Aspergillus nigerによるアミラーゼの生成にたいする有機酸の影響
6
0
0
全文
(2) 1 2n. 近 畿大学殿学部紀要. 第1 6号 日983). MgS0-0 . 2 g,FeSO.00 .1 g.CaC1 20 . 0g 1,酵母 エキス. な った7 1すなわ . ち酵紫液 1mLを用い,0. 5M 酢酸経. 00 .1gを超溜水 llに とか し,pH 50に調鼓 した.. 衝液で pH 5. 0に し,0. 2% ア ミロー ス液 を加 えて反. ア ミラーゼの生成 にたいする各種の有横 的添加の効. 応 させ,反応液 に ヨウ紫液 を加 えたの ち 7 0 0}叫 で. 果については,基本培地 に酢酸,乳酸,ピル ビン酸,. 吸光度 を測定 しf =.辞紫単位 は盲験の吸光度の 1 0%. クエ ン艶 シス-アコニ ッ ト酸,イソクエ ン酸,a-チ. を消失 させ る酵紫丑 を 1単位 とした. 生育JL 増殖 した菌体の収丑 は, 6日間振 とう培. トグ/ レタ JL , 酸, コハ ク鼓, 7マtJ レ酸, リンゴ鼠 オキザ ロ酢酸 をそれぞれ 5×1 02M ,1 0~ 2M , 5× 1 0~ 3M,1 01 3M, 5×1 0~ 一 M 添加 し,供試菌 を接種. 焚 したの ち培兼液 をろ過 し, さらに遠心分離 して菌 体 をあつめ 1 05C o ～ 11. 0C o にて恒 丑 にな る まで乾 燥. o で振 とう培凍 した.経時的に培凍液の一定 して 35C. させたの ち,増 発液 2 0 0mIあた-, )の乾物 並 流 として. 丑 を採取 し, ろ過 したのち遠心分殿 して菌体 を除去. 打出 しT =.. した. その上澄液 を幕溜水 で 24時 間透析 してア ミ ラーゼの測定 に用 いた,すなわ ち液化型 ア ミラーゼ の測定 には上澄液 を酵紫液 として使用 した. 液化型ア ミラーゼ活性の測定. 酵素活性の測定 は. 前 報6 )と同 じ方 法 で あ り, ヨー ド反応 に よって行. ‖. 結 果 お よび考 察. Aゆe TL g. ' /. l u. snl. ke yvanTi 4のア ミ eghem lO F 441 ラーゼ生成 にたいす る各種 の有磯酸 の影博について 検 討 した結果, つ ぎの ようであった.. ( J t L L J S]tu n )L ( ]!^ r)e U a SeTA∈V O 1 2. 3. 4. 5 6. 0. L 2 3 4 . 7 6 I nc ua bL i o nt l meL day ). 0. 1. 2. 3. 4. 5 6. ハ U ▲ q 0 3. n V り ). 〓 Ut. 0. J S )[un)(･ 一!^ !a t Zt,tuVl UE L L S. CI ヾ a c o nl t i ue. 01 ' . ! 3. 4 5 6. 0 ユ コ 3 J 5 6. I n e u b al l Ont 】 me( day ). 0. 1 2 : t J 5 6. : ● .. Fi g.I . Ef f e ctofvar l OU. SOr gan. l Cac. i dson帥epr oduct i onofaamyl as ebyAS f ･ e T gLL/ t f Sl l l k e rvan Ti e. Khe. m tO F 441 4 0T gani caci dco† 1 ccnr tat i ons:0.5×1 0M lx1 03 M;△.5× 1 0ー 3M ;ロ. 1 ×1 0 2M :0.5×l O~ 2 W.
(3) 鎌r 1 7:Asper L r 川usni geri =よる/ミラー ゼの生 成 にたいす る右横酸 の影滞. 柿酸 を添加 した場 合 には, 7'ミラーゼの生成 ( こた. 1 21. に 認 め られた.. 02 M,1 02 M. 5×1 03 Mにおいてそ い して 5×1. ヒル ビン酸 を添加 した場 合 には, ア ミラーゼの生 にたい して 1 0~M Z で 45. 8uni t s /mlと効 果 が認 め. l J Z / 4uni t sJ l L /4 ,03 . uni t s / l l t l .. 34.. 0uni t s/ れ ぞれ 36.. 成. と生成 杭が多いが,低渦度 で は少 ない ことが認 め ら. I )礼,酢酸 よ り良 い結果 とな っている.生成 の時 期. れ た. また培 虎桝期の. 2日目か ら少 しア ミラーゼの. も2日目か ら認 め られ, 3臥. 4日と顕著 に増加 し. 生成 が認 め られ, その 後, 日数の経過 と共 に生成が. O2 - 5×1 0~ lM に てい る. まt J蘭の生育 鬼 も 5×l. 頗 著 であ る.歯の生育 も 1 0 1 2 M, 5×1 0 ~ 2 M, 5×. I JL､ て多い ことが認 め られた.. 1 0~ 3M において.それ ぞれ 1 9 6, T T g/ 2 0 01 r T / ,10 8n l g/ 2 0 0′ 1 7 /. ,15 7 l l T g. / 2 0 01 nIと良好 であ った.. 0~ Z M, ア ミラーゼの生 成 に顕著 な効果 を示 し,5×1. 乳酸 を添加 した場 合 には, ア ミラ-ゼの生成 にた. クエ ン酸 を添加 した場 合 に も,ピル ビン酸 と同様 ,. 1 0 ~ 2M,5×1 03M で それ ぞれ 4 75 . uni t s / l nl4 , 35 .. 01 2M , 10~2 いす る効果が酢酸 よ り劣 ってJ 3り.5×1. uni t s/ ml ,366 .u ni t s. /. mIと良 く､また ア ミラー ゼ生. M に お い て,27. Ouni t s /mI .24. Ouni t s /J T T /と少 な. 成 の時期 も乳酸 よ り早 く, 2日目か ら認 め られた.. く, ア ミラーゼの生成 にあ ま り効 果が ない と考 え ら. 0~ 3 Mで 1 0 5mg/ 菌 の生 育 t )良 好 で あ ( )低 濃 度 の 1. れ る. 歯の生育 も各濃度 にお いて良 くなか った. ま. 2 0 0n t Lの生育 丑が え られ た.. た ア ミラーゼ生成 の時 脚 も 3日臥. シス- ア コニ ッ ト酸 を添加 した場 合 には. 1 0~ 2M. 4日目か ら徐 々. !Ll. ( ＼ t r LS ) n)I ( こ. 一! ^. U t! a S uV. t ! t LL. 0. L. _ 7 3 土 1 5 6. '. 0 1 2 3 ` 1 5 6. 0. 1 2. 3. 4. T ) 6. n c ua bt i ont ) i me( d ay). ( JuLJS ; ] ! un)･() ! ^二 U e. aSE e T (,∈ V. 0. 】. 2. 3 J 5 6. 0 1 1 2 3. ｣. ) 6. r. t n cua bL i onL i met day ) Ft g･2･ド( f ecloEvar i ousor gani caci dsontep h r oduct i onofa a my】 as ebyA坤e qL l / t i snL g e r. Van. Ti e ghem l FO 4 4. 1 4.Or gani caci dconc enr tat l 0nS:S e eFi 只.I ..
(4) 1 2 2. 第1 6 号. 近畿大学農学部紀夢. ( 1 9 8 3 ). ～ 5×1 0 1 3 Mの濃度 においてア ミラーゼの生成が少 し認 め られ,また菌の生育 も 1 0~ 2M においてのみ長 か った.生成の時期 も 3日目か ら認 め られ シス-ア. M において も 82m g2 /0 0mlの 菌体 丑 が え られた. ア ミラーゼ生成 は 2日目か ら認 め られ,α-ケ トグル. コニ ッ ト酸 はあ ま り効果がない と考 えられ る.. ア ミラーゼの生成 は,実験 に用 いた有機蕨の中で巌. タル酸 は良 く同化,利用 され ると考 えられ る. また も良好 であった.. イ ソ クエ ン酸 を添 加 した場 合 に は, シス-ア コ. コハ ク酸 を添加 した場 合 には, 1 0~ 2M, 5×1 0~2. ニ ッ ト酸 よ りはア ミラーゼの生成 も菌の生育 も長 い が, クエ ン鞍 よ りは少 ない. しか し,1 0~ 2M. 5×. 〟 , 5×1 0~ 3 肘 においてア ミラー ゼの生成が多 く,. 1 0r 2M においてそれぞれ 3 43 .uni t s / m/3 ,1 . 2uni t s / 〝 7 7となってお り, かな り効果が認 め られた. q-ケ トグルタル酸 を添加 した場合 には, 5×1 012 M,1 0 h 2 M, 5×10~ 3Mに お い て, それ ぞ れ 4 95 . uni t sml / ,4 .uni t s /mlとア ミラー 70 .u n i t s / ml4 , 32. 阜適濃度 も 1 0~ 2M～ 5×1 0~ 3Mの範囲 にあ る.菌の. 0 ~ 2 〟～ 5×10ー 】 〟 に お い て良 いが, ア ミ 生育 も 1 ラーゼの生成 は フマール酸 と比較 す る と少 ない こと が認 め られた, フマール酸 を添加 した場合 には, コハ ク酸 とア ミ. 5×1 0 r 2 M～5×. 0~ 2M～ 5×1 0 ~ 3 Mが通 ゼの生成 が長 く, また 5×1. ラーゼの 生成 が類 似 して い るが. した添度 であ る.菌の生育 も良好 で,低濃度の 1 0~3. 1 0 ~ 3M で コ- ク酸 よ り生成 丑が多 く.すなわ ち 1 0~2. ]t. ) t U t1) )(]t] ^ ] Ue ･TX;tZtJu tJ V. (＼u LrS. ( ＼LL L J S LJn)J t 一 t N Ua S e T. e. lV. L^ u. ∴. ド. !. ()1LL1Ⅵ! 】 L m)(TL^ )Ut Z. 良l t uI V. a. Fi g. 3 Re) at i o. nbe. t we enor gani caci dc onc enr tat i on sadα n amyl a s eac t l r i t y.Or gani caci d: a cae tt こ△ ,Pyr uae Vt ;D,Ci t r ae t ( B. ) 0,C a c oni tt ae;●.1SOI ac eae tt :●,l 由一 ( A)0,. keo tgua Ltr ae t こ口.S i nae t ( u C C. C) O,f umar ae. l ;●.malt ae;△,oxci t r ae t ;△.a-. ao lac eae tt,.
(5) 13 2. 鋪u ]:Asper g. i ‖u. sni gerに よるア ミラーゼの生成 にたいす る有燐酸の影簡. 1. a t. ( ] 7 u O Ou. 2 ･1. ). u)q ) きOJf. Con c e nr tal i r l n. 2 1. ttL. a tLL. ( 7 OOZJ. 1. J. )t tJ V LOC ). 卜 ｡. :. -. -. - :. +. - :. - -. Con c e nr tat i on. 50 00. ". ( ＼ L L LO O u･ YL t L)t T lき(. M ソ 一. ). ( .. 5 Con c e nr tat i on. Fl g. 4.Ef f ectofvar i ousor gani caci dsonteg h r owt hoft heAs pe 曙t ' [ L u snt ' ge TVa. nTi e ghem J FO 4 44i 1 nc ubae tdf or6day ･ S .Or gani caci dconcenr tat i ons. :I .. 5×1 0 ~ 一 M .2l ,xlO. ~. ユ M .35 ,× 1 0 1 3 M ;4.1×1 0~ 2M , ,5×L O2 M. ,5.
(6) 1 2 4. 近 畿大学農学 部紀 要. 8O . unt isml / で あ り, また菌の生 育 も 1 0 2M Mで 4 ∼ 5×10 Z M において良好 であった, リンゴ酸 を添加 した場 合 には, ア ミラーゼの生成 にた い して 5×1 02 M∼ 1 02 Mが位適浪度 であ り, 0 1. M で 436 , unt isl /nIと生 成 敬 が 多 くな って い. 2. 第1 6弓･日9 83 ). J V 要 約. As p曙i e L hL S〝F ' gr e vanTi e he g m lO4 F 44 1 に よる 鞍 化型 ア ミラー ゼの生成 にたいす る各種 の有横酸 の 効果 について検索 した. その結 果 ,q ケ トグJ L ,タル酸, ピル ビン酸, クエ. る. 蘭の生育 も 5×1 02 M∼ 1 02 Mにおい て良好 で. ン軌. あ り, それ よ り低浪度 では ア ミラー ゼの生成 も菌の. 濃度範 囲 におい て, ア ミラーゼの生成 に/ =い して有. 噌栄 も少 ない.. 効 で ある こ とが. % め られ た.. オ キザ ロ酢 鼓 を添 加 した場 合 に は, 5×1 0 2M. ∼1 02 M においてア ミラーゼの生成 牡は リンゴ酸 よ 0 2M で 4 6O . unt ism / /で あ りア ミラー りも多 く,1 ゼの生成 に有 効 な有機酸 で あ る と考 え られ る. 歯の 生育. b5×1 02 M∼1 0ー Z M で 良 い結 果 とな って お. オキザ ロ酢 酸 では 5×1 02 M∼ 5×1 03 Mの. 酢 艶 コ ハ ク酸, リ ン ゴ酸 に h-い て は 1 0 Z M ∼ 5×1 0 Z Mにおいて,か な り効果が監 め られたが, イソクエ ン酸, シス-ア コニ ッ ト酸,乳酸 において は効果が少 ない ことが認 め られた. ア ミラーゼの生成 にた いす る効果 は,有機酸の依. 02M では 2 3 0J l l g/ 2 0 Omlの生育 虫が認 め られ り, 1 た. またア ミラーゼの生成 の時期 も ZEI目か ら認め. 頼 に よって.こ とな った挙動 をす る ことが認 め られ,. られ,生成 丑の 多い α-ケ トグル タル酸 や フマール酸. 関 係 を もっているため と推論 した.. それ は生体 内 におけ る有横酸 の同化,利 用 と密接 な. と類似 の傾向 が え られl J. ア ミラーゼの生成 にたい して,有機 酸 の機類 や濃. ･ 度 におい て, か な りの相連 が認 め られ たの は,As eh g em l FO4 44 1 に よる有機 Pe gL l usmir Ti c vanTi 酸 の同化,利 用 と密接 な関係 の あ る ことを示 してい る と思われ る. すなわ ち,酢酸 におい ては酸化的 に 分解 され て代 謝 され エ ネ/ レギー軒 とな るが, また ク エ ン酸 や α･ケ トグ) iタ , JL ' 酸 その 他 7マール酸 や オ キザ ロ酢酸 な どに代 議 され てい く. ど/ レビン酸 にお いては,解糖 作用 や酢酸 ,乳酸 の代 謝 に並重 な役割 を もってお り, また ア ミノ基転 移反応 に よって容易. 文. 献. ( l ) SD ..Lr : E and YH . .RYu:F l al l 女l z k S々 iP' z LI W KL uJ az akhe o C/ l t '5 . ,22-20(93 4 3 17). ( 2) W. M. F( 芯 ARTY a nd PJ.GRF IF: li:Bi o L ･ Im w . 5,1.6-2 23 6 6(93 17) So. c Ta r1 2 T (KO.T. 汁.PI SAt tEhK 'O ad n G. M. ( 3 ) VL YAROVE. m) BROf uNSKAYA:Pn ' kl .Bt l oh kt L. m Mt ' kyb oi o/ . . 8.5 6 2 -5 6 8( 1 97 2 ) ( 4) 福 本 寿 一 郎 , 山 本 武 彦 :段 化 ,31,. 4 2 5 -4 2 9( 1 9 5 7 ). を経 て α ケ トグル タル酸 に変化 するが,さらにグル. ( 5 ) S. K. . Vt uKl 1ERJEE an d S. K. M AJUML )R: ^ I 7 1i da〃J .丘ゆ,BE oL, ,ll,3 46-4 3 R (93 17) ( 6 ) 鎌田芳郎 :本 法 ,1 3,7 7 -8 6( 1 9 8 0). タ ミン酸 の生成 に関 係 してい る有機 酸 であ る. また. ( 7) 植物 栄 燕 字 実験 編 娘 委 員 会 :植 物 栄 建学 実験. にア ラニ ンが生成 され る. クエ ン酸 は有燐酸代謝 に おいてHi要 な位置 を しめ てお り, い くつかの有機 酸. フマ. ー. ル酸 は アスパ ラギ ン酸 ア ンモニ ア リアーゼの. 作 用 で ア スパ ラギ ン酸 を生成 す るが, その他. TCA. 回路 な どに よ り α-ケ ト酸 となって ア ミノ酸 生成 の 紫材 とな る. この よ うに有機 酸 の代謝 とア ミ/酸の 生成 は極 め て密接 な関係 にあ り,有機 酸が ア ミラゼの生成 に効 果が あ った もの と推 論 した.. Pt . p1 8 6,朝 倉 t lF 店 ( 1 9 5 9).
(7)
関連したドキュメント
【試験方法】溶出試験方法として、水溶性成分を繰り
食品衛生法における器具・容器包装の規格 試験法のうち、GC-FID および GC-NPD を用 いる試験について、キャリヤーガスとして He および N
rVanTI E CHEMによる頼化amyl ase の生成 にた いす る各種 の窒 素化 合物 および ア ミノ酸.. ua tmi dや aa lnn ieな どよ り窒 素源 で
AmyK38
1
ニル）エチニル安息香酸シアノフェニルエステ ル（C３ H７ C ６H ４ CCC６ H４ COOC ６ H４ CN，TE３CN）
測定は、 PA を乾燥固化させた NMR サンプル管に βLG 溶液を注入することで開始させた。なお PA の 終濃度は、固化した PA がすべて溶解した場合 1mM になるよう調整した。 βLG 溶液注入後、
1 回の実験のながれは， はじめに血中乳酸値， 唾液アミラー ゼ活性， 疲労感の VASを測定した。アイマスク装着後，
