松 田 知 夫

結核菌の各種抗結核剤に対する耐性に関する研究

第 2 編

肺結核患者のS.M.治療と耐性獲得に就て

金沢大学結核研究所細菌免疫部（主任：柿下教授）

松 田 知 夫 ZｱomooM"s,McIcU

（受付昭和29年3月1日）

TomooMatsuda:‑STUDIESONTHERESISTANCEOFTUBERCLEBACILLI AGAINSTTHEVARIOUSKINDOFHEMOTHERAPEUTICAS．Part11.

RelationbetweenDevelopmentoftheStreptomycin‑resistant TubercleBacilliandStreptomycin‑treatmentProceduresagainst

PulmonalTuberculousPatients.

TheDepartmentofBacteriologyandlmmunology, ResearchlnstituteofTuberculosis,KanazawaUniversity.

(Director:ProfM・Kakishita) (ReceivedfOrPublication,March,1,1954)

緒 言 結核菌を

を含む 私 は 先 に 試 験 管 内 実 験 に に よ り ， 結 核 菌 を Streptomycin(以下S.M．と略記）を含む Kirchner液体培地に継代培養することにより，

容易にS.M.耐性となることを証明したが1), 臨床上肺結核患者のS・M.治療を行うに当って も比較的早期にS.M・耐性の結核菌が出現し爾 後 の 治 療 上 大 き な 障 碍 と な っ て い る こ と は 周 知

の事実である．之に対してその耐性の出現を遅 延せしむる方法として，併用療法2)3)4)，又は間 歌療法5)6)7〕等が提唱されている．

私はS.M.治療中の肺結核患者30例に対し，

S.M.耐性を測定すると共にその投与方法の検 討をなし，聯か成績を得たのでここに報告す

る．

実験材料並に実験方法

金沢市民病院に入院中の肺結榎患者でS.M・治療を原液(KHgPO430g,味の素10g,蒸溜水1000cc) 行える者の内喀渓中結核菌陽性のもの30名を選び，そを200cc宛5個のコルベンに分注し,100oC15分間，

の喀渓を各種の淵妾にS.M.を含む小川氏3%培地8)に3回滅菌し，之にDihydrostreptomycinを滅菌蒸溜水 培養して，直接法により結核菌のS.M・耐性を測定しに潮解し，上記の原液に対し,0,18,60,600,6000 た ． γ / c c と な る 様 に 加 え る ． 次 に こ の 各 コ ル ベ ン に 2 % マ

培地の調製:S・M.を鶏卵培地に添加し，之を加熱ブヒツトグリンとグリセリンを夫々3%に含む全卵液 凝固せしめる場合に,DihydrOstreptomycinを用L,る400ccを加え充分混和して中試験管に6cc宛分注し，

と吸着並に破壊によりその効力は％に減少する9 と云85｡〜88｡C40分間凝固滅菌1回を行う．以上の方法で われている。そこで次の様にして培地を作成した．出来た塘地のDihydrostreptOmycinの力価は夫々0,

松 田 58

−

3 , 1 0 , 1 0 0 , 1 0 0 0 Y / c c で あ る ． は ， 菌 の 発 育 が S ・ M . を 含 ま ぬ 対 照 の 培 地 と 略 , 々 同 程 培養及び判定:早朝の喀渓に8%NaOHを等量加え度に発育せるものの内S.M・を最も高濃度に含む試験 充分均等化したものを，毛細管ピペットで，各濃度の管の濃度を以て菌の耐性度（完全耐性）を表わした．

S・M.を含む試験管に2滴宛培養した．判定に当って

実 験 成 績

S.M.を投与せる肺結核患者30名の喀疾中結即ち1,0007又はそれ以上の耐性を示すもの7 核菌のS.M・に対する耐性度とS・M.投与方法例(23.3%),1007耐性のもの7例(23.3%), は第1表に示す通りである.10γ耐性のもの4例(13.3%),37又はそれ以下

第1表S・M.治療患者の治療方法と喀疲中の結核菌のS.M・感受性

１１

掴用壜

−−

20g

580gl'1'bl4

一

(0.1)2,.6g!

' ' 8 1

宙曼１

氏名

一

W.M、

室温有

入 院 前 入 院 後 の 抗 結 稜 剤 に よ る 治 療 法

一一一一一一一一■ー 申 宇 一

S・M.室洞内注入

一一一一一一一

Tb,9.42gl0.M.19.2590.M.吸入I0．M.室洞内注^入 2 0．M．有

S.M、309 PAS6ケ月

INAH1ケ月^INAH12I

S・M.(0.25)269

一 569 ＞

1,000Y

3 K､A、有

O､､y 3.5910.^yの一

￨PAS(麦鴬)z;f:￨msT隔週脳gIS.M・(2/w)2891 ￨s･M･(0.5)59nPAS704gl

I 0 ． M . 吸 入 S.M.(2/w)20glINAH6､09

0 ． M ． 吸 入

53₉ ＞ 1,000Y

4 N､M、有

S・M、20 PAS400 0．M.100

ｇｇｇ

0．M.40．590.M.吸入 ²⁰9 ＞

1,000Y

5 0．H、 有

PAS600 T b］ 4.5 INAH1.7

ｇｇｇ _{T b}

1 1.7

INAH6.8 gl

l

gl

S

. M . ( 2 / w ) P A S 9 1 g l l N A H 3 9 . 2 g l 竺

IPAS2,25791

Z上入 ₄₃

9 ＞ 1,000γ 7 K､K、有_PAS2,500^S・M、25

ｇｇ S・M.(2/w)40gi 0 ． M ． 3 6 09

65₉ ＞ 1,000γ 8 M､K、有 ￨S・M.(2/w)20

0 ． M ． 吸 入

9 20₉ 100_Y

ゞ

91K.G、

I

Ｓ−−ｇｇ８０１０６．ＳＭＡＳＰ

互国亘魑

2 I " ￨ = ￨ ￨

.M・(0.5)3.5glPAS‐

￨0.M.（菱驚)譜鈴2篭Ⅲ肌

S・M(0.5)59IS・M.(2/w)1291

￨S.M.(0.5)69

識淵繼'淵親

￨'1'b'

8gilNAH

( 麦 蕊 ) 壷 肺 ．Ⅲ 、

蟇 二 葉

0．M．1209

昭一Ｍ一超一妬一Ⅳ

，．S･

−

K.T、

有一有

Y､M、有

1．K．有

￨ゞ

H､M、

ｇｇ

− ００４０３

１

●﹃．︲一ＭＳ・ＡＳＰ

0．M．1959

撒面寵撒豆(一週交代)篭l

s､M､'0.句10可1FAS955gl−s.■M.b(0一一.512一3g一lls.M.{2/wl8glS2M Tb,8．9輿I

.(0.5一i17"IS.M.(1.0)29IIINAla133g S.M.(1.0)7gIIS.M.(2/w)一洞

（交代

一一一一一一一今一一一÷一一十一一一

￨0.M.25.5gllNAH ）11.2gllNAH18.2gIPAS240g^{1691 −一一一一一一−一} IS.M.(2/w)189

INAH31.85gIPAS8609I

S.M・(1.0)69S.M.(0.5)3491 I0．M.89 IS.M・(1.0)15gIS.M.(2/w)8

− 寺 一 一 一 一 一 一 一 一 ■ − ■ ̲ ＝ 寺 = 一 一 − − − − 1 己 一

INAH6.95gITb,6.21gl

￨s･M.(Z/W）ろg−−−−＝

409

■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■

629

23₉

189

−

78．6₉ 100γ

−

100γ

−

10Y

■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■

10γ

■ ■ I ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■

10Y

103glO.M.206.bg

−−今−−−−−−−−

578gITb,4.77g

卜01 S・M.(U､b)11

I

3Y>

．●

S､T、 IPAS

註:S.M(2/w)10gは1週2g投与で総量10gの略．

s.M・(1.0)10gは毎日1g投与で総量10gの略．

のもの2例,PAS並にo‑Aminophenol(O.M.) と併用せるもの1例であった.100γ耐性の7例 では単独療法2例,PASとの併用例1例（但し S・M・の総量33g中13gは単独投与である), O.M.の粉末吸入法と併用せるものl例，入院 前の投与方法の不明のもの3例であった.107 特性のもの4例中INAH併用1例(総量23g中 7gは単独投与),PASとの併用2例，単独投与 l例であった．一方3γ以下の感受性を示した もの12例には単独投与例はなく,PAS併用例 2例（内l例はINAH併用の時期あり.),O.M.

併用例3例，入院前の投与方法の不明のもの7 例となっている．

更に以上の各例につきS.M.と同時にPAS並 にO.M・の耐性を測定したが,PASに対しては S.M.に1,000γの耐性を示したものの内に107 耐性を示したものl例米を認めたのみで他は1γ 以下であった.O．M.に対しては全例1γ以下 であって耐性菌を認めなかった．

のもの12例(40%)となっている．

第2表はS.M.の総使用量と耐性度との関係 を示すもので，之から 2検定法10〕により総使 用量により耐性の出現に差異ありや否やを推計 学的に調べた所,"2=0.1231P=0.95となり

全く有意の差は認められなかった．

第2表S.M.使用量と耐性との関係

Jgl502

6 5 7 5 3 4

18 12 耐 性 例

感 性 例

此の表は第1表より求めたものである．

次に耐性度別にそのS・M.治療方法を検討す ると,1,0007耐性例7例中S.M.単独に投与せ るもの4例（此の内他の抗結核剤との併用期間 あるも比較的長期間にわたり単独投与を行える ものも含む.)，入院前のS.M.投与方法の不明

＊此の菌株は患者名を取り荒永株と命名した．

19K､K、有 ^S・M、259 0 ． M ． 1 2 3g一

￨S・M.(2/w)2091 ^{459 3Y}

20N､H、有 459

,5009^{INAH299 459 3Y}

21Y･Y 有 ^IS・M.（0.5)10gITbl22.8591 0．M． 224.5質

S・M.(z/w)1uglllNA且ZZ.ごOg一

I 0 ． M ． 吸 入 ^20面ロ 3Y>

22 1．H 有 _{P A S 4 8}^S・M、29₉PAS304glINA且0.5glPASZ./49

S・M.(2/w)129 ^{149 3Y}

23T､M、有 PAS7ケ月^S・M、609

INAH33,69l0.M･789

一一一

Tb, 15．25₉ ⁶⁰⁹ 3Y>

24 Y･H 有 S,M.(2/w)1091 S.M.(2/w)30glllNAIJ^:10．49

0 ． M . 1 0 2 9 1 1 0 ． M ． 吸 入 I U . M ､ b / ・ b g l U ． M ･ 吸 入 409 3Y>

25 1．M 有 ^PAS200』旦処(2ﾉw総合鷲(一週交代）^{P A S} zDglU．Ⅳ1．吸八

280gi ^{209 3Y}

26M､H、有 _PAS2^S・M･80g型塑−−聖

,000glNAH15g ⁸⁰⁹ 3Y>

27A・I． 有 IPAS88Uglu・皿 0

･zbglb.M･（U､oノOUg

M ・ 吸 入 ⁶⁰⁹ 3Y>

28N､H、有 _PAS100^S・M、13gl2・M･(2/w)16g1.1.bL上l･Dg ZITJAg400g rlUmmg

PAS350₉

29₉ 3Y>

29M､H、有 S.M、7591型皇型1･bg

PAS1,000gI0.M.吸入 ⁷⁶⁹ 3Y>

9O、 Ⅵ､120₉0 y

60 松 田

総 括 並 に 考 按 上記の実験成績で10γ以上のものを耐性株と

すれば1])12)，耐性例は18例(60%)で感性例は 12例(40%)となり，耐性18例中7例(38.8%) が1,000γ以上の高度耐性を示し，之は八木13)等 の成績と大体一致している．

次に第2表を推計学的に検定した成績からは S.M.耐性の出現はS.M.の使用量により変る とは云えない．之に就て富士]4)は同様な実験成 績を同じ方法で検定しS・M.使用量の増加に伴 い耐性菌の出現が増加すると云っている．然し この場合は同一の投与方法を行ったもののみよ り得た成績であり，私の場合は種々の投与方法 のものが混合しているので此の様な結果の相異 は当然起り得ることである．即ち，耐性菌の出 現にはS.M.の投与方法が強く影響すると云え

る．

そこでS.M.の投与方法と耐性との関係を見 ると，私の成績では例数が少い上に，入院前の 投与方法に明確を欠くものが相当あるので決定 的なことは云えないが，投与方法の明確なもの のみについて述べると前述の通りであるが，之 を更に投与方法別に比較して見ると(第3表)，

単独投与例7例中1,000γ耐性のもの4例,1007 耐性のもの2例，107耐性のもの1例で感受性 菌は認められなかった．然し,PASとの併用療

第3表S.M.投与方法と耐性度の関係

DOOYl100Yl10

４︐﹈０些脈Ｍ如露ＰＯＳＡＯＰ牢ｆ０１１１４１１井墹寮

皿 1 凸

＊数字は例数を表わす．

法を行つたもの6例については1,0007耐性のも のは見られず1007耐性のもの1例,10γ耐性の もの2例，3γ以下のもの2例であり,O．M.を 併用せるものでも4例中1例のみ100γ耐性で他 は3γ以下であった．又PASとO.M・で併用療 法を行った1例に1,000γ耐性を示したものがあ った．INAHと併用せるものはl例のみで之は 107耐性であった．

以上で明かな如く,PAS併用例で耐性を示 したものはS.M.単独投与例よりはるかに少か つたのは多くの人が強調している処と一致す る．又O.M.併用例についても高度耐性例を認 めなかったことは,O.M・も又結核菌のS・M.

耐性獲得防止上相当有効な様に思われる．

肇 同間

1007耐性のもの7例(23.3%),10γ耐性のもの 4例（13.3％）であった．

2)S.M.耐性出現の関係は,S.M.とPAS 或は0．M.との併用例の方がS.M・単独投与例 に比し耐性獲得を遅延させる様である．

結 S.M.治療を行った肺結核患者30例につき，

その喀疾中の結核菌のS・M.耐性を測定し次の 成績を得た．

1）全例中耐性を示したものは18例（60％）

で，その内1,000r耐性のもの7例(23.3%),

SuInmary

Streptomycin‑resistanceexaminationofotherantituberculosisagents,suchasPAS tuberclebacilliwascarriedoutupontheando‑Aminophenol,anditwasfoundthat sputaof30pulmonaltuberculouspatients inl8cases,or60%,thebacilliofthe whohadbeeneithertreatedwithstrepto‑sputawerefoundtoberesistantto mycinaloneorwithstreptomycinplusstreptomycin:in7ofthel8cases,the

vantageoverthetreatmentwithstrepto‑

mycinaloneineffbctinglesserdegreeof thedevelopmentofstreptomycin‑resistant tuberclebacilli.

bacilliwereprovedtoberesistantto 1,0007/mlstreptomycin,andin7tolOO 7/mlandinremind4tolO7/ml.

Further,thepresentworkhasshown thatthecombinationtherapyhasanad‑

文 1）松田知夫：金沢大学結核研究所年報，10(下)，

61,1952.2)Dunner,E.,etal.:Diseasesof Chest.,16(6),661,1949．3)Tempel:Am.

Rev.ofTuber.,62,101,1950．4)Lewis:

Diseasesofchest.,19,566,1950.5)Bogen, E､:DiseasesofChest.,16(6),176,1949．6) james,L.A.etalbAm・Rev・ofTuber.,63．275,

献

Tuber.,63295,1951．8)小川辰次：結核菌 検索の基礎と応用，保健同人社．9）小川政敏：

日本臨床結核，11（9），563,1952.10）崎野 滋樹：統計解析，医学書院．11)Howiett,etal.:

Am,Rev.ofTuber.,56,529,1947.12)砂原 茂一：日本医師会雑誌，30（3），124,1953.

13）八木忠男：医療，5（8），31，1951．14）

富士山：日本臨床結核，12（9），648,1953.

7)TemPel,C.w・etal.:Am.Rev・of 1951.

？