〈原著〉ラットを用いたω-3系不飽和脂肪酸静脈内投与による免疫賦活の至適条件設定と、重症急性膵炎モデルにおけるその検証

全文

(1)ぎと近畿大医誌附 JK i n k i. 6 7. フットを用いた ω一 3系不飽和脂肪酸静脈内投与による. 免疫賦活の至適条件設定と，重症急性勝炎モデルにおけるその検証新崎亘近畿大学医学部外科学教室(肝胆勝部門). 抄録脂肪乳剤の経静脈投与による免疫賦活を目的として，魚油をベースとした ω3系不飽和脂肪酸を種々な比率で添加した脂肪乳剤を作成し，ラットに経静脈的に投与した場合の，牌細胞膜のリン脂質の変化を解析した.魚、油を配合して ω3系不飽和脂肪酸を増強した乳剤の投与により抗炎症効果の指標とされる EPA/AA比を短期間で増加させ得ることが明らかとなった.この脂肪乳剤をラット重症急性解炎モデル作成直後から投与すると，勝炎作成後 3日目に採取した牌細胞は，大豆油ベースの脂肪乳剤を投与された場合と比較して， I L 2や INF-y産生能の充進など免疫反応、が賦活化されていた.この魚、油ベースの脂肪乳剤は経静脈的投与により短期間で免疫賦活が可能であり，経腸投与が困難な重症急性解炎などでも，腸管経路を使用しない免疫賦活療法となり得ると考えられ，重症急性勝炎において，感染の成立，あるいは感染の重症化を阻止しうる有効な治療手段となる可能性が示された. Keyw ords:重症急性解炎，免疫賦活療法，脂肪乳剤， ω3系不飽和脂肪酸. 緒. モ喜子. 酉. る重要因子の一つである.近年，免疫能の指標とし. Th1/Th2) がてヘノレパー T細胞における亜分画比 (. 高度侵襲疾患における免疫能低下に対する対策と. 用いられ，ラット重症急性解炎モデルにおいて. して，免疫強化栄養法が開発され，その有効性が解. Th1/Th2バランスが低下することが報告されてい. 析されてきたに免疫強化剤として，腸管上皮細胞の. る. 必須栄養素であるグルタミン酸や，アルギニン，核. 今回，新規指肪乳剤作成の試みとして， ω6/ω3. 酸， ω-3系不飽和脂肪酸などを経腸栄養剤に添加し. 比を変化させた種々の脂肪乳剤投与による牌細胞膜. た，免疫強化栄養剤の有効性が報告されている 2ー. の変化から至適組成を検討し，その免疫能の改善効. 脂質，特に ω 3系不飽和脂肪酸が免疫系に好影響. 果をラット重症急性牌炎モデルを用いて検証した.. を与えることは以前より報告されているが経口投. 材料と方法. 与あるいは経腸投与の場合に，それが細胞膜のリン脂質組成を変化させるには数日以上を要することも報告されているしたがって，重症感染症や周術期. 1.使用動物実験には，体重 200~250 gの SD系雄性ラット. などの急性期における作用を期待するには静脈内投. ( C h a r l e sR i v e r]apan，横浜)を使用し，実験計画. 与が望まれる.しかし現在使用可能な製剤はわずか. は近畿大学動物実験倫理委員会の承認を得て行っ. にヨーロツパで市販された一製品のみであり，しか. た.. も，その組成の配合理由など不詳な点が多い. 症などの重症感染症である.重症急性醇炎における. 2. 牌細胞の脂肪酸組成変化の検討 SD系雄性ラットを必須脂肪酸除去飼料(オリエ 4時間ンタノレ酵母，東京)にて 2週間飼育した後， 2. 免疫能の低下は，感染症の合併やその増悪に関与す. 絶食としてから実験に供した.ラットは無作為に各. 一方，重症急性勝炎の死因の 80% 以上は，梓感染. 7 7 2( 干5 8 9 8 5 1 1 ) 大阪府大阪狭山市大野東3 受付平成2 0年1 0月3 0日，受理平成2 0年 1 2月 8日.

(2) 6 8. 新崎. 表 1 TPN輸液における脂肪乳剤中の構成成分 1 実験条件. FO(%) 5fO(%) ω6/ω3比. ①. ②. ④. ③. ⑤. 3 3 5 0 6 0 9 0 7 8 0 1 6 7 5 0 0 3 3 2 4 . 4 2 . 3 1 .2 0 . 7 0. 4. TPN，t o t a lp a r e n t e r a ln u t r i t i o n;FO ( f i s h ioi!)，魚油;5 fO ( s a f f l o w e ro i l )，ベニバナ油. 表 2 TPN輸液における脂肪乳剤中の構成成分2 実験条件. ⑥. FO(%) 5fO(%) 50(%) 00(%) ω6/ω3比. 2 0 5 1 5 6 0 2 . 0. ⑦. 2 5 1 2 . 5 1 2 . 5 5 0 2 . 0. ⑧. ⑨. 。。。。. 3 7 . 5. 3. 急性醇炎の作成と脂肪酸投与体重200~250 gの SD系雄性ラットを 1 0日間必須脂肪酸欠乏飼料で飼育した後， 2 4時間絶食とし使用した.ぺントパルビタール 5 0mg/kgを腹腔内に投与して麻酔後，開腹.十二指腸に小切聞を加え，乳頭にポリエチレンカテーテルをカニュレーションし，肝内胆管への逆流を防ぐために肝門部総胆管を一時的にブルドック甜子でクランプした状態で. 5. %タウロコール酸を 0 . 1ml注入し，急性壊死性醇炎を作成した.さらに，開腹のみを行った群を対照群. 5 0 5 0. とした. 2 . 3. 3種類の完全静脈栄養 (TPN) 管理を行った. TPNは，乳酸リンゲル液 ( L a c t e c D⑧:大塚製薬工場)に加えて，大豆油ベースの脂肪 n t r a l i p o s @(大塚製薬工場)または魚油乳剤である I. 6 2 . 5 2 . 0. 旦. o t a lp a r e n t e r a ln u t r i t i o n;FO ( f is h io iI)，魚 TPN，t 油;5fO ( s a f f l o w e ro i l )，ベニバナ油;50 ( 5 o y b e e n oi!)，大豆油 ;00，オリーブ油.. 醇炎作成直後のラットの右内頚静脈に中心静脈カテーテルを挿入し. ベースの脂肪乳剤(大豆油:魚油=7 :3) を使用し，無脂肪の無脂肪群，大豆油群 (ω-6/ω-3=10)，. 群 (n=8/ 群)に割付け， ω-6/ω-3比の異なる脂肪. 魚油群 (ω-6/ω3=2.3)を作成した.対照群に対し. 乳剤を配合した完全静脈栄養 (TPN) を開始した.. 群). TPN ては無脂肪の TPN管理を行った (n=5/. 脂肪乳剤は，魚油 (Omewgaven-Fresenius，. は全ての群において同熱量 ( 8 7 . 5kcal /k g / d a y )と. F r e s e n i u sKabi， Germany)，ベニバナ油，大豆油(大塚製薬工場，徳島)，およびオリープ油 ( C l i n O l e i c， Baxter，Germany) を表 1および表 2に示す比率で配合して使用した. TPNの 1日の輸液投与量は熱量2 1 0k c a l，脂肪4 . 3g，ブドウ糖3 6 . 3g，アミノ酸6 . 2 g/kgとした. 輸液開始直後 1日後 3日後 5日後にラット. 2 . 9kcal /mI)で投与した. し，定流量 ( TPN投与 3日，または 5日後にペントパルビタール麻酔下にて開腹し，下大静脈より採血を行って脱血犠死させ，牌臓を摘出した.採血した血液を. 3， 0 0 0rpm，2 0分間遠心することにより血清を分離し，サイトカイン測定に使用した.牌臓は牌細胞におけるリンパ球サブゃタイプの割合，幼若化能，サイ. をペントパルビタール麻酔下にて開腹し，下大静脈. トカイン産生の測定に用いた.. より採血を行って脱血犠死させ，牌臓を摘出した.. 4 . 牌細胞免疫反応の解析. 牌臓を P h o s p h a t e b u f f e r e ds a l i n e(PBS) の入った. 牌臓を PBSの入ったシャーレ内に移し， 10mlシ. シャーレ内に移し， 1 0mlシリンジを用いて細胞を. リンジを用いて細胞を単離した.牌細胞浮遊液を. 0 0 0rpm， 5分間遠心単離した.牌細胞浮遊液を 2，. 2， 0 0 0rpm，5分間遠心し，上清を除いた後溶血剤を加えて溶血処理をした.PBSを加えて遠心処理することにより牌細胞を得た.そして， 10%F e t a lc a l f cerum ( F C S ) を含む培養液 (RPMI1640) にて希. し，上清を除いた後溶血剤を加えて溶血処理をした.. PBSを加えた遠心処理を 2度繰り返して牌細胞を得た.牌細胞 ( 2X1 08個)の全脂肪分画を 2 ， 6 d i t b u t y l 4 m e t h y l p h e n o l( 5 0mg/L)を添加したクロロフォルム/メタノーノレ(2 1，v ol / voI)で抽出し，リン脂質分画をアミノプロリルシリカカラム ( V a r -. 釈後，血球計算板にて細胞数を算定した. 牌細胞中リンパ球サフ.タイプの割合を分析するため，牌細胞 1X 1 05c e l l sを試験管にとり FITC標識. i a n，I n c .，CA.U . S .A.)を用いて分離した.分離した. 抗ラット CD4抗体 (BeckmanC o u l t e r ) および PE. リン脂質分画は，脂肪酸分析に供した.抽出したリ. 標識抗ラット CD8抗体 (BeckmanC o u l t e r )を加え. . 4 6mlのo . 5M m e t h a n o l i c sodium ン脂質分画を 0. て反応させることにより染色を行った.自動細胞解. hydroxideを加えて 7分間煮沸した後， 0.6mlの1 4 %m e t h a n o l i cboront r i f l u o r i d eを加えてさらに 3 0 分間煮沸した.反応液に 0 . 3 5mlのイソシアネートと 2ml飽和塩化ナトリウム溶液の混合液を加え，上. 析装置 FACScanを用いて， CD4陽性細胞と CD8. 層のイソシアネート層に抽出された脂肪酸分画を，ガスクロマトグラフイーにて分析した.. 陽性細胞の割合を測定した. 牌細胞幼若化能を， MTTa s s a yK i t (Chemicon ] a p a n )を用いて MTT法により測定した.牌細胞を 1X1 06c e l l s / m lに調整し，平底 9 6w e l lプレートに O.lmlずつ d i p l i c a t eで加え，さらに培養液，および.

(3) ω3系脂肪乳剤の静脈内投与による免疫賦活効果. EPA. o n c a n a v a l i nA (ConA，終濃度刺激物質としての c. 6 9 O.6~. E P A J A A 比. 5J . 1g /ml;SIGMA) と共に 3TCの 5% CO 2 インキ. 吸光度で除した値(刺激係数)として表した.. 642. 激サンプルの吸光度を培養液のみで培養した細胞の. (主主鋤封 G岳趨握血哩. 0時間培養した.その後 3 -( 4， 5 ユベーター内で2 dimethy 1 t h i a z o l 2 y ! )2， 5 g i p h e n y l t e t r a s o d i u m bromide(MTT)IPBSを1 0J . 1 l /w e l l添加し，さらに 4時間培養した.そして 1 0 0J . 11 I s o p r o p a n ol/HClを加え，細胞を可溶化後， M i c r o p l a t er e a d e rを用いて吸光度 ( 5 7 0nm)を測定した.測定結果は ConA刺. 牌細胞におけるサイトカイン産生を R a tインタ. t e r l e u k i n;I L )2，インターブエロンーロイキン(in t e r f e r o n;IFN)γ，I L 1 0E n z y m e l i n k e di m ( in munosorbenta s s a y(ELISA)K i t( B i o S o u r c eI n t e r n a t i o n al)を用い ELISA法により測定した.牌細胞を ConA添加(終濃度 5阿 1 m ! )，無添加の培養液 6 0c e l l s / m lに調整し，3TCの 5%C02 を用いて 1X1 インキュベーター内で2 4時間培養後， 3 ， 0 0 0rpm，1 0 分間遠心し，上清を採取した.M i c r o p l a t er e a d e rを 4 5 0nm) を測定し，検量線から牌細用いて吸光度 ( L 2，I F N γ，I L I O濃度を換算胞培養液上清中の I した.さらに， R atc y t o k i n eELISAK i tにより血清の吸光度 ( 4 5 0nm) を測定し，検量線より血清中のI L 2，IFNγ，I L I O濃度を換算した. S E )で表得られたデータは，平均値±標準誤差 ( した.また，検定は t検定を用い，有意差水準 5 % ( p < 0 . 0 5 ) で統計学的に有意とした. 成績. 1.脂肪酸投与至適条件の決定. 6 1ω-3比を変化させた各種表 1に示すような ω-. 1 6. 。旬. 。唱時間(目). 時間(日). 図1 ω 6 1ω 3比を変化させた各種脂肪乳剤を添加した TPN開始後のラット牌細胞膜のリン脂質構成の変化(実験条件:表1) 牌細胞膜の脂肪酸組成中のエイコサペンタエン酸 ( E P A )，ドコサヘキサエン酸 (DHA)， AA)含有比率，EPA/AA比，アラキドン酸 ( DHA/AA上 1 : ， ω6 1ω-3上 1 : . TPN中の脂肪乳剤組成(表 1中に提示): ，⑤. ・，①;+，②;・，③;<>，④ ;0. 様の方法で解析した.その結果を図 2に示す.牌細，DHAの含有比率胞膜の脂肪酸組成中での EPA は，脂肪乳剤投与開始後 3日間でほぼ平衡状態に達した.さらに， EPA ，DHA量は，魚油配合量の増加とともに増加した.一方，牌細胞膜中の AA比率は. 脂肪酸組成の脂肪乳剤を配合した TPN 液を 0~5. 時間経過とともにすべての群で低下し，その含有比. 日間投与した後の，牌細胞膜の脂肪酸組成を図 1に. 率は魚油の含有量が多いほど低くなる傾向を示し. 示す.牌細胞膜の脂肪酸組成中でのエイコサペンタ. た.その結果，抗炎症作用の指標とされる EPA/AA. エン酸 (EPA)，ドコサヘキサエン酸 (DHA) の含. 比は，投与する脂肪乳剤中の魚油の含有量の増加と. 有比率は，脂肪乳剤投与開始後 1日目から最大変化. ともに増加した.. 3日後にはほぼ平衡状態に達した.さらに， EPA ，DHA量は，投与する脂肪乳剤中. 2. 急性醇炎における脂肪乳剤投与の効果. の半分まで到達し，. 上記の結果を基に， ω6 1ω一3比2 . 3で，魚油含有. の ω6 1ω-3比が低下するとともに増加した.一方，. 比率30%の脂肪乳剤を魚油製剤とし，大豆油ベース. 牌細胞膜中のアラキドン酸 ( AA)比率は時間経過としたが，その含有比率は各群間で変化がなかった.. の市販脂肪乳剤で ω -6 1ω 3比 1 0 . 0である I n t r a l i p o s @ (大塚製薬工場)と比較解析した. 牌細胞における CD4陽性細胞の割合は， 3日後で. その結果，抗炎症作用の指標とされる EPA/AA比. 無脂肪群が対照群に比べて有意に低値を示した(図. は，時間経過とともに増加し，投与する脂肪乳剤中. 3).. のω 6 1ω 3比の低下とともに増加した. 剤中の構成比率を変化させ(表 2)，魚、油の含有量の. 一方，牌細胞における CD4/CD8比(図 3 )，Con A刺激に伴う牌細胞幼若化能(図 4)と ConA無刺激での I L 2産生(図 5)は 3日 5日後で 4群聞. 変化が牌細胞の脂肪酸組成に与える影響を上記と同. に有意差を認めなかった.. ともにすべての群で低下し. 5日後には約 14%に達. 1ω 3比をほぼ2 . 0と一定にし，脂肪乳次に， ω 6.

(4) 7 0. 新. 崎. 百. EPAJAA比. EPA. ロ対照群. 0 . 3. ロ無脂肪群. 制制緩割問票. aukuaaT. ロ大豆油群. 由群ロ魚 j. 64. (さ主凶町封S 且守鑑醤岨. 。 3日後. 5日後. E. 図 4 牌細胞幼若化能醇炎作成 3， 5日後に牌細胞を採取.刺激係数 :c onA刺激サンプルの吸光度を培養液の. みで培養した細胞の吸光度で除した値.. A. 。. 3. o. 時間(日). EEE)演余. 。. 。旬. 80. 一 (. 1 . 3. 時間(日). 一. 添加した TPN開始後のラット牌細胞膜のリン脂質構成の変化(実験条件:表 2) 牌細胞膜の脂肪酸組成中のエイコサぺンタエン酸(EPA)，ドコサヘキサエン酸 (DHA)， I AA比，アラキドン酸 (AA)含有比率，EPA DHAIAA上 L ω6 1ω3上 t : . TPN中の脂肪乳剤組成(表 2中に提示): 0，⑧ ;0，⑨. 。， ⑥ ;・，⑦ ;. NaJ. 図 2 魚油の配合比率を変化させた各種脂肪乳剤を. 70 60. 50 40. 30 20 10. B. 4 . 5 4. E. ，g. 3 . 5 3. 演. 2 . 5. ( 唱。)凶宵封盟国構岩盤寸Q O Q岳製圏構匙. 3 ミ. 口対照群. *. *. ロ無脂肪群ロ大亘油群ロ魚 j 由群. 2. ' ) ' 1 .5 . . . . J. 3 5 30. *. 0 . 5. 0 3日後. 25. 5日後. L2産生図 5 牌細胞における I 勝炎作成 3，5日後に牌細胞を採取. A，Con 0 5 A無刺激. B，ConA刺激下.人 ρ<0. v s3日後の大豆油群.. 20 15 10. 。 3日後. 5日後. 2. 5. しかし， Con A刺激下での I L2産生 ( 図 5)と. ∞. 4A00 ¥守口. 口対照群回無脂肪群口大亘;菌群図魚油群. υG円甘盟国唯盆. 1. 5. IFNγ 産生(図 6)は. 3日後で対照群と魚油群が. 大豆油群に比べ有意に高値を示し，さらに. ConA 無刺激での IFN γ 産生(図 6)は. 3日後で対照群. と魚油群が無脂肪群に比べ有意に高値を示した .. L-IO濃度を示す. 図 7に牌細胞培養液上清中の I ConA無刺激での IL-I O産生は，対照群と魚油群が 0. 5. 他の群に比べいずれも高値を示し，特に 3 日後では. I O産生は，有意差を認めた .ConA刺激下での IL3日後. 5日後. 図 3 牌細胞中の CD4陽性細胞比率と CD4 /CD8 比勝炎作成 3，5日後に牌細胞を採取.* ， ρ< 0 . 0 5v s3日後の無脂肪群の CD4陽性細胞比率.. 重症急性醇炎を惹起した 3群聞に有意差を認めなかった .. L 2，IFNγ ，IL-I O濃度は， 3日， 5 血清中の I 日後において，重症急性醇炎を惹起した無脂肪群，大豆油群および魚油群との聞に有意差を認めなかっ.

(5) ω3系脂肪乳剤の静脈内投与による免疫賦活効果. A. 7 1. 1-1 4 など，免疫抑制状態にあるこ能低下が見られる 1. 2 50. とが報告されてきた . そこで感染源である腸管への. E. 対策として，早期からの経腸栄養開始や，経腸栄養. 漁 1 5 0. ミ司. とともに，腸粘膜栄養としてのグルタミン酸投与の. u .. 有効性 15， 1 6や，腸内細菌叢を変化させる p r e b i o t i cs. ) . .1 0 0. z. 5 0. やp r o b i o t i c s投与の有効性が報告されている 17-19. u凶. また， ω 3系不飽和脂肪酸を含めた免疫賦活物質を. 3日後. B. 5日後. **. 7r. ロ対照群ロ無脂肪群ロ大豆油群ロ魚油群. 添加したいわゆる免疫栄養製剤も経腸栄養剤として使用可能であり，重症急性勝炎における経腸栄養剤. へ. として臨床応用されつつある 20. ε E b 4. しかし，重症急性醇炎での発症早期には麻痩性イ. 3. レウスのために腸管運動が障害されていることが多. ! 令索. く，症例によっては腸管への直接的炎症波及から腸. ト、. 量. 2. 管狭窄や穿孔などの器質的障害を伴うこともあり，. 。. 早期経腸栄養の施行は容易ではない.実際，わが国での重症急性解炎症例における経腸栄養施行率はき. 5日後. 3日後. わめて低いことが報告されている 22 そこで，経口や. 図 6 牌細胞における I FNy産生. 勝炎作成 3，5日後に牌細胞を採取.A，Con A 無刺激. B，C onA刺激下.本， ρ<0.05 v s3日後の無脂肪群** ， t<0. 0 5v s3日後の大豆油群.. 経腸経路ではなく，経静脈投与による免疫栄養療法の開発が急務となっている . 本研究では，重症急性解炎などの経口摂取が困難な高度侵襲状態において，脂肪乳剤の経静脈投与に. A. 2000. r. E E 1500 奇亀. 3 よる免疫賦活を得ることを目的として，新規に ω-. *. (. 系不飽和脂肪酸を添加した脂肪乳剤を開発し，その静脈内投与後早期より抗炎症効果の指標とされる. EPA/ AA比を増加させることが判明した .. ∞o. 余 1 o. Mor l ionらは， TPNとして魚油を投与した場合. : : ! 500. の血祭や細胞膜の脂肪酸組成への影響を報告してお. II B 700. 3日後. 5日後. り，その変化は 4日で平衡状態に達するとしていロ対照群ロ無脂肪群口大豆油群ロ魚 j 由群. ( E E600 500. る23 一方，Adamsらは魚油の経口投与では，血祭中や赤血球膜のリン脂質中の. EPA濃度は，経口摂. 取開始後 7日目まで上昇を続けると報告してい. 実 : 400. る24 このことは，経腸管的吸収経路と経静脈経路と. 。300. の代謝速度の差とともに，絶食の有無が関与してい. : : ! 200. る可能性がある.. 4 ミ. 6 1 ω3比が 2. 3の魚油ベースの脂肪乳剤実際， ω-. 1 0 0. 。 5日後. 3日後. 図 7 牌細胞における I LI O産生勝炎作成 3，5日後に牌細胞を採取.A，Con A 無刺激. B，C onA刺激下.* ， T<0 . 0 5 v s3日後の無脂肪群と大豆油群.. (大豆油:魚油=7 :3 )を重症急性梓炎モデルの作. L2や I NF 成直後に投与したところ， 3日後には，I 7 産生能の冗進が見られ，牌細胞の免疫反応が賦活. され，抑制された I L-I O産生が回復していた.. 3系不飽和脂肪酸を今回，われわれが調整した ω添加した脂肪乳剤 ( ω6 1 ω-3=2. 3 )は，経静脈的に. 7 こ. 免疫賦活が可能な製剤であり，重症急性騨炎に臨床考察. 応用が可能と考えられる.実験豚炎では，腸内細菌のB acteri a lt r a n s l o c a t i o nは勝炎作成後 1日以内. 重症急性牌炎では，発症後期の感染合併が治療成. に起こり，解局所の感染もそれに引き続いて成立す. 績向上の険路となっている . これまでに，重症急性. るが 2U6，実際の臨床例では，腸管透過性の充進が棒. 解炎では発症早期から免疫担当細胞であるリンパ球. 2時間前後に観察されておりへ惇および炎発症後7. のアポトーシスをきたし 1lO，牌細胞やリンパ球の機. 勝周辺組織への感染はその後に成立するものと考え.

(6) 7 2. 新崎. られる.したがって，隣炎発症直後から免疫賦活を目的とした脂肪乳剤投与を開始すれば重症急性醇炎に伴う感染成立，あるいは感染の重症化を阻止しうる可能性がある. 重症急性醇炎では，従来は脂肪製剤投与が醇障害を引き起こすことが危慎され使用が控えられた時期もあったが，最近では脂肪投与の重要性が再認識されている 28 本研究で使用したような，魚、油を配合した脂肪乳剤を重症急性醇炎の発症早期から使用すれば，重症急性梓炎における有効な感染対策となる可能性があると考えられた. 謝辞本研究のご指導を賜りました，大柳治正教授に謹んで、感謝の意を表します. また，本研究の遂行にあたりご支援を賜りました大塚製薬工場の中山満雄先生，萩彰文先生に感謝申し上げます.. 文献. 1 . Marik PE，Z a l o g a GP ( 2 0 0 8 )I m m u n o n u t r i t i o ni n l lp a t i e n t s :as y s t e m a t i cr e v i e wanda n a l y s i s c r i t i c a l l yi o ft h el i t e r a t u r e .I n t e n s i v eCareMed3 4 :1 9 8 0 1 9 9 0 2 .O ' C a l l a g h a nG，B e a l eRJ ( 2 0 0 3 )Ther o l eo fimmune. e n h a n c i n gd i e t si nt h e management o fp e r i o p e r a t i v e p a t i e n t s .C r i tCareR e s u s c5 :2 7 7 2 8 3 3 .F a r b e rMS，MosesJ ，KornM ( 2 0 0 5 ) Reducingc o s t s andp a t i e n tm o r b i d i t yi nt h ee n t e r a l l yf e di n t e n s i v ec a r e u n i tp a t i e n t . JPENJP a r e n t e rE n t e r a lNutr2 9 :S 6 2 6 9 4 . KudskK A ( 2 0 0 6 )I m m u n o n u t r i t i o ni ns u r g e r yand c r i t i c a lc a r e . AnnuRevNutr2 6 :4 6 3 4 7 9 5 .C a l d e r PC ( 2 0 0 7 )I m m u n o n u t r i t i o ni ns u r g i c a l and 33 1 3 9 c r i t i c a l l yi l lp a t i e n t s . BrJNu t r9 8S u p p l1:Sl e y e n f e l d t MF，Moses AG，Van 6 . Fearon KC，Von M GeenenR，RoyA，GoumaDJ .G i a c o s aA，VanGossum ，B arberM D，AaronsonNK，VossAC，T i s . A，BauerJ d a l eMJ ( 2 0 0 3 )E f f e c to fap r o t e i nande n e r g yd e n s eN 3f a t t ya c i de n r i c h e do r a ls u p p l e m e n tonl o s so fw e i g h t andl e a nt i s s u 巴 i nc a n c e rc a c h e x i a :arandomisedd o u . l Gut5 2・1 4 7 9 1 4 8 6 b l eb l i n dt r i a. i n c l a i rLA，W i l k i n s o nRG，EnserM， 7 . WachiraA M，S WoodJD，F i s h e rAV ( 2 0 0 2 )E f f e c t so fd i e t a r yf a ts o u r c e andb r e e dont h ec a r c a s sc o m p o s i t i o n，n 3p o l y u n s a t u r . a t e df a t t ya c i dandc o n j u g a t e dl i n o l e i ca c i dc o n t e n to f s h e e pmeatanda d i p o s et i s s u e . BrJNutr8 8 :6 9 7 7 0 9 .Nishik. 8 . UedaT，TakeyamaY，YasudaT，TakaseK ，Kuroda Y ( 2 0 0 2 )F u n c t i o n a la l t e r a t i o n so f awa J s p l e n o c y t e si ns e v e r ea c u t ep a n c r e a t i t i s .JSurgRes1 0 2: 1 6 1 1 6 8 o r iY ( 1 9 9 8 ) 9 . TakeyamaY，NishikawaJ，UedaT，H Thymic a t r o p h yc a u s e d by thymocyte a p o p t o s i si n 巴n t a ls e v e r ea c u t ep a n c r e a t i t i s . JSurgRes7 8 expenm 9 7 1 0 2 1 0 . TakeyamaY，TakasK .UedaT，HoriY，GoshimaM， KurodaY ( 2 0 0 0 )P e r i p h e r a l Iymphocyter e d u c t i o ni n. 日. s e v e r ea c u t ep a n c r e a t i t i si sc a u s e dby a p o p t o t i cc e l l a s t r o i n t e s tSurg4 :3 7 9 3 8 7 d e a t h JG .Nishik. 1 1 . YasudaT，TakeyamaY，UedaT，TakaseK 2 0 0 2 )S p l e n i ca t r o p h yi ne x p e r i m e n . awaJ，KurodaY ( 6 5 3 7 2 t a ls e v e r ea c u t ep a n c r e a t i t i s . PANCREAS2 4・3 .HandaH，TomitaH，TomitaY 1 2 . UeharaS，GothohK ( 2 0 0 3 ) Immune f u n c t i o ni np a t i e n t sw i t ha c u t ep a n . c r e a t i t i s . JG a s t r o e n t e r o lH e p a t o l1 8 :3 6 3 3 7 0 h i n z e k iM，Sawa 1 3 . UedaT，TakeyamaY，YasudaT，S j i k iT，F u j i n oY，S u z u k iY，KurudaY H，NakajimaT，A ( 2 0 0 6 )Immunosuppressioni np a t i e n t sw i t hs e v e r ea c u t e p a n c r e a t i t i s . JG a s t r o e n t e r o l4 1 :7 7 9 7 8 4 1 4 .P i e t r u c z u k M， Dabrowska MI， Wereszczynska SiemiatkowskaU，DabrowskiA ( 2 0 0 6 )A l t e r a t i o no f p e r i p h e r a lb l o o d Iymphocyte s u b s e t si na c u t ep a n . 3 4 4 5 3 5 1 c r e a t i t i s . WorldJG a s t r o e n t e r o l1 2・5 . Hotz HG， 1 5 .F o i t z i k T，Kruschewski M，KroesenAJ E i b lG，BuhrHJ( 19 9 9 )Doesg l u t a m i n er e d u c eb a c t e r i a l t r a n s l o c a t i o n ? As t u d yi n two a n i m a l models w i t h .I n tJC o l o r e c t a lD i s1 4 :1 4 3 1 4 9 i m p a i r e dg u tb a r r i er .KovacsG，S z a t m a r iK .BakoA，Szentkeres. 1 6 .H a l l a yJ .( 2 0 01 )E a r l yj e j u n a l z t yZ，LakosG，SipkaS，SapyP n u t r i t i o nandc h a n g e si nt h ei m m u n o l o g i c a lp a r a m e t e r s o fp a t i e n t sw i t ha c u t ep a n c r e a t i t i s .H e p a t o g a s t r u e n t e r o l o g y4 8 :1 4 4 8 1 4 9 2 r o .a n d 1 7 . Bengmark S ( 2 0 0 3 ) Use o f some p r e .， p l lp a t i e n t s .B e s tP r a c tResC l i n s y n b i o t i c si nc r i t i c a l l yi t e r o l1 7・8 3 3 8 4 8 G a s t r o巴n e l a g y iT，PotoL，Romics，LJ r，Bengmark 1 8 . OlahA，B S( 2 0 0 7 )S y n b i o t i cc o n t r o lo fi n f l a m m a t i o nandi n f e c . t i o ni ns e v e r ea c u t ep a n c r e a t i t i s :a p r o s p e c t i v e，r a n . o u b l eb l i n ds t u d y . H e p a t o g a s t r o e n t e r o l o g y domiz巴d，d 5 4 :5 9 0 5 9 4 ，C indoruk乱 1 .UnalS 1 9 . KarakanT，ErgunM，Dogan1 ( 2 0 0 7 ) Comparisono fe a r l ye n t e r a ln u t r i t i o ni ns e v e r e a c u t ep a n c r e a t i t i sw i t hp r e b i o t i cf i b e rs u p p l e m e n t a t i o n v e r s u ss t a n d a r de n t e r a ls o l u t i o n :ap r o s p e c t i v erandom. i z e dd o u b l e b l i n ds t u d y . World J G a s t r o e n t e r o l1 3 : 2 7 3 3 2 7 3 7 a l t e r s A M，Goggin PM， 2 0 .P e a r c e CB，Sadek SA，W SomersSS，TohSK .JohnsT，Duncan，HD. ( 2 0 0 6 )A d o u b l e b l i n d，randomised，c o n t r o l l e dt r i a lt os t u d yt h e e f f e c t so fane n t e r a lf e e ds u p p l e m e n t e dw i t hg l u t a m i n e， a r g i n i n e，and omega-3 f a t t ya c i di np r e d i c t e da c u t e s e v e r ep a n c r e a t i t i s . JOP7 :3 6 1 3 7 1 l . Hegazi RA，O 'Keefe SJ ( 2 0 07 ) N u t r i t i o n a l im 2 munomodulation o fa c u t ep a n c r e a t i t i s . Curr G a s t r o e n t e r o lRep9 :9 9 1 0 6 2 0 0 8 )消化管内除菌，経 2 2 竹山宜典，木原康，大槻員 ( 目. 腸栄養の方法と開始時期の検討.厚生労働省科学研究費補助金. 難治性疾患克服研究事業「難治性醇疾患に関する調. 9年度総括・分担研究報告書，大槻査研究」平成 1. 員，東. 2 5 5 京，株式会社アークメディア， 5 2 3 . MorlionBJ，TorwestenE，L e s s i r eH，SturmG，P e s k a r 19 9 6 )Thee f f e c to fp a r e n t e r BM，F u r s tP，P u c h s t e i nC ( a lf i s ho i lonl e u k o c y t emembranef a t t ya c i dc o m p o s i -.

(7) ω3系脂肪乳剤の静脈内投与による免疫賦活効果 t i o nandl e u k o t r i e n e s y n t h e s i z i n gc a p a c i t yi np a t i e n t s 5 :1 2 0 8 1 2 1 3 w i t hp o s t o p e r a t i v et r a u m a . Metabolism4 2 4 . Adams S，Yeh YY，J e n s e n GL ( 1 9 9 3 ) Changes i n p l a s m aande r y t h r o c y t ef a t t ya c i d si np a t i e n t sf e de n t e r a lf o r m u l a sc o n t a i n i n gd i f f e r e n tf a t s . JPENJP a r e n t e r 7・3 0 3 4 E n t e r a lNutr1 unkel NS，Moody FG，Smith GS，R o d r i g u e z LF， 2 5 .R LaRoccoM T，M i l l e rTA ( 1 9 91 ) Ther o l eo ft h eg u ti n t h edevelopmento fs e p s i si na c u t ep a n c r e a t i t i s . JSurg Res5 1 :1 8 2 3 h i n z e k iM，Sawa 2 6 . YasudaT，TakeyamaY，UedaT，S NakajimaT， KurodaY ( 2 0 0 6 )Breakdowno fi n t e s t i H，. 7 3. n a lmucosav i aa c c e l e r a t e da p o p t o s i si n c r 巴a s e si n t e s t i n a lp e r m e a b i l i t yi ne x p e r i m e n t a ls e v e r ea c u t ep a n 3 5 :1 8 2 6 c r e a t i t i s . JS u r gRes1 L e e d e rPC， KingRF， B a r c l a yGR， M a r t i n 2 7 . AmmoriBJ， a r v i nM，McMahonMJ ( 1 9 9 9 )E a r l yi n c r 聞記 i n IG，L i n t e s t i n a lp e r m e a b i l i t yi np a t i e n t sw i t hs e v e r ea c u t e a i l p a n c r e a t i t i s :c o r r e l a t i o nw i t hendotoxemia，organf o r t a l i t y . JG a s t r o i n t e s tS u r g3 :2 5 2 2 6 2 u r e，andm 2 8 . KataokaK ( 2 0 0 6 )S p e c i a l i z e dn u t r i t i o ns u p p o r tc o r r e s p o n d i n gt op a t h o p h y s i o l o g i c a lc h a n g e si na c u t eand 4 7 c h r o n i cp a n c r e a t i t i s . JKyotoP r e fUnivMed:625-6.

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