様. に, Gastro‑. 査 を 後 日行 っ た 時 に も,同. 胃 粘 膜 を 採 取 し た.得. 2時. 査 を 行 っ た 際,同. 生 成 物 が 蓄 積 して い る. HRP反. 実 験 結 果. 応 生 成物 は,細 胞 基. 底 膜 を濃 染 し,更 に下 部 結 合 組 織 に認 め られ る. 1) A). 光顕 所 見. 更 に粘 膜 固 有層 に存 在 す る,毛 細 血 管 内 の 赤 血球 お よ び顆 粒 系 白血 球 に反 応 生 成 物 が認 め られ る.十. 対 照群 の実 験 HRP溶. 液 の 代 りに 生 理 的 食 塩 水 を 注 入 し,完 全 に. incubationを. 行 っ た 実 験 で は,回. 粘 膜 に お い て,粘 赤 血 球 と,散. 腸,十. 二 指 腸,胃. 膜 固 有 層 に 存 在 す る毛 細 血 管 内 の. 在 し た 顆 粒 系 白 血 球 お よ び 単 球 に,ヘ. モ グ ロ ビ ン お よ び 内 産 生peroxidaseの. 示 す黄 褐 色. 二 指 腸 粘 膜 に おいて も,回 腸 粘 膜 よ りも数 は少 い が , 杯 細 胞 が 認 め られ る.し か し, HRP反. 胃:胃 粘 膜 上皮 で,腸 上 皮 化 生 が存 在 す る部 分 で は.腸 上 皮 化 生細 胞 は,小 腸 吸 収 上 皮 細 胞 と同 様 に. の,反 応 生 成 物 が 認 め ら れ た8) 17).し か し これ以 外 の 場. 注 入 したHRPの. 所 に は,反. 入 したHRPが. 応 生 成 物 は 全 く認 め られ な か っ た(図5, 6).. 次 にHRPを. 注 入 後,生. 検 に て 得 られ た 組 織 片 で,. 応 生 成 物 は回. 腸 程 著 明 で な い(図4).. は, HRP反. 吸 収 が認 め られ る.腸 管 内 腔 に注 存 在 し,上 皮 細 胞 のbrush. border. 応 生 成 物 の為,帯 状 を呈 し,胞 体 内 に.
(3) ヒ ト消 化 管 か ら のHorseradish. HRP反. Peroxidaseの. 応 生 成 物 の 小 滴 を認 め る.細 胞 間 隙 に は,著. 明 にHRP反 HRP反. 応 生 成 物 が畜 積 して い る.細 胞 間 隙 の. 応 生 成 物 は,細 胞基 底 膜 に移 行 し,更 に粘 膜. 吸収の細胞化学的研究. 1331. 胞 が存 在 す る.こ れ らの小 胞 は,特 に核 の 高 さ付 近 に 多数 認 め られ る. ま た隣 接 す る上 皮 細 胞 間 隙 は,全 体 に わ た りHRP. 固 有層 に拡 散 して い る.粘 膜 固 有 層 に は,特 に 多量. 反応 生 成 物 を認 め る.こ の 細 胞 間 隙 のHRP反. のHRP反. 成 物 は,細 胞 中 部 か ら下 部 に か けて,間 隙 の拡 張 が. 応 生 成 物 が認 め られ る.. 腸 上 皮 化生 細 胞 は,形 態 的 に分 化 が 高度 な もの 程, HRP反. 応 生 成 物 を 多量 に認 め,幼 弱 な もの程 少 量 で. あ る.更 に 小 腸 吸収 上皮 細 胞 に認 め られ た よ うに, 細 胞 胞 体 が 一 様 に, HRPに. 濃 染 す る細 胞 が 散 在 して. 応生. 認 め られ る こ と に伴 い,特 に 多 量 に認 め られ る.こ の細 胞 間 隙 のHRP反. 応 生 成物 は,細 胞 上 部 で, ti. ght junctionに よ り,腸 管 内 腔 との交 通 を妨 げ られ て い る(図8,. 10).図13に. 認 め られ る よ うに, tight. い る.又 杯 細 胞 も認 め るが,胞 体 周 囲 の細 胞 間 隙 に. junctionは 正常 構造 を示 して お り,間 隙 の 開 大 等 の. は, HRP反. 変 化 は,全 く認 め られ な い.. 応 生 成 物 の 沈 着 を認 め る.. 胃 固 有 粘 膜 細 胞 部 で は,腸 上 皮 化 生細 胞 部 に近 接 す る場 合,胃. 固 有 粘 膜 の 上皮 細 胞 間 隙 にHRP反. 応. 生 成 物 を認 め る.胃 固有 粘 膜 細 胞 胞 体 内 に は, HRP. さて 吸 収 され たHRPの. 分 布 を み る と, HRP反. 応. 生 成 物 は主 と して,細 胞 間隙 に 多量 に認 め られ,細 胞 胞 体 には 少 量 が存 在 す る.そ して 細 胞 間 隙 と連続. 反応 生 成物 を 認 め な い.こ の細 胞 間 隙 に存 在 す る,. してHRP反. HRP反. に下 部 粘 膜 固有 層 の結 合 組 織 に 多量 認 め られ る.. 応 生 成 物 は少 量 で,腸 上 皮 化生 細 胞 部 か ら離. れ る に従 って 徐 々 に 消失 して ゆ くの が 明 瞭 に認 め ら れ る(図7). 2). 電顕所見. 入 後20分 で,ヒ. ト回 腸 で は,吸 収 され た. 大 部 分 が上 皮 細 胞 外 に移 行 してい るのを 認 め. る.胞 体 下 部 基 底 面 に隣 接 す る部 で は, HRP反. 回 腸:回 腸 内 腔 に注 入 され たHRPは,反 物 の 電 顕 像 か らみ る と,図8, HRPを. HRP注 HRPの. 応 生 成物 は,細 胞 基 底 膜 を通 過 し,更. 9,. 応生成. 10に 示 す ご と く. 腸 管 内 腔 に注 入 してか ら, 20分 後 に生 検 して. 得 られ た標 本 で は, HRP反. 応生. 成 物 を含 ん だ小 胞 は殆 ど存 在 しない.粘 膜 固有 層 の 結 合 組 織 に拡 散 した吸 収 され たHRPは,毛. 細血管. 内 皮 細 胞 の 外 側 壁 に まで達 して い る.そ してHRP. 応 生 成 物 は,腸 管 内 腔 に. 反 応 生 成物 は,血 管 周 囲 に一 様 に存 在 して い る の が. 少 量 認 め られ る.更 に上 皮 細 胞 の 微絨 毛 表 面 お よ び. 認 め られ る.な お血 管 内 の 赤 血球 は,軽 度 に反 応 陽. 微 絨 毛 陰 窩 に も認 め られ る.し か し,微 絨毛 内 部 に. 性 を示 して い る の が認 め られ る(図14). 一 方 分 泌細 胞 で あ る杯 細 胞 は ,回 腸 で は,多 数 認. は, HRP反 応 生 成 物 は認 め られ な か っ た. 一 方HRP反 応 生 成物 は ,吸 収 上 皮 の細 胞 頂 部 の tubulovesicular. systemの. 小胞,小 管,空 胞 に認 め. め られ るが, HRP反. 応 生 成 物 が存 在 す る杯 細 胞 もあ. る.こ の 杯 細 胞 か ら分 泌 され て い る粘 液 は, HRP. られ る.又 活 性化 され た ライ ソ ゾ ー ム も認 め る こ と. 反応 生 成物 の沈 着 を示 し,細 胞 内 部 の粘 液 胞 に も軽. がで きた.し か し これ らのtubulovesicular. 度 にHRP反. temと,微. sys. 絨毛 陰 窩 との交 通 を示 す 所 見 は認 め られ. なか っ た.. 応 生 成 物 を認 め る.更 に細 胞 周 囲 に み. られ る胞 体 もHRP反 またHRPを. と こ ろで,吸 収 され たHRPは,上. 皮細 胞胞体内. では,特 に細 胞頂 部 や,あ る いは 上皮 細 胞 外 側 壁 に 近 接 した 部 に 多 く認 め られ る. また 吸収 され たHRPは,図12に. 応生 成 物 を認 め る(図13).. 吸 収 しな い杯 細 胞 も存 在 す る が,周. 囲 の細 胞 間隙 に はHRP反 十 二指 腸:ヒ. 応 生 成物 を認 め る(図12).. トの 十 二 指 腸 に おいては, HRPの. 吸. 収状 態 は 回腸 と類 似 し た所 見 が 認 め られ る.十 二 指 示 す ごと く,上. 腸 内 腔 にHRPを. 注 入 して20分 後 に生 検 で得 られ た. 皮 細 胞 の ゴル ジ装 置 に近 接 した 小 胞 お よ び小 管 内 に. 粘膜 上皮 で,腸 管 内腔,微 絨毛 表 面,微 絨毛 間 に少. もしば しば認 め られ る.更 に ゴル ジ装 置 内の 小 胞 に. 量 の 注 入 され たHRPを. もHRP反. 量 に は存 在 しな い(図15).細. 胞 頂 部 の小 管,小 胞 に. は少 量 の吸 収 され たHRPの. 反 応 生 成物 が認 め られ. 応 生 成 物 が少 量 認 め られ る.し か し,粗. 面 小 胞 体 に は, HRP反. 応 生 成物 は明 瞭 に は認 め られ. ない. 一 方HRP反. る.吸 収 され たHRPに 応 生 成 物 を含 ん だ小 胞 は,上 皮 細 胞. 胞体 の 核下 部 に は,殆 ど認 め られ な いが,図11に. 示. 認 め る.回. よ って活 性 化 され た ライ ソ. ゾー ム も多 く認 め られ,種 HRP反. 腸 と同 様 に 多. 々の 形 態 を示 して い る.. 応 生 成 物 を含 ん だ小 胞 は,細 胞 外 壁 に 隣 接 し. され る ご と く,細 胞 外 壁 に近 接 す る胞 体 内 に, exo. て特 に 多 く認 め られ る.上 皮 細 胞 胞 体 内 に 吸収 され. cytosisと 考 え られ るHRP反. たHRPは,回. 応 生 成 物 を含 ん だ小. 腸 と同 様 に主 と して 細 胞 間 隙 に 多 く.
(4) 1332. 松. 本. 認 め られ る.. 郎. に存 在 して い る.そ. そ して細 胞 間隙 の 下 部 に 多 く畜 積 し,上 部 で は, tight junctionで 腸 管 内 腔 との 交 通 を妨 げ られ て い る(図15,. 昭. 16).. して 幼 弱 な腸 上 皮 化生 細 胞 の 粗. な 微 絨 毛 の 間 に 入 り込 ん だHRPは,微. 絨毛 間の 陰. 窩 に存 在 す る. 更 にこの 腸 上 皮 化 生 細 胞 の胞体 頂 部 に,pinocytosis. 細 胞 胞 体 内 のHRP反. 応 生 成 物 は,胞 体 の 核上 部. に よ り と りこ ま れ るの が 認 め られ た.ま たHRPを. お よ び細 胞 外 壁 に 近 接 して 多 く認 め られ るの で あ る. 多 量 に含 ん だ, pinocytotic. が,特. この 小 胞 は,内 部 と その 周 囲 内 側 壁 にHRP反. に細 胞 核 上 部 の ゴル ジ装 置 付 近 に多 く存 在 す. る こ とが あ る.十 二 指 腸 で は,同 心 円 状 にHRP反. vesicleが. 認 め られ る. 応生. 成 物 を含 む の が特 徴 で あ る.幼 弱 な腸 上 皮 化 生 細 胞. 応 生 成 物 を認 め る ライソ ゾーム も存 在 した.し か し,. にお い て は,形 態 的 に,胃 固 有 粘 膜 細 胞 に類 似 して. これ らのHRP反. い て,粘 液 胞 が 多 く, tubulovesicular. 応 生 成 物 を含 ん だ小 胞 お よ び ライ. ソ ゾ ー ム とゴ ル ジ装 置 との 関 係,お よ び ゴル ジ装 置. HRP反. のHRP反. 存 在 す るHRP反. 応 生 成 物 につ いて は,明 瞭 な所 見 は 得 ら. れ な か った(図18).ま exocytosisと. た上 皮 細 胞 間隙 に隣 接 して,. 考 え られ るHRPを. 含 ん だ小 胞 を認 め. 応 生 成 物 は認 め なか った.し か し細 胞 頂 部 に. あ り, HRP反 HRP反. 応 生 成 物 は,細 胞 間 隙 と連続 して,基 底膜. を濃 染 し,粘 膜 固有 層 の結 合 組 織 に 多量 に認 め られ る(図17).. 応 生 成 物 が充 満 して い る.細 胞 間 隙 の. 応 生 成 物 は,細 胞 上 部 でtight. junctionに. よ り,胃 内 腔 との交 通 を妨 げ られて い る. この 部 に存 在 す る杯 細 胞 に は,胞 体 内 にHRP反 応 生 成 物 は な く,隣 接 細 胞 との細 胞 間 隙 に はHRP. 十 二 指 腸 粘 膜 上 皮 で も,細 胞 胞 体 に一 様 にHRP 反 応 生 成 物 を認 め る細 胞 が存 在 す る.胞 体 内 に粒 子 状 のHRP反. 応生成物が. 多量 に存 在 す る.上 皮 細 胞 中 部 の 細 胞 間隙 の 拡 大 も. HRP反 HRP反. 応 生 成 物 を含 ん だ小 胞 は認 め られ. る.こ の 部 の 上 皮 細 胞 間 隙 に は, HRP反. た.細 胞 基 底 部 で 基底 膜 に隣 接 した部 に は,や は り 応 生 成 物 を含 ん だ 小 胞 を殆 ど認 め な か っ た.. systemに. 応 生 成物 を畜 積 し,微 絨毛 も濃 染 して. 反応 生 成 物 は認 め られ た(図19,. 20, 21).. この 部 の 胃小 区 の粘 膜 内部 で,腸 上 皮 化 生 細 胞 の 下 部 で は,細 胞 間 隙 のHRP反. 応 生 成 物 も少 量 で あ. いて,こ れ らの細 胞 の 多 くは,細 胞 内諸 器 管 が,膨. る.吸 収 され たHRPは,こ. 化 の 傾 向 を示 して い る.又 表 面 の 微 絨毛 付 近 に組織. 基 底 膜 お よび粘 膜 固 有 層 に存 在 す る.そ して 毛 細血. 片 らしい 粒 子 状 の 小片 を認 め る こ と も多 い.細 胞 の. 管 周 囲 に充 満 して い る.更 に反 対 側 の 胃 固 有 粘 膜 の. 大 きさは 正 常 で あ るが,こ の 細 胞 の周 囲 の細 胞 間 隙. 部 分 の 粘 膜 固有 層 結 合 組 織 に も認 め られ る.し か し. は, HRP反. 毛 細 血 管 内 に はHRP反. 応 生 成 物 は認 め られ ない. 管 内 皮 細 胞 の窓 お よ び細 胞. 応 生 成 物 が充 満 して い て 明瞭 で はな い.. の細 胞 間 隙 と連 続 して,. この 種 の 細 胞 は,絨 毛 全 体 に散 在 していて, HRP反. 吸 収 され たHRPは,血. 応 生 成 物 は,他 の細 胞 が,膜 構 造 に 囲 ま れ た器 管 内. 間隙 にて 血 管 内へ の侵 入 を妨 げ られ て い る.血 管 内. に存 在 す るの に対 し,細 胞 胞 体 の 基質 に存 在 す るの. 皮 細 胞 間 隙 に もHRP反. が 特 徴 で あ る(図15). 胃:胃 内 腔 にHRPを. 応 生 成 物 は認 め られ な い.. 胃固 有 粘 膜側 の粘 膜 固 有 層 は, HRPを 注 入 後,胃 小 区 で そ の頂 点. あ るが,胃 固 有粘 膜 上 皮 細 胞 下 部 胞 体 お よ び細 胞 間. を境 と して,腸 上皮 化 生 細 胞 粘 膜 と,胃 固有 細 胞 粘. 隙 に はHRP反. 膜 が 対 立 して両 側 に存 在 す る部 にお い て電 顕 的 に観. HRP反. 察 した 結果 を述 べ る.. な って い るの が 明瞭 に認 め られ る(図22,. この片 側 の腸 上 皮 化 生 細 胞 の 並 列 して い る粘 膜 上. 認 めるので. 応 生 成 物 が,存 在 せ ず,細 胞 間 隙 の. 応 生 成 物 は,腸 上 皮 化 生 部 か ら徐 々 に少 量 と 23, 24).. 後 で述 べ るが,こ の部 の 胃固 有 粘 膜 上 皮 細 胞 には,. 皮 は,幼 弱 な腸 細 胞 の形 態 に類 似 した 不完 全 腸 上皮. 細 胞 表 面 にHRP反. 化生 で あ った が,こ の部 に は,胃 固 有粘 膜 細 胞 は全. よ び細 胞 間 隙 に は 全 く認 め な い(図31). 一 方 別 の 組織 片 よ り得 られ た分 化 の か な り進 ん だ. く認 め られ な か った 。一 方 反 対 側 の 部 は,胃 固 有粘. 応 生 成 物 を認 め る が,胞 体 内 お. 膜 細 胞 の み で,腸 上 皮 化 生 細 胞 は認 め られ なか った.. 腸 上 皮 化 生 細 胞 で は,前 述 した小 腸 吸 収 上 皮 細 胞 と. 同 部 を連 続 的 に 切片 を作 製 して 鏡 検 した が,両 者 が. 類 似 した 所 見 が認 め られ て い る,. 少範 囲 に 混 在 す る像 は認 め られ ず,腸 上皮 化 生 はあ る程 度 の範 囲 を も ち存 在 して い た. ヒ ト胃 内 腔 に注 入 され たHRPは,少. 細 胞 中 部 で は,細 胞 間 隙 の拡 大 も認 め られ, HRP 反 応 生 成 物 が 多 量 に認 め られ 細 胞 外 壁 に接 してex. 量 が胃 内 腔. と胃 固有 粘 膜 細 胞 表 面 と腸 上 皮 化 生細 胞微 絨毛 表 面. ocytosisと. 考 え られ る小 胞 も存 在 して い て,吸 収 さ. れ たHRPは,粘. 膜 固有 層 に も多量 に認 め られ る..
(5) ヒ ト消 化 管 か らのHorseradish. 細 胞 基 底 部 には,HRP反. Peroxidaseの. 吸 収 の細 胞 化学 的研 究. 応 生 成 物 を含 んだ 小胞. は殆 ど存 在 しな い(図25,. Ⅳ. 26, 27).. この 部 の 粘 膜 固 有層 を電 顕 で,詳 細 に観察 す る と 毛 細 血 管 内 に 吸 収 され たHRPが るの が 認 め られ る. HRP反. 多 量 に移 行 して い. 応 生成 物 は,毛 細 血 管 周. 考. 1333. 案. 細胞 外 か ら細 胞 内 に物 質 を と り込 む こ と を吸 収 と 呼 ん で い る.吸 収 は殆 どの 細 胞 に お い て 行 わ れ,そ の 吸収 した物 質 を,他 の 細 胞 に 供 給 す る機 能 を持 つ. 囲 に充 満 して い て,更 に血 管 内 に も吸 収 され たHRP. 細 胞 を吸 収 細 胞 と呼 ん で い る.哺 乳 動 物 消化 管 の粘. が存 在 して い る.赤 血 球 も軽 度 に反 応 陽 性 を示 して. 膜 上皮 細 胞 は,摂 取 され た栄 養 素 を細 胞 内 に 吸収 す. い る.消 化 管 の毛 細血 管 内皮 細 胞 の 窓 の 内外 共 に,. る典 型 的 吸 収 細 胞 で あ る.吸 収 は形 質 膜 を通 じて行. HRPは. 充 満 して い る のが 確 認 され た.し か し,吸 収. され たHRPが. 窓 を通 過 して い るよ うな所 見 は形 態. わ れ る.形 質 膜 の 変 化 を伴 わ な い, transmembrane absorptionと,形. 態 的変 化 を伴 う, absorption. by. 学 的 には 得 られ な か った.血 管 内皮 細 胞 間隙 も認 め. pinocytosisと. られ,そ の 内部 にHRP反. て いて,物 質 の 吸収 に対 して特 有 の 性 質 を持 つ.哺. 応 生 成 物 が存 在 して い る. が あ る.細 胞 形 質 膜 は半 透 性 を有 し. が,通 過 を示 す 像 か否 か は断 定 で きな か っ た.血 管. 乳 動 物 の 消 化 管,特 に小 腸 絨 毛 上 皮 細 胞 は 最 も吸収. 内 皮 細 胞 に は, HRPを. 能 力 が 大 で あ り,生 理 学 的,形 態 学 的,生 化 学 的 に. 含 ん だpinocytotic. vesicle. が 血 管 内腔 側 に も,細 胞 基底 膜 側 に も,更 に胞 体 内 に も認 め られ た(図28,. 29, 30).. もよ く研 究 され て い る. ヒ ト消 化管 の上 皮 細 胞 の 形 態 につ い て述 べ る.胃. と ころ で 胃 固有 粘 膜 上 皮 細 胞 で腸 上皮 化 生 部 か ら. で は,胃 固有 粘 膜 に噴 門 腺,胃 底腺,幽. 門腺 を有 し. 離 れ た 部 に お い て,前 述 した1つ の 胃小 区で 腸 上皮. て い る.ま た,胃 固 有 粘 膜 の 他 に,腸 上皮 と類 似 し. 化 生 細胞 部 の反 対 側 の 胃固 有 粘 膜 上皮 細 胞 に は,細. た 細 胞 を有 す る こ とが あ り,こ れ を腸 上 皮 化 生 と呼. 胞 胞 体 内 に は全 くHRP反. ん で い る.次 に小 腸 粘 膜 に は,輪 状 ヒ ダ,絨 毛 が よ. 応 生 成 物 は な く,活 性化. され た ライソゾー ム も認 め な い.細 胞 間 隙 に もHRP. く発達 して, Lieber‑Kuhn陰. 反応 生 成 物 は全 く存 在 せ ず,胃 内 の 注入 されたHRP. 胞 は微 絨毛 を有 す る円 柱 上皮 細 胞 で こ れ に杯 細 胞 が. は, tight junctionで 侵 入 を妨 げ られてい る(図31). 一 方 この 胃小 区 で ,腸 上 皮 化 生粘 膜 と胃 固 有粘 膜. 混 在 して い る.空 回腸 の陰 窩 の底 に は, Paneth細. 窩 を有 し,そ の 上 皮 細. が数 個 存 在 し, Brunner腸. 胞. 腺 は十 二 指 腸 の み に認 め. の境 界付 近 の上 皮 細 胞 を観 察 す る と,胃 固 有 粘膜 細. られ る.ま た全 小 腸 の粘 膜 内 に は孤 立 リンパ 小 節 が. 胞側 の間 隙 に はHRP反. あ り, Peyer集. 応 生 成物 を認 め ない が,腸. 上 皮 化 生 細 胞 側 間 隙 に は明 瞭 に認 め る(図32).. 合 リンパ 小 節 も認 め られ る17〜20).. さて胃 粘 膜 の 腸 上皮 化 生 は,種 々の 分 布 様 式 を も. 別 の 胃小 区か ら得 られ た 組織 片 で は,腸 上 皮 化 生. っ て存 在 して い る21)形態 的 に は,小 腸 粘 膜 上 皮 細胞. 細 胞 に近 接 した 胃 固 有 粘 膜 上皮 細 胞 で,細 胞 間隙 に. と極 めて似 て お り, Paneth細. HRP反. し,腸 上 皮 化生 が高 度 な部 分 で は,絨 毛 状 構 造 を示. 応 生 成 物 を少 量 認 め る.細 胞 胞 体 お よび粘 液. 胞 に は,全. くHRP反. 応 生 成 物 を認 め な い.細 胞 間. 隙 の 吸 収 され たHRPは,上. 部 のtight junctionに. よ って 胃 内 腔 との 交 通 を妨 げ られ て い る(図33). す.ま た 自由縁 に は,種 々の 程 度 の 微絨 毛 を有 して い る.そ して分 泌顆 粒 等 を有 し,粘 液 分 泌 上皮 と し て の 性 格 を も ち,微 絨 毛 は粗 で あ り腸 上 皮 と被 蓋上. 胃 粘 膜 に お い て も,小 腸 粘 膜 と同 様 に,胞 体 基質 がHRP反. 胞 や 内 分 泌 細 胞 も出現. 応 生 成物 で充 満 して い る細 胞 が認 め られ. 皮 との 中 間 的形 態 を持 つ.分 化 の低 い腸 上 皮 化 生 や, 形 態 的 に小 腸 上皮 細胞 に類 似 して いて も, alkalin. る.腸 上皮 化 生細 胞 で も,胃 固 有 粘膜 細 胞 で も認 め. ephosphataseや,. られ る.腸 上皮 化 生 細 胞 で は,微 絨毛 も濃 染 して い. が 弱 い腸 上 皮 化 生 を一 般 に不 完 全 腸 上皮 化生 と呼 ん. る.こ の よ うな細 胞 胞 体 に は,膨 化傾 向 の あ る空胞. で い る.こ れ に対 して 形 態 的 に も,殆 ど小腸 上 皮 細. を多 く認 め る.核 はHRP反. 胞 と類 似 して いて,酵 素 活 性 も小 腸 の そ れ と同様 に. 応 生 成 物 を認 め な い.. ま た腸 上 皮 化 生 粘 膜 で,こ の よ うなHRP反 成物 の充 満 す る細 胞 と隣 接 す る, HRP反. 応生. 応 生 成物 を. 認 め な い上 皮 細 胞 の,周 囲 の細 胞 間隙 にHRP反. 応. leucine‑aminopeptidaseの. 活性. 示 す もの を完 全腸 上皮 化 生 と呼 ん で い る22〜24).最 近は 胃 癌 との 関係 が 注 目 され て い る25) 26). 腸 上 皮 化 生 は加 令 と共 に発 生 しや す く,発 生 機序. 生 成 物 を認 め な い粘 膜 部 も存 在 して い た(図25, 34,. に は,異 所発 生 説 とstem. 35).. cellか らの 化 生説 が あ る. が,後 者 と考 え る説 の 方 が 多 い27)28). と ころ で各 消 化 管 に お い て,物 質 は 消 化酵 素 に よ.
(6) 1334. 松. 本. 昭. 郎. り低 分 子化 され吸 収 され るの で あ るが,あ る種 の 状. 上 皮 よ りferritinが 吸 収 され る こ と を述 べ た.ま た. 態 の と きや,生 後 の一 定 期 間 は ご くわ ず か の蛋 白質. Bernstein36)ら は,成 熟 ギ ネ ァ ビ ッグ腸 管 か らハ プ. は,未 分解 の ま ま 吸収 され うる こ とは前 述 した.. テ ンや 巨 大 分子 が 吸収 され る と述 べ て い る.. 分 子 量40,000で,直. 径 が,. 25〜30Aと. い わ れ る超. 最 近 で は, HRPを. 使 用 して, Cornell10),Hugon11),. 微 粒 子 蛋 白 質 分 子 で あ る 西 洋 ワ サ ビか ら抽 出 さ れ た. Walker37)ら が,成 熟 哺 乳 動 物 の 腸 管 で,高 分 子 蛋 白. peroxidaseのHRPが,そ. 質 が未 分 解 の ま ま 上皮 細 胞 に吸 収 され る径 路 を形 態. の性 質 上 蛋 白質 の吸 収 に. 関 す る 研 究 に 画 期 的 発 展 を も た ら し た. Karnovsky9)ら. は,HRPの. nobenzidineが. 存 在 下 で,. 類 似 した 吸 収 過 程 を示 す こ と を報 告 して い る.. 3,3‑diami. 過 酸 化 水 素 によ って生 成 す る反応 生. 成 物 が,光. 学 顕 微 鏡 お よ び電 子 顕 微 鏡 下 で 容 易 に 検. 出 し う る こ とを 応 用 し, HRPをtracerと HRPが. 学 的 に詳 細 に観 察 し,未 熟 哺 乳 動 物 に お け る場 合 と. Grahamと. し て 用 い,. マ ウ ス の 腎 の 尿 細 管 上 皮 細 胞 に 吸 収 さ れ うる. こ と を 報 告 し た.こ dase活. 年,医. 非 常 に 広 く 用 い られ て い る.高 と し て は,こ あ る が,. 学生物学の分野で. HRP程. 子 量500,000)等. また, Straus41) 42)ら に よ り吸 収 され たHRPの. 定. 量 法 が確 立 され, Warshaw12) 13)ら は,腸 管 上 皮 細 胞 管 血 管 と リン パ管 に少. 量 認 め られ る こ とを報 告 し,成 熟 哺 乳 動 物 の未 分 解 高 分 子 蛋 白質 の吸 収 に 関 す る概 念 が 確 立 され て きた. 分 子 蛋 白 質 のtracer. の 他 にferritin(分. 毒 素 が腸 管 か ら未 分 解 の ま ま吸 収 され. か ら吸 収 され たHRPが,腸. の 新 し い 細 胞 化 学 的 なperoxi. 性 の 証 明 方 法 は,近. その他,各. て い る事 実 を示 す報 告 もみ られ る38〜40).. が. .とこ ろで,ヒ る研 究 は,殆. 多 く用 い ら れ て い な い.. ト腸 管 の 高 分 子蛋 白質 の 吸収 に 関す どな され て お らず,定 量 的 に な され た. 分解. 牛 乳 蛋 白 質 や寄 生 虫 毒 に対 す る抗 体 の産 生 につ いて. の ま ま 吸 収 さ れ る と い う事 実 は 数 多 く 報 告 され て い. の研 究 が40) 43) 44),こ れ ら蛋 白質 の 吸 収 を推 測 させ るが,. る.. 形 態 学 的 に又細 胞 化学 的 に証 明 した報 告 は な い.. 新 生 哺 乳 動 物 の 腸 管 で,高. Brambell5)ら. は,新. 分 子 蛋 白 質 が,未. 生 哺 乳 動 物 の 腸 管 よ り,母. 体 の 抗 体 が ミル ク に 混 在 し,腸 と を 報 告 し, Clark6)ら. は,未. 管 か ら吸収 され る こ. ら は,新. 生 ラ ッ ト腸 管 で,脂. ロブ. 初 に主 な栄 養 素 の 吸収 部 位 で あ る回 腸 で,次 に回 腸 よ り も吸 収 機 能 は低 い が,未 分 解 の蛋 白質 の存 在 す. の 後, Cornell29). 肪 と蛋 白 質 が 類 似 の 径. 路 を と っ て 腸 管 上 皮 細 胞 に 吸 収 され る こ と を 報 告 し た.更 い て,授. にKraehenbuhl30)ら. は,新. 生 動 物 の腸 管 にお. 乳 に 際 し て 腸 管 か ら,高. 分 子 蛋 白質 が吸 収. され る こ と に よ っ て,母 て い る と 述 べ て い る.. 体 か らの受 動免 疫 が行 われ Worthington31)ら. は,ア. デノ. ピ ー ル ス が 新 生 ラ ッ トの 腸 管 よ り吸 収 さ れ る こ と を 述 べ,. Orlic32)ら. は,羊. 使 用 し,最. 腸上 皮 細 胞 か. 熟 マ ウ ス に γ‑グ. リ ン と ア ル ブ ミ ン を 経 口 的 に 与 え,回 ら吸 収 さ れ る こ と を 認 め て い る.そ. わ た し は,今 回 の 実 験 に お い てHRPを. 水 中 に 注 入 し たHRPが. 未熟. ラ ッ ト に 嚥 下 さ れ 血 管 に ま で 移 行 す る 事 を認 め て い. る可 能 性 の 強 い 十 二指 腸 で,そ. して未 分解 蛋 白質 が. 多量 に存 在 す る胃 で 消化 管 粘 膜 上 皮 細 胞 に よ る吸 収 過 程 を観 察 した. この実 験 結 果 よ り消 化 管 に 注 入 され たHRPは, 小腸 で も,胃 の 腸 上皮 化生 で も,明 か に上 皮 細 胞 よ り吸 収 され て い るの が 認 め られ た.そ. して吸 収 上 皮. 細 胞 に は,破 壊 お よび変 性 は,一 部 の特 殊 な細 胞 を 除 い て は認 め られ な い. ま た こ の実 験 で,ヒ. トの 胃 の 腸 上皮 化生 細 胞 は,. ヒ ト小 腸 管 粘 膜 と同 程 度 にHRPが. 吸 収 され るが,. も新 生 哺. 殆 ど小 腸 粘 膜 と同 様 な形 態 を示 す腸 上皮 化 生 細 胞 は. 乳 動 物 に お いて 高 分 子蛋 白質 が腸 管 に 吸 収 され る こ. 勿 論,ま だ幼 弱 な形態 を示 す 不 完 全腸 上皮 化 生 細 胞. る.更. に, Schlafke33), Hugon34), Graney15)ら. も, HRPの. と を 報 告 し て い る. 一方. , Clark6)やClarke35)ら. 腸 管 の 高 分 子 蛋 白 質 の 吸 収 は,生. は,新. 生 哺乳 動 物 の. 後 約20日 位 で 低 下. い て 示 さ れ た,未. 熟 哺 乳 動 物 で も,未. 熟 哺 乳動 物 にお. 分 解 高 分 子 蛋 白 質 が,腸. 管 に吸 収. DanforthとMoore7)ら. は,イ. を 成 熟 ラ ッ トの 小 腸 管 に 注 入 す る と,低 す こ と を 報 告 し, Bockman14)ら. っ. 熟 しな く と もす で に有 す る こ とが 明 か とな った.し. ることと し,ま ず 回 腸 お よ び 十二 指 腸 につ いてHRP の 吸 収 を検 討 す る. 消 化 管 内 に注 入 され たHRPが. さ れ る こ と も報 告 さ れ て い る. 古 くは,. 吸 収 が認 め られ る(図19, 20, 21).従. 吸 収 能 力 は,吸 収 上 皮 が 分 裂後 完 全 に成. か し吸収 様 式 に少 し違 い もみ られ るの で,後 で述 べ. す る と 報 告 し て い る. と こ ろ で,成. てHRPの. は,ハ. ン シ ュ リン 血糖 をおこ. ムス ター腸 管. 体 内 に と り込 ま れ. る径路 に は,細 胞 膜 を通 過 す る場 合 と,細 胞 間隙 か ら侵 入 す る場 合 が考 え られ る. Karnovsky9)ら ウスの 腎 の尿 細 管 上 皮 細 胞 で,HRPが. はマ. 形 質 膜 の重 積.
(7) ヒ ト消 化 管 か らのHorseradish. で あ る 小 管 状 の 構 造 に 入 り込 み,そ ocytosisの. の 先 端 か らpin. を 報 告 し た.こ. 吸 収 の 形 態 と類 似 して い て,. Cornell29), Walker37),. Kraehenbuhl30),. は りHRPが. systemに. 上 部 に 輸 送 され る こ と. の 膜 の 形 態 的 変 化 を 伴 う吸 収 様 式 は. 腸 管 上 皮 細 胞 のHRPの. 細 胞 頂 部 の,. Hugon34), Orlic32). ulovesicular. が 述 べ て い る よ うに,こ. systemは,成. も同 様 に,細. 使 用 した場 合 で. 胞 頂 部 のtubulovesicular. な か っ た が,こ. か も しれ な い. Hugon11) 34)ら は,満. して い る こ と よ り,吸. 腹 の マウス よ りも. 高 度 に 吸 収 す る と報 告. 管 上 皮 細 胞 の 頂 部 のtubulovesicular. 養. の ヒ ト腸. systemに. つ. 織 採 取 時 間 等 につ いて よ. さ て 細 胞 頂 部 のtubulovesicular. あ る が,. systemに. 吸収. 胞 胞 体 内 を 輪 送 さ れ て ゆ くの で. Karnovsky9)ら. は この 小 胞 が 融 合 しなが ら. 核 上 部 の 空 胞 に な る と し て い る.ま. たCornell29).. K. raehenbuhl30)ら. は,こ. agolysosome系. と 関 係 が あ り,更 に 酸 フ ォス フ ァ タ. ー ゼ ,チ. の 空 胞 は 水 解 酵 素 に 富 みph. ア ミン ピ ロフ ォス フ ァタ ーゼ を 多量 に含 ん. で い る の で,ゴ ocytotic. ル ジ 装 置 由 来 の 空 胞 に ま わ りのpin. vesicleが. べ て い る.従. 融 合 し て で きた も の で あ る と述. っ て 吸 収 さ れ たHRPは,こ. れ らの空. 胞 が ラ イ ソ ゾ ー ム 系 の 一 員 で あ る と説 明 し た. gon34)ら. Hu. も この 空 胞 と ラ イ ソ ゾ ー ム と の 関 係 の あ る こ. れ たHRPを. ト消 化 管 上 皮 細 胞 で は,吸. 収 さ. 含 ん だ 空 胞 を あ ま り核 上 に 認 め な い.. 時 間 的 要 素 か ま た は,構 で あ る.さ. は, necrotic. cellと 呼 び,こ の 胞 体 のHRPが. 造 的 要 素 に よ る もの か 不 明. て 吸 収 さ れ たHRPは,経. 体 内 で 消 化 を う け る か,ま. た は,細. 拡散. と考 えて い るが,そ の周 囲 の細 胞 間 隙 に, HRP反. 時 的 に細 胞 胞 胞 外 に輸送 され. 応. 生 成 物 が充 満 して い るの を認 めて い る. ヒ ト胃 の 腸 上 皮 化生 細 胞 のHRP吸. 収 につ い て み. る と,不 完 全腸 上 皮 化 生 細 胞 は,形 態 的 に細 胞 頂 部 のtubulovesicular. systemが. 少 い為,回. 腸 および. 十 二 指腸 と異 っ て粗 な微 絨 毛 の 散 在 す る細 胞 表 面 か らpinocytosisに. よ っ てHRPが systemに. 吸 収 され た 後,こ は あ ま り存 在 す る こ. とな く,小 胞 に よ り細 胞 胞 体 下 部 に輸 送 され る と考 え られ る.し か し完 全 腸 上 皮 化生 細胞 に お い て は, 回 腸 お よび十 二 指腸 と殆 ど類 似 したtubulovesicul ar systemに. 入 る と考 え られ る.細 胞 胞 体 内 を輸 送. され 粘膜 固有 層 に至 る径 路 は,い ず れ の場 合 も,回 腸 お よび十 二 指 腸 と同 様 の 径 路 を と って い る の が認 め られ た(図26,. 27).. 腸 上皮 化 生 細 胞,特 に,不 完 全腸 上 皮 化 生 細 胞 の HRP吸. 収 様 式 は,そ の幼 弱 な細 胞 形 態 か らも考 え ら. れ るよ うに,未 熟 哺 乳 動 物 が, pinocytosisでHRP を吸収 す る様 式 と類 似 して い るの は興 味 あ る事 実 と い え る(図20). 今 回 の実 験 で,ヒ. と を認 め て い る. 今 回 の 実 験 で,ヒ. 過 性 が 増加 してい る細胞 と考 えられ る45). Cornell10)ら. のtubulovesicular. り詳 細 な 研 究 を 必 要 とす る と考 え ら れ る.. され たHRPは,細. て い る細 胞 が存 在 す る.こ の 種 の 細 胞 は,細 胞 内諸. 質 膜 の 透 過 性 が ます た めか,あ るい はartifactの 為. のtubulov. 収 上 皮 細 胞 の 吸 収 度 は,栄. 入 方 法,量,組. を通 過 して,粘 膜 固 有 層 の 結 合 組 織 に拡 散 す る と考. して,粘 膜 固有 層 に移 行 す る可 能 性 を示 して い る.. 状 態 と 非 常 に 関 係 が あ る と推 測 され る.こ. い て は,注. 殆 ど隣 接 細 胞 間 隙 に移 行 した後 に基 底 膜. ま たHugon11)ら は,そ の 構 造 が 正常 で あ る と し,形. 他 動 物 と比 較 し て 異 って い る の. 空 腹 の マ ウ ス の 方 が, HRPを. 収上皮細胞. 膜 を採. で,粘. か し ヒ ト腸 管 で は,こ. systemが. 17).吸. 含 ん だ小 胞 は あま り認 め な い の. 移 行 し た もの. 入 後20分. で に 吸 収 さ れ たHRPが. と 考 え ら れ る.し esicular. る小 胞 を 多数 認 めて い る(図11, 基 底側 に は, HRPを. 考 え られ. らか の 原 因 で細 胞 構 造 の 変 化 を きた し,形 質 膜 の透. sys. 充 満 し て い る 像 は 得 られ. れ はHRP注. 今 回 の わ た しの実 験 で も, exocytosisと. 器 管 が膨 化 の傾 向 を示 して お り(図15, 34, 35),何. systemに. 今 回 の わ た し の 実 験 で は, tubulovesicular. 取 し た 為,す. 胞 間 隙へ と移 行 す る と考 え られ る10) 32).. 消 化 管 粘膜 上皮 細 胞 で微 絨 毛 も胞 体 も一 様 に 濃 染 し. のtracerを. 吸 収 さ れ たHRPが. 殊の. よ り細 胞 外 壁 か ら細. 一 方 今 回 の実 験 で も認 め られ て い るの で あ るが,. 熟 哺 乳 動 物 の 方 が,よ. と り こ ま れ る こ と が 報 告 され て い る6)15) 31) 33).. temに. 1335. え られ る.. のtub. り複 雑 な 形 態 を 示 す よ う で あ る. ま た 他 のferritin等. 輸 送 形 態 で あ るexocytosisに. で, HRPは. tubulovesicular. と り込 ま れ て い る こ と を 報 告 して い る.. し か しCornell10)ら. 吸収 の細 胞 化 学 的 研 究. る と考 え られ る.し か し大 部 分 のHRPは,特. よ う に 小 胞 が 分 離 し,細 胞 頂 部 を 互 に 融. 合 し な が ら空 胞 を 形 成 し,核. ら が,や. Peroxidaseの. ト胃 の 腸 上皮 化生 細 胞 で も,ヒ. ト小腸 管 粘 膜 に お け る と同 様 に,高 分 子蛋 白質 分 子 が 吸収 され うる可 能 性 が示 され た が,こ れ は,胃 で は摂 取 され た食 物 中 の 未 分 解 の 蛋 白質 が特 に 多量 に 存 在 す る とい う点 で 非 常 に 重 要 とい え る. 化生 の程 度 が 高 度 な もの は 勿 論,更 に ま だ微 絨毛.
(8) 1336. 松. 本. の 成 熟 の 度 合 も低 く,胞 体 頂 部 に ま だ粘 液 胞 を多 く 有 す る腸 上 皮 化 生 細 胞 で も, HRPを. 吸 収 し絨 毛 内. の毛 細 血 管 内 ま で輸 送 して い る.. 昭. 郎 一 方Hugon34), Rhodes48)ら. 管 内 にHRPを. は ,成 熟 哺 乳 動 物 の 腸. 注 入 し たが,上. 皮 細 胞 に よ る吸 収 を. 認 めな か った と報 告 して い る.そ してRhodesら. ヒ ト胃 が腸 上 皮 化 生 細 胞 を有 す る時,癌 が 高 率 に. は. 損 傷 が あった ときに前 述 し た細 胞 間 隙 の 開 大 が あ り,. 認 め られ る こ とは前 述 し たが, Korn24)ら は,正 常 の. HRPの. 小 腸 で は,例 え ば,脂 質 は乳 糜 管 を通 り輸 送 され る. の 実 験 とは 投与 量,方 法 と も違 うた め異 った結 果 が. 吸収 が お こると述 べ て い る が,今 回 の わ た し. が,胃 の腸 上 皮 化 生 細 胞 で は,脂 質 の停 帯 を きた す. 得 られ た もの と考 え られ る.更 に細 胞 化学 的 に は,. 可 能 性 の あ るこ とを あ げて い る.胃 の腸 上 皮 化生 細. 少 量 の 吸収 は証 明 しに くい とい う こ と も理 由 の1つ. 胞 の物 質 の吸 収 は,今 後 更 に研 究 が進 め られ な けれ. とな り う る とい える.. ば な らな い分 野 で あ ろ う.. わ た しの研 究 に よれ ば,成 熟 ラ ッ トの 胃 に お い て,. ヒ ト胃 固 有 粘 膜 細 胞 間 隙 に も, HRP反 を認 め て い る が(図33),こ. 応 生 成物. れ は ヒ ト胃の 腸上 皮 化生. 細 胞 に よ り吸 収 され たHRPが,胃. 固 有 粘膜 細 胞 間. 隙 に移 行 した もの で あ る と考 え られ る.. 手 術 的侵 襲 を加 え た後 に も,上 皮 細 胞 間 隙 の 変 化 も 認 め られ ず,胃 固 有 粘 膜 細 胞 に よ るHRPの. さてHRP反. わ た しは,成 熟 ラ ッ トの 胃 固 有 粘 膜 細 胞 でHRP. 吸収 も. お こ らな か っ た結 果 が 得 られ て い る49). 応 生 成 物 は,胃 の腸 上皮 化 生 部 の粘. 膜 固有 層 の結 合 組 織 と毛 細 血 管 内 に充 満 して い る.. の吸 収 はお こ らな い こ とを 報 告 して い る鮮 η更 に注. 吸収 され たHRPが. 入 され たHRPが. ま輸 送 され,血 管 内 に移 行す る こ とは,免 疫 学 的 に. 十 二 指 腸 部 か ら吸 収 され たHRP. の逆 吸 収 で な い こ とは,同 時 に行 った 胃 粘膜 幽 門 部 biopsyでHRP反. 応 生 成 物 を認 めな か った こ とか ら. 明確 で あ る.. 消 化 管 上 皮 細 胞 か ら未 分 解 の ま. 有 意 義 な 量 の 異 種蛋 白質 が,生 体 の消 化 管 か ら吸 収 され血 管 内 に移 行 す る可 能 性 が あ る こ とを示 して い る.更 に薬 物 も吸収 され血 中 に移 行 す る こ とが 十 分. ま た図22は,頂. 部 を境 と して一 方 に腸 上 皮 化 生 細. 胞 が 分 布 し,反 対 側 は 胃固 有 粘 膜 で 占 め られ て い る. 考 え られ る. 今 回 の 実験 は,回 腸 お よ び十 二 指 腸 にお い て は,. 部 の 絨 毛 の 内 部 で あ るが,腸 上 皮 化生 細 胞 部 よ り吸. HRPが. 収 され たHRPが,細. か し類似 した様 式 を と る こ と は十 分 推 測 で き る.. 胞 間 に著 明 に 沈着 し,粘 膜 固. 有 層 に 移 行 しか け て い る が,血 管 内 に は ま だ認 め ら れ ず,し か も胃固 有 粘 膜 の 部 分 に は,全. 毛 細 血 管 に 移 行 す る像 は 得 られな か った.し. 哺 乳 動 物 の腸 管 粘 膜 の 微 細 血 管 構 造 は,他 の 内臓. く吸 収 され. 血 管 の持 つ 構造 と類 似 して い て,有 窓 性 で 内皮 細 胞. て い な い こ とが 明瞭 で あ る.ラ ッ トと同 じ く,ヒ ト. 間 隙 にtight junctionを 持 つ50).窓 は 隔膜 と呼 ばれ る. 胃 固 有 粘膜 細 胞 で もHRPの. 膜 様 構造 で塞 がれ て お り,血 管 内 皮細 胞 に規 則 的 に. 吸 収 は お こ らな い の で. あ ろ う と考 え られ る.. 配列 して い る51) 52).血 管 内皮 細 胞 に お け るtight jun. 今 回の 実 験 で は,消 化 管 内 腔 に 注 入 され たHRP は,腸 管 上 皮 細 胞 よ り吸 収 され るが,上 皮 細 胞 間 の. ctionは,筋. の 毛 細 血 管 内 皮 細 胞 に認 め られ る53)と. 同様 に,腸 管 で もや は り,限 界膜 外葉 の融 合 を認 め. tight junctionの 部 よ り細 胞 間 隙 に侵 入 す るtrans. る劉 しか しそ の連 続 性 に つ い て は 明 確 に は わ か って. intercellularな. い な い.. か っ た.得. 径 路 を推 測 させ る像 は認 め られ な. られ た 電 顕 像 は, tight junctionの 部 は. 正 常 で その 内 部 にHRP反. 応 生 成 物 は 認 め な い. R. 高 分 子 蛋 白質 に対 す る血 管 の透 過 性 に つ いて は, Grotte54),Mayerson55), Pappenheimer56)ら. は,生 理 学. hodes48)ら は,腸 管 の損 傷 に よ る細 胞 間 隙 の開 大 を. 的 に種 々の 分 子 量 の 物質 を血 管 か ら透 過 させsmall. 報 告 して い うが,正 常 の腸 管 上 皮 細 胞 に は, trans. pore. intercellularな 径 路 は ない と考 え られ る. HRPは. 壁 孔 群 を推 測 した.こ れ に 対 して形 態 学 的 に, Kar. 直 径25‑30Aの. novsky57)ら は, HRPが. り. 粒 子 で あ る か ら, artifactやHRP. 自体 の 作 用 に よ るtight. junctionの. 開 大 がなけれ ば. 理 論 的 に は 通 過 は あ り得 な い. Walker37)ら vitroで tight る.更. は あ る が,成 junctionの にOrlic32)ら. て い る.. も, in. 熟 ラ ッ トで 電 顕 形 態 学 的 に,. 変 化 を認 め な い こ と を 報 告 して い も未 熟 ラ ッ トで 同 様 の 報 告 を し. systemと,. large. pore. systemに. の40A程. の 間 隙 をsm. 相 当 す る と 考 え た.ま. 細 血 管 内 皮 細 胞 で は,. tight. junctionは,膜. の 接 触 が ボ タ ン 様 に な さ れ て い て, HRPは 通 過 で き る と説 明 し た.同 も認 め て い て,. 類の. 筋の毛細血管の内皮 細 胞 間. 隙 を 通 過 す る こ と を 述 べ,こ all pore. systemの2種. ferritinは. 時 にHRPの. た 筋 の毛 と膜 と その 間 を 小 胞 性 輸送. この小 胞 性 輸 送 に よ る と.
(9) ヒ ト消 化 管 か らのHorseradish. Peroxidaseの. 述 べ た.. 吸 収 の細 胞 化 学 的 研 究. 1337. り今 後 研 究 され な けれ ばな ら ない で あ ろ う.. 更 にSchneeberger‑Keeley58)ら. は,マ. ウ スの 肺. 以 上述 べ た ご と く,成 熟 哺 乳動 物 の高 分 子 蛋 白質. 胞 毛 細 血 管 で も同 様 な 所 見 を認 め て お り,生 理 学 的. の 未 分 解 の ま まの 吸 収 につ い て は, HRPを. なsamll. て,細 胞 化 学 的 に説 明 されて い るが, Warshaw12,13). poresystemとlarge. pore. systemを. 形. 態 学 的 に,血 管 内 皮 細 胞 間 隙 と小 胞 に よ る輸 送 に相. らはbovine. 当 す る と考 えた.. を用 い,成 熟 ラ ッ トの 十 二 指 腸 にBSAを. これ に対 し,ClementiとPalade52)ら の腸 管 血 管 で,や は りHRPを. は,マ. ウス. 使 用 して,窓 に よ る. 膜 性輸 送 と形 質 膜 小 胞 に よ る小 胞 性 輸 送 を そ れ ぞれ small pore. systemとlarge. pore. systemと. 考え. serum. albumin(分. 投 与 量 の約2%のBSAが. 使用 し. 子 量50,000)(BSA) 注 入 後,. リ ンパ系 お よ び門 脈 系 に. 排 出 され る こ と を認 め,免 疫 学 的 に は十 分 の 量 で あ る と説 明 して い る. 今 回 の わた しの 実験 で は,リ ンパ 系 の観 察 は行 っ. る所 見 を述 べ,腸 管 血 管 にお い て は,血 管 内皮 細 胞. て い ない が,直 接 リンパ 管へ 輸送 され るな らば,粘. 間 隙 の通 過 は お こ らな い と報告 した.そ. して 巨大 蛋. 膜 固 有 層 に存 在 す る局 所 リン パ系 の 抗 体 産 生 の み な. 白 質 分子 程,内 皮 細 胞 通 過 に時 間 を要 す る と して い. らず,体 系 的 免 疫 に も重 要 な意 義 を有 す るで あろ う。. る.結 局 確 定 的 な こ と は不 明 で あ る が,小 胞 性 輸 送. Walker61)ら は, HRPを. 経 口投 与 して免 疫 した 成. は,エ ネ ル ギ ー的 に も時 間 的 に も非 能 率 で あ り,内. 熟 ラ ッ トでin. 皮 細 胞 間 隙 や窓 を通 過 す る径 路 が存 在 し,そ の 作 用. 収 が著 明 に低下 した と報 告 して い る.更 に免 疫 状態. の 比 率 に よ り血 管 壁 の 蛋 白 質分 子 に対 す る透 過 性 が. で は,そ の 抗 原 の侵 入 を妨 げ る作 用 をす る と して い. vitroで はあるが,腸 管 よ りHRPの. 吸. 示 され るの は間 違 いの ない とこ ろで あ ろ う52). Yardl. る.ま た, Walker52)ら は,免 疫 状 態 にあ る ラ ッ トは. ey59)らの,コ. 抗 原 が 腸 管 に存 在 した時,た だ ちに 抗 原抗 体 複 合体. レラ毒 素 に よ り腸 管 血 管 の 拡 張 と共に. 窓 の 増加 が お こ りその 結 果,腸 管 の分 泌 増 加 が お こ. が つ く られ,抗 原 が腸 管 に侵 入 す るの を妨 げ る と述. る とい う報 告 もあ る.. べ た.. 今 回 の実 験 の結 果 で,形 態 学 的 に吸 収 されたHRP. これ に対 して, Bockman14)ら は,馬ferritinで,. が 窓 を通 過 して い る像 は 認 め られ なか っ たが,内 皮. 感 作 され た成 熟 ハ ムス ター の腸 管 で, ferritinの 著. 細 胞 間 隙 に は, HRPが. 明 な 吸収 を認 め た と報 告 して お り,こ の結 果 の違 い. 存 在 す る こ とは 認 め た.そ. の通 過 の径 路 の 詳 細 は 明確 に で きなか った.し か し. につ い て は,腸 管 免 疫学 の重 要 な課 題 で あ り,今 後. ヒ ト消 化 管 粘 膜 血 管 でHRPの. の研 究 を ま たね ば な らな い で あ ろ う.. 小 胞 性 輸 送 は 明確 に. 認 め られ て い る.小 胞 は 多数 で は な く,輸 送 の手 段. V. と して は極 小 で あ る こ とが推 測 され る.現 在 ま で 哺. 結. 語. 乳 動 物 の 消 化 管 か ら吸収 された 高 分 子 蛋 白質 が粘 膜. ヒ ト成 人 の消 化 管上 皮 よ り,高 分 子 蛋 白 質 が 吸収. 血 管 内 に移 行 す る過 程 を詳 細 に報 告 した 文献 は な く. され うるか,ま た そ の径 路 は どの様 な もの で あ るか. わ た しが 最 初 で あ る.諸 家 の 報 告 は,血 管 内腔 か ら. 研 究 す る為horseradish. 血 管 周 囲 へ の 物質 移 行 につ いて の 研究 が殆 どで あ る. acerと. が,基 本 的 には血 管 は物 質 交 換 の 場 で あ るの で,類. 的 に注 入 した後,生 検 を行 っ た組 織 に つ い て,細 胞. 似 して い る もの と考 え られ る.. 化 学 的 に 吸収 実 験 を行 っ た.結 果 は次 の3つ に要 約. 血 管 内 皮 細 胞 で,高 分 子 蛋 白 質 の移 行 に要 す る時 間 は,数 分 間 で血 管 の 反 対 側 に 認 め られ る とす る報. peroxidase(HRP)をtr. して,ヒ ト回腸,十 二 指 腸,胃 内腔 に 内視 鏡. され る. 1). ヒ トの消 化 管 で は,物 質 吸収 能 力 が最 も大 で. 告 が 多 く52,57,58),極 めて 短 時 間 で 移 行 す る と推 測 され. 通常 ア ミノ酸 の 吸収 が 行 わ れ る回 腸粘 膜 で,注 入 さ. る.. れ たHRPの. さてHRPは,毛. 細 血 管 よ り透 過 す る とい う特 性. を生 か し,小 血 管 の 微 細構 造 の 研 究 に使 用 され て き た が, tracerと して 生 体 に用 い られ た 組 織 に お こ. 上 皮 細 胞 に よ る著 明 な 吸収 が み られ,. 粘膜 固有 層 に ま で輸 送 され て い た.そ の吸 収 径 路 は 他成 熟 哺乳 動 物 と類 似 した過 程 で あ っ た. 2). 吸 収 能 力 は回 腸 粘 膜 よ り もお とるが,抗 原 と. る ヒス タ ミンや セ ロ トニ ンの遊 離 の為 に,毛 細血 管 内. な りうる未 分 解 蛋 白質 が 回腸 内腔 よ り も多 く存 在 す. 皮 細 胞 に影 響 を与 え る事 も報 告 されてい るが50), Kar novsky57)ら は,各 種 の対 照 実 験 で この影 響 を否 定 し. る可 能 性 が強 い 十 二 指 腸粘 膜 で も,上 皮 細 胞 か ら, HRPが 吸 収 され 粘膜 固有 層 に まで 輸 送 され て い た .. て い る.し か し この点 に関 して は,疑 問 の余 地 が あ. そ して そ の吸 収 径 路 は 基本 的 に は回 腸 粘 膜 と類 似 し.
(10) 1338. 松. 本. て い た. 3). 昭. 郎. 示 され た.. 通常 は栄 養 素 の吸 収 は殆 ど行 わ な い と考 え ら. れ て い る胃粘 膜 に お い て,粘 膜 に存在 す る腸 上 皮 化 生 細 胞 か ら, HRPが. 吸収 され,粘 膜 固 有層 の毛 細 血. 稿 を終 るに の ぞ み,御 懇篤 な る御 指 導 と御 校 閲 を 賜 った恩 師 田 中早 苗教 授 に深 甚 の謝 意 を表 わ す と共. 管 に まで 移 行 す る こ とが証 明 され た,胃 内 腔 で は,. に,本 実 験 に終 始 直 接御 指 導 下 きっ た緒 方 卓 郎 講 師. 抗 原 と な り うる蛋 白質 は殆 ど未 分 解 で 存 在 す る と推. に深 謝 い た しま す.ま た電 子 顕 微 鏡 の観 察 に御 協 力. 測 され る ので,こ の こ とは特 に重 要 な意 義 を有 す る. い た だ い た,中 村,林,才. と考 え られ る.ま た 腸上 皮 化 生 細 胞 に お け る吸収 過 程 は小 腸 粘 膜 上 皮 細 胞 と類 似 して い た. 更 に 吸 収 され たHRPが,血. 中 に ま で移 行 す るこ. とが証 明 され,消 化 管 か ら吸収 された 抗 原 が,腸 管 局 所免 疫 の み な らず,全 身 免 疫 に関 係 す る可能 性 も. 原 技 官 に 感 謝 い た しま す.. 本 論文 の 要 旨 は,第7回. 日本 臨床 電 子 顕微 鏡学 会,. 第24回 日本 消化 器病 学 会 中国 四国 地 方 会,第62回 本 消化 器 病 学 会 総 会,第8回 会 にて発 表 した.. 日. 日本 臨 床 電 子 顕 微 鏡学.
(11) ヒ ト消 化 管 か らのHorseradish. Peroxidaseの. 文. 1) Walker, W. A.: Pediatric. Clinics. 3) Tomasi, T. B.: 4) Farr,. from the small. of North America,. 22, 731-746,. Secretory. R. S.,. against. Dickinson,. bovine. 5) Brambell,. F.. intestine. and gastrointestinal. immunoglobulins, Fed.. K.:. Proc.,. The passive. tract:. Part. 1, The Jour. N. Engl. J. Med. , 287, 500-506,. W. , and Smith,. disease,. 1975.. Immunology of the gastrointestinal 1973.. serum albumin, W. R.:. 1339. 献. Antigen absorption. 2) Walker, W. A., and Hong, R.: nal of Pediatrics, 83, 517-530,. 吸収 の細 胞 化 学 的 研 究. Quantatative. aspects. 1972.. of oral. immunization. 19, 199, 1960.. immunity of the young mammal,. Biol.. Rev.,. 33, 488-531. 1958. 6) Clark,. S. L.:. The ingestion. ells of the small. intestine. of proteins. in suckling. and colloidal. materials. and mice,. J. Biophys.. rats. by columnar absorptive Biochem.. Cytol.,. c. 5,. 41. - 50, 1959. 7). Danforth, gy,. 8). and Moore,. R. O.:. Intestinal. absorption. of insulin. in the rat,. Endocrinolo. 65, 118-123, 1959.. 岡 本 耕 造,上 594,. 9). E.,. 田 政 雄,前. 田 隆 英,水. 谷 昭:パ. ー オ キ シ ダ ー ゼ,顕. 微 鏡 的 組 織 化 学,医. 学 書 院,東. 京,. 583‑. 1965.. Graham,. R. C.,. and Karnovsky,. M. J.:. The early. stages. of absorption. of injected. eradish peroxidase in the proximal tubules of mouse kidney: Ultrastructural by a new technique, J. Histochem. Cytochem., 14, 291-302, 1966. 10) Cornell, rseradish. R., Walker, peroxidase.. 11) Hugon, J. S.,. W. A., and Isselbacher, K. J.: A cytochemical study, Lab. Invest.,. and Borgers,. M.:. ells of the duodenum of mouse.. Absorption. Small intestinal absorption 25, 42-48, 1971.. of horseradish. 1. The fasting. animal,. hors. cytochemistry. peroxidase. J. Histochem.. of ho. by the mucosal. Cytochem.,. c. 16, 229. -236, 1968. 12) Warshaw,. A. L.,. : Evidence 13) Warshaw, urgery,. A. L., 76, 495. 14) Bockman,. and Walker,. and Isselbacher,. K. J.:. Protein. uptake by the intestine. Gastroenterology, absorption. 66, 987-992,. W. A.:. Intestinal. W. B.:. Light and electron. microscopy. in sensitized. and non-sensitized. hamsters (Mesocricetus. and Winborn,. Observations. s), Anat. Rec., 15) Graney, D. O.:. 155, 603-622, 1966. The uptake of ferritin. ctron microscopic 16) Korenblat,. W. A.,. of intact macromolecules,. of intake antigenic. 1974.. protein,. S. 499, 1974.. D. E.,. in absorption.. P. E.,. human adults after 226-235,. Walker,. for absorption. study,. by ileal. Amer. J. Anat.,. Rothberg,. R. M.,. 123, 227-254,. Minden,. oral and parenteral. absorptive P.,. exposure. cells. of intestinal. in suckling. rats.. ferrit auratu An ele. 1968.. and Farr,. R. S.:. to bovine serum. Immune responses. albumin,. J. Allergy,. of 41,. 1968.. 17). 関 正 次:血. 18). 山 元 寅 男:吸. 液 と リ ン パ,現. 代 組 織 学 と 器 管 微 視 解 剖,杏. 19). 渡 仲 三:細. 20). 山 元 寅 男:図. 説 小 腸 吸 収 上 皮 細 胞 に お け る消 化 吸 収 の メ カ ニ ズ ム,東. 21). 吉 井 隆 博:腸. 上 皮 化 生 の パ タ ー ン.特. 22). 竹 林 茂 夫:胃.特. 23). 安 部 宗 顕,大. 収 細 胞 の 形 態 学,医 胞 の 吸 収 と分 泌,医. 学 の あ ゆ み, 学 の あ ゆ み,. に 胃 癌 を 中 心 に,. 94,. 76,. 林 書 院,東. 445‑454,. Tanabe. 内 伸 夫 ・ 赤 松 昌 亮 ・ 松 本 高 明:腸. 78‑90,. 1965.. 1971.. に 実 体 顕 微 鏡 的 観 察,胃 Tokyo. 京,. 380‑388, 1975.. quarterly,. と腸, 24,. 京 田 辺 製 薬,東 6,. 881‑888,. 14‑27,. 上 皮 化 生 の 酵 素 組 織 化 学,胃. 京,. 1975.. 1971.. 1976. と 腸,. 6,. 875‑880,. 1971..
(12) 1340. 松. 24) Korn,. E. R.:. Intestinal. metaplasia. 本. 昭. 郎. of the gastric. mucosa,. Amer.. J. Gastroent.,. 61, 270. - 275, 1974. 25). 中 村 恭 一,菅. 26) Nagayo,. 野 晴 夫,高. T.,. cancer:. Ito,. study,. G. N.,. 28) Ming,. 癌 組 織 発 生 の 概 念,胃. and Komagoe,. T.:. と 腸,. Early. 6,. 849‑861,. phages. 1971.. of human. gastric. GANN, 56, 101-120, 1965. T.:. Intestinal. study of its distribution. metaplasia. in various. of the gastric. disease. states,. mucosa:. A g. J. Natl. Cancer. Inst.,. 1968.. S. C.,. carcinoma. H.,. and Hayashi,. and microscopic. 41, 627-634,. 倉 賢 二:胃. Yokoyama,. Morphological. 27) Stemmermann, ross. 木 国 夫,熊. M.,. Goldman,. H.,. and Freiman,. in human stomach.. D. G.:. Light and electron. Intestinal. microscopic. metaplasia study,. and histogenesis. Cancer,. of. 20, 1418-1429,. 1967. 29) Cornell,. R.,. ckling rat,. and Padycula,. Amer.. 30) Kraehenbuhl,. J. P.,. ific antibodies 31) Worthington,. H. A.:. J. Anat.,. and Campiche,. in the new born, rat.. M. A.: D. O.:. 1 The neonatal. study of intestinal. absorption. Early. stages. 42 , 345-365,. of intestinal. Uptake of adenovirus ileum, Anat.. Rec.,. absorption. ec.,. S.,. and Enders,. A. C.:. Protein. of spec. 1969. by intestinal. 175, 37-62,. absoprtive. c. 1973.. 32) Orlic, D., and Lev, R.: Fetal rat intestinal absorption of horseradish swallowed amniotic fluid, J. Cell Biol., 56, 106-119, 1973. 33) Schlafke,. in the su. 1968.. J. Cell Biol.,. B. B. , and Graney,. ells of the suckling. A cytological. 125, 291-316,. peroxidase. uptake by rat preimplantation. stages,. from Anat. R. 175, 539-560, 1972.. 34) Hugon, J. S.: Absorption of horseradish peroxidase by the mucosal of mouse. II The newborn mouse, Histochemie, 26, 19-27, 1971. 35) Clarke, R. M., and Hardy, R. N.: Factors influencing rrolidone by the intestine of the young rat, J. Physiol., 36) Bernstein, Int. Arch. 37) Walker,. I. D., and Ovary, Z.: Absorption Allergy, 33, 521-527, 1968. W. A.,. absorption.. Cornell,. Mechanism. rat intestine,. R.,. J. Cell Biol.,. 38) Kao, V. C. Y., ical observations. Davenport,. of horseradish. L.. of the duodenum. the uptake of [125I] 212, 801-817, 1971.. of antigens. polyvinyl. from the gastrointestinal. M. , and Isselbacher,. peroxidase. cells. py. tract,. K. J.: Macromolecular. uptake and transport. in adult and neonatal. 54, 195-205, 1972.. Sprinz, H., and Burrows, W.: Experimental cholera: Immunohistochem on the localization of toxin in the intestinal mucosa, Gastroenterology, 58. , 965, 1970. 39) Serebro,. H. A.,. Mcgonagle,. T.,. Iber,. ect of cholera toxin on small intestine J., 123, 229-232, 1968.. F. L.,. Royall,. without direct. R.,. and Hendrix,. mucosal contact,. 40) Qurth, D. D., Matre, R., Helgeland, S. M., and TSnder, O.: dase test for human antibodies to Toxoplasma Gondii, Acta path. B.,. T.. Johns. R.:. An eff. Hopkins. Med.. An indirect immunoperoxi microbiol. scand. Section. 82, 145-150, 1974.. 41) Straus, W.: intravenously Biochem. 42) Straus,. Colorimetric analysis with N, N-dimethyl-p-phenylenediamine of the uptake of injected horseradish peroxidase by various tissues of the rat, J. Biophysic.. Cytol., W.:. 4,. 541-550,. Colorimetric. (Horseradish Peroxidase)by ol., 12, 231-246, 1962.. 1958.. investigation. of the uptake of an intravenously. rat kidney and effects. of competition. injected. by egg white,. J.. protein Cell Bi.
(13) ヒ ト消 化 管 か ら のHorseradish. 43) Peterson,. R. D. A.,. and significance,. Peroxidaseの. and Good, R. A.:. Pediatrics,. 肢収の細胞化学的研究. Antibodies. 31, 209-221,. 1341. to cows milk proteins-their. presence. 1963.. 44) Rothberg, R. M., and Farr, R. S.: Anti-bovine serum albumin and anti-alpha in the serum of children and adults, Pediatrics, 35, 571-588, 1965. 45) Ryser, H. J. P.: nce, 159, 390-396,. Uptake of protein 1968.. by mammalian cells:. An underdeveloped. lactalbumin area,. Scie. 46) Matsumoto, T., and Ogata,T.: A cytochemical study of the absorption of peroxidase thro ugh the rat and human gastrointestinal tracts, J. Clin. Electron Microscopy, 8, 377-378, 1975. 47) Matsumoto,. T.,. and Ogata,. iron colloid particles copy,. 9,. 402-403,. 48) Rhodes,. R. S.,. Matsumoto,. Res.,. J. A. G.. 171-185,. 52) Clementi,. F.,. ferritin,. J.. J. H., Amer.. 55) Mayerson,. J.. of peroxidase. Clin.. Loss of macromolecular. Electron. and. Micros. Invest.,. barrier. 25, 220-229,. function associa. 1971.. The diaphragm. Morphological. 196, 381-390,. of capillary. classifications. of vertebra. 1959.. endothelial. fenestrations,. J. Ultrastruct.. 1962.. and Palade, Cell Biol.,. G. E.:. 41, 33-58,. Wolfram,. Intestinal. capillaries.. Permeability. to peroxidase. and. 1969.. G. E.: Studies on blood capillaries. J. Cell Biol., 37, 244-276, 1968.. Passage of dextran 211, 419-420, 1956. H. S.,. Lab.. and Hampton, J.: J. Physiol.,. 53) Bruns, R. R., and Palade, blood capillaries in muscle, 54) Grotte, G.: nd. suppl.,. glands,. 発 表.. H. S., Luft,. 6,. M. J.:. trauma to the intestine,. te blood capillaries, 51) Rhodin,. study of the absorption. 1976.. T.:未. 50) Bennett,. A cyto-chemical. the rat and human gastric. and Karnovsky,. ted with surgical 49). T.:. through. molecules. C. G. ,. across. Shirley,. I General. the bloodlymph barrier,. H. H.,. and Wasserman,. erences in capillary permeability, Amer. J. Physiol., 56) Pappenheimer, J. R.: Passage of molecules through. organization Acta chir.. K.:. 198, 155-160, 1960. capillary walls, Physiol.. of sta. Regional. diff. Rev.,. 33,. 387-423, 1953. 57) Karnovsky,. M. J.:. idase as a tracer, 58) Schneeberger-Keeley, ar-capillary. The ultrastructural J. Cell Biol., E. E.,. basis. of capillary. 35, 213-236,. and Karnovsky,. membrane permeability. permeability. studied with perox. 1967. M. J.:. to peroxidase. The ultrastructural. used as a tracer,. basis. of alveol. J. Cell Biol.,. 37, 781. -793, 1968. 59) Yardley, J. H., and Brown, G. D.: Horseradish peroxidase ine in experimental cholera, Lab. Invest., 28, 482-493, 1973. 60). 大 迫 茂 人:. Peroxidaseの. 電 子 顕 微 鏡 学 的 利 用 に つ い て,細. 胞,. 4,. 61) Walker, W. A., Isselbacher, K. J., and Bloch, K. J.: ules: Effect of oral immunization, Science, 177, 608-610,. tracer. 25‑33,. Intestinal 1972.. 62) Walker, W. A., Wu, M., Isselbacher, K. J., and Bloch, K. J.: acromolecules. III Studies on the mechanism by which immunization uptake,. J. Immunol.,. 115, 854-861,. 1975.. studies. in the. intest. 1972.. uptake. of macromolec. Intestinal interferes. uptake of m with antigen.
(14) 1342. 松. 本. 昭. 郎. 附 図 説 明. 図1:. HRP注. 入 回 腸 絨 毛 の光 顕 像.黒 色 に染 ま るHRP反. 応 生 成 物 は,粘 膜 固 有 層 の 結 合 組 織 に まで 認 め ら. れ る.無 染 色.×500 図2:. HRP注. 入 回 腸 粘 膜上 皮 の光 顕 像. HRP反. 右 方 に,胞 図3:. HRP注. 体 に均一 にHRP反. 応 生 成 物 は特 に 細胞 間 隙,粘 膜 固有 層 に強 く認 め ら れ る.. 応 生 成物 を含 む上 皮 細 胞 を 認 め る(矢 印).無. 染 色.×1,000. 入回 腸 粘 膜 固 有層 の光 顕 像.粘 膜 固有 層 に存 在 す る赤血 球(R)と 顆粒 糸 白血 球(W)も. 反応陽性. を示 して い る.無 染 色.×1,000 図4:. HRP注. 入十 二 指 腸 粘 膜 の光 顕 像. HRP反. 応 生 成 物 は,粘 膜 固有 層 に ま で認 め られ,回 腸 と類 似 の 所. 見 を 呈 して い る.無 染 色.×400 図5:対. 照群 の十 二 指 腸 粘 膜 の光 顕 像.生 食 水 注 入 後,完 全 にincubationを. 行 った もの.粘 膜 固 有層 の 赤 血. 球 お よ び 顆粒 系 の 白血球 が反 応 陽 性 を示 して い る.無 染色.×200 図6:対. 照 群 の 胃粘 膜 の光 顕 像.生 食 水 注 入 後,完 全 にincubationを も,陽 上 皮 化生 細 胞部(I)に. も, HRP反. 行 った もの.胃 固 有粘 膜 細胞 部(S)に. 応 生 成 物 は認 め ず,粘 膜 固有 層 の 赤 血 球 お よ び顆粒 系 の 白. 血 球 が 反 応 陽 性 を示 して い る.無 染色.×200 図7:. HRP注. 入 胃粘 膜 の光 顕像.腸 上 皮 化生 細 胞部(I)に. の 胃固 有 粘膜 細 胞 部(S)に はHRP反 図8:. HRP注. はHRP反. 入回 腸 上 皮 細 胞 の電 顕 像. HRP反. 応 生 成 物 は,黒 色 の粒 子 と して 胞 体 内 およ び細 胞 間 隙 に認. め られ,右 方 の 細 胞 間 隙 は拡 張 が あ り,特 に 多量 のHRP反 図9:. HRP注. 応 生 成 物 が 多 量 に認 め られ る.左 方. 応 生 成 物 は認 め られ ない.無 染 色.×500. 入 回 腸 上皮 細 胞 の 電 顕 像. HRP反. 応 生 成 物 が 存 在 す る.×8,000. 応 生 成 物 は胞 体 頂部 のtubulovesicular. systemに も認 め ら. れ る.×20,000 図10:. HRP注. 図11:. HRP注. 入 回 腸 上皮 細 胞 の 電 顕 像.腸 管 内腔 に 注 入HRPを. 認 め,更 に微 絨 毛間 隙 およ び陰 窩 に も侵 入. して い る(矢 印).×22,000 入 回 腸 上皮 細 胞 の電 顕 像.細 胞 間 隙 に 多量 のHRP反. 応 生 成 物 を認 め る.細 胞 外 壁 に 沿ってex. ocytosisと 考 え られ る小胞 を 認 め る.×15,000 図12:. HRP注. 入 回 腸 上皮 細 胞 の電 顕 像.核 上部 にHRP反. 応 生 成 物 を含 ん だ 小 胞,ラ. .これ らの小 胞 お よ び ライソゾー ムは,ゴ ル ジ装 置(GO)に. イソ ゾー ムを 認 め る. 近 接 して 認 め られ る.杯 細 胞(GB)に. はHRP. 反 応 生 成 物 は認 め られ な い.×12,000 図13:. HRP注. 入回 腸 杯 細胞 部 の電 顕 像.杯 細 胞 の分 泌 液 お よび粘 液 胞 にHRP反. 隙 のHRP反. 応 生 成 物 は,上 部 のtight. 応 生 成 物 を認 め る.細 胞 間. junctionで 腸 管 内 腔 との交 通 を妨 げ られ て い る(矢 印).×. 30,000 図14:. 図15:. HRP注. 応 生 成 物 は,粘 膜 固有 層 の結 合 組 織 に拡 散 して 毛 細 度 に反応 陽 性 を示 して い る.×10,000. HRP注. 応 生 成 物 は,粘 膜 固 有層 に まで達 して い る.胞 体 基 質. にHRP反 図16:. 入回 腸 上皮 細 胞 基 底 部 の 電 顕 像. HRP反. 血 管 の周 囲 に充 満 して い る.赤 血 球(R)も,軽. HRP注. 入十 二 指腸 粘 膜 上 皮 の電 顕 像. HRP反. 応 生 成 物 を均 一 に 多量 に含 む細 胞 を認 め る.×7,500 入十 二 指腸 粘 膜 上 皮 の電 顕 像.細 胞胞 体 内 にHRP反. 認 め る.細 胞 間 隙 のHRP反. 応 生 成 物 を含 ん だ 小 胞,ラ イソ ゾ ー ム を. 応 生 成 物 はtight junctionで 腸 管 内 腔 との 交 通 を妨 げ られて い る(矢印).. ×9,200 図17:. HRP注. 図18:. HRP注. 入 十 二 指 腸粘 膜 上 皮 細 胞 基 底 部 の 電 顕像.細 胞 間隙 は, HRP反. exocytosisと. 応 生 成物 が 多量 に存 在 し,. 考 え られ る小 胞 も認 め る.×10,000. 入 十 二指 腸 粘 膜 上 皮 細 胞 の 電 顕 像.胞 体 内 にHRP反. 応 生 成 物 を含 ん だ 小 胞 お よび ライソ ゾ ー. ム を認 め る.×12,000 図19:. HRP注. 入 胃 腸 上皮 化 生 細 胞 の電 顕 像.細 胞 頂 部 にpinocytotic. 間 隙 に もHRP反 図20:. HRP注. vesicleを 認 め る(矢 印).さ. らに細 胞. 応 生 成 物 を認 め る.×12,000. 入 胃 腸 上皮 化 生 細 胞 の電 顕 像.注 入HRPは,. pinocytosisに. よ り,細 胞 表面 か らと り込 ま れ.
関連したドキュメント
1）血管周囲外套状細胞集籏：類円形核の単球を
Standard domino tableaux have already been considered by many authors [33], [6], [34], [8], [1], but, to the best of our knowledge, the expression of the
気候変動対策 詳細は P22 知的財産活動 詳細は P32 財務戦略 詳細は P13–14. 基礎研究の強化
Then it follows immediately from a suitable version of “Hensel’s Lemma” [cf., e.g., the argument of [4], Lemma 2.1] that S may be obtained, as the notation suggests, as the m A
上部消化管エックス線健診判定マニュアル 緒 言 上部消化管Ⅹ線検査は、50
Amount of Remuneration, etc. The Company does not pay to Directors who concurrently serve as Executive Officer the remuneration paid to Directors. Therefore, “Number of Persons”
ダイヤフラム フロア 使用済
今年度は 2015
