福山型先天性筋ジストロフィーの生検筋組織の免疫組織化学的検討

(1)

原著

倭血糖鳥譜58幽閉嬬言〕

福山型先天性筋ジストロフィーの

生検筋組織の免疫組織化学的検討

東京女子医科大学小児科学教室（主任：福山幸夫教授）オカダノリコ

岡田典子

（受付昭和63年1月21日）

Immunocytochemical Study on Muscular Tissue of

Fukuyama Type Congenital Muscular Dystrophy

Noriko OKADA

Department of Pediatrics（Director：Prof． Yukio FUKUYAMA） Tokyo Women’s Medical College

Etiology of Fukuyama Type Congenital Muscular Dystrophy（FCMD）is not yet fully understood and several hypotheses about its pathogenesis have been proposed． It seems that the common opinions tend to evaluate very little the role of inflammatory process in the development of FCMD．

The present author examined the biopsied specimens from the muscies of the patients suffered from this disease histological五y and immunocytochemically．

Histological pictures were not convincing， however， the presence of lymphoid and fibroblastic reticular cells， possibly inflammatory in their nature， was often recognized in muscular tissue． Immunocytochemically， positive results for LCA（leukocyte common antigen）or MT−1（pan T） were obtained on the scattering lymphoid and fibroblastic reticular cells in the muscular tissues from the patients under two years old in their age． Moreover， in these cases the presence of several T− marker expressing lymphoid， immunoglobulin containing cells and some complement components and complement receptors on the reticular cells was proven．

Immunoelectron microscopy revealed T cell markers on the surface or immunoglobulins in the cytoplasms of infiltrating cells．

On the other hand， in the cells contained in the muscles of FCMD patients above two years old in their age， immunocytochemical positiveness was sometimes proven， its frequency being iower． These results suggest that inflammatory cell reaction may play a role in the early stage of development of FCMD．

緒言

1960年Fukuyamaら1）によって初めて記載さ

れた「特異な先天性進行性筋ジストロフィー症」

は，その後多くの研究者によってその疾患として

の特異性が確認され，進行性筋ジストロフィー症

の中の一亜型として，福山型先天性筋ジストロ

フィー症（FCMD）の名称のもとに，内外ともに

広く認められている．教室の大沢2）は，診断確実な本症159家系について詳細な遺伝学的研究を行い，

本症の発現形式が常染色体性劣性遺伝のそれと完

全に一致することを証明した．しかし一方，

Chou3），鴨下ら4）‘）は，主として脳の神経病理学的

検索から，胎内でのウイルス感染の可能性を示唆

し，本症の同胞再発率が高いことも胎内感染と矛

盾するものではないとした．そこで教室の鈴木

ら6）は，FCMD 38例の生検筋組織について，とく

に炎症性変化の存否に重点をおいて綿密な組織学

的，組織化学的再検討を行ったが，通常の方法で

一394一

(2)

みる限り，筋組織への細胞浸潤はないか，または

あっても軽度にとどまり，したがって筋病変の成

因として炎症の関与を否定した．

著者はさらにこの問題を追求すべく，筋組織内

の炎症性細胞の浸潤の有無を中心に，形態学的な

らびに免疫組織化学的検索を行い，若干の成績を

得たので，多少の文献的考察を加え，報告する．

検索症例

1972年から1987年までの問に，東京女子医科大

学小児科で，臨床症状と筋生検を含む検査所見から

FCMDと診断された24例を検索した． Fukuyama

ら7）による病幾分類別にみると，典型例（知能障害があり，独歩能力のないもの）17例，非典型例（知能

障害がないか軽度，または独歩能力のあるもの）

7例よりなる。検索した筋組織はすべて生検によ

り得た大腿四頭直筋で，生検時の年齢は0歳5カ

月から8歳5ヵ月であり，男児9例，女児！5例で

ある．また，同時にDuchenne型進行性筋ジストロ

フィー（以下DMDと略）7例（1歳4ヵ月から

6歳0ヵ月）と，明らかな筋病変を認めえなかっ

た4例（3ヵ月から3歳8カ，月，男児2例・女児

2例，高CPK血症，高乳酸血症， Prader−Willi症

候群および筋病変を認めない旦oppy infant）の筋

組織をも対照として検索し，比較検討した．

検索方法

1．形態学的検索

組織を生検採取後直ちにドライアイス・イソペ

ンタソ内で急速凍結した。凍結組織はクリオス

タットで切片を作製し，hematoxylin−eosin（H−E）

染色およびGomori−trichrome変法染色を行っ

た。ホルマリン固定後，通常の過程でパラフィン

包埋した組織も同様の方法で，光顕的に検索した．また，組織の一部は採取後，2．5％グルタールァル

デハイド固定を行い，ついで1％オスミウム酸固

定の後，型通りの方法で脱水，エポン樹脂包埋し，

電顕用切片を作製した．免疫電顕切片と共に，電

子顕微鏡明石2000LEMを用いて観察した．

2．免疫組織化学的検索

筋組織の免疫組織化学的検索では，主として筋

組織に浸潤する細胞に存在する諸物質の有無を確

めるために，通常のホルマリン固定パラフィン包

埋標本，2％perlodate−lysin−paraformaldehyde

（PLP）固定後凍結した標本，あるいは無固定凍結

標本について，以下の方法により検索した．

1）パラフィン切片による検索

通常のホルマリン固定パラフィン包埋標本を4

μの切片として，0ユ％ネオプレインで処理したス

ライドガラスにのせた．切片は1％トリプシン・

トリス緩衝液で30分間処理後，モノクローナル抗

体（MT−1， LCA8）， Leu M！）の反応ではFarr＆

Nakane9）の方法に準拠した酵素抗体間接法によ

り免疫染色した，ポリクローナル抗体（免疫グロ

ブリン，lysozyme）の反応ではperoxidase

antiperoxidase（PAP）法（Sternbergerlo））またはavidin−biotin−complex（ABC）法（Hsuら11））により，免疫染色した（Fig．1）．用いた抗血清は Table 1に示すごとくである．

2）凍結切片による検索

PLP固定と無固定凍結標本は，いずれもクリオ

スタットで6μの切片を作製した．切片をアルブミ

ン処理したスライドガラスにのせ，酵素抗体間接

法で検索した．一次抗体はTable 1に示すモノク

ローナル抗体（B1， Leu 1， Leu 2a， Leu 3a， Leu 7，0K Ia， HLA−DR），補体成分（Clq， C3， C3c， C3d， C4， C5， C6， C8， C9， C3 activator， C3c inactivator， properdin），補体レセプター（CR1， CR2， CR3）である． 1），2）いずれの場合も，反応熱phosphate bu仔er

solution（PBS）で洗浄，0．03％3，3！一

diaminobenzidine tetra−hydrochlorideトリス塩酸緩衝液中に0．05％のH，0、を添加した液（DAB）

で発色した．発色後，メチルグリーンまたはヘマ

トキシリンで核染後脱水透徹封入した．また，凍

結切片で反応した一部の切片は，DABで発色後

グルタ＿ルァルデハイド・オスミウム羽二重固定

後脱水し，Epon 812に浸漬して電顕ブロックと

し，超薄切片作製，Reynoldsのクエン酸鉛で染色

した免疫電顕切片を作り，観察した．

3）染色の特異性と検索症例の特異性の確認

免疫染色の特異性をたしかめるために，次の手

技を行った．①第一抗体のかおりに免疫動物正常

血清を用いた．②第一抗体を除いた．③第一抗体

395一

(3)

Blocking endogenous peroxidase act1Vlty First step Second step Third step Paramn section （formalin一且xed） 0．5％H202−methylalcoho1 4℃，30min．

↓

0．1％Trypsin in Tris−saline 37℃，30min． ↓ Frozen section （PLP・丘xed）（unfixed） 0．5％periodic acid 4℃，10min．

10％normal serum（goat暫swine， sheep） room temperature，10min，

↓

Antisera for primary reaction

／

（PAP） SWIne ant1 ，rabbit Igs or rabbit anti ・goat IgS ↓ PAP complex

＼

↓ （ABC） biotinated anti・goat IgG avidin HRP ⊥ DAB reaction with H202

↓

＼

（indirect） HRP conjugated second step sera

counterstaining with methylgreen or hematoxylin

！．Specimens were rinsed with PBS or Tris−saline after each step incubation．

2．First step reaction was carried out in moist chamber（4℃）overnight．

3．Other steps were reacted at least 30 minutes in room temperature，

Stain procedures were according to Sternberger1D｝， Hsu et allD and Farr＆Nakane9》． F孟g．1 1mmunoperoxidase staining prQcedures

でその抗原を吸収し，また抗原との特異沈降応答

をOuchterlony法でたしかめた．④第二抗体を除

いた．⑤内因性ペルオキシダーゼ活性の有無を

DAB反応のみのものと比較した．

結果

1．形態学的検索

光顕的には（Table 2），筋組織の基本構築は結

合織の増加や脂肪組織の浸潤で種々の程度に破壊

されていた．その程度は患児が年長なほどめだつ

傾向があった．リンパ球と思われる細胞の結合織

へ・の浸潤は，H−E染色標本では24例中21例

（87．5％）にみられた．そのうち14例では明らかに

リンパ球と考えられたが，他の7例では，変性し

た筋組織の核と必ずしも区別し難いものであっ

た．明瞭な円形細胞の多くは単核のリンパ球様細

胞で，毛細血管周囲や筋線維の近傍にも散在性に

認められた．また，紡錘形の胞体を有し，核が不

規則長円形の細網細胞様あるいは線維芽細胞様の

細胞も結合織内に存在し，これに混じて空胞を伴

うやや大きいマクロファージと考えられる円形細

胞も僅かにみられた．細胞浸潤のはっきりしない

3例では，筋線維がほとんど消滅し，結合織およ

び脂肪組織によって置換されていた（Photo 1）．

一方DMDでは， FCMDの同年齢の組織所見と

くらべると，その変化はより軽度であったが，同

様の細胞浸潤がみられた．

コントロールに用いた筋組織では，筋線維の変

化や結合織の増殖もなく，円形細胞の浸潤もみら

(4)

Table l Monoclonal and polyclonal antibodies used Antibody

LCA

MT−1 Leu Ml B−1 Leu l Leu 2a Leu 3a Leu 7 0Kla HLA−DR Anti−IgG −IgM JgA −IgE −IgD ・κ＆λ 一lysozyme Anti−complemellts Clq， C3c， C4， C5， C3 activator C3d C6， C8 C3， properdin， C3b inact． Cg Anti℃omplement receptors CRl

CR2＆CR3

Specificity 1eukocytes pan T cell monocyte， granulocyte pan B ・ pan T supPressor／cytotoxic T helper／inducer T human natural killer T B，activated T and monocyte

activated T， dendritic cell

IgG IgM IgA IgE IgD light chain of Ig histiocytic cell complement COmpollents complement receptors

Second＆third antisera and reagents

Swine anti−rabbit immunoglobulins Rabbit anti−goat immunoglobulins Rabbit peroxidase anti−peroxidase complex Goat peroxidase anti−peroxidase complex HRP linked IgG F（ab’）fragment sheep anti−mouse immunoglobulin

HRP linked IgG swine anti−rabbit immunoglobulins

Avidin−biotin・complex（ABC）kit 3，3’一diaminobenzidine tetrahydrochloride（DAB） Source Dakopatts（Denmark） Biotest（West Germany） Becton−Dickinson（US．A．） Coulter Clone（U．SA．） Becton−Dickinson（U．S．A．） Becton−Dickinson（US．A．） Becton−Dickinson（U．S．A．） Becton・Dickinson（U．S．A．） Ortho Diagnostic（U．S．A．） Dakopatts（Denmark） Dakopatts（Denmark） Dakopatts（Denmark） Behringer（West Germany） Dakopatts（Denmark） Behringer（West Germany） Dakopatts（Denmark） Dakopatts（Denmark） Behringer（West Germany） Dakopatts（Denmark） Cappel Lab，（U．SA．） Kent Lab．（U．S．A．） Miles Lab，（U．SA．） Dakopatts（Denmark） Becton−Dickinson（U．S．A．） Dakopatts（Denmark） Dakopatts（Denmark） Dakopatts（Denmark） Dakopatts（Denmark） Amersham International（England） Dakopatts（Denmark） Vector Lab．（USA．） Dotite（Japan） HRP；horseradish peroxidase れなかった。

電顕的には，検索しえた例（21例）では筋線維

と変性，結合織および脂肪の浸潤がめだち，再生

筋線維核もみられた．結合織内には核が円形で核

網の密な円形細胞がみられ，胞体はポリソームに

富み，時と．して短桿状の少数の粗面小胞体を有す

るリンパ球が存在した．また，粗面小胞体が発達

し，二形のやや不規則な形を示す核を有し，胞体

突起を有する細胞がみられた．この細胞には少数

の小型のライソゾームを有するものもあった．明

らかな貧食像は認められなかった．この細胞を以

下，細網細胞と呼ぶ．加えて，ライソゾームを有

し，貧食空胞をもち少数の桿状の小胞体があるマ

クロファージも少数ながらみられた（Photo 2）．

2．免疫組織化学的所見

Table 3∼5に，免疫組織化学的所見の結果を示

す．LCA陽性細胞あるいはMI−1陽性細胞のいず

れか，またはともにみられる症例は，FCMDでは

24例中19例（79．2％），DMDでは．7例中5例

（71．5％）でみとめられ，結合織内に集籏性あるい一397

(5)

_一一一宰；atypical type

は散在性に分布していた．筋線維細胞およびコン

トロール筋組織では，LCAやMT−1陽性細胞は認

められなかった（Photo 3，4）． LCA， MT−1が共

に陽性またはいずれかが陽性であった症例は，年

齢が低い傾向をしめし，特に2歳未満の症例では

いずれかが陽性であった．Leu M1陽性細胞は4

例（16．7％）で認められ，その全例でLCAも陽性

であった．

B1陽性細胞は， FCMDでは検索4例中3例

（75％）の筋組織内に散在した．一方検索した

DMD 4例，コソトロール1例では陽性細胞は検

出しえなかった．

Leu 1陽性細胞は凍結切片で検索しえたFCMD

6例全例（100％）にみられ，その数はB1陽性細

一398一

(6)

Table 3．Immunocytochemical且ndings of the in丘ltrating cells in intramuscular regions of FCMD， DMD and controls using monoclonal antibodies

LCA

MT・1

LeuM1

Leu7 Leu1 Leu2a Leu3a B1 OKIa HLA−DR

FCMD

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 十十十十

NE

十十十

NE

十十

ND

十＋／一十十 NE ．十

ND

＊；not available to use frozen materials， ND；not determined， NE；not examined

胞に比して多い傾向を示した．Leu 2aとLeu 3a

陽性細胞は数に多寡はあるが両者の数に著しい差

は認められなかった（Photo 5，6，7）．

Leu 7陽性細胞は検索したFCMD 6例中5例

（83．3％）に散在性に分布した（Photo 8）． DMD では4例中．2例（50％）にLeu 7陽性細胞．の存在

をみたがその数は少なくなかった．コントロール

筋組織では，B1およびLeu 1， Leu 2a， Leu 3aお

よびLeu 7抗体に対する反応はすべてに陰性で

あった．

免疫電顕的には，Leu 2a， Leu 3a， Leu 7， B1

そしてOKIaは，いずれも浸潤するリンパ球表面

(7)

に陽性反応を呈した（Photo 9， Table 3）．

免疫グロブリンは，筋組織内に存在するリンパ

球と，わずかながらみられる形質細胞様細胞の胞

体内に陽性であった．また，細網細胞表面に陽性

の反応がみられた．とくに，FCMDでは検索した

22例中4例（18．2％）で，その筋組織内にIgM，

IgG陽性細胞が少数ながら散在し，主に小血管周

囲と筋線維近傍にみられた．検索した症例で免疫

グロブリンを認めた症例の生検時年齢は，4例と

も2歳未満で，IgA， IgE， IgD，κ，λもほぼ同様の成績であった．

免疫電顕的には，IgMおよびIgGは浸潤リンパ

球の核周囲腔，粗面小胞体に陽性を呈するものが

みられた（Photo 10，！1）．

DMDでは免疫グロブリン陽性細胞は検索した

全例に認められた．

コントロール筋組織では免疫グロブリンに対す

る反応は全て陰性であった．

リゾチーム陽性細胞をみる症例はFCMDでは

5例（22．7％），DMDでは2例（25％）であり，

コントロール筋組織では陰性であった（Table

4）．

HLA−DRは， FCMD筋組織結合織内のリンパ

球および細網細胞に陽性であった．また，FCMD

およびDMDでは， OK Iaに対する反応は染色上

やや微弱であるが，細胞表面に陽性を示す細胞が

結合織内に散在した（Photo 12）．

補体のうち古典経路成分のClqは， FCMDで

はほぼ全例で浸潤リンパ球表面や細網細胞表面に

陽性であった（Photo 13）．またC3dは1例， C5

は2例，C6は2例， C8は1例で同様に陽性細胞を

みた．二次経路成分では，properdinで1例に陽性

をみた．生後5ヵ月の最年少例では補体成分が

もっとも多．く証明された．一：方DMDでの陽性例は，Clq， C3dが1例ずつ， C5は2例と一定の傾向

は得られなかった．コントロールはClqが1例に

陽性であった．

補体レセプター反応については，FCMDでは，

CR1が4例， CR2が1例， CR3が4例でそれぞれ陽

性であり，これらは一部の浸潤リンパ球と細網細

胞表面に一致する傾向を示した（Photo 14）．ま

Table 4 1mmunocytochemical findings of the infiltrating cells in intrarnuscular tissues of FCMD， DMD and controls using polyclonal antibodies

IgG IgM IgA IgE IgD κ λ Ly

FCMD

1 2 3 壌 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

DMD

25 26 27 28 29 30 31 十／

ND

＋／一 ControI 十

NE

NE

_NE

一一

NE

33

ND ND ND ND ND ND ND

_NE

34 一一一

NE

一一一 35 一一一一一一一一

／；not available to immunostaining using paraffin sec− tions

た，マクロファージとみられる細胞にはCR3が陽

性であった．DMDでは補体レセプターはほとん

どが検出しえなかった（Table 5）．

考察

福山型先天性筋ジストロフィー（FCMD）は常

(8)

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Photo 1 Muscular tissue of FCMD : Typical case of FCMD, a 6-month-old boy, quadriceps rectus femoris. a. Variable sized muscle fibers with markedly increased connective tissue and small round mononuclear cell invasion (H-E, ×122). b, Higher magnification of the same specimen with la. Cells with hyperchromatic nuclei and scanty cytoplasm between muscle fibers (H-E, ×200).

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Photo 2 Muscular tissue of FCMD : Typical case of FCMD, a 8-month-old boy.

Electron microscope reveals the existence of lymphoid cells (L) and histiocytic cells (H). V : blood vessel, M : muscle fiber

(9)

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(arrow)

case) ParaMn sectton,

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gvS

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iaYeg,g,X,isee,.

Photo 3 Immunostammg with LCA LCA positive lymphoid cells scattered m muscular connective

tissue of FCMD (a 6-monthold boy, typical mdirect method, counterstammg,

methylgreen (×80)

Photo 4 Immunostaimng with MT 1 MT 1 positive lymphoid cells (arrow) scattered in muscular connective

tissue of FCMD (a 8monthold boy, typical case) Parafin section, mdirect method, counterstaming, methylgreen ( × 122)

Photo 5 Immunostaming with Leu 1 Leu 1 positivity is recognized on the surface of the connective tissue

cells of FCMD (a lyear7monthold girl, typical case) Frozenunfixed material, mdirect method,

counterstammg , methylgreen (×122) ip ee c , 6 ,Hs e Photo 6

of FCMD

green (×122) Photo 7 tlssue of + Photo 8 (a green (×122) tge$'it,･.,$.i11kiiiiglg#l ,ivptklil･'lll3･IIII'i/W,'fi･li,it,.

Leu 3a positive lymphoid cells (arrow) scatter m the connective tissue case) PLP fixed material, mdirect method, counterstammg , methyl

Several Leu 2a positive cells (arrow) are present m the connective girl, atypical case) Frozenunfixed material, mdirect method,

Leu 7 beanng cells (arrow) scatter in the connective tissue of FCMD Frozen unfixed material, indirect method, counterstaining , Immunostainmg with Leu 3a

(a 5 month old boy, typical

Immunostaimng with Leu 2a FCMD (a 1 year 10 month old

counterstammg , methylgreen (×160)

Immunostaining with Leu 7 1 year 7 month old girl, typical case)

(10)

ma N ft J5Z ･N- pa III

"

p

b

Photo 9 Immunostaming with monoclonal antibodies, a. Bl, b. Leu 3a, c. Leu 2a

With each antibodies immunoelectronmicroscopically positive stainmg is obtamed on the surface membrane of lymphocyte

Fep

ii'liii$i:"ec'mel,lkik./liii

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siT:mrm inl: sPatai gsiiik

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lj;i,,;isj,ta :kSe

Photo 10 Immunostaining for IgG a. IgG positive lymphoid cells (arrow) are detectable in the endomysial connective tissue of FCMD (a 5 month old boy, typical case) PLP fixed material, mdirect method, counter

stammg; methylgreen (×200) b. Immunoelectronmicroscopically, IgG is recognized on the surface of

nuclear membrane (arrow) and roughsurfaced endoplasmic reticulum PLP fixed material, indirect method

(11)

-403-ma M in J51{ N- pa IV

ii$ll

reee

iliii

ss

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ee

#P, "

Photo 11 Immunostaming for IgM a. IgM positive lymphoid cells (arrow) are detectable m the endomysial connective tissue of FCMD (a 8 month old boy, typical case) ParaMn section, PAP method, counterstaining ,

methylgreen (×122) b. Immunoelectronmicroscopically, IgM is recognized on the surface of nuclear

membrane (arrow) and roughsurfaced endoplasmic reticulum PLP fixed material, indirect method

ew ge

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$ $pamp * di eq, w sN

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""

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yx

a"k k

va paEg, iilaj ks '". }il, l, .tw ew a-s" Photo 12 Immunostaining with OKIa

of FCMD (a 1 year 1 month old boy, typical ing, methylgreen (× 122)

Photo 13 Immunostaining for complement

blood vessels in the connective tissue indirect method, counterstaining ,

Photo 14 ImmunostainingforcomplementreceptorC3bR

in the connective tissue of FCMD (a 8 month old boy, typical case) (×200) e xtw ,re ts

14

di ssit!ge,g'g//'l$･ill/k･xi,ve･, .s #gla,, ", ,s'ai xg

ss ss

tseecg,geeijS"

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,ge,I gXYre "

" tot e e inP es"

is positive on the infiltrating round cells between muscle fibers Frozen unfixed material, mdirect method, counterstam

component Clq Clq is positive on some cells clustenng near

(arrow) (a 8-month old boy, typical case) Frozen unfixed material, hematoxylin (×100)

. C3bR is positive on the round and large ovoid cells

Frozen-unfixed material, mdirect method

(12)

-404-Table 5 1mmunocytochemica1丘ndings of the in且ltrating cells reacting to antibodies for comple． ment components and complement receptors

Clq C4 C3 C3c C3d C5 C6 C8 C9 P「o． C3act，

C3blNA

CR1 CR2 CR3

要視されているものの，筋組織の変化をもたらす

直接の原因は未だ不明である．生検6＞12）∼16）および剖検4）5）17）18）での病理形態から本症の骨格筋には炎

症性細胞浸潤を認めないとする報告が圧倒的であ

り，本症の筋病変に対する炎症性病因説は否定的

である．

現在までFCMDの筋組織の形態的検索は多く

の概究者によってなされている．病勢の進行にと

もなって組織像の変化に幅があるが，筋線維の萎

縮，筋線維径の大小不同，筋線維の再生および壊

死とマクロファージの浸潤を認め，結合織増殖や

脂肪浸潤が種々の程度に存在する．著者の検索症

例でも諸家の報告と同様の所見を得ている．

一方，間質における炎症性細胞の存否は本症の

病態に大きな関連を示すとみられるが，前述のご

とく多くの報告ではその浸潤はないとされ，この

ことから本症の病因としての感染説あるいは何ら

かの原因に伴う炎症説は否定的である．当教室の

鈴木ら6）はFCMD 36例の筋組織学的検索から，他

の明らかな病因を挙げえないながらも，炎症性変

化と神経原性変化の存在を否定している．一方，

鴨下4）5）はFCMDを胎内感染に基づく筋炎の遷延

化と考え，大脳・小脳の特異な小多脳回，髄膜の

肥厚ならびにリンパ球性細胞浸潤および多発性筋

炎に近い筋組織病変と合わせ，病因を胎内感染に

求める仮説を提起した．しかし，従来までの病理

学的検索はすべて通常の光顕・電顕ならびに組織

化学的検索によるものであり，またある程度病期

が進行した症例についてのものであったため，発

生病理を正確に論じえないきらいがあった．

今回，著者はFCMD筋組織への炎症性細胞浸

潤の有無・性格について免疫組織化学的に検討し

た．検索した24例のうち，脂肪浸潤や線維化の顕

著な例を除く多くの例において，筋組織内結合織

へのリンパ球，細網細胞，マクロファージなどの

浸潤をみた．しかし，変性筋線維細胞と上述した

浸潤細胞との鑑別は，光顕的には必ずしも容易で

はないので，免疫組織化学的ならびに電顕的観察

を併せて行った．

炎症性細胞浸潤の存在が疑おれた症例の多くは

生検時年齢が2歳以下であった．Table 3∼5に示

したように免疫組織化学的検索は，これらの若年

乳児症例に焦点をあてて行った．

その結果，増加した内鞘等の結合織に，円形細

胞が比較的少数ながら分布していること，そして

それらの中には，モノクローナル抗体に対する反

応性やその形態からみて，Bリンパ球あるいはT

リンパ球と判定される細胞が存在することが確か

められた．加えて，免疫担当細胞のひとつである

マクロファージ系細胞も介在していることをみと

めた．免疫組織化学的に，LCA， MT−1陽性細胞が認め

られた症例はFCMD 24例中19例と過半数以上に

及んだ．DMD例では，7例中5例にLCA， MT−

1陽性細胞がみとめられ，全例に免疫グロブリン陽

一405一

(13)

性リンパ球があった．しかし，FCMD例で免疫グ

ロブリン陽性リンパ球を保有する症例は4例のみ

（症例1，4，8，13）であった．この4例は全例

が2歳未満であった．少なくともこれらでは何ら

かの免疫反応が存在した可能性が示唆された．浸

潤細胞にLCAあるいはMT−1が反応しなかった

3例（症例14，15，22）では，免疫グロブリン保

有細胞は結合織に存在せず，明らかな炎症性ある

いは免疫反応の存在は否定的である．これらは，

2歳2ヵ月以上の症例であった．したがって，著

者は，検索した症例がほぼ二群に大別され，炎症

反応が残存したものと全く認めえないものとが

FCMDに存在していると考えざるを得な：い．

このように，FCMDで，リンパ球な：どの細胞の

存在する症例では，マクロファージの性格をもつ

りゾチーム陽性細胞も散在する．しかし，DMDで

はFCMDのそれに比して，その数は多かった．こ

のことは，FCMDでは加齢とともに筋の崩壊に伴

う旺盛な貧食機構が低下することを示唆すると思

われる．DMDの6歳以下の若年の筋組織につい

て検索し，同年齢のFCMDと比較すると，その組

織学的変化はより軽度であった．これは，対象と

した症例が，臨床的にはDMDとしては病初期に

相当することと一致している．免疫組織化学的に

は，リンパ球に対するモノクローナル抗体に反応

する細胞や免疫グロブリン保有細胞もあることが

観察された．この年代のDMD筋に多少の免疫反

応があることは示唆される．しかし，FCMDと同

意義のものであるかは，さらに年長例を含めての

検討をまたねばならない．教室の森ら13）は，筋組織内に炎症細胞の存在を

認め，ステロイドホルモン投与が部分的に有効と

思われた特異なFCMDの2同胞例を報告した．

一方，EngelとArahata19）∼21）をま，主に筋炎にお

けるリンパ球による筋障害過程の解析を報告して

いる．このなかで，とくに多発性筋炎・封入体筋

炎などではT8（suppressor／cytotoxic T細胞）が

筋組織に多くみられ，またIa抗原の発現をみてい

る．さらに，DMDでは，浸潤細胞は少ないが， T

細胞とマクロファージが存在し，また補体の膜障

害成分（MAC）が変性筋にみられる程度は他の疾

患のそれより顕著であったと報告している．

筋炎ではリンパ球系細胞の浸潤が病変の中心を

なしているが，筋ジストμフィーでは浸潤細胞は

あっても少なく，炎症反応は軽微なものであろう．

著者はまた，FCMDにおける炎症に関連した免

疫応答の有無を確める目的で補体と補体レセプ

ターの存在の有無を調べた．その結果，存在する

少数のリンパ球や細網細胞の表面に，補体とくに

Clqと，他にC6や，補体レセプターCR1・CR3が

みられた．このことから少なくとも一部のFCMD

症例では，結合織内で補体を介した免疫反応があ

ることが考えられた．検索したDMD病初期例で

はそのすべてに補体成分の一部がみとめられた，

一般に補体の活性化は免疫複合体や多糖体などが

そのひきがねを担い，また形霊的には多くはリン

パ濾胞の形成を伴うような著しいリンパ球や樹枝

状細網細胞の出現をみる22）23）．しかし検索しえた

本症の筋組織でこのような変化はみられなかっ

た．また本研究では補体の出現を検出しえたのは，

凍結切片で検索しえたFCMDの1歳以下例であ

るため，全般にわたる現象としての即断はしかね

る．しかし，本症ではリンパ球・マクロファージ

系での相互関係が，免疫グロブリン産生に関与し

ている可能性，あるいは筋障害に補体が関与して

いる可能性は否定できない．

筋ジストロフィーにおける基本的異常を，カル

シウムを中心とした筋細胞膜の代謝障害に求める

考え方が，一部の研究者24）によって有力視されて

いるが，この説は補体の活性経路とのかねあいで

興味深い．著者はFCMDの筋組織，結合織に存在

する浸潤細胞（炎症性細胞）を中心として検索し

たが，なお他臓器との関連も考慮しなけれぽなら

ないと考える。

FCMDの病因は依然として不明であるが，少な

くとも一部の症例では，発症・経過のいずれかの

なかで炎症あるいは免疫応答が存在したことを示

唆する所見が認められた．これらの所見が全例で

はなく，一部の例にのみ認められたことは，本症

における炎症・免疫過程の関与のしかたが均一で

はないと考えることもできるし，また本症が原因

を異にし表現型が同一である異質な疾患群である

一406一

(14)

からと考えることもできよう．しかし筋の炎症性

あるいは免疫応答性所見の陽性例は2歳未満例に

多く，2歳以上の例には概して少ない傾向をみる

ことは，炎：症過程が病初期にのみ活発であり，加

齢とともに減弱し，静止するという考え方で，よ

りょく説明できるのではなかろうか．これらのこ

とは，今後，同一症例について経時的に検索する

ことがでぎれぽ，より明らかになるであろう．稿を終えるにあたり，御懇意な御指導と御校閲を賜わりました福山幸夫教授に謹んで感謝の意を表します．御指導，御教示いただきました笠島武教授に深甚なる謝意を捧げるとともに，本研究の実施に際し，御助言を下さいました梶田昭教授に深く感謝致します．さらに種々の御助言を戴きました本学小児科学教室の諸兄姉ならびに山形大学医学部病理学教室の皆様に厚く御礼申しあげます．文献

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福山型先天性筋ジストロフィーの生検筋組織の免疫組織化学的検討

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