細 菌 多 糖 類 の 抗 原 性 に 関 す る 研 究
12
0
0
全文
(2) 2894. 横. 類 を 分 離 し て よ り, 謂Boivin. type. し た.即. Gram陰. antigenの. ち,. Boor32),. 塩 化 醋 酸 で, Henderson36). Freeman33). 第1表. 性 菌 多 糖 類,所. Freeman33). Proteus X19菌. 37), Freeman33). 35)39),. glycolを. Topley37). 35)39)等. 多 糖 類 の三 塩化. 醋 酸 に よ る抽 出順 序. 35)39)等 は 三. はDiethylene. い て 多 糖 類 を 抽 出 し, 37) 38),. 衛. 抽 出 法 が 著 し く進 歩. Morgan34). 37)等. 山. 38),. 用. Raistrick. はTrypainで. 菌 体. を 消 化 し 多 糖 類 を 分 離 し た. こ れ 等 は,加. 熱 除蛋 白 の操作 が無 い為 に多. 糖 類 抗 原 の 分 離 抽 出 に 当 り,其. の変 性 を 最 小. 限 度 に 止 め て い る の が 特 徴 で あ る. 又,. Proteus. X19菌. 方 法 と し て は, 熱 法, 法,. よ り 多糖 類 を 分 離 す る. (1) Przesmycki40)の. (2）Meisel41)等. 醋 酸 加. の ア ル カ リ法 及 び 酸. (3) Castaneda42)‑44)のAntiformin法,. (4) Furth45)等 消 化 法,. のAntiformin法. Bendich47)等. (7)黒 屋48)等. び(8)岡. 本49)等. (6). す る に 当 り,可. Trypsin消. Diethylene. 化 法 の3法. glycol法. を 用 い,之. 及 び. 等 の分 離 方. 度 及 び收 量 の 比 較検 討 並 び に 本 多糖 類. の 化 学 的 性 状 に 関 す る 実 験 を 行 い,興. 味 あ る. り,こ. 実 験 材 料. を, Alkohol,. Aceton,及. 滌 し て 脱 脂 した.〔 次 に,こ し,こ. し.実. の分 与 を 受 け て 之 を 使 用. 験 動 物 と し て は 体 重 約3,000gm前. 後. 実 験 方 法. Proteus. X19菌. 様)透. 析 終 了 後,こ. 称 す る)を. X19菌. Boor32)等,及. びFreeman33). 後S氏. 用 い て 濾 過 し た.此. 濾 過器 と略 の 濾液 に. 加 えて 生 じ た 白 色 沈 澱 を 遠 心 し て 集 圧 乾 燥 し て 保 存 し た.. Diethylene. 35)39)等 の 方 法 に. glycolに. よ る抽 出,. 並 び に精 製 法 Diethlene. に 示 す 如 く,. 抽. 出 を 行 つ た.. び. よ り三 塩 化 醋酸 に よつ て. 多 糖 類 を 抽 出 す る に は,第1表. れ を 精 製 す る 目 的 で,. 濾 過 器(以. 第2項. に精 製 法 Proteus. 加 下同. こ の 様 に し て 本 菌 塊 に 対 し 連 続 し て5回. よ り多 糖 類. 三 塩 化 醋 酸 に よ る 抽 出,並. 加 え て,. 渣 は 再 び 三 塩 化 醋 酸10ccを. Seitz‑Werke氏. を 抽 出 精製 す る方 法 第1項. 塩 化 醋 酸10ccを. 属 の 抽 出 を 同 様 操 作 で 行 う.以. め た 後,減. 第1節. 順次に洗. 3日 間 氷 室 中 に 放 置 し た 後 強 力 に 遠 心 し,そ. Acetonを. の 家 兎 を 用 い た.. 第3章. びEtherで. 脱 脂 湿 菌2.0gm〕. の脱 脂 湿 菌塊 を 乳 鉢 を 用 い て磨 砕. れ に4.1%三. え 第2回. 使 用菌 は 岡 山大 学 医 学 部 微 生物 学 教 室 保 存 X19菌. 瓶. の 菌浮 游 液 を 遠 心 して集 菌 した湿 菌 塊. 透 析 した.(沈. のProteas. をKolle氏. の 上 清 を セ ロ フ ァ ン膜 に 包 み 流 水 中 に24時 間. 成 績 を 得 た の で こ ゝ に 報 告 す る.. 第2章. X19菌. これ を 生 理 的 食塩 水 で 洗滌 して菌 浮 游液 を作. よ り多 糖 類 を 分 離. 及 的 変 性 の 少 い 方 法 と し. 塩 化 醋 酸 法,. 記Proteus. 普 通 寒 天 平 板 培 養 基 を 用 い て24時 間 培 養 し,. の 諸 法 が あ る. X19菌. 準 じ て 下 記 の 如 く行 つ た. 即 ち,前. の 中 性 及 び 酸 性 加 熱 法,及. 著 者 はProteus. 法,純. 化 法,. の 三 塩 化 醋 酸 法 及 びTrypsin消. 化 法,. て,三. 及 びTrypsin. (5) White46)のTrypsin消. 第2表. glycolに. よ る 抽 出 に つ い て は,. に 示 す 如 く, Morgan34) 37)等, Freeman. 33)35)39)等. ,及. びHenderson36). 準 じ て 下 記 の 如 く行 つ た.即. 37)等 の 方 法 に ち,. Proteus.
(3) 細 菌 多糖 類 の 抗 原性 に関 す る研 究. 第2表. Proteus lene. X19菌. X19菌. しめ て 得 た 乾 燥 菌1.7gmを. glycolを. sinに. 菌,脱. 脂 した.. この脱 脂 菌塊 を 自然 乾 燥 せ. 粉 末 状 と な し,こ. 乳 鉢 を 用 い て 磨 砕,. れ に17ccのDiethylene. 添 加 し て 懸 濁 液 を 作 つ た.こ. の 懸濁. 液 を 時 々 振 盪 しつ ゝ孵 卵 器 中 で37℃, 間 抽 出 操 作 を 行 つ た 後,強. 17ccを. 24時. 力 遠 心 し,そ. 清 を 天 然 膀 胱 膜 を 用 い て,流 透 析 した.(沈. 水 中 に24時. 間. glycol. 抽 出 を 同 様 に 行 う.)透. を 加 え,白. 色 沈 澱 を 生 ぜ し め,こ. 減 圧 乾 燥 し 保 存 した. 連続 抽 出 を. 行 つ た.. Trypsinに. よ る 消 化,並. びに. 間37℃. に保存し た 後 加 え て,同. 卵 器 中 で5日. 間 保 存 し た.そ. を 用 い てpH. 7.0に. Acetonを め,減. 様孵. の後 これ を 塩 酸. 修 正 し た 後,精. 製 の 目的. 濾 過 器 で 濾 過 し た.此. の濾 液 に. 加 え て生 じた 白色沈 澱 を遠 心 し て集. 圧 乾 燥 し て 保 存 し た. 第2節. を10ccの. 家 兎 の免 疫 X19菌 24時. を試 験 管 普 通寒 天斜 面 間 培 養 し,そ. の1斜. 面. 生 理 的 食 塩 水 に 浮 游 せ し め,こ 2時 間,加. れ. 温 殺 菌 し,. こ れ を 前 記 家 兎 の 耳 静 脈 内 に1週. 以 後3cc宛. よ るProteus. じ て行 つ た.即 脱 脂 し たProteus. ち,前. 注 射 した50).第16回. に 全 採 血 を行 い,抗Proteue X19菌. の 消 化 は,. 第3表 に 示 す 如 く, Topley37) 38)等, Wilson 33)37)等 ,及 びFreeman33) 35)39)等 の 方 法 に 準. 溶 液0.81ccを. 加 え. 間2回. の間. 隔 で,第1回1cc,第2回2cc,第3回3cc, Trypainに 精製 法. に 対 し て,蒸. 卵 器 中 で2.5日. を 重 湯 煎 中 で60℃,. この 様 に し て 本 菌 塊 に 対 し5回. 第3項. て,孵. 培 養 基 に37℃,. れを集めて. 多 糖 類 のTryp. 再 びTrypsin末18.0mgを. 前 記Proteus. 析 後, S氏 濾 過 器 で 濾 過 し,こ の 濾 液 にAceton. X19菌. よ る消 化 順 序. 18.0mgのTrypsin末(Merck製)を. を 以 てS氏. の上. 渣 に は 再 びDiethylene. 加 え,第2回. Proteus. よ る抽 出 順 序. を 前 述 の 如 く培 養 し,集. 〔脱 脂 湿 菌6.2gm〕. 第3表. 多 糖 類 のDiethy. glycolに. 2895. 述 の 如 く培 養,集. X19菌. 菌 し. 兎 血 清 を 得 た.之 thiolateを. に 防 腐 の た め,. 血 清 の1/100容. 第3節 本 章 第1節. 注 射 後8日 X19菌. 目. 免 疫 家. 100倍Mer. 量 加 え て 保 存 し た.. Paper‑Chromatography 第1項. に於 て 述 べ た三 塩化 醋 酸. の 脱 脂 湿 菌 塊1.8gm. 法 に よ り抽 出 し た 多 糖 類 乾 燥 粉 末30.0mgを. Toluol 18cc, N‑NaOH. 塩 酸 で 加 水 分 解 し た 後,送. 風 乾 燥 し て塩 酸 を. 除 き,こ. 醋 酸,蒸 溜 水 を4:. 溜 水360cc, 加 え,(pH. 8.2〜8.5)次. で. れ をButanol,氷.
(4) 2896. 横. 山. 衛. 1:5の. 割 合 に 混 合 せ る展 開 剤 を用 い て東 洋 濾. て 得 た 乾 燥 菌 塊 にN/100‑NaOH溶. 紙No.. 50に. て 乳 鉢 で 磨 砕 し た.次. Spotの. 展 開 し た.. 検 出 に は ア ン モ ニ ヤ 硝 酸 銀 法,及. 過 マ ン ガ ン酸 加 里 法 の2法 第4節 前 節 同 様,三. び. を 用 い た51)52). 析 し た.透. 章 第2節. 天 を 溶 解 せ し め,(pH. に於 て 述 ベ た家 方 法 に準 じ. 6.5〜7.5)次. 層 の透 明 な る部. 稀 釈 し,こ. れを以. 沈 降 管 の 内 壁 を 被 膜 し た.. 含 有 せ しめ,更. に48〜50℃. 於 て 同 温 度 の 抗 血 清 と 同 量 混 合 し た.こ 既 に 被 膜 せ る 沈 降 管 の1/2〜2/3ま. に れを. で 盛 り,. 間 水 室 で 寒 天 を 凝 固 せ し め た.次. 本 菌 多 糖 類 を 生 理 的 食 塩 水 で1:1,000に 量 のMerthiolateを. で 稀釈. 含 む)こ. れ を 前 述 の 抗 血 清 寒 天 の 上 に 重 畳 し,そ. の反. の 間 は 毎 日,第2〜. 第5節. 養 した 後,こ. 第3週. は. て,こ. で24時. 間培. れ に 燐 酸 緩 衝 液 を 加 え る と共 に, 入 し て,再. 又,本 章第1節. に於 て 述べ た 各 抽 出(消 化). 法 の各 過程((1)透. 析 後或 は消 化 後, (2)濾 過. 後, (3)精製 粉 末)の 溶 液 を抗 原 とし,本 免 疫 血清 を抗 体 と して, Uhlenhuth氏. 法62)によ る. る沈 降 反 応 を行 つ た.然 して各 抽 出法 に よつ の抗 原 として の 活性 物 質 の收 量差 並 び に純 度 価 を 以て 比 較 した.. 沈 降 反 応 の 判 定 は,抗 原 を抗 体 に重 層 して. 検 定 に 当 りP32原. 液 の1:10,000生. 1時 間〓,. 性 な る場 合‑と. した.. 第4章 第1節. に 於 て 述 べ た 如 くProteus. 第2項 X19. 燥 せ しめ. 実 験. Proteus. 成 績. X19菌. 多糖 類 の. Biuret反. 応 及 びMolisch反. 応. に於 て述 べ た各 抽 出法 に 依 つて. 得 た 白 色 の 乾 燥 粉 末 に 就 い て 行 つ たBiuret 反 応 は 陰 性,. 菌 体 蛋 白の 濾 紙電 気 泳 動. 脂,乾. 2時 間+と し,陰. 化 学 的性 状. 前 章 第1節. 理的食. 塩 水 溶 液 を 対 照 と し て 用 い た.. れ を 集 菌,脱. 合 〓, 30分 〓,. 第1項. 数 管 を 用 い て 検 定 し た .54)‑67). 本 章 第1節. した.. の 多 糖 類 と,多. 糖 類 抽 出 後 の 残 渣 と の 各CountをGeiger‑. 菌 を 培 養 後,こ. 沈 降 反 応 を行 つた.抗 原 対 照 として生 理 的 食. し. の 湿 菌 よ り前 述 せ る 三 塩 化 醋 酸 抽 出 法. を 用 い て 多 糖 類 を 抽 出 し,そ. 第6節. 血 清 を 抗体 とし て,抗 原抗 体 稀 釈 法61)によ る. び孵 卵 器 中. 2時 間 保 存 し た 後 集 菌 し た.然. Muller計. 章 第2節 に於 て述 べ た 抗Proteus X19菌 家 兎. し,判 定 の表 示 は,重 層 後15分 で 陽性 な る場. 導入. をBouillon中. P32を60万Count投 に37℃,. 抽 出 法 に よ り抽 出 した 多糖 類 を抗 原 と し,本. 後,接 触 面 に 白輪 を生 した もの を反 応 陽性 と P32の. X19菌. 兎抗 血 清 に対 す る沈 降反 応 本 章第1節 第1項 に於 て述 べ た 三塩 化 醋 酸. を, Uhlenhuth氏. 隔 日 に行 つ た.. Proteus. Proteus X19菌 多糖 類 の 家. て得 た多 糖 類 及 び各 抽 出過程 に於 け る多糖 類. 応 輪 の 移 動 距 離 を 測 定 し た. 測 定 は 第1週. 第7節. 塩 水 を,抗 体 対 照 として 正常 家 兎血 清 を使 用. の 寒 天 を 再 び 生 理 的 食 塩 水 で0.6%. の 寒 天 生 理 的 食 塩 水 液 に 稀 釈 し, 1/500容 量 の. し,(1/10,000容. 対 照 と して 同時 に 正 常 人 血清 の泳 動 を行 つ. で これ 遠 心 し て,. の 寒 天 を再 び 加 熱溶 解. し て 生 理 的 食 塩 水 で1%に 径3mmの. 紙. 用 い て. た.. 沈 澱 した 夾 雑 物 を 切 離 し,上 分 の み を 使 用 した.こ. 51を. び生. 泳 動 を 行 つ た58)‑60).. 割 合 で 精製 寒. を 熱 い 液 状 の ま ゝ4,000回 転 で15分. 10〜15分. れ を 送 風 乾 燥 し,再. 電 気 泳 動 法 に よ り東 洋 濾 紙No.. 理 的 食 塩 水 に10%の. Merthiolateを. 析 後,こ. 理 的 塩 食 水 に 溶 解 せ し め た も の を 以 て,濾. て 沈 降 反 応 を 行 つ た.. 次 に,こ. 上 清 を セ ロ フ ァ ン 膜 を 用 い 流 水 中 に24時 間 透. 塩 化 醋 酸 法 に よ り抽 出 し た 多. 兎 血 清 を 抗 体 と し て, Oudin53)の. て,内. 液 を加 え を遠 心 して そ の. Agar‑Method. 糖 類 を 抗 原 と し,本. 即 ち,生. で,之. Moliach反. 感 は 強 陽 性 で あ つ た.. Paper‑Chromatography. 本 多 糖 類 を 加 水 分 解 し た 後 行 つ たPaper‑ Chromatographyで. は,第4図. に 示 す 如 く,.
(5) 細 菌 多糖 類 の抗 原性 に関 す る研 究. 2897. ア ン モ ニ ヤ硝 酸 銀. (1)多. 糖 類(2.8mg). 51Count. 法 に 依 る 検 出 で,. (2)残. 渣(0.75mg). 33Count. 3箇. のSpotを. 検. (3)対. 照. 出 し た. 然 し て,其. の. (但 し,(1). SpotのRfは0.47, 0.29,. 164Count. 自然 計 数 (2) (3)のCount数. 0.12で. あっ. 即 ち,本. 多 糖 類(Boivin. 残 渣 と のSpecific. type. activityの. 又 過 マ ン ガン酸. 第5項. に 於 て も同 様 の. 第6図. 検 出 し た.. に 示 す 如 く,. Proteus. 濾 紙 電 気 泳 動 で は,同 清 に 対 し て,以. Method. た.. Agar‑Methodに. X19菌. 下 の 如 き4種. Alb.. (2). β‑glob.位. 蛋 白質. 第5図a)及. (3). γ‑glob.位. 蛋 白質. (4). γ‑glob.原. 点 位蛋 白質. の. 反応 輪は 終始 単 一. 又,各. で あ つ た.. 29%,. α‑glob.中. の蛋 白質 を認 め. (1). びb). 蛋 白 の. 時 に泳 動 した 対 照 人血. よ る 沈 降 反 応 は,. 又,こ. あ. 菌体 蛋 白 の濾 紙 電 気 泳 動. Agar‑. に 示 す 如 く,其. antigen)と. 比 は1:1で. つ た.. 加 里法 に よ る検出. 第3項. は 自然 計 数 を. 含 む). た.. Spotを. 23Count. 間 位 蛋 白 質. 々 の 菌 体 蛋 白 に 対 す る 百 分 比 は, (2)36%,. (3)14%,. (4)21%で. の反 応 輪. の 移 動 は,. 1週. 間. で2mm,. 2週. 間. 第2節. 三 塩 化 醋 酸 抽 出 法 に よ り抽 出 した 多 糖 類 の 抗ProLeus. 3.5mm, mmを. (1). あ つ た.. 3週. 菌家 兎血 清 に対 す る沈 降 反応. 間4. 第7表. 示 し た.. 第4項. P32を 導 入 せ るProteus. に 示 す 如 く,本 反 応 に 於 て は,抗. 価1:25,000,抗. P32の 導 入. 收 量 は 湿 菌1.0gmに. X19菌. 多糖 類 の. 対 し て2.8mgで. 1:5,000で. あつ. 体 価1:50,結. 然 し て,本. 原. 合 帯 抗 原価. あ つ た.. 第3節. た.. のCountの. X19. Proteus. X19菌. 多糖 類 の抽. 出 並 び に消 化 成 績 多糖 類 と三塩 化 醋 酸 抽 出 残渣 と 比 は 以 下 の 如 くで あ つ た . 第5図. a)反. 応 輪 移 動 曲 線. 第1項 第3章. 第1節. 三 塩 化 醋 酸 に よ る柚 出 成 績 第1項. に 於 て 述 べ た 如 く,同. Agar‑Method. b)反 応 図.
(6) 2898. 横. 第6図. 山. 衛. 菌 体 蛋 白 の濾 紙 電 気泳 動.
(7) 細 菌 多糖 類 の抗 原 性 に 関 す る研 究 第7表 Proteus. 沈. X19菌. 降. 多糖. 反. 一 の 脱 脂 後 の 湿 菌 塊2.0gmに. 応. 〓 抗Proteus. 2899. X19. 対 し て,. 5回. 連 続 して行 つ て抽 出精 製 した 多糖 類 の総 收 量. 家 兎血 清 系. は6.9mgで. あ つ た.然. し て,抽. 出 精製 過 程. に於 け る溶 液 の 家 兎抗 血清 に 対 す る 抗 原 価 (Uhlenhuth氏. 価)は. 第8表. に 示 す 如 く,. 透析後. 1:25. 濾過後. 1:10. 乾 燥 粉 末 を濾 過 後 液 量 の1/10量 の 生 理 的 食塩 水 に 溶 解 した場 合. 1:10. で あ つ た. 然 し て,第12表Aに. 第8表. 程 に於 け る抗 原 として の活性 物 質 の收 量 差 を し て,透. 出精製過. 三 塩化 醋酸 抽 出法 に依 る抽 出 成績 湿 菌. 乾 燥 粉 末 を1と. 示 す 如 く,抽. 重. 量2.0gm. 回連 続 して行 つ て抽 出精 製 した 多糖 類 の総 收. 析 後 液 及 び濾 液 に就. 量 は0.98mgで. い て 比 較 した 場 合 は,以. 下 の 如 くで あ つ た .. 程 に於 け る溶 液 の 家 兎抗 血 清 に対 す る抗 原 価. 即ち. 末=36:10:1. (Uhlenhuth氏. 透 析 後:濾. 液:粉. (但 し, Uhlenhuth氏. 価 と液量 の積 を以 て. 算 出) 又,第8表. に 示 す 如 く,抽. 出回 数 の進 む に. つ れ て抽 出 收 量 が 減 少 し て い る の で あ る が , 第1回. 抽 出 と第2回. む し ろ,第2回. 抽 出 とが 殆 ど 差 が 無 く,. 抽 出 に 於 て 強 い沈 降 反 応 が 認. あ つ た.然. し て,抽. 価)は,第9表. 出精製過. に 示 す 如 く,. 透析後. 1:10. 濾過後. 1:1. 乾 燥粉 末 を濾 過 後 液 量 の1/10量 の生 理 的 食塩 水 に溶 解 した場 合. 1:1. で あ つ た. 然 して,第12表Aに. 示 す 如 く,抽 出精 製 過. め ら れ た の は,第1回. 抽 出 の際 に は 菌体 の破. 程 に於 け る抗 原 とし ての 活 性 物 質 の收 量差 を,. 壊 が 未 だ 不 充 分 で,満. 足 す べ き抽 出作 用が 行. 乾 燥 粉 末 を1と. わ れ な か つ た 為 で あ ろ う と考 え ら れ る . 第2項. Diethylene. glycolに. よる抽 出. 成績 第3章 第1節 第2項 に 於 て 述 べ た 如 く,同 一 乾 燥 菌1 .7gm(湿 菌 量6.2gm)に 対 し て5. して,透 析 後 液 及 び濾 液 に就. い て比 較 した 場合 は以 下 の如 くで あ つ た. 即 ち,透 析 後:濾 液:粉 末=108:10:1 又,本 抽 出 法 に於 ては,第9表 第1回 抽 出 に於 て,や. に 示 す 如 く,. ゝ強 い抗 原 価 を 示 し,. 第2回 以 後 は漸 減 し乍 ら も大 差 の ない 抗 原 価.
(8) 2900. 横. 第9表. 山. Diethyleae. 衛. glycol抽. 湿 菌 重 量6.2gm(乾. 出法 に よる抽 出 成 績. 燥 菌 量1.7gm). 乾 燥 粉 末 を濾 過 後 液 量 の1/20量 の 生 理 的 食塩 水 に溶 解 した 場合. を 示 し た. 第3項 第3章. Trypsinに 第1節. Trypsinに. 第3項. よ る消 化 成績. 間 行 つ た,然. 精 製 粉 末 の 総 量 は 湿 菌1.7gmに で あ つ た.又,消. 然 し て第12表Aに. して. 対‑して40.0mg. 乾 燥 粉 末 を1と. 即 ち,消 化 後:濾 過 後:粉 末=570:20:1. に 示 す 如 く, 1:25. 濾過後. 1:1. Trypsin消. 又,消 化 経 過 中 に 於 け る消 化 の進 行 状態 を 抗 血清 に対 す る沈 降 反 応 に依 つ て検 討 した 結. Trypsin消 湿. 第11図. して,消 化 後 溶 液 及 び濾 液 に. 就 い て 比較 した 場 合 は 以下 の如 くで あ つ た.. 価). 消化後. 第10表. 示 す如 く,消 化 精 製過 程. に於 け る抗 原 と して の 活性 物 質 の收 量 差 を,. 化 精 製 過 程 に 於 け る溶 液 の. 家 兎 抗 血 清 に 対 す る抗 原 価(Uhlenhuth氏 は 第10表. で あつ た.. に 於 て 述 べ た 如 く,. よ る 消 化 は8日. 1:1. 菌. 化. 法. 重. 量1.8gr. に. 化 法 の消 化 経 過 時間 及 び. 日数 に 於 け る抗 原 体 の経 過 曲 線. よ る 消 化. 成 績. 果 は,第11図. に 示 す 如 くで あ つ. た. 即 ち,消. 間 まで. ‑. 〃8時. 化4時. 間. +. 〃24時. 間. 〓. 〃48時. 間. 〓. 〃4日. 〓. 〃8日. 〓.
(9) 細 菌 多糖 類 の抗原 性 に関 す る研 究. な ほ 充 分 で な か つ た 事 に 依 る も の と考 え ら れ. で あ つ た. 第4項. 各 抽 出(或. は 消 化)法. に よ り得. る が,第4回. よ り第5回. は,抗. は 消 化)法. 実 験 上 の 誤 差 で あ ろ う.. 相 互 間 の抗 原 と して. の 活 性 物 質 の 收 量 比 は,第12表Bに glycol法. 三 塩 化 醋 酸 法:. を1と. 示 す 如 く,. し て,. Diethylene. 又,. 血 清 に 対 す る両 者 の 抗 原 価 よ り考 え て. Diethylene. が 悪 く,第2回. glycol法. 大 差 が 認 め ら れ な か つ た,且. glycol法:. glycolは. 又,純. 不 完 全 に な り易 く,従. 度 比 はTrypsin法. を1と. 三 塩 化 醋 酸 法: Diethylene. し て,. 又,各. で あ つ た.. /湿. 抽 出(消. 心分 離 が. つ て 抽 出 誤 差 も多 か つ. 価 ×溶 液 量. /精 製乾燥 粉末. 化)法. 化 醋 酸 法(2). glycol法. 価 ×溶 液 量. 菌 量. Uhlenhuth氏. 純 度 比= 第12表A. 甚 し く粘 稠 で あ る 為 に,遠. (1)塩 Uhlenhuth氏. つDiethylene. た 事 と考 え ら れ る.. glycol法:. Trypsin法=2:3.5:1. 量 比=. で は 全 般的 に收 量. 抽 出 以 後 の沈 降 反 応 抗 原 価 に. Trypsin法=13:1:3. 但 し,收. が 多 くな つ て い る の. た る多糖 類 の收 量 及 び純 度 比 各 抽 出(或. Diethylene. 2901. に よ る 多 糖 類 收 量 は,. Trypsin法(3). の 順 で あ り,純. Diethylene. 度 は(1). Diethylene. glycol法(2)三. 塩 化 醋 酸 法(3). 順 で あ つ て,三. 塩 化 醋 酸 法 は收 量 及 び 純度 共. Trypsin法. の. 優 秀 で あ つ て 且つ 抽 出 操作 が比 較 的 簡 易 な 方. 各 抽 出(消 化)法 に於 け る透. 法 で あ る と思 わ れ る。 然 して,. 析(消 化)濾 過 及 び乾 燥 の收. も三 塩 化 醋 酸 法 とTrypsin法. 量比. 者 の 秀 れ て い る 事 を 述 ベ て い る. 一般に ,多 糖 類 分 離 法 の 優 劣 は,其. Bendich47)等 とを比 較 して 前. の 操 作,. 收 量 及 び 純 度 に よつ て 比 較 せ ら る べ き で あ つ て,こ. の 三 塩 化 醋 酸 法 に 比 す れ ば, Castaneda. 43)44)のAntiformin法. 第12表B. は純 度 に於 て. ,黒 屋48). 等 の 中性 及 び酸 性 加 熱法 は 操作 の複 雑 さに 於. 各 抽 出(消 化)法 に依 り抽 出. て,や. せ る 多糖 類 の收 量及 び純 度 比. ゝ劣 る も の が あ る の で は な い か と思 わ. れ る. 又,先 は,強. に 述 べ た 如 く,多 糖 類 分 離 に 当 つ て 酸,ア. ル カ リ,及. び 加 熱 処 理 は,其. の. 抗 原 性 に 変 化 を 与 え る お そ れ が あ る為 に 可 及 的 行 わ ぬ の が 良 い の で は あ る ま い か.. 第5章 Proteus. 考. X19菌. giycol法,及. 論. よ り,三. glycol法,及. 連. で 多 糖 類 を 分 離 精 製 し て,其. し. を 比 較 し た 結 果,次. の 收 量 が 減 ず る傾 向 に あ 抽 出. が 多 くな つ て を り,又,. 抽 出 に於 てに 菌 体 の破 壊 が. (1)收. の收 量 及び 純 度. の 如 き 成 績 を 得 た.. glycol法. の 順 で あ る.. 度 に 於 て は, Diethylene. 三 塩 化 醋 酸 法>Trypsin法 (3)抽. 化法. 量 に 於 て は,三 塩 化 醋 酸 法>Trypsin. 法>Diethylene (2)純. 塩 化 醋 酸 法,. びTrypsin消. で は5回. 抗 血 清 に 対 す る 沈 降 反 応 が や ゝ強 く現 わ れ て い る の は,第1回. X19菌. 結. の 総 收 量 を 求 め た.然. し,三 塩 化 醋 酸 法 に 於 て,第1回. の 收 量 よ り も第2回. Proteus Diethylene. れ ら抽 出 に際 して は全 般 的 に抽 出回 数. が 進 む に つ れ て,其 る.但. Diethylene. を 行 つ た が,前2法. 続 抽 出 を 行 つ て,其 て,こ. 第6章. 多糖 類 の 分 離 精 製 法 と し. て,三 塩 化 醋 酸 法, びTrypsin法. 按. 出(消. 化)後. glycol法>. の 順 で あ る. の 多 糖 類 はS氏. に よ る 精 製 の た め に1/3.6〜1/28.5に. 濾過器 減 じ,乾.
(10) 2902. 横. 燥 粉 末 で は 更 に1/10〜1/20に. 山. (7). 減 ず る.. 多 糖 類 は 長 期 保 存 が 可 能 で あ る.. (5)三. 塩 化 醋 酸 法 に よ り抽 出 し た 多 糖 類 に. と 思 わ れ るSpotを. 水 解 後3箇. の糖 類. 助 言 を戴 い た 緒方 助 教授 に謝 意 を捧 げ る.. 会,及 び 昭 和31年4月. 第26回 目本籍 生 学 会総 会 に於. て発 表 した.). 主 1) Toenniessen:. Ztb.. Bact.. Orig.,. 85,. 要 225,. 1920.. 文. 献. 20) Goebel-Avery-Baber:. J. Exp.. Med.,. 50, 521,. J. Exp.. Med.,. 54, 437,. J. Exp.. Med.,. 55, 761,. 1929.. 2) Landsteiner-Levine:. J.. Exp.. Med., 46, 213,. 1927.. 21) Goebel-Avery-Baber: 1931.. 3) Landsteiner. et al.:. J.. Exp.. Med.,. 52, 347,. 1930.. 22) Goebel-Avery-Baber: 1932.. 4) Landsteiner. et al.:. J.. Exp.. Med.,. 57, 633,. et al.:. J.. Exp.. Med., 64,. 1933. 5) Landsteiner. 625,. 1936.. 23) Goebel-Avery-Baber: 1934.. J. Exp.. 24) Goebel-Hotchkis:. J.. Med.,. 60, 85,. Biol.. Chem.,. 115, 285,. Ann.. Chem.,. 519, 111,. 1936.. 6) Avery-Goebel: 7) Avery. Tillet:. J.. Exp.. Med.,. J. Exp.. 8) Heidelberger-Avery:. 58,. 731, 1933.. Med., 49, J.. Exp.. 251,. Med.,. 1929.. 38,. 73,. 1923.. 25) Sevag et al.:. J. Exp.. Med.,. 40,. 301,. 1924.. A. and. J. Exp.. Med., 42,. 701,. 1925.. 27) Boivin,. A.. 28) Boivin,. A.. J. Exp.. Med.,. 42,. 72,. 29) Boivin,. J. Exp.. Med.,. 64,. 559,. 30) Boivin,. 1925.. 1936. J. Exp.. Med.,. 49,. 847,. A.. 1929. J.. Biol.. Chem.,. 96,. 31) Boivin,. 15) Heidelberger-Kendal:. J.. Exp.. Med.,. 55,. 1932.. 16) Heidelberger-Kendal:. J. Exp. Med., 53, 625,. 17) Heidelberger-Menzel: & Med., 29,. 631,. Proc.. Soc. Exp.. 18) Heidelberger-Goebel:. Biol.. Chem.,. J.. 74,. Exp.. Med.,. 62,. 179,. 1935.. and. Rev.. d.. L.:. Rev. d.. L.:. Rev.. Miller,. J.,. J.,. 35,. C. P.:. J.. Infect.. Partridge,. Challinor,. D. W. path.. Raistrick,. and Wilson,. S. M.:. 169, 1940.. Biochem.. Exp.. S.W.. 307, 1940.. and. 34,. G. G.,. J.:. d.. 1938.. 1944.. W. T. J.. 36) Henderson,. 37) Topley,. L.:. 1937.. G. G., Challinor,. 35) Freeman,. J.. d.. 1936.. 197,. Biochem.. Brit.. Comp.. Rev.. and Mesrobeanu,. 47,. 34) Morgan,. son, J.. 613, 1927. 19) Goebel:. Biol.. 1932.. L.:. L.:. Mesrobeanu,. 4, 40,. Ak. 35,. Biochem.. 1931... and 3, 319,. 33) Freeman, J.:. Mesrobeanu,. 2, 113,. A.. 32) Boor, Dis.,. 1932.. Mesrobeanu,. 114, 302, 307, 1933.. and Mesrobeanu,. A.. Immunol.,. 14) Heidelberger-Kendal:. and. and. Immunol.,. 13) Heidelberger-Avery:. Comp.. 1, 553, 1935.. Immunol.,. 12) Heidelberger-Avery:. L.:. 113, 490, 1933.. Biol.,. Immunol.,. 11) Heidelberger-Avery:. Mesrobeanu,. Biol.,. Rendsoc.. 10) Heidelberger-Avery:. Lieb.. 1935. 26) Boivin, Rendsoc.. 9) Heidelberger-Avery:. 555,. 導 入を. (本論 文 の要 旨は 昭和30年11月 第65回 岡山 医学 総. 単一抗原な る事 を 認. め た.. 541,. antigenにp32の. 稿 を 終 るに 当 り,終 始 御 懇 篤 な る御 指導 と御校 閲. 得 た.. (6) Agar‑Methodで. type. を賜 つ た 恩 師大 田原 教授 に深 謝す る と共 に,種 々御. の 化 学 的 性 状 を 検 定 し た 結 果,. Paper‑Chromatographyで. Boivin. 認 め た.. (4)本. 就 い て,そ. 衛. J.,. S. W.. 34,. and. 1940.. Morgan,. 19, 82, Wilson,. 307,. and Wil. W. T. J.:. 1938. Stacey,. Challinot,.
(11) 細 菌 多糖 類 の抗 原 性 に関 す る研 究 Clark:. Lancet.,. 38) Raistrick,. 49). 1, 252, 1937.. Topley:. Brit.. J. Exp.. path.,. Challinor,. Wilson:. Biochem.. J.,. 34, 307, 1940. 40) Przesmycki: 41) Meisel,. C. R.. Soc. Biol.,. Mikulaszek:. C. R.. 44) Castaneda:. J.. 45) Furth,. 佐 竹:ク. J. Exp.. Med.,. 56,. J. Exp. Med., 58, Esp.. 455,. 57). 野 中:. Landeteiner:. 55, 1933. 1934.. J. Esp.. 49,. Med.,. Brit.. J. Exp.. Chargaff:. path., J.. 59). Chem.,. 黒 屋,川. 小 林:生. Immunol.,. 藤:医. 65,. 47,. 41,. 794, 1951.. J.. Bact.,. 12.. 1950.. 62,. 352,. 39,. 4(2)37,. W. & Hannig, 37,. 立 全 書,. 学 と 生 物 学,. Radioisotopes.,. 1951.. 9,. 1956,. 1956.. K.:. Naturwis. 397, 1950.. 物 物 理 化 学,. 林,森:濾. 61) Ogata:. 168,. 2,. No.. 1, 3,. 1954.. 紙 電 気 泳 動 法 の 実 際,南. 江 堂,. Z. f. Immunitat. Forsch. Org.. Bd.. 39, 270, 1924.. 283, 1946. 48). 41(1)1,昭4年.. 1955.. 14, 145, 1933.. Biol.. 1(2)241,昭. 31.. and Goring:. senschaften, 727,. 5, 8,. Phytopath.,. 58) Grassmann,. 60)小. 47) Bendich,. 山 医 学 会 雑 誌,. J.. 三 好,金,伊. Med., 60, 119,. 本 細 菌 学 雑 誌,. ロ マ トグ ラ フ ィ ー.共. 56). 1929. 46) White:. 52). 55) Clark. Castaneda:. Zia:. 化 学 の領 域,. 54) Warren:. 1932. 43) Castaneda,. 須 之 内:岡. 51). 114,. 361, 364, 1933. 42) Zinsser,. 50). 53) Oudin:. 95, 744, 1926.. Soc. Biol.,. 沢:日. 19年.. 15,. 113, 1934. 39) Freeman,. 岡 本,吉. 2903. 上:血. 清 学 免 疫 学 雑 誌,. 62) Uhlenhuth:. 3(3)377,. Prkt.. biol. Eiweisadiff.. 昭17年.. Studies. on the. Antigenicity. of Bacterial Part. On. the. Refining. of. B.. Anleit. (Jena). Zur. Ausfuhr.. 1909.. Polysaccharides. 1:. Proteus. X19. Polysaccharide. By Mamoru. Yokoyama. Department of Public Health Okayama University Medical School (Director: Prof. Dr. K. Ohtahara). By using trichloracetate method, diethylene glycol method, and trypsin digestion method, the author has separated a polysaccharide from B. Proteus X19 and refined it, and then having compared the respective quantity and purity derived from each method, the following results have been obtained. 1) The quantity derived in each method has been found in the order of trichloracetate method>trypsin method>diethylene glycol method. 2) The comparison of the purity so determined has been found diethylene glycol method >trichloracetate method>trypsin method, in the order mentioned. 3) The quantity of polysaccharide after extraction (digestion) is reduced to 1/3 .6-1/28.5 on account of the refining by the Seitz-Werke filter . When dried and pulverized, it has been further reduced to 1/10-1/20. 4) It is possible to preserve this polysaccharide for a long period of time . 5) Having examined the chemical nature of polysaccharide abstracted by trichloracetate method, and after hydrolysis with paper-chromatography , three saccharide-like spots have.
(12) 2904. 横. 山. 衛. been obtained. 6) This polysaccharide has been recognized to be a monoantigen by agar -method. 7) The introduction of P32 into Boivin type antigen has been ascertained..
(13)
関連したドキュメント
ところで，文の産出，文法の獲得についての心理学的研究に対しても，Chomsky（1963）の
SOME FAMILIES OF MEROMORPHIC MULTIVALENT FUNCTIONS INVOLVING CERTAIN LINEAR OPERATOR (Study on Differential Operators and Integral Operators in Univalent Function
reported previously a separation method for major serum lipoproteins (HDL, LDL, and very low density lipoprotein (VLDL)) but not HDL subfractions using a cation-exchange
If a language has the order of Subject-Object-Verb (at the deep level), then the language is postpositional, the genitive precedes the noun (at the surface
They include (1) indices for occupational sex segregation by industry and age, (2) index of sex-and-age dissimilarity for employment structure according to categories crossing
On the other hand, AgNORs with Ki67 positive cell have been many dot spots by the flat-elavated- with-depressed tumors, it was suggested that cell proliferative
What characterizes this stage is that prefectural boards of education as administrative agency, guide, 'assist and entrust study to schools and also have educational institutes
Husserl says that ‘ the meaning and the existential validity ’ (Sinn und Seinsgeltung) of the objec- tive world, including all kinds of objects, numbers, and the mathematical world
