Src,Crk,…そしてシグナル伝達経路

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(1)Mem. Institute of Advanced Technology, Kinki University No. 7 : 1 〜 10（2001）. 1. Src, Crk, - - - そしてシグナル伝達経路田中顕生ここではシグナル伝達経路発見の引き金となった１９８０年代後半の Src, Crk 研究から１９９０年代はじめにとりあえず完成した Ras-MAP キナーゼ経路発見を中心として筆者の Src 研究の問題点と関連して言及する。なお、現在のシグナル伝達研究はその対象が拡大そして深化してはいるが、ストラテジーそのものは基本的には変化していない。 Ⅰ．分子生物学とシグナル伝達経路の関係現在、バイオメディカルあるいはバイオテクノロジー分野は分子生物学研究者が相当な割合を占めている。ところが奇妙なことに、現代分子生物学をきっちりと定義した人を寡聞にして知らない。中には、分子生物学とは DNA を扱う生物学だと思いこんでいる人さえいる。確かに、クラシック分子生物学に較べ現代分子生物学での DNA テクノロジーの役割は大きなものがあり、そして、また、定義は各人各様であってもいいのであるが、一番見事な定義を提供してくれた人はクラシック分子生物学におけるコンセプト確立に大きな役割をした F. Crick である。彼のセントラルドグマ概念（図１の DNA - mRNA - Protein 部分）はクラッシック分子生物学の成果をを的確に表現したが、ここで彼は分子生物学の定義を行っている。曰く、＜分子生物学とは DNA → RNA →タンパク質合成の遺伝情報の流れ、そしてそのメカニズムを研究する学問である＞と（１）。. セントラルドグマ（CentralDogma）（分子生物学：情報の流れを念頭に置いた生物学） DNA（複製）（転写） mRNA （翻訳） Protein （シグナル伝達）［Signal Transduction Pathways］図 1. セントラルドグマとシグナル伝達経路１９８０年代後半から１９９０年代はじめにかけてシグナル伝達経路 Signal transduction Pathway が存在していることが証明された。そして１９９０年代、シグナル伝達経路の研究は壮観ともいうべき爆発的な広がりを示し、現在に至る。遺伝子機能を少しでも深く研究しようとすると、多くの場合、必然的にこのシグナル伝達経路分野に足を踏み入れることとなる。理由は、的確な他のストラテジーが取れないことによる。興味深い点は、このアプローチは少なくとも、まだ破綻を示していないばかりか、ことによると生命現象のほとんどすべてを解明へと導くのではないかと思わせる点である。＜シグナル伝達＞という言葉（概念）は＜シグナル伝達経路＞発見以前に既に存在していた。両者が異なる点は経路と呼べるほどのものが存在しているか否かの点であり、そのスケールの差である。＜シグナル伝達＞の場合は細胞外部からの情報（シグナル）が細胞膜を通過し、その細胞膜及び内膜近傍での非常.

(2) 2. Memoirs of Institute of Advanced Technology, Kinki University No. 7 (2001). に限られた区域でのシグナル授受（例えば G タンパク質を中心としたもの）に限られており、経路というほどのものは存在せず、従って上流・下流という概念も存在しなかったといいうる。一方、＜シグナル伝達経路＞の場合、その経路は細胞全体（すなわち細胞膜から細胞質全体、そして核内全体及び染色体 DNA）へと広がっており、経路の網羅状態は既に一分子生物学者の理解の域を越えている。現在、シグナル伝達経路の正確な総数は不明と言っていいほどであり、まだ未発見の経路も存在していると思われる。図２は生化学の代表的成果とも言える ATP 生成を示す TCA 回路である。一方、図３は最初に完成された Ras-MAP キナーゼシグナル伝達経路である（２）。前者は物質恒存則を守りながら化学物質の代謝過程を示し、後者は物質恒存則とは無関係にシグナルの流れる方向、これに関与している物質を示す（特にシグナルの流れをスイッチ ON、OFF する物質及び一種類のイン・プットシグナルをいくつもの質的に異なったシグナル伝達経路へとシグナル変換する物質（アダプター））。即ち、シグナル伝達経路研究とはシグナルの流れ - 情報の流れ及びそのメカニズムの研究ということになる。従って、シグナル伝達経路は上記、クリックの提唱したセントラル・ドグマの延長線上 Extension に存在するものであると捕らえることが出来る。セントラル・ドグマの場合、核酸やアミノ酸の配列により遺伝情報を具体的に捕らえることが出来るが、シグナル伝達経路の場合その情報は実験を通してしか捕らえることが出来ない。にもかかわらず、その情報は遺伝的に規定され、それぞれの情報は遺伝子に暗号化 encrypt されていると言いうる。. 図 2. トリカルボン酸（TCA）サイクル.

(3) 3. 図３．EGF/Ras/MAPK シグナル伝達経路詳細は文献（２）参照。. Ⅱ．Src, Crk - - -. ［Src タンパク質］ガン原遺伝子（proto-oncogene）もしくはガン遺伝子（oncogene）src にコードされているタンパク質でチロシンキナーゼ（Tyrosine kinase）活性をもち、チロシン（Tyr）残基をリン酸化する（src は sarcoma の略）。in vivo における Src 固有機能に関しては今もって不可解な点が多く、src 研究者を悩ませ続けている。過去、この src 及び関連研究は癌、ウイルス、ガン遺伝子、シグナル伝達経路分野で重要な貢献をなしてきた。例えば、ガンを引き起こすウイルス（Rous sarcoma virus）の最初の発見（このウイルスゲノムに src が組み込まれている）；RNA 依存 DNA ポリメラーゼ（reverse-transcriptase）の発見（図１の RNA → DNA 過程を司る）（この酵素のゆえ、この種のウイルスはレトロ・ウイルスと呼称される；エイズを引き起こす human immune deficiency virus（HIV）もこのグループに属する）；正常細胞のクロモゾームに存在しているガン原遺伝子の最初の発見；１９８０年代前半おびただしいガン遺伝子、ガン原遺伝子の発見が相次いだが、これらのうち、最初の活性化メカニズムの解明は Src タンパク質で行われた。Src 及びこれを含むウイルスに関する過去の膨大なデータ蓄積のため、そして実験的に扱いやすいため沢山の研究者に研究され、様々な発見をもたらしたといいうる。私見によれば、歴史的に見て、 src 及び関連研究のテーマは実用的というよりも、モデル的に用いられ続けている珍しい遺伝子に属するのではないかと思われる。 Src は非受容体型キナーゼで、主として細胞内膜に存在する。図４A は Src タンパク質の機能ドメイン・マップを示す。第１番目アミノ酸残基 Met は除かれ、その代わり脂肪酸の一つミリステートが共有結合し、アミノ端最初の機能ドメイン［膜結合ドメイン］を形成し、次に、［ユニーク・ドメイン］、そして［SH3］、［SH2］、［チロシンキナーゼ・ドメイン］、［カルボキシターミナル・レギュラトリー・ドメイン（カルボキシ端制御領域）］が続く（３-７）。［膜結合ドメイン］：Src タンパク質の細胞内膜局在に関与。.

(4) 4. Memoirs of Institute of Advanced Technology, Kinki University No. 7 (2001). ［ユニーク・ドメイン］：筆者はこの領域を定義し、Recognition domain と名付けたが（４）、後にユニーク・ドメインと呼称される。Src はファミリーを作っており、全部で９種類の類似遺伝子が存在する（６, ７）。これらはお互いに構造的には酷似しているが、そのアミノ酸配列のうち、ユニーク・ドメイン部分のみが類似性を持っていない（６, ７）。その機能としては、Src 固有のレセプターもしくはタンパク質を認識（結合）し、Src 固有の機能を司ると推定したが（４）、依然として該当タンパク質は同定されていない。ただし、 Src ファミリーのうち、Fyn 及び Lck において該当レセプターが発見されているが、この領域の詳細な機能は不明である（８, ９）。［SH3, SH2］：SH は Src Homology の略であり、これらの領域は別のチロシンキナーゼ遺伝子 fps を用い、 Src アミノ酸配列と比較することにより定義されたが、機能解明に関しては後述する Crk の出現を待たねばならなかった。ガン化を引き起こす Src （v-Src）のこれらの領域に様々な突然変異をつくることにより、その表現型は著しく変わり、場合によってはガン化に関して温度感受性を示す場合もあり、メカニズム的には説明不可能な領域であった。［チロシンキナーゼ・ドメイン］：この領域にチロシンキナーゼが存在。［カルボキシターミナル・レギュラトリー・ドメイン］：この領域に存在する Tyr 残基の一つがリン酸化されるか否かにより、チロシンキナーゼが不活化されるか活性化されるかが制御されており、チロシンリン酸化による Negative Regulation 仮説を提示（3）。後にこのメカニズムは多くのグループにより証明されることとなる（７）。＜カルボキシターミナル＞と断っているのは、＜ SH3-SH2 ＞領域も一種の制御領域であるため、混乱を避けるために命名。なお、精細な活性化メカニズムに関しては SH2, SH3 機能が関与しており（図４B）、やはり Crk の出現を待たねばならなかった。. 図４．c-Src ドメインマップと c-Src チロシンキナーゼ活性化メカニズム. A．c-Src ドメインマップアミノ酸残基 No. はスタンダードとして用いられている chicken c-Src に従った。Human c-Src ではユニークドメインに３アミノ酸残基余分に存在する（４）。. B．c-Src チロシンキナーゼ活性化メカニズム. 図中の CSK は c-Src カルボキシ末端の Tyr 残基をリン酸化するキナーゼ（c-Src Kinase）。.

(5) 5. ［Crk］１９８８年、突如として出現したガン遺伝子であり、このタンパク質を大量発現することにより細胞内の様々なタンパク質の Tyr 残基がリン酸化され、in vivo 及び in vitro でガン化及びトランスフォーメーションを引き起こす。それにもかかわらず、この遺伝子はチロシンキナーゼをコードしていず、あるのは上記 SH2 及び SH3 類似ドメインのみであった（図５）（11）。この発見は一時的混乱そして大きな興奮を研究者の間に呼び起こした。私見によれば、この発見が後のシグナル伝達経路発見の直接のトリガーとなった。すなわち、この発見なしにはシグナル伝達経路の発見は大幅に遅れたものと思われる（ちなみに、この遺伝子の発見は Hanafusa（花房）のグループによってなされた）。この発見により SH2 及び SH3 ドメインがタンパク質相互作用に重要な役割を持つことが認識され、Src SH2 及び SH3 は集中的にアタックされた。この後、これらのドメインを持つ様々なタンパク質が続々と発見され、様々なシグナル伝達経路において極めて重要な働きをするキー・プレーヤーであることが分かってきた。. 図５．SH2, SH3 を持つタンパク質酵素活性を持つもの、持たないもの（アダプター機能のみを有する）を示す。 2 : SH2. 3 : SH3. PTK, protein tyrosine kinase; PTP, protein tyrosine phosphatase ; PLC, phospholipase C ; GAP, GTPase activating protein ; Gly/Pro, glycine and proline-rich 領域。［Src キナーゼ活性化機構］正常（Wild type）Src タンパク質のカルボキシ端の Tyr 残基は多くの場合リン酸化されており（不活性型）、このリン酸化 Tyr（P-Tyr）は３次元構造 SH2 ドメインのポケットに入り込んだ状態にある（非共有結合）。この不活性型を活性型に変換するには SH2/P-Tyr の結合がはずれる必要があり、次の３つのケースが知られている（図４B）（５, ７）。（１）リン酸化 Tyr- タンパク質フォスファターゼが作用し、カルボキシ端 P-Tyr を脱リン酸化する。（２）他のタンパク質の SH2 と競合し、その結合がはずれる。あるいは、（３）SH3 が他のタンパク質と結合することにより、近傍に存在する SH2 の３次元構造が変化し、その結果、SH2/ カルボキシ端 P-Tyr の結合がはずれる。なお、SH3 はあるタンパク質（ターゲット）のプロリン残基がリッチなペプチッド領域に、ある種の特異性（broad specificity）を持って結合する。また、SH2 と P-Tyr の結合も P-Tyr 近傍のアミノ酸配列が関係し、ある種の特異性を持っている。いずれにしろ、SH2/ カルボキシ端 P-Tyr の結合がはずれるとキナーゼ・ドメインへの ATP 通路が出来、キナーゼの活性化が引.

(6) Memoirs of Institute of Advanced Technology, Kinki University No. 7 (2001). 6. き起こされる。そして SH3 を介しての活性化の場合、SH3 ドメインに結合しているターゲットタンパク質はその活性化キナーゼによりリン酸化される。このリン酸化により、シグナルの流れは Src からそのターゲットタンパク質に伝達されることとなる。なお、活性化された Src キナーゼ領域は自己リン酸化を同一分子上（cis）で行うが、この自己リン酸化により活性化 Src はさらに強力なキナーゼ活性能力を獲得すると考えられている。［SH2, SH3：そのアダプター機能］ SH2 及び SH3 はそれぞれ他のタンパク質の P-Tyr 領域、プロリン残基リッチ領域に特異性的に結合することが出来る（図６A, B）。Src SH2 はカルボキシ端の P-Tyr に結合できるが、他のものにも結合する。例えば、PDGF（血小板由来細胞増殖因子）受容体自己リン酸化部位の P-Tyr に結合し、Src キナーゼ活性化の後、PDGF シグナル伝達経路を活性化し細胞増殖を引き起こす（６, ７）。一方、Src SH3 は様々なターゲットタンパク質に結合、リン酸化し、フォスファチジルイノシトールキナーゼ（PI3-K）伝達経路など別のシグナル伝達経路を活性化することが知られている。このことは SH2 や SH3 を持つタンパク質がアダプター機能を持っていることになる。そしてこれらのタンパク質が何個も介在することにより巨大な多量体さえ形成しうることになる。そしてシグナルの流れは様々な方向へ同時的に流れ、様々なシグナル伝達経路を活性化することになる（図４B, ６A 及び７参照）。なお、アダプター機能をもつドメインは SH2, SH3 以外にも幾つか存在している。例えば、PTB（phosphotyrosine-binding）、PH（Pleckstrin homology）及び PDZ ドメイン。 Ⅲ．そしてシグナル伝達経路図３は Ras-MAPK シグナル伝達経路を示すが、ras 遺伝子もまた古くから知られているガン遺伝子であり（ras は rat sarcoma の略）、ガン原遺伝子の中で初めてヒトのガン（大腸癌）と関係があることが発見され（１９８２）、その機能は精細に研究されている。Src と異なり、GTPase 活性を持つ（GTP を GDP に変換；なお Ras 経路が活性化されるのは GTPase 活性が無い時、即ち GTP 結合型 Ras）。Sos は Ras と GDP の解離を促進する（図６B）。GTPase 活性化タンパク質（GTPase Activating Protein（Gap））は SH2, SH3 を持ち（図５）Ras タンパク質に結合して、GTPase 活性を１００倍以上活性化する（２）。MAP キナーゼ（mitogen activated protein kinase（MAPK））は Ser/Thr キナーゼ活性を持ち、核内の Myc、Fos などの核内転写因子をリン酸化し転写活性を制御する。マイトゲンの一つ EGF（上皮細胞成長因子 epidermal growth factor）を外から細胞に加えた場合、チロシンキナーゼ活性を持つ EGF 受容体のキナーゼがまず活性化される。EGF レセプターチロシンキナーゼを活性化（スイッチ ON） → EGF レセプター自己リン酸化が数カ所で起きる→その内の一つにアダプタータンパク質 GRB - 2 の SH2 が特異的に結合（図３，５B）→ GRB - 2 の SH3 ドメインは Sos をリクルート→この Sos は Ras と結合し Ras 経路を活性化（不活性型 Ras）（スイッチ ON）→ Raf （Ser/Thr キナーゼ）が Ras に結合し、活性化される（スイッチ ON）→ Raf が MEK をリン酸化し、MEK（Tyr/Ser/Thr キナーゼ）が活性化される（スイッチ ON）→ MEK が MAPK（Ser/Thr キナーゼ）をリン酸化し活性化（スイッチ ON）→核内に移行した MAPK が様々な転写因子をリン酸化し、転写活性を制御→一群の遺伝子が転写され該当細胞の細胞増殖もしくは細胞分化を誘導（２）。このようにして、経路上の様々な酵素活性物質をスイッチ ON, OFF することによりシグナルが［細胞外→細胞内→核内 → DNA］と伝達されていく（２, ６）。なお、上記 EGF レセプター活性による自己リン酸化部位数カ所のうちのいくつかに異なったタンパク質が結合し、別のシグナル伝達経路を活性化する。Src ファミリーの一つ Lyn では図７に示すようないくつものシグナル伝達経路の活性化に関与していることが知られている（５）。.

(7) 7. 図６．SH2, SH3 アダプター機能 A はモデル図。 B は EGF が EGF レセプターに結合し、Ras をリクルートする図（Aに対応）を示す。 Ras/MAPKシグナル伝達経路は図３を参照。. 図７．Src ファミリー Lyn キナーゼ関与シグナル伝達経路. mIG : 膜結合型免疫グロブリン；抗原が結合することにより Lyn キナーゼが活性化され、自己リン酸化及び結合タンパク質のリン酸化を行い、様々なシグナル伝達経路を活性化する。図中の矢印はそれぞれ異なるシグナル伝達経路を示す。上述したように、現在、シグナル伝達経路に関する研究は膨大な広がりを示しており、その結果は精細な分子生物学的テクニックで裏打ちされ薬学的、医学的応用へと的確に開発されつつあり、何の不服もないかに見えるが、大きな問題が存在している。それは一つのシグナル伝達経路決定に膨大な時間とマン・パワー（知力？）と相当な研究費が必要であること。ある遺伝子をクローニングし、その遺伝子産物を発現し、そのタンパク質の機能を決め、その制御機構を解明し、そのタンパク質の相互作用タンパク質を同定し、さらにそのタンパク質の上流、下流にあるタンパク質の機能を解明し、さらにその制御機構を解明し、.

(8) Memoirs of Institute of Advanced Technology, Kinki University No. 7 (2001). 8. −−。かくしてシグナル伝達経路が決められていく。しかし、現在、３−４万個のヒトの遺伝子が存在しており、その多くが何らかの形でシグナル伝達に関与している可能性が高い。即ち、ヒトの全シグナル伝達経路を決定するには膨大な数の遺伝子を上記の方法で決めて行かねばならない。大げさにすぎるかもしれないが、全シグナル伝達経路決定は人類にとり、やはり壮図である。 Ⅳ．Src における問題点 Src は知られている限りでは、すべての組織、細胞で発現している（ただし、神経細胞、骨の破骨細胞、血小板において高発現が見られる）。一方、Src のターゲット（もしくは相互作用タンパク質）は数十種知られている（表１の説明参照）（５, ６, ７）。このため、Src は細胞が生きていくために必要なハウス・キーピング（house keeping）遺伝子のひとつではないかという説もある。遺伝子機能決定の強力な武器とも言える遺伝子ノックアウト（gene knockout）技術を用いて Src ファファミリー遺伝子はアクティブに研究されてきたが、src 遺伝子ノックアウトマウスは骨形成異常（大理石病）及び無歯を示したが、他には異常を示さなかった（11）。この骨・歯の異常は破骨細胞の骨吸収機能に Src が必要であり、Src 固有の機能は骨吸収に関係しているのではないかと思われた。しかし、さらに実験を行った結果、この骨吸収機能に上記 Src ユニークドメインは無関係と結論された。つまり、Src SH2 及び SH3 のアダプター機能によるものであると結論できる（６, 11）。表１：Src ファミリー遺伝子のノックアウトマウス実験及び発現組織 Gene （s）. 表現形質（Phenotypes）. 正常発現部位. c-src （-/-）. 大理石病、無歯；生後、数週間で死亡；但し、柔ら普遍的 , 脳、血小板、破骨細胞で高発現. かいエサを与えると生き続け、生殖能力あり。 fyn （-/-）. 空間記憶異常（Morris water maze test）；海馬の構造異常；. ミエリン形成不全；T 細胞抗原レセプターからの普遍的 , 脳、胸腺で高発現. シグナル伝達異常 c-yes （-/-）. 変化なし脳、内皮細胞、線維芽細胞、T リンパ球 c-src （-/-）c-yes （-/-）. 出産時死亡 c-src （-/-）fyn （-/-）. 出産時死亡 fyn （-/-）c-yes （-/-）. 相当数生き残る；腎臓異常をきたし糸球体硬化症 c-src （-/-）fyn （-/-）c-yes （-/-）死亡（胎児 E 9.5 day） c-fgr （-/-）. 変化なし骨髄系細胞、B 細胞 lyn （-/-）. B 細胞抗原レセプターからのシグナル伝達異常、自普遍的、小脳、骨髄系細胞、B リンパ球. 己免疫疾患 lck （-/-）. B 細胞抗原レセプターからのシグナル伝達異常、Ｔ T リンパ球、NK 細胞. 細胞の生育不全 blk （-/-）. 変化なし B リンパ球 hck （-/-）. 変化なし骨髄系細胞. Src は様々な膨大な数のタンパク質と相互作用を持つ（文献５, ６）（注：これらのほとんどが , Yes, Fyn タンパク質とも相互作用している）。（a）細胞内膜近傍のタンパク質：インテグリン類、カドヘリン類のレセプター。（b）成長因子レセプター：EGF、FGF、 CSF-1、NGF、HGF、IR、IGF、Neu（ErbB2）等のレセプター。（c）サイトカインレセプター：IL-2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, Prolactin, TNF, EPO, Oncostatin M, and 4.1 MM レセプター。（d）G タンパク質結合レセプター：LPA, a2aA, Thrombin, M1, Angiotensin II, ET-1, Bombesin, Bradykinin, Vasopressin, FMLP, and PAF。（e）Protein Tyr-Phosphatase； PI3-Kinase；FAK/Pyk2；GPI- リンクレセプター。.

(9) 9. 一方、上記ノックアウトマウスで他の組織異常が見られなかったのは Src キナーゼ活性が他の Src ファミリー遺伝子産物により代用されたためと考えられている。Src ファミリーは９種類のメンバーからなり、これらのうち Yes、Fyn はとりわけ Src に酷似している（ユニークドメイン以外は）。この代償機能のメカニズムはシグナル伝達系を考慮すれば、当然これらのタンパク質が持つ SH2 及び SH3 のアダプター機能によるものと考えられる。そして src, yes, fyn のダブルノックアウトマウスが作られたが、Src に関しての他の異常所見は見られなかった（ただ、Fyn に関してのノックアウト実験では免疫関与、空間記憶関与と興味深い結果が得られている）（表１）（６, 11）。現在、色々なグループが Src の神経細胞における役割をシグナル伝達経路の観点から追っており、NMDA （N-methyl-D-aspartate）レセプターとの関与（12）、あるいは新しいタイプのイオンチャンネルとの関与（13）など興味深い知見が得られているが、これらがアダプター機能による関与なのか Src 固有の機能に関与しているのか定かでない。問題点は Src 固有の機能と Src の持つアダプター（SH2, SH3）機能を区別できるような実験系を組むことが非常に難しいことにある。そして、今ひとつは、Src 固有の機能に関与していると考えられている Src ユニークドメインに結合するタンパク質が見つかっていない点にある。現在、この２点に的を絞り研究を行っている。. 引用文献１．Judson, W.I.B. The Eighth Day of Creation : Makers of the Revolution in Biology .（Cold Spring Harbor Laboratory）, 1996. ２．Lodish, H. et al. Molecular cell biology（1999）（W.H. Freeman and Company） . Figures borrowed form this book were modified as shown in Fig. 4. ３．Tanaka, A. and D.J. Fujita. Expression of a molecularly cloned human c-src oncogene by using a replication-competent retroviral vector. Mol. Cell. Biol. 6: 3900-3909, 1986. ４．Tanaka, A., C.P. Gibbs, R.R. Arthur, S.K. Anderson, H.-J. Kung, and D.J. Fujita. DNA sequence encoding the NH2-terminal region of the human c-src protein: implication of sequence divergences among srctype kinase oncogenes. Mol. Cell. Biol. 7: 1978-1983, 1987. ５．田中顕生、山本雅＜Srcタイプチロンシンキナーゼのシグナル伝達機構＞. 実験医学臨時増刊号「シグナル伝達の研究の最前線」（羊土社） Vol. 35, No. 14, p23-29, 1998.. ６．Thomas S.M. and Brugge, S.M. Cellular functions regulated by Src family kinases. Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. 13: 513-609, 1996. ７．Brown M.T. and Cooper, J.A. Regulation, substrates and functions of src. Biochemica et Biophysica Acta 1287: 121-149, 1996. ８．Timson Gauen, L.K. et al. p59fyn tyrosine kinase associates with multiple T-cell receptor subunits through its unique amino-terminal domain. Mol Cell Biol 12:5438-46, 1992. ９．Turner J.M. et al. Interaction of the unique N-terminal region of tyrosine kinase p56lck with cytoplasmic domains of CD4 and CD8 is mediated by cysteine motifs. Cell. 60:755-65, 1990. 10．M ayer B.J. , Hamaguchi, M. Hanafusa H. A novel viral oncogene with structural similarity to phospholipase C. Nature 332:272-5, 1988. 11．田中顕生Molecular Medicine Vol. 34 臨時増刊号「ノックアウトマウス・データブック」セクッション＜src（c-src, v-src）＞p466-467, 1997. 12．Ma, Y-C. et al. Src tyrosine kinase is a novel direct effector of G protein. Cell 102: 635-646, 2000..

(10) 10. Memoirs of Institute of Advanced Technology, Kinki University No. 7 (2001). 13．Santoro, B. et al. Interactive cloning with the SH3 domain of N-src identifies a new brain specific ion channel protein, with homology to Eag and cyclic nucleotide-gated channels. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 94: 148-15-14820, 1997..

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