分子生物学的に Arthroderma vanbreuseghemii と同定された顔面白癬の２例：日本における報告例の集計

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(1)Jpn. J. Med. Mycol. Vol. 51, 193 − 198, 2010 ISSN 0916 − 4804. 原. 著. 分子生物学的に Arthroderma vanbreuseghemii と同定された顔面白癬の２例：日本における報告例の集計野. 口. 博. １. 光. 榮. 仁. ２. 子. 服. 部. ３. 真理子. 比留間. ３. 政太郎. １. のぐち皮ふ科. ２. 寺尾病院皮膚科. ３. 順天堂大学医学部附属練馬病院皮膚・アレルギー科. 〔受付：８月 24 日，2009 年，受理：８月６日，2010 年〕. 要. 旨. 症例１は 26 歳，女性，左頬部に 25 mm 大の落屑を伴う紅斑を認め，直接鏡検が陽性，顔面白癬と診断した．マイコセル寒天培地 25℃の培養で集落を分離し，巨大培養とスライド培養の形態学的特徴から Trichophyton mentagrophytes と同定した．さらにリボゾーム RNA 遺伝子（rDNA）の internal transcribed spacer 1（ITS 1）領域の DNA 塩基配列の解析の結果，分離株は Arthroderma vanbreuseghemii と同定された．飼いネコ９匹のヘアブラシ培養検査で，２匹からの分離株は A. vanbreuseghemii と同定され，ネコが感染源である可能性が示唆された．症例２は 11 歳，男児，左眼囲，鼻根部，左頬部の手掌大の紅斑落屑局面を認め，直接鏡検が陽性，顔面白癬と診断した．６週間前からステロイドを外用していた．分離株は A. vanbreuseghemii と同定された．飼いネコ２匹と飼いイヌ１匹より真菌培養を試みたが，同様の真菌は検出されなかった．2000 年以降，わが国で分子生物学的に A. vanbreuseghemii と同定された白癬の報告は自験例を含めて 16 件 25 例あったが，12 例は顔面に発生しており，11 例はステロイド外用歴があった．本菌は顔面白癬の原因菌の１つとして重要と考えた． Key words：Trichophyton mentagrophytes，Arthroderma vanbreuseghemii，顔面白癬（tinea faciei）. はじめに Trichophyton mentagrophytes は，交配試験により有性世代が見いだされた Arthroderma 属を含む複合菌種 1）（complex）である．近年，リボゾーム RNA 遺伝子（rDNA）の internal transcribed spacer 1（ITS 1）領域などの DNA 塩基配列により complex 内の菌種の同定が 2,3）可能になった．今回，DNA 塩基配列解析により同定された A. vanbreuseghemii による顔面白癬の２例を経験した．顔面白癬の用語は，2009 年に発表された皮膚真 4）菌症診断・治療ガイドラインでは病型としては採用されていないが，特異な臨床像を呈することが多く，誤診されやすいことに注目し，欧米の教科書では体部白癬と 5）は区別されているため，あえてこの診断名とした．わが国において分子生物学的に同定された A. vanbreuseghemii の報告例とその特徴をまとめた．別刷請求先：野口博光〒 861-3101 熊本県上益城郡嘉島町鯰 1834-1 のぐち皮ふ科. 症. 例. 症例１：26 歳，女性．初診：2008 年 10 月．主訴：左頬部の紅斑・落屑病変．家族歴・既往歴：特記すべきことなし．現病歴：４日前に左頬部の皮疹に気づき，当院を受診した．毎日，自宅の庭でネコ９匹にエサを与え，ときどき家に入れているという．家族は３名で，主に本人がエサを与えている．初診時現症：左頬部に 25 mm 大の，やや盛り上がった環状の落屑性紅斑を認めた．軽度のかゆみがある（Fig. 1）．真菌学的所見：落屑の直接鏡検で菌要素を認めた．分離菌のマイコセル寒天培地 25℃２週間目の培養は，白色絨毛状で中央は結節状に隆起し，辺縁は粉末状淡黄色を呈する集落（Fig. 2），スライド培養ではラクトフェノールに濃染する多数の円形の小分生子とらせん器官，棍棒状の大分生子を認め，T. mentagrophytes と同定した（Fig. 3）．ネコ９匹には脱毛斑などの病変はなかった.

(2) 194. Fig. 1. Clinical findings at first presentation in Case 1. Scaly erythema is seen on the left cheek.. Fig. 3. Slide culture finding of the specimen in Case 1. Numerous round microconidia, spiral organs and club-shaped macroconidia are observed. T. mentagrophytes was identified.. が，ヘアブラシ検査を行うと９匹中２匹に中央卵黄色，周囲は白色粉末状の集落を認め，巨大培地とスライド培養の形態学的特徴から T. mentagrophytes と同定した（Fig. 4a, b）．症例１と２匹のネコの分離株から DNA を抽出し， rDNA の ITS1 領域をプライマー，5'-GTAACAAGGT （T/C）TCCGT および 5'-CGTTCT- TCATCGATG を用いて PCR を行い，ダイレクトシーケンス法により 6） DNA 塩基配列を決定した．当該３分離株の DNA 塩基配列は同一であり，BLAST 検索（http://www.ncbi.nlm. nih.gov/）から A. vanbreuseghemii と同定した（ex type strain CBS 646.73（Accession 番号：Z98014）と合致）．治療および経過：塩酸テルビナフィンクリームの外用を左頬部に４週間施行したところ，紅斑，落屑が消失し菌は陰性化した．. 真菌誌. 第 51 巻. 第４号. 平成 22 年. Fig. 2. Two-week Mycosel agar medium culture finding of the organism isolated from Case 1. White villous colonies are seen with central nodular elevation and slightly yellowish powder at the periphery.. 症例２：11 歳，男児．初診：2009 年３月．主訴：左眼囲の紅斑．家族歴・既往歴：特記すべきことなし．現病歴：初診の６週間前に左上眼瞼の拇指頭大の紅斑を主訴に当院を受診したが，接触皮膚炎と診断され吉草酸酢酸プレドニゾロン軟膏を処方された．ネコ２匹，イヌ１匹を飼育している．ネコは自由に家を出入りでき，イヌは戸外に繋がれている．初診時現症：左眼囲，鼻根部，左頬部の手掌大の境界明瞭な紅斑落屑で，辺縁はやや隆起している（Fig. 5）．真菌学的所見：落屑の直接鏡検で菌要素を認めた．分離菌のマイコセル寒天培地 25℃２週間目の培養では，中央黄白色粉状，辺縁は一部放射状を呈する淡黄色綿毛状の集落の発育（Fig. 6），スライド培養ではラクトフェノールに濃染する多数の円形の小分生子とらせん器官を認め（Fig. 7），T. mentagrophytes と同定された．さらに分離株の ITS1 領域の DNA 塩基配列は，症例１の分離株のそれと一致し，A. vanbreuseghemii と同定された．飼いネコ２匹に脱毛斑などの病変はなく，ヘアブラシ培養検査も陰性であった．一方，飼いイヌの耳や鼻先には脱毛斑があったが，ヘアブラシ培養検査を行い分離した菌は，同様の遺伝子解析の結果，症例２の感染源ではなかった．治療および経過：イトラコナゾール 100 mg/日，１週間の内服と塩酸ブテナフィンクリームの外用を５週間行い，菌は陰性化し，症状は改善した．考. 察. T. mentagrophytes は分類学的に複数の菌種からなる complex を形成しており，有性世代が確認できれば，有 1）性世代の名称を用いるのが正式である．これまで種の同定は交配試験により決定してきたが，有性世代が確認できない場合の種の同定は T. mentagrophytes に留ま.

(3) Jpn. J. Med. Mycol. Vol. 51（No. 4）, 2010. 195. （ａ）. （ｂ）. Fig. 4.（ａ）Case 1 kept 9 stray cats in her home garden. The hairbrush culture was positive in two cats（yellow asterisk） . （ｂ）Hairbrush culture finding in Case 1. Colonies having a yellow egg yolk- like at the center and white powder at the periphery（yellow arrow）are seen. T. mentagrophytes was identified.. Fig. 5. Clinical findings at first presentation in Case 2. Palm-sized erythematous plaques are seen from the nasal base to the area around the left eye and on the left cheek.. 2）. る．近年，rDNA 遺伝子の ITS 1 領域やキチン合成酵 7）素（CHS: chitin synthase）などの遺伝子の塩基配列の類似度と complex 内の種の対比から，DNA 塩基配列により簡便的な同定および識別を行うことができるようになった．今回，我々は２症例と症例１のネコの分離株について原因菌を A. vanbreuseghemii と同定することができた．わが国で 2000 年以降に分子生物学的に同定された A. vanbreuseghemii による白癬の報告は，自験例を含み 25 8−22）例，男性８例，女性 17 例であった（Table 1）．平均. Fig. 6. Two-week Mycosel agar medium culture（25℃） findings of the organism isolated from Case 2. Colonies are seen with yellow-white powder at the center and partially-radiating, pale yellowish villus at the periphery.. 年齢は 25.4 歳で若年者に多く，部位は顔面が 12 例，四肢に８例，頭部３例，頚部３例，病型は体部白癬 12 例，顔面白癬 10 例，ケルスス禿瘡３例，白癬性毛瘡２例，手白癬２例であった．同定の手法は，rDNA の ITS 1 領域の塩基配列の解析によるものが 10 例，rDNA の ITS 1 領域の制限酵素分析（PCR-RFLP）によるものが 13 例， CHS 1 遺伝子の塩基配列の解析によるものが２例であった．また，交配試験によって菌種が同定されたものは２件，４症例であった．感染源については，菌が分離されネコが感染源である症例が３例，菌は分離されな.

(4) 196. 真菌誌. かったが，ネコからの感染疑いの症例が３件，６症例あった． T. mentagrophytes は，一般にげっ歯類の宿主に由来すると考えられる．そのため狩猟犬やネズミをとるネコ 23）に感染することがある．Drouot らのスイスにおけるペットの皮膚糸状菌調査では，140 匹のネコの中で M. canis が 32 匹（22.9％），T. mentagrophytes が 14 匹（10.0％）で，T. mentagrophytes はすべて A. vanbreuseghemii と同定されたが，M. canis が検出されたのは，すべて室内で飼っているネコ，A. vanbreuseghemii が検出されたのは，屋外で飼っているネコが 13 匹（92.9％）であった．症例１は屋外でネコを飼育してお. Table 1.. 第４号. 平成 22 年. り，ネコがげっ歯類から感染した可能性が考えられた．顔面白癬は，2009 年に発表された皮膚真菌症診断・治 4）療ガイドラインでは病型としては採用されていないが，外国の教科書では独立して記載されており，あえて体部白癬と区別する理由は，臨床像が典型的な環状輪状紅斑を呈さないことが多く，日光への曝露によって症状 24,25）が修飾され，誤診が多いからである．顔面白癬は外来患者 600 例中 13 例（2.2％）と頻度は少ないが，診断まで平均 55 日を要し，70％にステロイド外用剤を処方 26）したという報告もある．顔面白癬の原因菌は，T. rub24） rum，T. mentagrophytes，M. canis の頻度が高いが，わが国では 2001 年以降，格闘技選手の間に増加している T. tonsurans 感染症も顔面に生じる頻度が高く，注意 27）を要する．今回調べた分子生物学的に同定された A. vanbreuseghemii による白癬の 25 例中 12 例（48.0％）は顔面に発生しており，11 例（44.0％）にステロイド外用歴があった．A. vanbreuseghemii は，顔面白癬の原因菌の１つとして重要と考えた．また，ステロイド外用剤の誤用を行わないように，慎重に診療すべきであると考えた．文. Fig. 7. Slide culture finding of the specimen in Case 2. Numerous round microconidia and spiral organs are observed. T. mentagrophytes was identified.. 第 51 巻. 献. 1）高塩満男：皮膚糸状菌の性世代とそれを基とした Trichophyton mentagrophytes の分類. 西日皮膚 38: 703-728, 1976. 2）Makimura K, Mochizuki T, Hasegawa A, Uchida K, Sai to H, Yamaguchi H: Phylogenetic classification of Trichophyton mentagrophytes complex strains based on DNA sequences of nuclear ribosomal internal transcribed spacer 1 regions. J Clin Microbial 36: 2629-2633, 1998.. Japanese cases with tinea identified as Arthroderma vanbreuseghemii by molecular biology 8−22）.

(5) Jpn. J. Med. Mycol. Vol. 51（No. 4）, 2010. 3）Gräser Y, Scott J , Summerbell R: The new species concept in dermatophytes − a polyphasic approach. Mycopathologia 166: 239-256, 2008. 4）渡辺晋一, 望月隆, 五十棲健, 加藤卓朗, 清佳浩, 武藤正彦, 仲弥, 西本勝太郎, 比留間政太郎, 松田哲男：皮膚真菌症診断・治療ガイドライン. 日皮会誌 119: 851-862, 2009. 5）小川祐美, 比留間政太郎：白癬：診断と治療ガイドラインへの一つの提案. 真菌誌 50: 199-205, 2009. 6）日本薬局方解説書編集委員会編：第十五改正薬局方解説書. 遺伝子解析による微生物の迅速同定法, pp1580-1581, 廣川書店, 東京, 2006. 7）Kano R, Nakamura Y, Watari T, Watanabe S, Takahashi H, Tsujimoto H, Hasegawa A: Species-specific primers of chitin synthase 1 gene for the differentiation of the Trichophyton mentagrophytes complex. Mycoses 42: 71-74, 1999. 8）小林三保子, 比留間政太郎, 松下明子, 槙村浩一, 山口英世, 小川秀興：Arthroderma vanbreuseghemii による白癬の家族内感染例. 真菌誌 41（suppl 1）: 96, 2000. 9）畑康樹, 天谷雅行, 仲弥, 原田玲子, 西川武二：ハムスターおよびチンチラより感染した Trichophyton mentagrophytes によるケルスス禿瘡と体部白癬. 真菌誌 41: 269-273, 2000. 10）藤広満智子, 戸崎裕子, 望月隆, 河崎昌子：ステロイド外用を契機に引き起こされた Trichophyton asteroides の家族内感染. 真菌誌 42（suppl 1）: 95, 2001. 11）望月隆, 中出忠宏, 田邊洋, 阿部真也, 河崎昌子, 石崎宏：Arthroderma vanbreuseghemii による体部白癬の家族例. 皮膚の科学 1: 329-334, 2002. 12）小笠原弓恵, 武藤正彦, 小笠原万里枝, 槇村浩一, 比留間政太郎：チンチラより感染した Arthroderma vanbreuseghemii による体部白癬の１例. 西日皮膚 65： 158-161, 2003. 13）八木伸江, 瀧本玲子, 松下明子, 高森建二, 比留間政太郎, 槇村浩一：動物園勤務者に生じた Arthroderma vanbreuseghemii による体部白癬. 皮膚病診療 25: 657-660, 2003. 14）藤田繁, 望月隆：Arthroderma vanbreuseghemii 型の分子型を示した Trichophyton mentagrophytes による体部白癬の姉妹例. 臨皮 59: 1158-1160, 2005. 15）佐藤友隆, 森本亜玲, 勝正和, 三上襄, 加納塁, 松尾聿朗：Arthroderma vanbreuseghemii によるケルスス禿. 197. 瘡および体部白癬の１例．皮膚臨床 47: 453-456, 2005. 16）佐藤友隆, 川久保洋, 松尾聿朗, 天谷雅行, 長谷川太一, 三上襄：猫から感染した Arthroderma vanbreuseghemii による顔面白癬の１例．真菌誌 46（suppl 1） : 98, 2005. 17）佐藤友隆, 永尾圭介, 畑康樹, 谷川瑛子, 天谷雅行：５歳男児に生じた Arthroderma vanbreuseghemii によるケルスス禿瘡の１例．真菌誌 47（suppl 1） : 71, 2006. 18）竹之下秀雄, 望月隆：Arthroderma vanbreuseghemii の分子型を示した Trichophyton mentagrophytes による白癬性毛瘡の１例. 皮膚臨床 49: 1545-1548, 2007. 19）小川晴子, 渡邊晴二, 河崎昌子, 田邉洋, 望月隆, 安澤数史, 刀川信幸：Trichophyton mentagrophytes（分子型 Arthroderma vanbreuseghemii）による白癬菌性毛瘡の１例. 日皮会誌 117：706, 2007. 20）竹之下秀雄, 望月隆：Arthroderma vanbreuseghemii の分子型を示した Trichophyton mentagrophytes による体部白癬の１例. 皮膚臨床 50: 943-947, 2008. 21）池田香織, 小田香織, 澤本学, 熊本貴之, 磯貝理恵子, 山田秀和：チンチラから感染したと思われる体部白癬の１例. 皮膚の科学 7: 75, 2008. 22）今井慎, 張財源, 坂元花景, 小西啓介, 安澤数史, 望月隆: Arthroderma vanbreuseghemii による体部白癬の１例. 皮膚の科学 7: 726, 2008. 23）Drouot S, Mignon B, Fratti M, Roosje P, Monod M: Pet as the main source of two zoonotic species of the Tr ichophyton mentagrophytes complex in Switzerland, Arthroderma vanbreuseghemii and Arthroderma benhamiae. Vet Dermatol 20: 13-18, 2008. 24）Hay RJ , Moore MK: Tinea faciei . In Rookʼs Textbook of Dermatology 8th ed（Burns T, Breathnach S, Cox N, Griffins C ed） , vol 2. pp.36. 29-36. 30, Blackwell Science, Oxford, 2010. 25）James WD, Berger T, Elston D: Desease Resulting from Fungi and Yeasts. In Andrewsʼ Diseases of the Skin 10th ed, pp297-332, W.B. Saunders, Philadelphia, 2006. 26）Starova A, Stefannova MB, Skerlev M: Tinea Faciei − Hypo Diagnosed Facial Dermatoses. Maced J Med Sci 3: 27-31, 2010. 27）吉田暁子, 白木祐美, 比留間政太郎：顔面白癬. 皮膚病診療 28: 155-158, 2006..

(6) 198. 真菌誌. 第 51 巻. 第４号. 平成 22 年. Review of Two Japanese Cases with Tinea Faciei Identified by Molecular Biological Techniques as Arthroderma vanbreuseghemii 1. 2. 3. 3. Hiromitsu Noguchi , Hitoko Sakae , Mariko Hattori , Masataro Hiruma 1. Noguchi Dermatology Clinic. 2. Terao Hospital, Division of Dermatology. 3. Department of Dermatology and Allergology, Juntendo University Nerima Hospital. A 26-year-old female（Case 1）presented with scaly erythema on the left cheek. Positive direct microscopic examination results indicated a diagnosis of tinea faciei. Colonies were isolated after incubation on Mycosel agar medium. Trichophyton mentagrophytes was morphologically identified based on giant colony formation and slide culture. Furthermore, nucleotide sequence analysis of the internal transcribed spacer 1（ITS1）region of the rDNA gene identified Arthroderma vanbreuseghemii. The patient had 9 cats in her home, and similar colonies were isolated from 2 of these 9 cats by the hairbrush culture method. The isolated organism was identified as A. vanbreuseghemii, suggesting the cats to be the source of infection. An 11-year-old boy（Case 2）had palm-sized erythematous plaques from the nasal base to the area around the left eye and on the left cheek. Positive direct microscopic examination results indicated a diagnosis of tinea faciei. The patient had been treated with topical steroids for 6 weeks before the onset of these manifestations. The isolated organism was identified as A. vanbreuseghemii. His dog and two cats were tested but did not appear to be the source of infection. Since 2000, there have been 25 cases of tinea in Japan, identified as A. vanbreuseghemii by molecular biological techniques. Twelve cases had tinea on the face, and 11 had used topical steroids. A. vanbreuseghemii was found to be one of the important pathogens in tinea faciei..

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