242 （104） 氏名（生年月日）
本 籍
学位の種類
学位授与の番号 学位授与の日付 学位授与の要件学位論文題目
論文審査委員
ナガ オ ノリ キ長尾憲樹（昭和2
医学博士 乙第918号昭和63年3月18日
学位規則第5条第2項該当（博士の学位論文提出者）
Toluene・Diisocyanate（TDI）特異的IgG抗体に関する実験的研究
（1）Toluene－Diisocyanate皮膚感作マウス血清中からの検出（II）TDI特異的IgG抗体とマウス皮膚のTDI結合蛋白について
（主査）教授 石津 澄子 （副査）教授 香川 順，教授 藤田 昌雄i論文 内 容 の 要 旨
目的 ウレタンフォームや塗料などの原料として汎用され ているtoluenediisocyanate（TDI）は，取扱う工場作 業者に喘息様呼吸器障害や，時に接触性アレルギー性 皮膚炎をおこすことから感作性化学物質としてよく知 られている． それにもかかわらず，TDIの障害作用に関する基礎 的研究は少なく，感作成立の機序などの詳細はほとん ど明らかにされていない．そこで，i著者はTDI塗布マ ウスについてTDIの経皮吸収後の結合部位や，血清中 のIgGの変化などを免疫学的手法を用いて検討し， TDIの障害作用を明らかにすることを目的とした． 方法 1．BALB／C雄性マウス15匹を使用し，5％TDI酢 酸エチル溶液を背部皮膚に1日1回，5日間連続塗布 した．塗布終了後，4日目に1％TDI酢酸エチル溶液 を耳介にチャレンジし，24時間後に耳介の腫脹を測定 した、ついで同じ動物の血清について，蛋白質の二次 元電気泳動法による解析と，enzyme－1inked im・munosorbent assay（ELISA）によるTDI－speci丘。 IgG 抗体の検出を行った． 2．0．1～5日目で5段階のTDI酢酸工・チル溶液を 塗布した各群（N；5匹）について1．の方法と同様， チャレンジ後の耳介腫脹率と血清中のTDI－speci且c IgG抗体のtiterを測定した． 3．TDI結合人血清アルブミン（TDI－HSA）でウサ ギを免疫し，抗TDI－HSA血清を得，これを用いて
TDI塗布マウス皮膚のTDI結合部位を，免疫組織化
学的染色法で検討した，さらにこの皮膚の水可溶性蛋 白質より，immuno－a琉nity chromatographyでTDI 結合蛋白質を抽出し，二次元電気泳動法により解析を 試みた． 結果及び考察5％TDI溶液を背部皮膚に塗布したマウスの耳介
は，チャレンジによって対照マウスよりも強い腫脹を 示した（p＜0．005）．この時，血清には，IgGが増加し， ELISAで分析すると，TDI・speci丘。 IgG抗体が検出さ れた． 0．1～5％まで濃度別にTDIを塗布した各群の耳介 腫脹率は，0．1％塗布群のみ58％であったが，1～5％ 塗布群では，100％前後の腫脹率で差異はみられなかった．それにもかかわらず，1～5％塗布群のTDL
speci丘。 IgG抗体のtiterは塗布濃度に依存して増加 していた． TDI塗布皮膚の免疫組織化学的染色を実施してみ ると，表皮の角質細胞層と真皮の浅層に強い免疫染色 性を認めた．この皮膚の水可溶性蛋白質からimmuno－ afinity chromatographyで抽出した蛋白質を二次元 電気泳動で解析してみると，TDI結合アルブミンが検 出された，以上の結果から1％以上のTDIをマウスの皮膚に
塗布すると，表皮から真皮層まで浸透し，その部位に 一906一243 存在する蛋白と結合することによって，細胞性免疫， 液性免疫の両者に関与し，耳介の腫脹やTDLspecific IgG抗体の産生を起こすものと考えられる． 結語
