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Aspergillus nigerによるα-amylaseの生成にたいするグルタチオンの影響に関する研究 : 各種の糖類および有機酸の効果

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Academic year: 2021

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(1)As pe. T ・ g. i l E usni gerによるα-amyl ase の生成 に たいす るグル タチオ ンの影響 に関す る研究 各種 の糖類 お よび有機 酸 の効 果. 鎌. 田. 秀. 郎*. he Product i on ofαamyl ase by As su tdi es on t pe r gL 1 l u sni ge r r e c EF tofGl ua ll hi one,Sugarand Or gani cAci d Shur o KAMATA*. Synops. I S. I. nt hi ,As pe r gi l l usni ge rv a nTi e ge hm I 4wa sus e df ors t uyn digt hee f f eco tf spa pe r FO441 g a ni c i he pr i on ofaa a s g ltt uah. i one,s ug a ra nd or ca d on t ou dc t myl e by t he f ung us . Gl sa di ntei h nc uba t i ngme di um a tv a iousc r onc e nr ta t ua tt hi onewa 1t o dde i onsr fom 3mg 0 / l mg / I .As pe r gi l l usnL ' ge rwa , hk ai ngc ul t ur ea t35o Cf or6da ys sn ic ubt ae di nt hene ldi umbys df ordt ee r mi nn lgαa ・myl a s epr ou e dbyt heu fng us . a ndt heme di umwa sus e dc / 1t o5mg / 1a dde di nt heme di umwa f f se I twa sso h wnt ha tgu l e c t i v eo t tt ahi onef r om l Omg eα・ myl a s ebyt ung us . Ont heot he rha nd,1 mg pr ou dc a hef ons i de r a bl y / 1g ltt uahi onewa sc a myl ebyt e f f e c t i v e. Gl a s he ua tt hi ones e e me dt obea s s oc i ae tdwi t htep h r ou dc t i onofa・ f ung us . nnos es , uc r os ea ndma l t os ewe r ea dde da. tt hec onc e nr ta ・ Gl uc os e,r r uco ts e,ga l a co ts e,ma Ml. i n tei h nc ubt a i n. gme d. i um whi c hc ona ti ne d 5mg1g. / ltt t i on or5x 1 0-2. uahi one,a nd g l uc onae t,g uc c a l a cu tr onae t,s i na t e,c i t r ae t,pyr uv ae t,ma l ae t,f or ma t e,g l yoxya lt e,oxa l ae t, o pl Onae t, o E ・ keo tg l ua tr a t e, g 1 a ca tt e, pr l yc ol l ae t, f uma r a t e, a c eae tt, a c eo ta c ea tt ea nd oxa l oa c ea tt r 0-2 Mi nt hes a mei nc ua bt i ngme di um・As ewe ea dde da ttec h onc e nr ta t i onof1 l t her e s ul t s ,i twa ss hownt ha ts uc r os eg ,l uc os e,f r uco ts e,ma l t os es ,uc c i nae t,cr i tae t,ma ae t, α・ uma eado ewe ee f f et opr myl eby keo tg l ua tr a t e,1 a cae tt,f r a t n xa l oa c ea tt r e c t i v ou dc eα・ a a s unu fs. h t he rha nd,g l uc onae t,pyr uva t ndpr t h. ef .Onteo ea opi onae t we r ec ons i a ye f f de r bl e c ,i twa. sc dt tt ecmp ea s s ht om t he s e s ul t s t i v e, Fr er onc ld u e. ha. he s. o oundswe r oc i ae tdwi t he pr ou dc t i on ofq・ a myl a s e by te h f ung usi n te h i nc ubt ai ng me di um whi c hc ona ti ne d g ltt uahi one.. Ⅰ 緒. 看. EBROJチ オ ンの関係 につ いて も報告 して い る。 NI DoBOSZ2)はクレアチ ンホ スホキ ナーゼの活性 に対す. グル タチ オ ンは、生体 内の種 々の酵 素 の活性 化 や 賦 活化 に作 用 して い る とともに,生体 内の ア ミノ酸. る グ ル タチ オ ンの典 男 につ いて研 究 を して お り、. や含硫 化 合物 の代謝 , お よび酸 化還 元反応 な どにあ. M EI STER3)は、ア {/酸 の移送 にお け るγ-ブル タ ミ. づ か って い る。H I t 3 BERDl)らは Es ce hr i c hl aC Ol iを. ー ル回路 で の グル タチ オ ンの重要性 につ いて報告 し. 用 いて, ジア ミ ドの代謝 に グル タチ オ ンが重 要 な働. て い る。 また, YouNG4)らは, ア ラニ ン, フ ェニー. きを持 って お り, また細 胞 中の タ ンパ ク質 とグル タ. ルアラニン,リジンなどのア ミノ酸 代謝 にグルタチ オ ン. +農 工化r , ・ 料. 脚 勿・ 末葉 T J W 究辛 (I J J川 t t、 L L l ntVul r l L wn. T)F ・ T 10LAq, 1 (ur t Ul r一 日. hem, nr v Klk n lUnl V Hl gaS ho ,さ aka Os lkd577 ・ T apan). -.

(2) 1 0. 近畿 大学 農学部紀 要. が必 要であることを示 し,SANDY5 )らは,Rhd oo ps e uc d>. 2号 (1 97 9) 第1 衝 液 で pH5. 0に し,0. 2% ア ミロース液 を加 えて反応. mo nass pe hr o i de sを用 いて 5 -ア ミノロイブ リネ- ト合. させ ,反応 液 に ヨー素液 を加 えたの ち7 0 0mJ J で吸 光. 成酵 素の 活性剤 と して グル タチ オ ンが作 用 して い る. m の かかわ りに水 1P m を用いて 度 を測 定 した。酵 素液 1P. )らは, Es cec h, ih i a と報 告 して い る. さ らに FucHS6. 同様 に処理 したもの を盲験 とし,その吸 光 度 ( Do)を測. c o l z 'の 突 然 変 異 株 を用 い て グ ル タチ オ ンが細 胞 中. 定 した。酵 素単 位 は吸 光 度 Doの1 0% を消失 させ る酵素. の ア ミノ酸代 謝 に関係 し, また リボ ヌ ク レオ シ ドジ. 量 を1単位 とした。さらに,増殖 した菌 体 の収 量 は,6日. ホ ス フ ェー トレダ ク ターゼ の作 用 に重 要で あ る と報. 間培 養 したの ら培 養液 をろ過 し, さらに遠 心 分離 して. 告 して お り, MANNERVI K7)らは,チ オ トラ ンス フ ェ. 菌 体 を集 め 1 0 5 o C∼1 1 0 o Cにて恒 量 とな るまで乾 燥 さ. ラーゼ の作 用 に グル タチ オ ンが必 要 で あ り, また シ. せ たの ち,培 養液 2 00 mPあたりの乾物 重 量 として算 出. ステ イ ンの代 謝 に グル タチ オ ンが関与 して い る こ と. した 。. myl を示 して い る。 しか し,α -a. as e の生 成 にた い す るグル タチ オ ンの効 果 につ いて は, まだ 明 らかで は. As pe r gi l l usni ge rvan TI EGHEM. ない。 本報 文 は. I myl as e の 生 成 にた いす るグル FO441 4に よ る α-a. Th aL oll Ef f ec t sofgltt h r ou dc t i onof uahi on. eontep α・my a l a s eby As e g pe r g. i l l u. sni ge rvan Ti he mI FO 441 4ado n nt hef ungusg r owt h.. タチ オ ンの影 響 につ いて検 索 し,二 ・三 の知 見 を得. Gl ua tt hi one. た ので報 告 す る。. 1 ng n i on a ddi l o. /. 15mg11 / mg/ 1l 30mg / 12m 0 g/. Ⅱ 実験方法 供 試 菌 には AS PTi e. gl. l u. Sni ge rvan TI ECHEM I FO. 441 4を便 用 した 。 基 本培 地 の組 成 は,可 溶性 で んぷ ん1 0 . 0g,(NH4 SO42. 0g,Na 2 HPO41. g, )2. K2 SO。. 2. 81 3. 3. 2. 28 .. 35 .. 28 .. 2. 6. 4. 213 .. 29. 4 38. 2 440 . 263 . 260 .. 6. 4. 92 .. 550 . 67. 0 70. 4 540 . 528 ,. 01 0. 5?, MgSO.0. 2 g,Peso.0. 01 9, CaC1 2 0. g 酵 母 エ キ ス 00 .1タ,蒸 留 水. 0に調 19で あ り,pH5.. 製 した。 この基 本培 地 に, グ ル タチ オ ンをそれ ぞ れ,. 3 bg / A ,2 ( 如/ A ,1 0 叩/ A, 5m G/ A, 1m g/A, お よび 無 添 加 の もの を調 製 して実験 に供 した。 また,各 種 の糖 類 お よび有機 酸 の効 果 につ いて は,基 本 培地 と. 0. して,( NH。S ) 2 O。 2. 0 ?, Na2 HPO4 01 .9,K2 SO4 5 g, O0 .1 9,酵母 エ キ ス MgSO402 .?,. FeSO。. 00 .1. プ,. CaCIz それ 00 .1g, 蒸溜 水 1 2で あ り,. pH5. 0に調 製 した もの に, ぞ れ グル コー ス, フ ラク トー ス, ガ ラク トー ス, マ ン ノー ス,サ ッカロ ー ス,マ ル トー スで は 5×1 02M を添 加 し, グ ル コ ン酸 , グ ル キ ュ ロ ン酸 , ガ ラ ク. Ⅲ 結果および考察. チ ュ ロ ン酸 , コハ ク酸 , クエ ン酸 , ピル ビ ン酸 , リ. As pe r gi llu sni ge r vanTT EGHEM I FO 441 4の a-. ンゴ酸 ,蟻 酸 , グ リオキ シル酸 , シュー酸 , 乳酸 ,. amya lseの 生成 にお いて,グル タチオ ンを各種 の濃 度. プ ロ ピオ ン酸 , a-ケ トグル ター ル酸 , グ リコ- ル酸 ,. で添 加 した場 合 , お よび グル タチ オ ンに各種 の糖 類 ,. フマ ー ル酸 ,酢 酸 , アセ ト酢 酸 , オキザ ロ酢 酸 で は. あ るい は有機酸 を添 加 した場 合 の効 果 につ いて は 下. 1 02M を添 加 した もの に グル タチ オ ンを 5mg/P添 加. 記 の様 で あ った。. した もの と無 添 加 の もの を調 製 した。供 試 菌 を接種 して 35C o で振 と う培 養 し,経時 的 に培 養 液 の一 定 量. す な わ ち,基 本培 地. 1βあ た りに グル タチ オ ンを. 3 0m g,. 2 0m g,. 5mg. ,1mg添 力l ]した もの と無添 カロの もの. を採取 し, ろ過 した の ち遠 心 分離 して菌 体 を除去 し. myl asの生 成 につ いて は (表 1) ,グル タ にお け るα-a. た 。 その上 澄 液 を蒸溜 水 で 2 4時 間透析 して α-amy1 -. チ オ ンを1 ] 伽g∼ 5m g/P範 囲 で添 加 した場 合 ,無 添 bJ. as eの測 定 に用 い た。 す な わ ちα-amyl as eの 測 定 に. の もの と比 較 して顕 著 な効 果 が認 め られ た。 す な わ. は上澄 液 を酵 素 液 と して使 用 した。. 伽g添 加 した場 合 には,無添 加のも ち グル タチ オ ンを3. α-amya ls eの活 性 の測 定 は ヨー ド反応 によ りお こ な った。 す なわ ち酵 素液 1mPを用 い ,0. 5M 酢 酸 緩. as e. の と比 較 して α-a. myl の生 成 に効 果 が認 め られず , α-a. as. myl pの 生 成 が少 な くをって い る。 グル タチ オ.

(3) Pe r g. i l ls u ni ge rによるα-amya lseの生成 にた いす るグル タチ オ ンの影響 に関 す る研究 鎌 田 :As. ll. f sofg ea ndma. es ,uc r os l t os e Ta bl2 e . Ef e c t l uc os e,f r uco ts eg ,a l a co ts e ,ma nnos i h r e s e nc as be nc. guahi or t eont hepr ntep eor. eofltt i onof qa my. l a s eby oduc t As pe r gi l l u snL ge rVa h e ge. h m IO4 F 41 n nte h f. nTi 4ado un gusg r owt.. da ys ) i me( I nc ua bt i ont 1. 4. 5. 6. r owt. 0 7,. 8. 51 5 2 . 0l 4 2 1. . 3 2 42 . 41. (n u i t sm / ) I ( m 2 2 g 0 / 0mり. e M Gl utt c a os h i one十5x1 0 5 m 2g1 / -. 0. 40 .. . 56. . 28 9 1 6. 0 376 4 675. Fr uco ts e. 0. 3_ 0. 80 . 21. 2 3 90 . 498 . 22 9. 32 .. 4 285 1 2. 5 371 . 58. 2 67.. Gl uc os e. 5x1 2M 0-. 2 l 3. 5x1 02M. / Frco th 5 m 2g M 11 0 G l utt a s e i one+5x1 0 Ga e l aco ts. 2M 5x1 0-. 0. 28 .. 83 . 1 66 . 306 . 450 . 22 4 T. 2M ■ ■ ■ . 4 Ga l a co ts e + 5xl 0 ー■3 O/ Gl ua tt hi one 5mg 1. 1 22 . 26. 3 407 . 52. 0 240. Ma nnos c. 0. 2_ 0. ll . 3 246 . 362 . 422 . 205. / G Mltt a ua nno h s e i one+5x1 mg 2M 5 1 0. 0. 25 .. . 423 . 490 . 23 0 ll . 6 238. suc r os e. 0. 38 .. 0. . 540 1 4_ 5 3 1 452 . 252. 0. 68 . 22. 4 462 . 645 . 73. 0 31 2. 0. 3. 0. 1 06 . 23. 5 403 . 51 8 . 3 23. 0. 49 .. 1 78 . 380 . 568 . 681 . 290. 2M 5x1 0-. 5x1 2M 0-. / 5 su G l ua c tt r os h e i one十 5x1 mg 1 2M 0 Ma l t oe S. 5x1 0-2 M. / 5 G Ml a ua l t o t s h e i one+5x1 I m 2g M 0. ンを2 伽 gまたは 1 m g添 加 した場合 には,無 添加 の も. 効果 があ った もの と推察 した。. の と類似 した α-a myl as eの生成 を認 めた。菌 の生育. グル コース, フ ラク トー ス, ガ ラク トー ス, マ ン. 0 n z g∼ 57 n g添加 した もの が最 も良 もグル タチ オ ンを1. 0-2 M ノー ス,サ ッカロース, マ ル トース を各 5×1. as eの生 成 には 10 m g∼ 57 n g/ Pの グ 好 で あ り,α-amyl. z g/蛮恭加 した もの と,無 添加 の にグル タチ オ ンを 5n. ルタオ ンの添加 が効 果 の あ るこ とが認 め られた。 グ. myl as eの生成 は (表 2) ,各種 の糖 もの にお け る α-a. ル タチ オ ンは酵 素作 用 の活性化物質で あ るばか りで. 類 において グル タチ オ ン添加 の効 果 に相違 の あ るこ. な く,酵 素 の S H基 や酸 化還 元反応 に関与 してお り,. とが認 め られた。 す 巻わ ち,サ ッカ ロース にグル タ. また生体 内 の ア ミノ酸代謝 の経 路 に も重 要な役割 を. a s e の生 成が最 も多 myl チ オ ンを添加 した場 合 に α-a. 持 ってお り, す なわ ちマ レイル アセ ト酢 酸 イソ メ ラ. く認 め られ, また グル タチオ ン添bJ ] の効 果 も顕著 で. ーゼ やa-ア ミノア ジ ピ ン酸 レダクターゼ な どの活性. あ る。 グル コー ス とフ ラク トー スの場 合 も, グル タ. 剤で あ る他, EL L , E9 )らによりア ミノ酸代謝 に関係 を. チ オ ンの添 狛 こお いて顕著 な効 果 が認 め られ,サ ッ. 持 って い るα-グル タ ミール トラ ンス フ ェラーゼ とグ. カロース よ りは α-a. myl a s e の生 成 は少 なかったが、. ル タチ オ ンにつ いての報告 をどもあ り, この様 をこ. グル コー ス とフ ラク トースは類似 の傾 向 を示 してい る。 この こ とは グル コース とフ ラク トース が炭 素源. とか ら, グル タチ オ ンの添加 が α-a. myl as e. の生成 に.

(4) 1. 2. 第1 2号 ( 1 97 9). 近畿 大 学 農学 部紀 要. と して同化 利用 され る時 同 じ程 度 の効 果 が あ る こ と. て行 くが, この場 合 グル タチ オ ンな どが必要 で あ り,. を示 して い る と考 え られ る。 マ ル トー ス も顕 著 を効. 糖 類 は この様 に して ピル ビ ン酸 を経 て種 々の 化 合物. 果 が認 め られ グ ルコー スや フ ラ ク トー ス と程 ん ど等. に代謝 されて い く。 また,サ ッカロー ス, フ ラ ク ト. as pの生 成 が あ り,グル コー ス, フ ラ ク しい α-amyl. ー ス, グル コー スな どが グ ル コー ス-11ホ ス フ ェー. ト- ス, マ ル トー ス は グル タチ オ ン添 加 の効 果 が認. トを経 て UDP-グ ルコース とな り,それか ら多糖 類 の. め られ た。 これ に反 して ガ ラク トー ス とマ ンノー ス. 生 合成 や糖 の代 謝 経 路 に入 って い くが, この反応 に. myl as e の生 成 はサ ッカロー スや グル の場 合 は ,α-a. お いて グル タチ オ ンが重 要 な働 きを侍 って い る。 ま. コー ス な ど と比 較 して少 か ) 。 グル タチ オ ン添 加 の. た グル タチ オ ンの構 成 成分 と して システ イ ンが含 ま. 効 果 も, や は りサ ッカ ロー スや グル コー ス よ り少 な. れて い るが, CoAの生 合成 には シス テ インが必要 で. い が, か な りの効 果 が認 め られ た。糖 類 で はサ ッカ. あ り,4 ' -ホ スホ 1. : パ ン トテ ニ ー ルーL-システ イ ン. myl as eの生 成 に対 して グル タチ ロー スの場 合 が α-a. を経 て生 成 され る。CoAは各 種 の 有機 酸 や糖 の代謝. オ ン添 加 の効 果 が最 も良好 で あ り, グル コー ス, フ. に重要 な働 を侍 って お り, この よ うな こ とか らグル. ラ ク トー ス, マ ル トー スで も顕 著 な効 果 が認 め られ. タチ オ ン添 加 の効 果 があ った もの と考 え られ る。. たo菌 の生 育 は, サ ッカロ- ス, グル コー ス, フ ラ. グル コ ン酸 , ブルキ ュロ ン酸 , ガ ラクチ ュロ ン酸 ,. ク トー ス, マ ル トー ス において良 く, ガ ラク トー ス. 0コハ ク酸 , クエ ン酸 を各 1 2M に グル タチ オ ンを. とマ ンノー ス にお いて は少 し劣 って い る。 グル コー. 5. 喝/プ添 加 した もの と無添 DJ l の ものにおけるαamy7. -. ,. スや フ ラク トー ス な ど種 々の糖 類 は フ ラ ク トー ス 1. , これ らの 有機酸 にお as eの生 成 につ いて は (表 3). 6. -ジホ ス フ ェー トを経 て ク リセ ル アルデ ヒ ドと な り,. いて グル タチ オ ン添 加 の効 果 に相違 の あ るこ とが認. さ らに13 , -. ジホ スホ グ リセ レ- トに な って代謝 され. め られ た。 す なわ ち, コハ ク酸 にお いて は グル タチ. f ecs t ofgu uc c eadc Ta bl e3. Ef lc onaegu t,lc ur onaeg t, a l a cu tr onae t,s i na t n i tt ae ntep es e nc eofa eorg i h r bs e nc ltt uah. i on. eontep i l r oduc t i onαa myl a s eby As pe r gi l l usnE ' ge rv nTi hef ungusg r owt. h 4ado n nt a e ge h mI FO441. Ⅰ nc ubt ai ont i me( da ys ). Gr owt h. Gl uc onae t. 1. 02M. 0. 28 .. 5n ll. 33 . 3. 58 . (u4 ni 45 t s . / m】 )( m 2 21 ー Om 2 2. Gal a cu tr onae t. 1. 02M. 0. 3.. 0. 1. 06 . 2. 05 , 3. 48 . 4. 55 . 2. 1. 0. 0. 32 .. 1. 42 . 2. 8.. 0l441 . 5. 3.. 6 2. 4. 6. 1. 02.. M. 0. 38 .. 9 2. 46 . 4. 05 . 5. 02 . 2. 4. 0 ll.. 2M 1. 0-. 0. 3.. 0. 8.. 0 1. 98 . 3. 78 . 4. 82 . 2. 2. 5. 0 5 m 2. g M / 1 Ga l u l a tt a cu t hr i one ae t + 1. suc c i nae t. Lci t r ae t. . d(.

(5) 鎌 田 :Ase f ,r gi l L usni ge rによ るα-amya ls eの生成 にたいす る グル タチ オ ンの影響 に関す る研 究 オ ンの効果 が最 も良 く認 め られ,α-amyl as eの生成. 1 3. 蘭 の生育 も リンゴ酸 よ り劣 る結果 とな って い る。 シ. が 多 く, グル コー スや フ ラク トー スと類似 の傾 向 が. ュー酸 と蟻 酸 にお いては グル タチ オ ンを添 加す ると. 認 め られた。 クエ ン酸 において も グル タチ オ ン添加. 無 添 加 の もの に比 較 して α-amyl a s eの生 成 は 増 し. の効果 があ り,菌 の生育 もコハ ク酸 や クエ ン酸 にお. て い るが, リンゴ酸 や ピル ビ ン酸 よ りは少 な く, ま. いて良好 で あ った。 グル コ ン酸 において も グル タチ. た菌 の生 育 も良 くなか ったo. オ ン添 加の効果 が, かな り認 め られた が, コハ ク酸. 乳酸 , プロ ピオ ン酸 ,α-ケ トグル ター ル酸 , グル. や クエ ン酸 よ りは α-amyl as eの生 成 が少 な く,ガ ラ. コール酸 の各 1 0J2. Mにグル タチ オ ンを 5mg/ P添加 し. クチ ュロ ン酸 や グルキ ュロ ン醇 で は グル タチ オ ン添. ,a-ケ トグ た もの と無 添加 の ものの場 合 には (表 5). 加 の効 果 があ ま り認 め られ な い 。菌 の生育 も良 くな. ル タ- ) i 酸 に グル タチ オ ンを添加 した場合 が, α,. か った。. amyl as eの生成 が最 も多 く, グル タチ オ ンの効 果 が. ピル ビ ン酸, リンゴ酸 ,蟻 酸 , グ リオキ シル酸 ,. 認 め られ る. 。. 乳酸 の場 合 も効 果 が認 め られ, どち ら. シュー酸 を各 1 0-2. Mにグル タチ オ ンを 5mg/ P添加 し. の 有機 酸 の場 合 も菌 の生育 も良好 で あ った 。 プロ ピ. た もの と無 添加 の場 合 につ いて は (表 4) ,リ ンゴ酸. オ ン酸 において は,乳酸 よ りも α-a. myl as e の生 成 が. において α-a. myl as e の生 成 が最 も多 く,グル タチオ. 少 ない が, グ リコー ル酸 よ りも多 くなって お り, グ. ン添加 の効 果 が著 しい ことが認 め られた。 コハ ク酸. ル タチ オ ンを添加 す るこ とによ って, プロ ピオ ン酸. myl as e の生 成があり, や グル コー ス と同 じ程度の α-a. は α-a. myl as e の生成 が増加 す ることが認 め られた。. 菌 の生育 も良 好 で あ った 。 ピル ビ ン酸 において も,. グ リコー ル酸 の場 合 もグル タチオ ンを添加 す る と,. グル タチ オ ンの効 果が認 め られた が, グ リオキ シル. myl 無 添加 の場 合 よ り α-a. as e の生成 が増 加す るが,. 酸 にお いて は ピル ビン酸 よ りも効 果 が少 なか った. α-ケ トブル ター ル酸 と比 較 す ると少 な く,菌 の生育. 。. a t ei nt he Ta bt e4. Ef f e c t sofpyr uvae t,ma l ae t,f or ma t e,gy loxya lt ea ndoxal pr es e nc bs e nc L r 1 a myl a s eby e ora e ofgltt uah. i on. eon tep h r oduc t i on ofr As pe r g i l l u sni ge rva nTi e ge hm I hef ungusg r owt. h FO441 4a ndont. 1. hc me( da ys ) ubt ai ont i 2. 3 4. 5. Gr owt h 6. 1. 02M. O. 28 .. 22 . . 0 2. 2. 00 3. 35 . 3. 48 . (u4 ll ni t s /mJ( T T 1 ( 2 m1 ). .1 0 5. 2. m gT. o. 42 .. 1.. 58 3. 4.. 2?5-. Ma l ae t. 1. 0-2 M. O. 27 .. 1. 0. 172. 32 . 4. 06 . 5. 1.. 5 2. 2. 8. t e For ma. 2M l O-. 0. 20 .. 0 2. 82 . 3. 45 . 1. 6. 2. 771. 6. 6.. G Fo l u r m t a a t h t e i one. + 1. 2M 0 5. mg / 1. 0. 25 .. l l. 4 一246 70 . 4. 2.. 0 1. 9. 8. . 3. Gl yoxyae lt. 1. 02M. 0. 22 .. 78 . 1. 92 . 3. 3.. 0 3. 62 . 1. 6. 8. e pa r ua Vt. 芸二 二 a v t a h t ?n .e. S: y u ? a x . y h l i a . t n e e oxa l ae t. .1 0 5. lgl T f o 1. 02 M. O. 0. 6. 1 .. 8 2. 7. 0 r. . 4 4. 2.. 0 4. 63 . 2. 1. 5. 31 . 1. 05 , 2. 7. 2. . 4. 7.. 311. J 62 . 2. 78 . 3. 3.. 0 1. 5. 5.

(6) 1 4. 近畿大学農学部紀要. 第1 2号 ( 1 97 9). カ ブ トピ ル ビ ン酸へ の反応 で グル タナ ンが作 用 して. もあ ま り良 くなか った 。. お り,♂ -メル カプ トピル ビ ン酸 は ピル ビ ン酸 に変 化. フマ ー ル酸 ,酢 酸 , アセ ト酸 , オキザ ロ酢 酸 の各. 1 02M に, グル タチ オ ンを 57 n g/P添 加 した も の と. して他 の化 合物 へ と代 謝 されて い く。糖 類 や 有機酸. ,フマ ー ル酸 ,酢 酸 , 無添 加 の もの の場 合 には ( 表 6). は,生体 内 にお いて相互 に開通 し合 ってエ ネル ギ ー. お よび オキザ ロ酢 酸 に グル タチ オ ンを添加 す る と,. 源 な どに な るほ か, ア ミノ酸 な どの化 合物 に代 謝 さ. myl α-a. as e. の生 成 にた い して顕 著 な効 果 を示 し, グ. れて い くが,生 体 内 にお け る グル タチ オ ンの役 割 に. ル コー スや フ ラ ク トー ス と同 じ程 度 の α-amyl as eの. l ENI O) らは,グル タチオ ンと タ ンパ ク質 と っ いて, Ct 4 を用 いて研 究 して お り,グル タチ オ ンは の 関係 を1C. 生 成 が認 め られ た。菌 の生育 も良 好で あ った。 アセ. 生体 内 で重 要 な働 きを して い るこ とが推 察 され る。. ト酢 酸 にお いて は, グル タチ オ ンの効 果 が あ ま り認. as e の生 成 は少 な く,また菌 の生 育 め られず α-a. myl. as eの生 成 に対 して, この よ うな こ とか ら,α-a myl. も良 くな か った。. 糖 類 お よ び有機 酸 にお け る グル タチ オ ン添加 の効 果 が認 め られ た もの と推 論 した。. グル タチ オ ンは, コハ ク酸 か らイ ソ クエ ン酸へ の 反応 にお いて活性剤 と して作 用 す るほか, グ リオキ. Ⅳ 要. シ レー トか ら リ ンゴ酸 へ の反応 にお いて も重 要 な働 -マ レイル アセ ト酢 酸 か ら きを持 って い る。 また ,4. 約. As pe r gi l lqn uL i ge rvan TI EGI T EM I FO 441 4にお け. 4-フマ リル アセ ト酢 酸 の反応 に もグル タチ ンが必 要. るα-a. myl as e. の生 成 にた いす る グル タチ オ ンの効 果 ,. で あ り,4- フマ リル アセ ト酢 酸 は フマ ー ル酸 とア. お よび糖 , 有機 酸 に グル タチ オ ンを添 加 した場 合 の. セ ト酢 酸 に分 解 されて ピル ビ ン酸 な どに変化 して代. 効 果 につ いて検 索 した。. 謝 されて い く。 さらに, また システ イ ンか らβ-メル. 7g その結 果 ,グル タチ オ ンの添 加量 にお いて は,10n. f ec t sofl tgl ua tr a t ea ndgl yc ol l a t ei nt he Ta bl e5. Ef a cae tt,pr opI Onae t, q' -keo e ora bs e nc e orgltt a a s pr e s e nc myl eby uah. i on. eon tep h r oduc t i on orαe ge h mI hef ung usgr owt. h FO441 4ado As pe r gzu l l lsnl ge rVa n Ti n nt. 1. 2. 0. 28 .. 0. 48 . 2. 75 . 51 . 0 625 . 672 . 286. 0. 2. 0. 1 01 , 252 . 400 . 470 . 220. 0. 3, 0. 1 46 . 33. 4 512 . 592 . 275. akco tg l ua tr ae t l O2M. 0. 42 .. 1 48 . 270 . 408 . 520 . 240. a k ua eo tt tg h lt i ua one r ae t+ l Gl 2g M O 5 m / 1. 0. 50 .. 28. 0 402 . 586 . 675 . 291. 0. 23 .. 96 . 1 75 . 260 . 332 . 1 60. Lacae tt. G La l ua c t a t ei h one pr op1 0nae t. tt l O h n i a o t n e e pr G l o ua p. yc Gl o1 1 ae t. 2M 1 0-. +1 0 5 mg 2M / 1 2M 1 0-. +l O 5 m 2g M / 1. 2M 1 0-. 3. 4. 5. 6. 27n) 4 80 . 1 30 . 302 . 425 . (ui nt sm / l( )m 2 2 d0r 0 l.

(7) 鎌 田 :As f ・ e ri gl lsmgr u 'e に よ るα-amya lseの 生成 に た いす る グル タチ オ ンの 影響 に関 す る研 究. 15. Tabl e6. Ef f ec t soff uma r a t e,ac et at e,ac et oac et at ea nd oxa l oac et at e i nt he pr es enc e or a bs enc e orgl ut at hi one on t he pr oduc t i on orαamyl as eby As prt eg' l l usni gr e vnT a ig e h em T FO441 4ado n ntefn h u gusgo rwt. h. os al oac et a t e. 10-2 M. 0. ∼ 5m/ g タの範 囲 の濃 度 が効 果 のあ ることが認 め られ た。. 2. 2. 6, 8 16. 1 34. 0 50. 6 235. 2) l NIB ・ ・ E ROI OSZ: IIDoB CI z A nC . hm i. Ac l a ,71,32. 7 -329 日976). 糖 類 にお いて は, サ ッカ ロー ス, グル コー ス, フ ラ ク ト- ス, マ ル ト- ス にお いて は, グル タチ オ ン 添 加 の 効 果 が認 め られ た が, ガ ラ ク トー ス お よ びマ ン ノー ス にお いて は効 果 が あ ま り認 め られ な か った 。 有機 酸 に お いて は, コハ ク酸 , クエ ン酸 , リ ンゴ 顔 , α-ケ トブル ター ル酸 , 乳 酸 , フマ ー ル酸 , オキ lsの 生 成 に効 果 が認 め られ, ザ ロ酢 酸 で はα-amyae グル コ ン酸 , ピル ビ ン酸 , プ ロ ピオ ン酸 で は, か な り効 果 が認 め られ た が, グル キ ュロ ン酸 ,蟻 酸 , グ リオキ シル酸 , シュー酸 , グ リコー ル酸 , アセ ト酢 酸 にお い て は,α-amyl as eの生 成 に対 す る グル タ チ オ ンの 効 果 は, あ ま り認 め られ な か った 。. r uc LBaSi SMe mbr .Func l . Pr o c. 3) A・ MET S TER :St 0 (9 1 75. ) ll n. S. v mp., 95- 16 4)]D ・・ YoUN J. C. ELO L ORY andp . CWRG . I HT: C. BL ' ohm re . J, .12 5 , 713- 715 (9 175) 5) J・ D・ SANDY,R・ C. DAVI ES an d A. NEUBERGER:. Bi o c h e m. J. .150, 245-257 ( 1975). ・・ FUlS ・・ RNER:JB . alr cez . o. l. .. 6)JA CH and HRWA 1 24, 1 40- 1 48 ( 1975). 7) B・ K and K・ MANNERVT AxELS S ON:Bl z ohm... ce J,. 149, 785-788 ( 1 975). 8)植 物栄養学実験 編 集委 員会 :植 物栄養学実験. 86,朝倉 書店, 東京 (1 959). 吾 ,1 BROXMF _ YER :Bz o c he m. J". 9) JI S・ ELCE andB.. 引. 用. 文. 献. BER( ) ET . HI R・ WARNER 1) K・ A・ HI BBER。, PB・. and JA ・・ FL 」 ( lS H :JB .l z c l pz ro, l.13 3 , 110 51155 ( 1978). 153, 223-232 ( 1976). G・ LEE:Mo / ・ Phr amao c .ll, 10) C・ (H l EN andS・ l. 409-420 (9 1 75). ( 昭和 53年1 0月16日受理).

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