論文審査の結果の要旨
氏名：平 野 隆 幸
専攻分野の名称：博士（医学）
論文題名：神経芽腫におけるNuclear Receptor subfamily 4 group A, member 3遺伝子の新規予後規定 因子としての検討
審査委員：（主 査） 教授 槇 島 誠
(副 査） 教授 國 分 眞一朗 教授 大 島 猛 史 教授 増 田 しのぶ
小児固形腫瘍の一種である神経芽腫の予後予測因子の探索において、核内受容体neuron-derived orphan receptor 1の遺伝子であるnuclear receptor subfamily 4, group A, member 3（NR4A3）のexon 3 CpGi の低メチル化状態・低発現状態が予後不良と関連することが、これまでの研究で見出されている。そこで、
本研究では、神経芽腫の細胞機能における NR4A3 遺伝子の役割を明らかにするため、神経芽腫細胞での
NR4A3遺伝子の発現抑制や強制発現、MYCN遺伝子の発現抑制などを行い、神経分化などへの影響を解
析した。
神経芽腫におけるNR4A3の発現レベルと予後との関連性をpublic data baseを用いて解析したところ、
NR4A3 高発現群は低発現群に比較して無病生存期間が延長していた。ヒト神経芽腫細胞株 7 種における
NR4A3のmRNA発現を解析し、高発現のSK-N-AS細胞においてsiRNAを利用してNR4A3の発現を抑 制し、また低発現のNB1細胞においてNR4A3の強制発現を行った。SK-N-AS細胞でのNR4A3の発現 抑制は、神経突起伸長への影響は認められず、細胞増殖はむしろ低下した。一方、NB1 細胞での NR4A3 の強制発現は、神経突起の伸長や神経分化マーカーの発現を誘導した。細胞増殖への変化ははっきりしな かった。神経芽腫臨床検体の解析において、MYCN非増幅群でNR4A3が高発現する傾向がみられたこと から、NB1細胞においてsiRNAによりMYCNの発現を抑制した。その結果、NR4A3や神経分化マーカ ーの発現増加及び神経突起の伸長が認められた。
NR4A3の遺伝子発現増加は、神経芽腫細胞の分化を促進することが明らかになった。臨床検体の解析か
らも NR4A3 高発現が予後良好因子であり、また臨床検体及び細胞実験から MYCN 非増幅や発現抑制が
NR4A3の発現増加と相関することが示された。以上の結果から、NR4A3遺伝子が、MYCNにより発現が 制御される神経分化関連因子であり、神経芽腫の予後予測因子として利用できることが示唆された。
よって本論文は、博士（医学）の学位を授与されるに値するものと認める。
以 上 平成３０年２月２８日
