エマージングウイルスのワクチン東京大学医科学研究所河岡義裕

(1)

エマージングウイルスの

エマジングウイルスの

ワクチン

東京大学医科学研究所

(2)

１．流行

２診断

３ウイルスの性質

２．診断

３．ウイルスの性質

４対策

４．対策

Pandemic 2009

(3)

2009

(4)

2009 pdmインフルエンザ感染者数・死亡者数

p

インフル

ンザ感染者数

死亡者数

総計米国その他その他メキシコカナダ英国死亡者数チリ _{オーストラリア}

(5)

H5N1 – 鳥由来キット 1 感度

_>

2 3 4 5 6

>

7 8 9 10

>

1 2 3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3 4 5 6 7 7 8 9 10 11 11 12 13 14 15 16 17 18 18 19 20

(6)

2009 pdm ウイルスキット感度

>

1 2 1 2 3 3 4 5 6 6 7 8 9 10 10 11 12 13 14 14 15 16 17 18 19 20

(7)

2009 pdm ウイルス – 患者検体

キット感度検体 1 検体 2 検体 3

>

1 3 検体 1 検体 2 検体 3 3 4 8 8 10 12 13 19

(8)

東京大学医科学研究所ウイスコンシン大学

Acknowledgements

Centers for Disease Control

東京大学医科学研究所堀本泰介五藤秀夫下島昌幸ウイスコンシン大学 David Warshauer Peter Shult 大阪府公衆衛生研究所

Wisconsin State Laboratory of Hygiene

Rebecca Brockman-Schneider James Gern 下島昌幸田川-坂井優子岩附-堀本研子木曽真紀八田正人滋賀医科大学小笠原誠渡辺登喜子大阪府公衆衛生研究所 _{M. Suresh} 高橋和郎木曽真紀野田岳志藤井健村本裕紀子伊藤睦美八田正人渡辺真治伊藤靖小笠原一誠喜田宏北海道大学今井正樹八田寧子伊藤睦美山田晋也角川学士村上晋 Gabi Neumann 新矢恭子牧野晶子神戸大学 Chengjun Li 喜宏迫田義博岡松正敏小澤真 Martha McGregor 村晋今井博貴田村大介坂部沙織新潟大学齋藤玲子鈴木宏永寿総合病院 Martha McGregor Rebecca Moritz Krisna Wells Anthony Hanson _高橋慧富山化学工業株式会社三田村敬子永寿総合病院 Anthony Hanson _高橋慧高野亮けいゆう病院菅谷憲夫富山化学工業株式会社第一三共株式会社古田要介山下誠

(9)

(10)

ウイルス増殖３日目新型季節性 ) 0 pfu/g 価 (Log 1 0 ルス価ウイル

(11)

新型季節性

非感染

(12)

鳥インフルエンザどこにいったのか？

鳥インフルエンザ、どこにいったのか？

(13)

高病原性鳥インフルエンザに感染した人

鳥インフルエンザは、どこにも、いっていない

鳥インフルンザは、どこにも、いっていない

(14)

インドネシアはH5N1ウイルス感染者の数が世界中で最も多い Azerbaijan Azerbaijan Bangladesh Cambodia jib i Djibouti Turkey Pakistan Thailand Myanmar Nigeria Pakistan インドネシア Iraq Lao PDR

(15)

ブタで新型ウイルスが出来るという仮説

Christoph Scholtissek Christoph Scholtissek

(16)

謝辞: インドネシアのブタにおけるH5N1ウイルス感染

ガ学 Chairul A. Nidom S f il D l 新矢恭子神戸大学アイルランガ大学 Syafril Daulay Didi Aswadi 東京大学静岡県立大学高野量山田晋弥坂井優子鈴木隆静岡県立大学坂井優子岩附研子村本裕紀子鈴木康夫中部大学

(17)

インドネシアのブタからの

H5N1ウイルスの分離

時郡農場・屠畜場の数サンプル数分離ウイルス数（分離率）時郡屠畜場の数サンプル数数（分離率） 2005年1月‐

2

8

167 35 (21%)

2005年2月

2

8

167 35 (21%)

2006年10月‐ 2006年10月‐ 2007年2月

4

6

235 17 ( 7%)

年月 2008年11月‐ 2009年4月

8

9

300 0 ( 0%)

14

23

702 52 ( 7.4%)

合計

(18)

HA遺伝子の解析ブタ分離株は3つの Clade 2.1.1 Clade 2.1.2 グループに分類された. Clade 2.1.3 H5N1 ウイルスは2005年から2007 H5N1 ウイルスは2005年から2007 年の間に、少なくとも 3回ブタに伝播した 3回ブタに伝播した.

(19)

2009 pdm ウイルスは人からブタに

伝播している

伝播している.

H5N1ウイルスと2009 pdm ウイルス間

でリアソータントが出来る可能性

(20)

(21)

2009 pdm ウイルスは人からブタに

伝播している

伝播している.

H5N1ウイルスと2009 pdm ウイルス間

でリアソータントが出来る可能性

(22)

H5N1ウイルスと2009 pdm ウイルス間のリアソータントの作製

M

H5N1 2009 d H5N1 2009 pdm M2発現細胞

(23)

結果

59コのウイルスの中,

32コが異なる遺伝子型の

ウイルスであった

H5N1 2009 pdm 2009 pdm

(24)

結果

人で伝播しやすい高病原性鳥

インフルンザウイルスが

生まれる可能性がある。

能性

あ。

H5N1 新型新型

(25)

新型インフルエンザ対策の目指すところ何もなかた場合何もしなかった場合 _{医療現場の破綻を防ぐ}

患

者

対策をした場合

者

数

対策をした場合

時間

厚生労働省

(26)

インフルエンザ対策

• ワクチン

ワクチン

• 抗インフルエンザ薬

衆衛生対策

• 公衆衛生対策

(27)

インフルエンザ: 抗インフルエンザ薬

リン酸オセルタミビル (タミフル®₎

リン酸オセルタミビル (タミフル )

(28)

抗インフルエンザ薬の効果６日目無治療６日目 ) １００万１千万無治療タミフル (30mg/kg) リレンザ (8mg/kg) 量 (個 ) 1000 １万１０万 CS-8958 (0.7mg/kg) NA 阻害剤, 第３相終了一回投与のみイルス 10 100 1000 T-705 (60mg/kg) 2009 pdm (H1N1) 季節性 (H1N1) 回投与のみ RNA 合成酵素阻害剤第２相終了ウイ ₁₀ 0 (H1N1) (H1N1) _{RNA 合成酵素阻害剤, 第２相終了}

(29)

(30)

(31)

季節性インフルエンザに感染し、タミフルで治療を

受けた小児の18％に、タミフルの効かないウイルス

(32)

(33)

タミフル耐性

B

型インフルエンザウイルスの

人から人

へ伝播

人から人

へ伝播

タミフル

Hatakeyama et al. JAMA, 2007

(34)

伝播

タミフル耐性タミフル耐性新型ウイルス

?

(35)

伝播

鼻洗浄液中のウイルス量タミフル感受性タミフル感受性大阪ベトナム /ml) g 10 pfu / タミフル耐性タミフル耐性量 (Lo g 大阪 _{タミフル耐性} ベトナム H275Y タミフル耐性 H275Y イルス量ウ

(36)

• ワクチン

ワクチン

• 抗インフルエンザ薬

衆衛生対策

• 公衆衛生対策

(37)

公衆衛生対策の効果米国ユタ州 489 例 489 例 35 入院 2 死亡 2 死亡 5月 6月 4月日本近畿地方 390 例中入院例なし 390 例中入院例なし 6月 5月

(38)

2009年関西で最初に流行したウイルスは消滅していた

(39)

• ワクチン

ワクチン

• 抗インフルエンザ薬

衆衛生対策

• 公衆衛生対策

(40)

半生インフルエンザウイルスとは－

増殖に必須なウイルス蛋白質を欠損しているため、細胞に度だけ感染してウイルス蛋白質を

細胞に一度だけ感染してウイルス蛋白質を

(41)

半生インフルエンザワクチン

不活化ワクチンの長所（安全性）と生ワクチンの長所（細胞性不活化ワクチンの長所（安全性）と生ワクチンの長所（細胞性ならびに粘膜免疫の誘導）を備え持つが、両ワクチンの短所（不活化ワクチン, 免疫原性の弱さ；生ワクチン, 病原性復帰の（不活化ワクチン, 免疫原性の弱さ；生ワクチン, 病原性復帰の可能性）をなくした。

(42)

半生ワクチンの作成

ウイルスRNA産生用プラスミド

半生ワクチンの作成

M M ウイルス蛋白質産生用プラスミド _{PNAS 96:9345-9350, 1999}

(43)

半生ワクチンの作成

Ｍ２ＫＯ半生ウイルス X X

(44)

半生ワクチンの作成

この半生ワクチン作製方法

の問題点

問題点

-- 作製手技が煩雑

実用化可能な半生ウイルス

産生系の確立

(45)

半生ワクチンの作成方法

Ｍ２ＫＯ半生ウイルス親株 X X M2 発現細胞

(46)

M2 knock-out インフルエンザウイルスの増殖

イン

ンザウイ

増殖

親細胞 _{M2 発現細胞} 個々に感染している細胞はあるが、プラックは検出できない

５ｘ１０

７

/ml

あるが、プラックは検出できない多段階増殖した。

(47)

免疫 X M2KO半生ウイルス M2KO半生ウイルス攻撃インフルエンザ

ＯＲ

(48)

攻撃後の生残率

) M2KO半生ワクチン群率 (% ) 生残率生コントロール群コントロル群攻撃後日数

(49)

攻撃後の生残率

) ワクチン群

高い感染防御効果を示す

率 (% )

高い感染防御効果を示す

半生インフルエンザ

生残率

_{ワクチンの作製は可能}

生コントロール群コントロル群攻撃後日数

(50)

東京大学医科学研究所

(51)

謝辞

National Institute of Allergy and Infectious Diseases

Kawaoka lab

Heinz Feldmann _{Shinji Watanabe}Gabriele Neumann Peter Halfmann

and Infectious Diseases

Rocky Mountain Laboratories

(52)

Ｅｂｏｌａｖｉｒｕｓ

ひも状

• ひも状

(53)

Ｅｂｏｌａｖｉｒｕｓ

出血熱

• 出血熱

• 90％の致死率

90％の致死率

(54)

(55)

(56)

特定の細胞でのみ増殖可能なエボラウイルス

- 増殖に不可欠な遺伝子を欠損 - 増殖に不可欠な遺伝子を欠損

変異エボラウイルス

(57)

特定の細胞でのみ増殖可能なエボラウイルス - 増殖に不可欠な遺伝子を欠損 - 増殖に不可欠な遺伝子を欠損 - 安全で、BSL4以外で使用可能

N

i

No virus

(58)

(59)

普通の細胞 _{VP30発現細胞}

(60)

Ebola ∆VP30 virusの増殖 6 8 1 0 /ml 4 6 Log 1 0 2 感染後日数 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 感染後日数を欠く変異ボウイは VP30 を欠く変異エボラウイルスはwild-typeのエボラウイルスと同様によく増殖する。

(61)

Ebola ∆VP30 virus Ebola virus

(62)

National Institute of Allergy and Infectious Diseases

R k M

t i L b

t i

Rocky Mountain Laboratories

Heinz Feldmann

(63)

(64)

免疫/攻撃

ＯＲ

攻撃 2 weeks 8 weeks 1 t _i ₂ d _i 攻撃 1st _imm. ₂nd _imm. 1000 MLD₅₀ Ebola virus

ΔVP30 Eb l i (1 107 _FFU) Ebola virus

(65)

ΔVP30 Ebola virus の効果

生

残

%

生

後

感染後日数

(66)

ΔVP30 Ebola virus の効果 – 攻撃後のウイルス量 g 10 ) 9 ス量 (lo g 5 7 ウイルス Not 3 5 ウ detected 0 1 C1 C2 C3 V1 V2 V3 無免疫免疫 C1 C2 C3 V1 V2 V3 無免疫免疫

(67)

(68)

免疫/攻撃

ＯＲ

21 days 42days 1 t _i ₂ d _i x 1st _imm. ₂nd _imm. 攻撃 1000 LD₅₀ Ebola virus

ΔVP30 Eb l i (1 107 _FFU) Ebola virus

(69)

ΔVP30 Ebola virus の効果 120 100 120 60 80 Vaccinated Control

生

残

40 Control

%

生

0 20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

感染後日数

(70)

エマージングウイルスの ワクチン 東京大学医科学研究所 河岡義裕