清蛋白 及 す影 響 女性 投 与

金沢大学 十全 医学会 雑誌 第91巻 第⁴号 6 71 ^‑6 8 3 (1 9 8 2) ^{67 1}

女性 ^{に お け る e str og e n} 投与^{お よ び Str e S S の}

血清 蛋 白 ^に及 ^ぼす影響

金沢 大学 医学 部産 科婦 人科 学 講座 ( 主 任^: 西田悦 郎 教授)

橋 本 茂

(昭和^{5 7}年3 月2 9日受 付)

閉経 後 女性^{に つ いて,e Str Oge n と}血 清 蛋 白分 画と の関 連性を検 索す る目 的で,4 5 ^〜6 5歳の 2 0 名^の閉 経後女性^に, 結合 型e str oge n(E)を 2 1 日間経口投 与し, 血清の約4 0 種^の蛋 白分 画を測 定し た̀ 血 清 蛋自 分画測 定^{には, mic r o sin}gl^{e r ad ial im m u n od i ffu sio n} 法が用^いら れ た^･ E 投与 後, 増 加す る も の と し て は, 町 A P

‑

α2

‑ A P ^‑gl yc op^{r o}tein は E 投 与 後 急 増し た■ 軽 度上昇す る も^ので は, 町 1ipop^{r o}t_ein, a2

‑ H S ^‑ glyc o^‑

p^{r ote}in な ど が あ^った^･ E 投 与 後, 減 少す る も の と し て は, 町 a Cid gl yc op^{r o}tein, hap togl ob in,β^‑1ip^o･ pr oteiⁿ, C Is ^‑inh ib ito r,he m ope xin, a ntithr o mbinIII が あ り, 軽 度 減 少す る も の で は, p^{r e a}lb um in･ Clq

‑C O mPO n e nt_,P^2‑ glyc opr ot_ein I ,r etin ol ^‑b ind ing ^‑p^{r O}tein な ど があっ た‑ ほ と ん ど全 く変 化し な^いも の に, albu min,im m u n oglobulin G, C 5 ^‑ C O mp^{O n e n}t, α 2^‑ m a C r Oglobulin, α 1B ^‑ glyc op^{r o}teiⁿ そ の他 が あ^っ た. 次^いで, 婦 人 科手 術が行な わ れ た 5 名^{に つ い}て, 手術 前 臥 手 術終了直後, 第1 , 3, 5, 7,

1 4, 3 0病日^の血 清蛋 白 分 画^の変 動を検 討し た^･ 手術 後の血 清蛋 白 分画 濃 度^の変 動^によって 3 群す な わ ち,

増加 瓢 減 少群^, 不 変群に分け ら れ た･ ま た, 増 加群は そ の増 加pat te r n に よって さ らに急増 群と綬 徐増 加 辞^の2 ^{つ に}分け ら れ た. 急 増群に属す る も の は, ･α1

‑

a ntitry p^sin, 町 a Cid glyc opr otein, hap t^oglobin,

c e r ulopla s min で あ り, これ ら は手 術後 第1 病日 に は か な り急増^し, 第3 ^〜 5 病日に p^{e a}k と な り, そ^の後

漸減し た^. 綬 徐 増 加 群^に属す る も の は, β

‑

inhibito r で あ り, これ ら は第¹病日^には急 激な上 昇を せず, 緩 徐^に上昇し て, 第3 ^〜 7病日に pe ak に達 し, そ の後漸 減し た. 減 少群で は, 第1 病日 で は術 前^に比し著 変な く, そ^の後 低 下し, 第3 ^〜 5 病日 で,

最低値と な り, 第7病日には術 前値^に復し た. 不 変 群^には, albu min, im m u n oglobulin G, A･ M, ^･αl

‑

1i p^op^{r o}tein,P2

r

て検 討さ れ, ま た, E 投 与と手 術時との血清蛋白 分 画の変 動^{に つ い}て も比較 検 討さ れ た^･

Key ^{w o r}ds s e r u m p^{r o}tein, e Str Og^{e n}, Op^{e r a}tio n _,fe m ale, p^{O S}t m e n Op^{a u S e}

女性^{に おいてe str o}ge n は中枢や神 経 系な どに対し て 種^{々 の}重要な機 能 的役 割を演じ て^いる が, ま た, 性 器

およ び性 器外e xtr age nital の各種 組 織^{に お}け る形 態 学 的変化^に関連し て大き な 生物学 的 作用 を有して いる^.

女性の思春期^{に お}け る 2

●

の著し^い形態 学的 変 化^の多く^の部分 は卵 巣ま た は胎 盤

からのe str oge n の作用に依存し て^いる^{. 一} 方, 閉経 後 女性の性 器^およ びe xtr age nitalの形 態学 的退行 性変 化 は, e Str Oge n の減 少^に由来す る面が大き^い.

これ らe str oge n が組 織^の形態 学 的変 化^いわば蛋白代 謝の変 動を惹 起^せし め る機 構^の詳細^{に つ い}て は,近年,

種^々検 討が進め ら れ て^いる が, な^お明ら か で ない面が 極^めて多^い.

e str og^{e n} は その ta rgeto rgan と し て^の子宮筋 層,子 宮 内膜, 腫上皮な ど^に特 異な作用 を有し, そ れ らの組 織^{に お}け るe str og^{e n} に対す るr e c ep to rとの関 連性も重 要な問 題^であ る が,, 他 方^, e Str Og^{e n} は全 身 的^に皮 膚,

血管 壁^, 毛髪な ど^の結 合組 織^にも 重要な作用 を 呈 し て

E ffe cts of e str og^{e n a n}d stre s s o n s e r u rn p^{r O}tein in w o m e n･ S hi_g^{e r u} H a shim oto,

Dep^{a r}tm ent of O bstet^ric s a nd G _yn e c olog y

(

)

Cin e_. Ka n aza w a U nive r si_{t y}.

6 7 2

いる¹⁾.

わ れ わ れ は, これ ら の問題の ^一端を窺^い知る目 的で,

e str og^{e n} 投与 時の血 清 中の各 種 蛋 白分 画の変 動^{に つ い} て検 索を加え た. あ る^{ホ ル モ ン}の影 響の検 討には, 該 ホル モ ンの欠乏 状 態の対 象^に該ホル モ ンを投 与し て,

そ の影 響の有無を検す る の が ^一般 的に適切な方 法であ る^. わ れ わ れ は, 閉 経 後 女 性を対 象と し て, これに e str og^{e n} を投 与し, そ の場 合の 血清 蛋 白 分画^の変 動を 約4 0穫^の蛋 白分 画^{に つ い}て検 索し,各々 の変 動を数種 の_pat te r n に分類し, e Str Oge n の血 清 蛋 白 分画^に及ぼ す作用^{に つ い}て検 討を加え た.

e str oge n 投 与の全 身 面^に対す る作 用と して は, さ ら にe str oge n 投 与が ^一種のStr e S Sと して全 身 的に作用す る という^一 面があ げら れ る.動 物^に e str oge n を大 量長 期 投 与す る と,副 腎皮 質^は肥大し,全 身 的に はc o rtis ol を投 与し た場合^に類似し た状 態を 示 す に 至 る.

女 性に お^いて も,性 周期や妊 娠の存在は全 身 的str e s s

と し て作 用し,内分 泌 面で はe str oge n の作 用が関 与し ている と さ れ, 閉経は, あ る面で はe str og^{e n に}よ る全

身的str e s s か ら の開放と^いう 面もある と み な さ れ て^い

る.

種々 のStr e S Sの加わった場 合の 血清蛋 白 分 画の変動

に つ いて は種々 の報 告が な さ れ て^いる が^2ト7), わ れ わ れ は さ らに ∴婦 人科 領域^にお け る手術 的str e s sの加わっ

た場 合の血 清 蛋

白

p^at te r n とc o rtis ol の変 動pat te rn と を 比較し,さ ら に,

Str e S S 時 副 腎 皮 質か ら分 泌さ れ, かつ, e Str Oge n の pr e c u r s o r である副 腎 性a ndr og^{e n,} とく^にdeh_ydr o^･ epia ndr o ste r o n e(D H A), D H A s ulfate(D H A ^‑S),

11 ^‑de o xy ^‑1 7 ^‑keto ^‑ Ste r Oid (1 1 ^‑ de o xy ^,1 7 ^‑ K S) な ど の婦人 科 手術 時にお け る変 動patte rn ⁸ト^{1 2})な

ど と比

較

閉 経後 女 性^にお け るe str og^{e n}(E) 投 与の血 清蛋 白 分 画の変 動に及ぼ す影響の検 索で は, と くに疾 患を認め ない4 5^〜6 5 歳の閉 経後 女 性2 0名を選び, 結 合 塾E を 1 日 1^･2 5 m g を 2 1 日間 経口投 与し, 投 与 第7, 1 4,2 1 日 の血 清蛋 白 分 画濃 度を測 定し, 投与 前の債と 比較検 討し た^. 採 血は各1 0ml 採 血し, 血 清を分離し た.

血 清 蛋 白分 画濃 度測 定に供す る血 清^は, 測 定ま で ^‑ 80⁰C に保 存さ れ, 他^{の 一}部は総 蛋 白 濃 度 測 定, 血清

e str ad iol(E D),triglyc e ride 値, Ca, P 憶 測定^に供し た.

血清 蛋 白分 画は, 4 0 の分 画につ いて測 定さ れ, 測定 法と し て は, 微量 放射 免 疫 拡 散 法^mic r o single r adial im m u n odifFu sio n (M S R I D) 法^{1 3)l ▲)}が用^い ら れ た. 本

本

法

､

板

の作 製には, 特 製の流し型 m o ul d が使用 さ れ た. すな わ ち,6^･5×1 0 c m の2枚の ガ ラス板^の間に_,厚さ1 _{m m} で, 底辺6^･5 c m, 高さ 1 0^{c m}, わ く巾1 c m の U 字型

のア^ルミ^ニ ウ^ム製わ く fr a m e を挟み, ク リップで固定 し て流し型が作ら れ た^.

この流し型に下記の如き,2 % ^aga r o s e液を注入 牒

固し て, 抗 体 寒天板^{a n}tibody aga r plate が作製さ れ た･ aga r O S e(A ^‑3 7, 半井 化学 薬 品K^.K^.) は_, 0.5 M ba rb itu r ate bulfe r(pH 8^･6, イ オン強 度J^L=0.05) に

2 % の濃度^に溶

解

抗 血 清が混 和さ れ た. 抗 血 清の 量 は, 蛋 白分画^によ り 異な り 0^.03 ^〜0.4 ml であった.

凝 固し た抗 体 寒天板は, わ く か ら はずさ れ, 3 2^.5× 2 0 m m の長 方 形に切ら れ, そ れに6つ穴があけ ら れ,

2 つ は標 準 血 清 ( 抗 原) 用^, 他は被検 血 清 用とさ れ た.

穴の直径は ^一般には 1 m m で, これに0^.4J̀1 の被検血 清が注入 さ れ た. 穴 あけ^には特 製の 注射 針を 剛⁾, 血 清 注入 に は 1 0_jLI H a milto n mic r o sy^ringeと 反復分注 帯r epe atingd ispe n s e r(D ispe n s e rP B 60 0, Ha milto n

Co.)が用^いら れ た. 血 清 蛋 白分 画 濃度^{の 一}般^に低^いも の の場合には穴の直 径^{を 3 m m} と し,注入 血清量 を10 J^Ll に ま で増 加し た( 分 画と し て は, C R P,IgD, Cl_q,

CIs, S P 3 な ど であ^っ た.).

標 準血 清と し て は,多 用 途日本 人標 準 血 清であるQS 血 清 (^{He chst ‑}Jap^.Co^.) が 用^いら れ た^. 本 血清は,

数 千 人の 正常 人 新鮮 血 清を_po ol し, これ を微 量づつア ンプル内で凍 結 乾燥し,

‑8 0⁰C で保存さ れ た もの で_,こ れ を 用に応じ て,

一 定量 の,

一般^には 5 0_〟1 の蒸留水^に 溶 解し,1 0 0% 標 準血 清と し た^. ま た, 同時^に, 倍^の血 清 濃 度の 2 0 0% 標 準 血 清を作 製し,両者を標 準血清とし て寒天板の 2 つ の穴に時人 し た.

被検 血 清 注入後, 湿 箱 中^に3 日間7 2 時 間静置し た.

この間に反 応は終 点に達し た^. 次^{い で}, さ ら^に3 日間 7 2 時 間^の間, 脱蛋白液^である 0^.0 2 M , pH 8^.0 の ホウ 酸 緩 衝 生^理的 食 塩水^{bo r ate ‑buffe r ed s alin e(0.85 %} NaC l) ^に浸し た後, 寒天板を蒸 留 水^で湿し た濾紙で被

い

, そ の ま ま放 置し て乾 燥さ せ た^.

乾 燥 後, 寒天板を^{コ マ} ジ ^ー プ リ リ ア^ント ブ^ルー Co o m a s sie brillia ntblu e (G ^‑ 25 0, 半 井化 学薬品 K^･ K)^. で染 色し, 乾 燥さ せ て か ら, 拡 散 輪^の直径を測定 し た. 直径の測 定は, 計 測 器Sc ale Co u nte r(Belde x t y pe B S ^‑1 0 5) 附^の陰 影拡 大 投影 器Pr ofilePr oj^{e cto r} (N i ko n 6 C) ^で投 影 拡大し て計測し た^. 被 検血清^の拡 散 輪の直 径を 2 乗し た数 値を標 準 血 清^のそ れ ら と比較

し て, 蛋 白 分 画の相 対濃 度^を算 出し た.

次^いで, 手 術時の女性血清 蛋 白分 画 濃度^の変 動^の検

女性^にお け る ^{e str o}ge n 投 与^およ び St_{r e S S} の血清 蛋 白^に及ぼ す影 響

Table l^. Se r u m ^･pr Otein fr a ctio n s,th eir ab br e viatio n s, and c o n c e ntr atio n sin p^{o s}tm e n opa u sal w o m e n

67 3

S^{e r u m} p^{r O亡e}in fr a ctio n s A b b ^{r e v}iatio ns Av e r ag^{e v a}lu e s of

c o nc e n亡r a亡lo ns 聯

p^{r e a}l bu min アr eal b 2 9.8 mg / d l

al bu min Al b 3 8 8 1^.1 ^mg/^{d l}

α 1 ^‑a Ci d g l y^{c o}p^{r o亡e}in α 1AG 7 8.1 丁場/d l

α 1^‑1 1 p^op^{r o}亡e土n α₁L i_po 4 2 8.4 mg/d l

α 1^‑a n亡itry p^sin α 1A T 2 0 1.4 mg/^{d l}

ぽ 1^‑a n亡icb y^{m o亡r}y p^sin ロ1Ⅹ

9.5 S^‑α1^‑g l y^{c o}p^{r ote}in 9.5 S^‑α1 r etin ol b ind ing p^{r o}亡^ein R B P

Gc^‑g l^obul in Gc 4 7.2 mg / d l

inte r^‑α^‑亡ry p^Sin inh i b ito r ⅠαT 工

a n亡i亡hr o mb in Ⅱ AT Ⅱ 3 0^.7 ^mg/^{d l}

c e r ulop l^{a s m}王n C p 3 4.6 mg / d l

Zn^‑a2

‑g l y^{c o}p^{r ote}in Zn α 2

ロ 2^一己S^‑g l y^{c o}p^{r o}亡ein ぴ 2H S 6 3.3 mg/^{d l}

C Is lna c亡iv a亡O r C Isl 3 4.1 1喝/d l

C Is ^‑C O mp^{O n e nt} C Is 4.3 Ⅷg/d l

C 9^{‑C O m}p^{O n e n}亡 C 9 7.6 mg/^{d l}

hap^亡Og l^ob in Hp 1 6 8 ^.7 ^mg/^{d l}

α 2^‑A P g l y^{c o}p^{r o}teln S P 3

α 2^‑m a Cr Og l らb^ul in α 2M 2 6 5.2 mg/^{d l}

α 1B^‑g l y^{c o}p^{r o}亡ein α₁B 3 4 ^.1 mg/^{d l}

Pla s min og^{e n} Pmg

β^‑1ip^op^{r o}teil l βLl p^o 7 9 6.2 mg/^{d l}

he m op^{e x}ln Hx 1 0 9^.1 mg / d l

C 3^‑C O mp^{O ne n}t C 3 8 3^.5 mg/^{d l}

C 4^‑C O mp^{O ne nt} C 4 2 4.6 口唱ノ^{d l}

C 5^‑C O mp^{O ne n亡} C 5

亡r g n sfe r rln Tf 2 9 3.9 mg / d l

C^‑r e aCtiv e p^{r otein} C R f^〉

β2

‑

C 3^‑p^{r O a C}亡1v a亡O r C3P A

β2

‑

g l y^{c o}p^{r o亡}

■

'〔 ■ ▼

C l q^{‑C O m}p^{O ne n}t C l q 1 3^.4 mg / d l

C 3c ^‑C O mp^{O n e n}亡 im m u n og l^obul in G

C3^c

1 g G 1 う9 8.5 mg/d l

2 9 5.5 mg/^{d l} 2 9 6^.4 ^mg/^{d l}

im m u n o gl^obulin A I gA

im m u nog l^obulin 1

.

im m u nog l^obul 土n D I g D

1m m u n og l^obulln E I g^E

*

co n c e ntr atio n s dete r min ed b_{y t}he a utho r.

T he b la nks : n Ot y^et dete rmi n ed^.