論文内容要旨
論文題名
Sleep bruxism model using neural cells derived from patient-specific iPS cells with 5-HT2A polymorphism
（5-HT2A遺伝子多型をもつ疾患特異的
iPS
細胞を用いた睡眠時ブラキシズム の疾患モデルの確立）掲載雑誌名
PLOS ONE （投稿中）
歯科補綴学 帆足 有理恵 内容要旨
【目的】
睡眠時ブラキシズム(SB)と遺伝的要因の関連については，血縁関係を基 盤とした研究より推論されていたものの，その発症メカニズムの解明には 至っていない．先行研究により我々は環境要因と遺伝的要因を包括した
SB
リスク因子の探索的研究により，セロトニン関連の遺伝子多型，セロ トニン2A
受容体遺伝子5-HT2A
のSNP（一塩基多型）rs6313
がSB
と 有意に関連し，rs6313 のC
アレル保因者のSB
発症リスクが約4
倍であ ること報告した. しかし，前頭前皮質や前頭葉などの脳内に広く分布する セロトニン2A
受容体とSB
との機能的な関連性を生体で検証することは 不可能である．近年，急速に進展した人工多能性幹細胞（iPS 細胞）技術 は，再生医療や創薬，疾患の基礎的研究などに応用可能である．本研究の 目的は，SB患者および健常成人からiPS
細胞を樹立し，5-HT2A を発現 する神経細胞を誘導して，機能的関連性を検討可能なSB
疾患モデルを構 築することである．【方法】
問診，口腔内検査により
SB
臨床診断を行い，咬筋筋活動測定を含む睡 眠ポリグラフ検査によって確定診断のついた，SB ならびにControl
被験 者群を対象としてSNP
解析を行った．SB
群からrs6313
のC
アレル保因 者2
名，Control
群からSB
群と年齢がマッチするC
アレル非保因者2
名 を選択した．これらの被験者の末梢静脈血から血球細胞を採取し，初期化 因子(OCT3/4，SOX2，KLF4，LIN28，L-MYC)を用いてiPS
細胞を樹立 した．樹立したiPS
細胞からそれぞれ3
つのセルラインを選択し，品質チェック(未分化マーカー発現，三胚葉分化の解析，核型解析)を行った．
iPS
細胞から神経細胞への誘導は，Wnt，RA，Shh シグナルを調節する薬剤 の濃度を変化させることで，中枢神経の前後軸，背腹軸に沿った領域特異 的な神経細胞を誘導するImaizumi
等の方法を用い，セロトニン神経細胞 が多く存在する縫線核領域に寄せた神経細胞を誘導した．誘導した神経細 胞に対して，免疫染色を行いセロトニン神経細胞を確認し，qRTPCR と 免疫染色により5-HT2A
の発現を確認した．尚本研究を行うにあたり昭和大学ヒトゲノム・遺伝子解析倫理審査委員 会（承認番号
179
号）及び，慶應大学医学部倫理委員会（承認番号20080016
号）の承認を得て行った.【結果】
SB
ならびにControl
の全被験者（4 名）の末梢静脈血，血球細胞からiPS
細胞を樹立することに成功した．また，樹立したiPS
細胞より誘導し た神経細胞に5-HT2A
発現神経細胞が含まれることがqPCR
により確認 された．さらに，これらの神経細胞のrs6313
遺伝子型が保存されている ことが確認された．【考察】
本研究により
iPS
細胞を用いたヒトSB
疾患モデルが初めて構築された．本モデルは
