Title
Immunohistologic Study on Enzootic Bovine Leukosis( 内容の要
旨 )
Author(s)
千葉, 達成
Report No.(Doctoral
Degree)
博士(獣医学) 甲第003号
Issue Date
1994-03-14
Type
博士論文
Version
URL
http://hdl.handle.net/20.500.12099/2057
※この資料の著作権は、各資料の著者・学協会・出版社等に帰属します。氏 名(本籍) 学 位 の 種 類 学 位 記 番 号 学位授与年月 日 学位授与の要件 研究科及び専攻 研究指導を受けた大学 学 位 論 文 題 目 審 査 委 貞 千 葉 達 成 (宮城県) 博士(獣医学) 獣医博甲第 3 号 平成6年3月14日 学位規則第4条第1項該当 連合獣医学研究科 獣医学専攻 岩手大学
Immunohistologic Study on Enzootic Bovine
Leukosis 主査 岩 手 大 学 副査 岩 手 大 学 副査 帯広畜産大学 副査 東京農工大学 副査 岐 阜 大 学 副査 岐 阜 大 学 授 授 授 授 授授 教教教教教教 助 司夫 治義哉 幸 恒 啓 克 田 本 瀬 生 脇 井 岡 坂 広 桐 武 平 論 文 の 内 容 の 要 旨 地方病性牛白血病(EBL)の病因は牛白血病ウイルス(BLV)であり､BLVの標的細胞はB細 胞であると考えられている｡また､EBLの腫瘍細胞には腫瘍関連抗原(TAA)が発現するこ とが知られている｡このTAAに対する単クローン性抗体(MoAb)が作製され､EBLの病理､ 診断および治療の研究に既に多く用いられている｡著者は､EBLのリンパ節および腫瘍組 織の細胞構成を明らかにすること､および､構成細胞とTAAおよび主要組織適合抗原 (MHCclassII)の関連を解明することを目的に､EBLのTAAに対するMoAbおよび牛の各リ ンパ球サブセットに対するMoAbのパネルを用いて､免疫組織学的染色により解析した｡ BLVに自然感染し､剖検に付された牛5例の浅頸リンパ節､腫瘍および対照としてBLV非 感染牛3例の浅頸リンパ節を検索した｡BLV感染の有無は､寒天ゲル内免疫沈降法による 抗BLV抗体検査およびサザンプロット法によるBLVプロウイルスの検出により判定した｡ リンパ節および腫瘍組織の細胞構成は厚さ5〃mの凍結切片を作製し､T細胞表面マーカー (CD2､CD4､CD8､WCl)､B細胞表面マーカー(B-B2､SIgM)､MHCclassIIおよびTAAに対 するMoAbを用いて､免疫組織学的染色を施し検索した｡ EBLの浅頸1)ンパ節を検索した結果､CD4+ぉよびCD8+やWCl+細胞は腫瘍細胞の浸潤増 殖の程度によって､その数は減少した｡B-B2'､SIgM'､MHCclassII+ぉよびTu'細胞は いずれも腫瘍細胞が増殖している部分では数の増加が認められたが､濾胞内ではB-B2+ぉ
-66-よびsIgM+細胞の数の減少が認められたoEBLの腫瘍組織においては､CD4+ぉよびCD8+ 細胞は散在して認められ数量もほほ同量であった｡WCl+細胞は認められなかった｡5例中 4例において､多くの腫瘍細胞はB-B2およびsIgM陽性であった｡しかし､1例においては B-B2は陽性であるが､SIgMは陽性であるものと陰性なものとに分かれた0また仝例にお いて､少数の腫瘍細胞がB_B2陰性であるものも認められた｡MHCclassII+ぉよびmA+は 切片全域に認められた｡BLV非感染牛の浅頸リンパ節においては､ヘルパーT細胞(TH: cD2+､CD4+)はリンパ節の傍皮質領域および濾胞周囲皮質領域の大部分と濾胞内および 髄質の一部に存在し､サイトトキシック/サブレッサーT細胞(T｡/S‥CD2'､CD8')は傍皮質 領域､濾胞周囲皮質領域および髄質に集族していた｡しかし､濾胞内には認められなかっ た｡WCl+細胞は皮質および髄質のリンパ洞辺縁にみられた｡B-B2+ぉよびIgM'細胞は濾 胞全体を占め､傍皮質領域および1)ンパ洞にも僅かに認められたo M=CclassII+細胞は､ 一部傍皮質領域を除くリンパ節全域に認められた｡TAA+細胞は主に濾胞やリンパ洞に認 められ､傍皮質領域および濾胞周囲皮質領域にも僅かに存在した｡EBLのリンパ節および 腫瘍組織において､腫瘍細胞が浸潤増生している領域に､Tjuに対するMoAbc143の認識 するTAA陽性細胞が多数認められたことから､C143抗原はEBLの腫瘍細胞の同定に有用な 表面マーカーであると思われた｡腫瘍組織5例中4例においてB-B2陽性細胞はIgM陽性であっ た｡しかし､1例はIgM陽性とIgM陰性のB-B2陽性細胞が認められた0また､仝例において､
腫瘍細胞の一部はB-B2抗慮を失い､IgM産生が乏しいと思われた｡B-B2抗原とIgM産生能
の共有関係は常に一定しているのではなく､腫瘍分化後のIgM合成調節の変化によるもの と思われた｡腫瘍組織内においてTc/S細胞やTH/l細胞がみられたことから､細胞性免疫 が残存していた可能性が示唆された｡ 書 査 結 果 の 要 旨 地方病性牛白血病鱒BL)の病因は牛白血病ウイルス(BLV)であり,BLVの標的細胞はB細胞であ ると考えられている.また,EBLの腫瘍細胞には腫瘍関連抗原汀AA)が発現することが知られてい る.このTAAに対する単クローン性抗体(MoAb)が作製され,EBLの病理,診断および治療の研究 に既に多く用いられている.著者は,EBLのリンパ節および腫瘍組織の細胞構成を明らかにする こと,および,構成細胞とTAAおよび主要組織適合抗原(MHCclassII)の関連を解明することを目 的に,EBLのTAAに対するMoAbおよび牛の各リンパ球サブセットに対するMoAbのパネルを用い て,免疫組織学的染色により解析した.BLVに自然感染し,剖検に付された牛5例の浅頸リンパ 節,腫瘍および対照としてBLV非感染牛3例の浅頸リンパ節を検索した.BLV感染の有無は,寒 天ゲル内免疫沈降法による抗BLV抗体検査およびサザンプロット法によるBLVプロウイルスの検 出により判定した.リンパ節および腫瘍組織の細胞構成は厚さ5〃mの凍結切片を作製し,T細胞 表面マーカー(CD2,CD4,CD8,WCl),B細胞表面マーカー(B-B2,SIgM),MHCclasslIおよび TAAに対するMoAbを用いて,免疫組織学的染色を施し検索した. EBLの浅頸リンパ節を検索した結果,CD4+ぉよびCD8+やWCl+細胞は腫瘍細胞の浸潤増殖の 程度によって,その数は減少した.B-B2十,SIgM+,MHCclassIl寸およびTAA+細胞はいずれも腫 -67一瘍細胞が増殖している部分では数の増加が認められたが,濾胞内ではB-B2+ぉよびsIgM+細胞の 数の減少が認められた.EBLの腫瘍組織においては,CD4十およびCD8+細胞は散在して認められ 数量もほほ同量であった.wCl+細胞は認められなかった.5例中4例において,多くの腫瘍細胞 はB-B2およびsIgM陽性であった.しかし,l例においてはBrB2は陽性であるが,SIgMは陽性であ るものと陰性なものとに分かれた.また全例において,少数の腫瘍細胞がB-B2陰性であるものも 認められた.MHCclassⅡ十およmA+は切片全域に認められた.BLV非感染牛の浅頸リンパ節 においては,ヘルパーT細胞01H:CD2+,CD4+)はリンパ節の傍皮質領域および濾胞周囲皮質領 域の大部分と濾胞内および髄質の一部に存在し,サイトトキシック/サブレッサーT細胞汀c/S: CD2+,CD8+)は傍皮質領域,濾胞周囲皮質領域および髄質に集族していた.しかし,濾胞内に
