死体内 分解 拡 散 死 後 産生

119 8 金 沢 大学 十 全 医学 会 雑 誌 第9 8巻 第6号 1 1 9 8−^{1 2 1 1 く1 9 8 9う}

ユ タノ ^ーノレd 6 の死 体 内^{で の}分 解 ^． 拡散^{とエ タノ ー ル の死}後産生

金沢大学 医 学 部法 医 学着 座 ^く主任^二永 野耐 造 教 掛

福 ^{井 宏} 有

く平成¹ 年^{1 2}月6 日受付1

死 後^のエタノ ^ー ルの産 生^． 分解や拡 散^に関し て， これ ま でt 多くの報 告がある． し か し な が ら，

これ らの研 究は， いずれ も生 前 摂 取さ れ た^エタノ ^ー ルと死 後 産 生さ れ た^エ タ ノ ^{ー ル}と を直 接 区 別で き な か_った た め， 死 体 内^{に お}け る^エ タ^{ノ ー ル}の消 長に^{つ い}て は， 相 対 的変 化^{か ら}推 測す る域を出な かった^． 1 9 8 7年． T akaya s u 8t N aga n o は， 重 水素 標 識 化 合 物^{で あ るユタノ ーJV．d 6 を 用い， ガスクロ マ ト グ ラ}

フ ィ^ー質量分析く^{G じ M S}l で天 然の^エタノ ^ー ルと明 確に分 離さ れ ること を確認し， 種々 の知 見を報 告し て いる^． 本 研 究は^エタノ^ー ル^ーd 6 を 用^い， 上記 問 題 点解 明の た め， 動 物 体を用^いて G C⁻M S 法を適 用し，

実 験を行^った も の である^． ラットにエ タ^{ノー ルー}d 6 を経口投 与す る と， ヒト^への^エタ ノ ^{ー ル}投 与 時と類 似の血 中 濃 度 曲線を 示 し，

エタノ ^ー ル^ーd 6 臓 器 濃 度ノ血 中 濃 度比 は， C h^ristop^{o u}lo s ら の^ヒトの剖 検 例^の 報 告値と ほ ぼ同様^であっ た■ 生前ウ サ ギ^にエタ ノ^{ー ルー}d 6 を静 脈 注 射 後3 0分で死 亡さ せ， 死体を3 0⁰C で 放 置す る と， 心内 血， およ び諸臓 器 中の^エタ ノ ^{ー ル．}d 6 は 1 日目 以 降 激 減し， そ れ と逆に死 後 産 生 天 然

エ タノ^ー ルが急 増し， 放 置2^■5 日以 降は産 生エタ ノ ^{ー ル}の方が高 濃 度^に達し た^■ ラット屍^の胃 内^{に エ}タ ノ ^ー ル^ーd 6 を経口的^に注入後， 5⁰C およ び3 0⁰C で 0^．卜 3 日間 放 置し， 死 後 拡 散^に関し て検 討を施し た^． 5⁰C群^では， エタ^{ノー ルー}d 6 は主に胃^に接 着し た臓 器 僻 臓^， 左 腎， 肝 左 熱 ^{か ら}検 出さ れ た が， 死 後 産 生の天 然^エタノ^ー ルは認め ら れ な かっ た^． 3 0⁰C 1 2時 間 後^には胃 接 着 臓 器で 5 ⁰C放 置よ り高 濃 度^{にエ タ} ノ ^ー ル^ーd 6 が検 出さ れ， 1 日以 降で は腹 部 各 臓 器 僻 臓^， 肝 臓， 腎 掛 内^で検 出さ れ た が， そ の後 徐々に

減 少し た^． 2 日目に は死 後 産 生 天 然^{エ タノー ルとこの}拡 散^エタ ノ^{ー ル．}d 6 と が ほ ぼ同^{レ ベ ル}の濃 度に なっ た^． 3 日目^には死 後 産 生 天 然^エタノ ^ー ル の方が高濃 度^にな り， 拡 散よ り も影 響が大き かっ た^■ しか し， 大腿部 骨 格 筋で は拡 散の影 響は ほ と ん ど な く， 3 0⁰C 2 日以 降^に死 後 産 生天然^エタ ノ ^{ー ル}が検 出^{さ れ} た^． ま た， 脳 中^にエ タ ノ^{ー ルー}d 6 が，1 2時 間 以 降 両 温度 群^いずれ の個 体か ら も 0⁻1^へ0^．9m glml の濃 度で 検 出さ れ た． ラット屍を開 腹し， 胃 内^に直 接^エタ ノ ^{ー ルー}d 6 を注 入し た実験で は， 胃^から心 内血 ^へ の影 響は軽 微 く0^．0 1 6^m gノmll で あっ た が， 胸 腔 液^へは少し影 響 く0．2 5 8mgl^mll が及ん で^いた^{． こ}の場 合， 脳

から は す^べて の例で^エタノ ^ー ルd 6 は検 出さ れず， 頭 蓋 腫 内^{へ の}拡 散は全く なかった⁻

E ey ^{w or}ds エタノ ^ー ル^ーd 6 の体 内 分 布， アル コ ^ー ル の死 後 産 生^と分解， アル コ ^ー ル の死 後 拡 散， ガスク^{ロ マ} トグラフ ィ ^ー 質 量 分 析

多く の法 医 学 実務の中で， 血 中そ の他 人体 試 料^{に つ}

いてのア^{ルコ ー ル}検 査は重 要な 日常 業 務^{の 一つ} で あ る^． 分 析試 料が新鮮な場 合^には特 別 大き な問題は ない が， 新 鮮で な^い場 合 幾^{つ か の}問 題 点が含ま れ て^いる．

す な わ ち， 人体の 死後 変 化^に伴って， 生 前 摂 取さ れ た

エタ ノ ^ー ル の死後 拡 散や分 解， 或^い は死 後^{の エ} タノ^ー ルの産 生な ど多く の困難な問 題が あ る^． 従^っ て， 人体

A b br e viatio n ニE I，E le ctr o n im p^{a c}t i G C ⁻M S ，

内の^エタ ノ ^{ー ル の}正確な評 価を行う た め^には， ア^ル

コ ^ー ル濃 度の 正確な測 定は も ち ろ ん^， 上記の点に^{つ い} て十 分^に検 討し な け ればな ら な^い．

死 後^の人 体 内^{にお け るエタ ノ ー ルの}産 生^{に つ いて は} 古く か ら多く の報 告があり ^州 ， 死 体が置か れ た環 境 条 件^によっ て は， 0 ．5 ^旬 1 m gノ^{ml に}も及^ぶエタ ノ^{ー ル} の産 生が報告さ れ て^いる^{句． 一} 方， エ タノ ^ー ルの消 化 G a s chr o m atog^{r a}ph_y ⁻m a S S Sp^{e C}tr O m et^ry i ア 濃 度， アルコ ^ー ル波動 血 中^ア濃度， 心 内血^{アル コ ー ル}濃 勘 大 腿 筋， 大 腿 部 骨 格 筋

エタノ ^ー ルd 6 の死後 拡 散と 死体 内^エタノ ^ー ル産 生

菅な ど か ら の 死後 拡 散^{に つ い}て も古く か ら研 究さ れ て おり， 胃周 囲な どに影 響を 及 ぼ し て^いる と報 告さ れ て いる ^{冊 ．} し か し な が ら， これ ら 死後の分解と産 生や拡 散^{に つ い}ての報 告は， いず_{れ も}， 生 前 摂 取さ れ た^エ タ ノ ^ールと死 後に産 生さ れ た^エタノ ^ー ル の両 者を直 接 区 別す る^こと が で き な かった た め， 詳 細な分析^には限 界

が あ^った^．

近 年， エ タノ ^ー ルの安 定 同位 体である重 水 素 標 識 化 合物^エタ^{ノ ー ルー}d 6 が市 販さ れ， この物 質は 天然^エタ ノ ^ールと同 様の性 状を持って^いる が， ガスク^{ロ マ} ト グ ラフ ィ^ー質量分析くG C⁻M SJ で両 物 質は明 確に分 離さ れ う る^． 教室の Takay^{a s u} 8t Naga n o^{1 0 ，}は， この物 質が

エタノ ^ー ル の法 中毒 学 的 分析の実 験に極め て有 用な^こ と を報 告し て^いる^．

この よ う な点^に着 目し， 著 者は， エ タ^{ノー ルー}d 6 を 用^いて動 物 実験を行な^い， い エタノ^ー ル^ーd 6 の体 内 分布， 21 生 前^に投 与し た^エタノ^ー ノレd 6 の 死体 内で の分解と死 後の^エタノ ^ー ル の産 生， 3I 死後 消 化管か ら の^エタ^{ノ ー ルー}d 6 の拡 散， な どに つ いて検 討を試み た^．

材 料お よ び方 法 王． 試 薬お よ び動 物

エ タノ ^ー ル ^ーd 6 くC E A ， フラ ン ス お よ び M S D IS O T O P E S， カ ナダ1 ^{を 用いた．}

動物は ラットく体重 2 00g 前 後， ウ イ^スタ^ー 系 紛 ^お よ び白 色日本ウ サギ く体 重2 kg 前後， 恥 を 用^いた^．

工工． エタノ ^ー ル^ーd 6 投与 ^． 注 入方 法と放 置 条件お よ び資 料 採 取， 貯 蔵

1 ⁻ ラット^への エ タノ^ー ル^ーd 6 の投 与

ラッ ト^にエタ^{ノー ルー}d 6 の2 5％ く^wノ^vl 水 溶 液 ⁴mlノ kg 体 重を金 属カ テ ^ー テ^ルを 用いて経口投 与し． 1 5^， 3 0， 60， お よ び 9 0分後， 中枢 神 経 破 壊を行^い． 直ちに

心内 血お よ び諸臓 器 く脳， 心臓， 肺，肝 臓， 腎 臓お よ び 大腿部骨 格 筋 く大腿儲用 を採 取し^， 分析 時まで4 ⁰C お

よ び⁻2 0⁰C で そ れ ぞ れ保 存し た^．

2 ^{． エ} タノ^ー ル^ーd 6 のウ サ ギ^への投 与と 死後の放 置 条件

ウ サ ギの耳 静脈^{に エ}タ^{ノ ー ルー}d 6 の2 5％ く^wノvl 水溶 液3mlノkg 体重 を注 射し， 30分 後 ^一酸 化 炭 素 くC Ol 中 毒死 さ せ， 30⁰Cの恒 温 槽^に1 ， 2^．5およ び 4 日間 放 置 後， 心内血， 脳， 肝 臓， およ び大腿 筋を採取し ， い

ず_{れ も} ^ー_{2 0}⁰_{C で}分 析 時ま で保 存し た^．

3 ^． ラット屍^へ の^エ タノ ^ー ル^ーd 6 の注入 と放 置 条件 C O 中毒 死さ せ た ラットに直ちに エタノ ^ー ル^．d 6 の 15％ く^wIvJ 水 溶 液3^．3 3^mllk_g 体重 を カ テ^し テルを用

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い て_， あ る^いは開腹し て． 直 接胃 内^に注入 し た． この ラット を 5⁰C お よ び 3 0⁰C の恒 温 槽 内^に そ れ ぞ れ 1 2時 間， 1 ， 2 ， およ び 3 日間放 置し た^． 資 料採 取^{に つ い} て は 上記1 ^． と同様^に行^い t いずれ も ^ー2 0⁸C で保 存し た^．

m ． 分析 装 置^およ び 分析方法 ^．条 件 1 ^． 装 置

日本 電子 く東 京 都 昭 島 市1 製 JM S⁻D X 3 0 3 と JM A ^rD A 5 1 0 0 デ^ー タシ ステム くG C⁻M SI 装 置を用^い

た^．

2 ． 分析 方 法

アルコ ^ー ル類の分 析は気 化 平 衡 法 く^he ad spa c e m ethodl^川によ り G C⁻M S で行った^． す な わ ち，凍 結 保 存し た試 料0^．3^旬0^．5g を薄 軌 ^バイ ア^ル瓶に入 れ， 秤 量後， 内部 標 準^{と し てte rt−ブ タノ ー ル}の 0^．1 8m gJ ^ml 水溶 液0 ．5ml を加え密封，5 5⁰C で2 0 ^旬25分 間保 温し，

気化 平 衡さ せ た^． こ の気 相 約1 ml をあら か じ め 5 0 ^へ 6 0⁰C で保 温しておいた ガ ラ^ス製 く2mり^シリンジ で採取

し^， G じ M S 装 置^に注入， 分 析し た^． 3 ^． 分 析 条 件

質 量 分 析 装 置ニEle ctr o nim pa ctくE IJ お よ び 正 イ オ ン検 出^{モ ー} ド^． ア ク^{セ ル}電 圧3 E V， イ オ ^ン化 電 圧 7 0eV ， イ オン化電 流0．3^m A _， イ オ^ン化 室 温 度1 5 0^OC ^．

G C 装置ニカ ラム P E G⁻1 0 0 0く1 5％ト^Unipo rtB く2．6

m m 卓^X2叫， カ ラム温 度77⁰C ， イ^ンジェク^ショ ン温

度1 2 0⁰C， セ パ レ ^ー タ ^ー 温 度1 3 0⁰C， キャリヤ ^ー ガス

くHeI3 0mll^min ．

I V ． エタノ ^ー ル^．d 6 ， 死後 産生 天然エ タノ ^ー ルお よ ぴ m⁻プ^ロパ ノ ^ー ル の定量

エタ^{ノ ー ル．}d 6 は水 溶 液 中^で容 易^にエタ^{ノ ー ルー}d 5 に変 換す る くC D3⁻C D²⁻O D＋nHD ^ぅC DrC DTO H ＋ H O D 十く^{n −} いH お1^{． こ}の た め^エタノ^ー ルー^{d 6 の定量に}

は，d 5 由 来^{の m}ノz 3 3， 4 9^およ び5 1の各イ オンを用^い た^{． エ}タノ ^ー ルは mノ^z 31，45およ び46， n プ ロ パ ノ ^ー ルは ml^z 3 1^およ び5 9， ま た内部 標 準^{の t}e rt⁻ブ タ^{ノ ー} ルは mノz3 1^，5 9^およ び6 0の各イ オンを 用い て， 内部 標 準^に対す る 比高ま た は面 積比 を 用いて各物 質^の定量 を 行っ た．

成 績

工． 動 物 実 験 資 料からのエタノ ^ール^ーd 6 およ ぴ^エタ ノ ^ー ル のG C ^．M S による分析

図1 に生 前 経 静 脈 投 与し た ウ サ ギの死 亡直 後 く図1

aI と 3 0⁰C 4 日放 置 後 く図1 bl の脳 中^{の エ} タノ ^ー ルd 6 およ び^エタノ ^ー ルの^{マ ス}ク^{ロ マ} ト グ ラム を例示 し た^■ 死亡直 後^{のマ ス}ク^ロ マト グ ラム にお^いて は， エ

1 2 0 0

タノ ^ー ル^．d 6 しd 51 由 来の ピ ^ー ク の み が検 出さ れ て^い る． し か し⁴ 日放 置の資 料^から は^エタ ノ ^{ー ルー}d 6 トd引 と死 後 産 生^エ タノ ^ー ルく^mノ^{z ニ}3 1，4 5，4 61 が明ら か^に示 さ れ て^いる^．

王1 ．

エタノ ^ー ル^ーd 6 ， エタ^{ノ ー ル}お よ ぴ n^一プロ パ ノ ^ー ル の検 量 線

G C⁻M S 分析 法^によ る^エタ^{ノ ー ルー}d 6， エタ^{ノ ー ル お} よ び ⁿ プ^ロ パ ノ ^ー ルの検 量 線を図2 ^に示 し た^■ 図2

a は^エタ ノ ^{ー ルー}d 6 ^{に つ い}て の内 部標 準 法^によ る検 量 線を 示 し て^Vlる^一 内 部 標 準^には ^{te rt一}ブ タ ノ ^{ー ル}を 用 い， エタ^{ノ ー ルー}d 6トd 51 の検 量 線は， mノ^z 5 1，4 9 お よ び3 3に おけ る値と， te rt⁻ブ タ ノ ^{ー ル}の ml^z 3 1^にお け る値と の比 高を用^いて作 成し た^{． こ}の よう^にす る と，

いずれ も原 点を通る直線を 示 し て^いる^． 図2 b は^エタ ノ^ー ル に つ いて， エタ ノ ^{ー ル}d 6 と同様， mノz 4 6，4 5 ぉ よ び3 1 を 用^いて作 成し た． いずれ も直 線性を 示 し て いる^． 図2 c は n プ ^{ロパ ノ ー ル に つ い}て同 様， mノ^z 5 9 を用^いて作 成し た もので あ る が， 良好な直 線 性を 示

し て^いる^．

m ． エタノ ^ー ル^ーd 6 のラッ ト体 内分布^につ い て ラットに エ タ^{ノ ー ルー}d 6 を経口投 与し1 5 ^句9 0分 後

に_， そ の濃 度を各 臓器 組 織に^{つ い}て測 定し たく表 い^一 表1 は各3 個 体^の平 均値を 示 し^{て い}る^■ 心 内血の^エタ

5 8 18a l 三さ らc ■ n

ノ ^ー ル^ーd 6 濃 度は1 5， 3 0． 6 0 お よ び 9 0分 放 置 後に おい て， そ れ ぞ れ 0^．8 0 8， 0^．7 9 6， 0．7 1 7 お よ び 0■5 3 6mgノ

ml であっ た． 各 臓 器 中^エ タ^{ノー ルー}d 6 濃 度は 1 5分後で 最 高 値を 示 し， そ の後 徐^{々 に}低 減し て^いったく図31^■

エタ ノ ^{ー ルー}d 6 の心内 血^に対す る比を計 算す る と表2 の よ う^になった^． す な わ ち， 1 5分後， 脳， 心 軌 肺，

肝 臓， 腎 臓お よ び大 腿 筋で そ れ ぞ れ， 7 9， 7 4， 6 0，

5 5， 7 0 お よ ぴ8 9％， ま た9 0分 後で は， そ れ ぞ れ6 4，

6 9， 5 3， 3 2， 6 8 お よび6 9％で あった−

1 V^． 経 静 脈投 与ウ サギ体 内^エタノ ^ー ル の死後 変 化

エ タ ノ ^{ー ルー}d 6 を経 静 脈 投 与3 0分 後に C O 中毒死 さ せ， 3 0⁰C で 1 ， 2^．5及 び4 日放 置し た ウ サ ギ の心内 血，

脳， 肝 臓お よ び大腿 筋^{に つ い}て^エ タ ノ ^{ー ル．}d 6 およ び 死後 産 生^エタ ノ ^{ー ル}濃度を測 定し た結 果を表3 お よ び 図4 に示 し た^． 生 前^に投 与し た^エタ ノ ^{ー ル}d 6 の各 臓 器 組 織の濃 度 く3 羽 の平 均 胤 mg付 は心 内血0^．32 3，

脳0．2 朗， 肝 臓0．1 5 6， 大 腿 筋0^．25 2であった^．放置1 日 後^に少し減 少， 1 日後か ら2 ．5 日後^にか け て急 激に減 少し たく図 り^{．3 00C}放置4 日後に は死 直 後の^エタ ノ^ー

ル^．d 6 濃 度の 1 パ ^へ 1ノ4 に減 少し， 各 臓 器0⁻0 4 ^へ 0 ．0 5m gノg であ^った⁻

これ と対 照 的^に， 死 後 産 生 天 然^エタ ノ ^{ー ル}は 1 日放 置後 各 臓器 か ら微 量 検 出さ れ， 2 ■5 お よ び 4 日放 置し

b

1 らB I E ， 5c l n

58

F i_g．1． M a s s chr o m atogr a m s of etha n olトd 61in the br ain ofthe r ab bit c a r c a s s e s，

くal righ ^t af^te r de ath， a nd くbl ^{sto r ed at 3 00C fo r 4 days− A b br e viatio n}

くくI S^，，

ind ic ate sinte r n al sta nda rd，te rt⁻buta n ol− Eth^{a n o}l^．d 5 w a s dete cted，be c a u s e the

d 6 is r e adil_y c o n v e rted to d 5 in aqu e o u s s olutio n ． Etha n ol⁻d 5くm o nito r ed at ml

z 3 3， 49 a nd 5 11 ^{a nd etha n ol} くm o nito r ed at ml ^z 3 1， 4 5 a nd 4 6l elute at ap p^{r o x}im ately 4 min⁻ Oⁿly etha n oトd 5 ^{w a s} dete cted fr om the spe cim e n righ^t

afte r de ath く^al^{． Both etha n ol−d 5 a nd po stm o rte m pr odu c ed etha n oI w e r e} dete cted fr o m the putrified sp^{e c}im e n くbJ^．T he a nal_{y t}ic al c o nd itio n s w e r e a s

follo ws こG C ^{c o}lu mn，P E G⁻1 00 0 く1 5％1ニC Olu mn te mp^{e r a}tu r e，7 7^OCiE I m ode．