1
9
0
(
5
9
)
スミ ヱ
氏名(生年月日〉
本 籍
学 位 の 種 類
学 位 授 与 の 番 号
学 位 授 与 の 日 付
学 位 授 与 の 要 件
学 位 論 文 題 目
論 文 審 査 委 員
寓 野
純
恵
医 学 博 士
乙第
4
0
7
号
昭和60
年
2
月
51 日
学 位 規 則 第
5
条 第
2
項該当(博士の学位論文提出者〉
トルエン，
2
，
4
・ジイソシアネート
(TD
I)による赤血球形態変化に関する研究
( 主 査 〉 教 授 降 矢
焚
〔 副 査 〉 教 授 石 津 澄 子 ， 教 授 渡 辺 宏 助
論 文 内 容 の 要 旨
研究目的
赤血球は種々の要因により形態変化をひきおこす
が，その特殊な形態であるeytccosdi の形態成立およ
び保持閏子として膜の脂質あるいは蛋白質の何れが主
役を演ずるかという点に関し，今なお議論の多いとこ
ろである.著者はトルエンー.2 -4ジイソシアネート
(TDI) の生体系への作用機序の解明を念頭におきなが
ら， TDI 処理による赤血球の形態と性状の変化を観察
し，変化に寄与する膜内要素と形態変化の機作につい
て検討を行L，、 TDI による赤血球の変形機構，さらに
は赤血球の形態の成立および保持因子を解明する一助
として本実験を行なった.
実験方法
ヒト赤血球の等張緩衝液中に浮遊し，氷浴中でTDI
と反応させ，得られたTDI 処理赤血球の形態を走査電
子顕微鏡を用いて観察し対照赤血球との比較検討を
行った.一方， TDI 処理赤血球の低張溶液に対する低
抗性，細孔(径 8μm フィノレター〉を通過しうる変形能
を測定し，対照赤血球から得られた結果と比較，検討
した. TDI 処理赤血球からイソプロパノール・クロロ
ホルム混液を用いて膜脂質を抽出， IATROSCAN
TH-10TLC/FID アナライザーを用いてリン脂質を分
析し，膜蛋白質はLaemmli の方法に準じSDS ーポリア
クリルアミド電気泳動法により分画を行ない，対照、赤
血球から得られた結果と比較検討した.
次に，Hanahan らの方法によりヒト赤血球から膜を
分離し球状型のゴーストを調製した.得られたゴース
トに各種イソシアネート化合物を作用させ，形態，膜
-810
蛋白質の電気泳動像を観察し，対照ゴーストから得ら
れた結果と比較，検討した.また， トリプシンを用い
て予めゴーストの蛋白質の部分的水解を行い， TDI 処
理によるゴーストの形態変化に及ぼす影響を調べた.
結果
1
) TDI は濃度依存的に赤血球を内方陥没型に変化
させる.
2
) TDI 処理赤血球では細孔を通過する変形能の低
下がみられ，水に対する溶血抵抗性の増加がみられた.
これらは何れも TDI 濃度依存性を示した.
3
) 赤 血 球 か ら 細 胞 内 可 溶 成 分 を 除 去 し た 形 質 膜
(ゴースト〉を用いても TDI による形態変化が再現さ
れる.
4
) ゴーストの形態変化をおこさせるイソシアネー
ト化合物は二価性であることを要する.
5
) 赤血球膜内におるTDI 反応物質はアミノリン脂
質および裏打蛋白質(特にスベグトリン〉の両者であ
り， TDI はこれらを単独あるいは他のものと架橋重合
化させる.
6
) 膜蛋白質に対し予めトリプシン水解を行うと，
TDI によるゴーストの形態変化は阻害される.
結 論
TDI は赤血球膜を架橋重合化し，形態を内方陥没型
に変化させる.この形態変化には少なくとも膜蛋白質
の関与を必要条件とする.
すなわち，赤血球の形態成立および保持因子として，
膜の脂質よりはむしろ蛋白質が重要な役割をなすもの
と考えられる.
1
9
1
論 文 審 査 の 要 旨
本 研 究 は ， ヒ ト 赤 血 球 お よ び 赤 血 球 ゴ ー ス ト に 二 価 性 架 橋 剤 で あ る ト ル エ ン ー
2
，
4
ージイソシアネート
を
n v
i
o
r
t
i
で 作 用 さ せ て
TDI
濃 度 依 存 性 の 内 方 陥 没 を 起 こ さ せ ， こ の 形 態 変 化 が 膜 の 脂 質 お よ び 裏
打 ち 蛋 白 質 ( 特 に ス ペ ク ト リ ン 〉 の 架 橋 重 合 に 基 づ く こ と さ ら に ， ト リ プ シ ン 水 解 を 受 け た ゴ ー ス ト
は
TDI
に よ る 形 態 変 化 能 を 失 う こ と を 見 出 し ， こ の 変 形 に は 膜 蛋 白 質 の 関 与 を 必 須 条 件 と す る こ と
を 明 ら か に し た も の で あ る .
正 常 ヒ ト 赤 血 球 の 形 態 の 成 立 お よ び 保 持 の 機 構 の 説 明 に 寄 与 す る こ と 大 で あ り ， 学 術 上 価 値 あ る 論
文 で あ る .
主論文公表誌
トルエンー2，4ージイソシアネート (TDI) による赤血球
形態変化に関する研究
東 京 女 子 医 科 大 学 雑 誌 第
4
5
巻 第
7
号
5
8
1
頁
-594
頁(昭和
9
5
年
7
月
5
2
日発行〉
副論文公表誌
1)ブノレクトース摂取の人体に及ぼす影響
女子栄養大学紀要
3 20-27
昭(
)
7
4
2
) 蕉糖大量投与の人体に及ぼす影響
女子栄養大学紀要
4 33-37
昭(
)
8
4
3
) 体重減量に伴う血中遊離脂肪酸の動態
栄養と食糧
9
2
1)(
-16
1
1
)
6
7
9
1
(
8
1
1
4
)
加齢に伴う脂質過酸化および膜不安定化に対す
るαートコフエロールの長期過剰投与効果
東 女 医 大 誌
9
4
)7(
7
1
6
-
8
0
6
(昭
)
4
5
5
) マ ウ ス に お け る 長 期 リ ン ゴ 酸 お よ び ト コ フ ェ
ロール過剰投与の脳および肝有機酸脱水素酵
素への影響
東 女 医 大 誌
9
4
0
1
(
・
)
1
1
2
6
9
- 9
2
7
(昭
)
4
5
6
) イヌ目悩カやングリオシド
一 寸
s
位による組成の相違
東 女 医 大 誌
0
5
)
3
(
8
6
2
-
1
6
2
昭(
)
5
5
