免 疫 動 物 諸 臓 器 抗 体 の 抽 出 法 に 就 て
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(2) 2074. 平. 第2節 1). 松. 免 疫 家 兎 は 最 後 の 注 射 か ら7日 後 頸 動. 放 血 終 了前37℃. 夫. を 用 い た.即. 臓 器乳 剤製 法. 脈 よ り放 血 致 死 せ し め た. 2). 哲. %の. ち 臓 器 浸 出 液 或 は 免 疫 血 清 を1. 「ア ラ ビ ヤ ゴ ム 」 食 塩 水 溶 液 に て 漸 次 逓. 降 的 に 稀 釈 し是 に 対 し沈 降 原 を 生 理 的 食 塩 水. に 加 温 せ る生 理 的 食. に て 順 次 稀 釈 せ る も の を 層 畳 し た.成. 塩 水 を 「カ ニ ユ ー レ」 を 通 じ て 反 対 側 頸 静 脈. に は15分. よ り注 入 し て 体 内 の 血 液 を 可 及 的 流 出 せ し め. 30分 後 の も の を(〓),. た.. (+),. 3). 開 腹 し て 取 出 した 所 要 臓 器 は 水 道 水 に. て8〜16時. 積判定. に て 白 色 輪 環 を 呈 す る も の を(〓), 1時 間 後 の も の を. 2時 間 後 の も の を(+)と 第2項. し た.. 補体 結合 反 応. 間洗 滌 した後生 理 的食 塩 水 で洗 滌. 先 づ 新 鮮 海 〓 血 清 の 補 体 価 を 測 定 し,次 に. し濾 紙 の 間 に 挾 ん で 充 分 水 分 を 取 除 き,胎 児. 緒方 氏 稀 釈沈 降 反応 に 倣 い臓器 浸 出 液並 に血. 圧 搾器 並 に 乳鉢 に て充 分磨 砕 し半流 動 体 の臓. 清 を 逓 減 的 に 稀 釈 し,之 に 各 種 濃 度 の 抗 原 及. 器 乳 剤 を 得 た.. び 補 体 価 の2単. 第3節 1). 抗体 抽 出 法. 置 後 溶 血 系 と し て2.5%山. 卵 器 に1時. 間静. 羊 血 球浮 游 液及 び. 種 々 な る浸 出 液4.5cc. 之 に 対 す る溶 血 性 家 兎 非 働 性 血 清 を 加 え 再 び. を 加 え た 後 よ く混 和 し冷 却 或 は 加 温 した 後 一. 孵 卵 器 に2時 間 静 置 後 一 夜 氷 室 に 放 置 し翌 朝. 夜 氷 室 に 静 置 し 翌 朝 強 力 遠 心 し て上 清 を 実 験. 成 績 を 判 定 し完 全 溶 血 阻 止 せ る も の を(〓),. に 供 し た.. 弱 溶 血 せ る も の を(〓),中. 2). 臓 器 乳 剤0.5gに. 位 を 加 え,孵. 加 温 の 為 に は 重 湯 煎 を 使 用 し氷 結 の 為. に は 食 塩 と氷 片 に よ る 寒 剤 に て 約‑15℃ 冷 却 後56℃15分. に. の を(〓),強. 第3章 第1節. 反応 検 査 方 法. 沈 降反応. 1927年 緒 方 博 士 の 発 表 せ られ た 沈 降 素 の 量 的関 係 を最 も明 確に 指 示す る稀 釈沈 降 反応 法. 第1表. 全. せ り.. 加 温 して 融 解 せ し め た.尚. 濾 過 器 を 使 用 し た.. 第1項. 度 溶 血 せ る も の を(+),完. 溶 血 せ る も の を(‑)と. 強 力 遠 心 す る も上 清 不 透 明 の 場 合 はSeitzの. 第4節. 等 度 溶 血せ る も. 加温法 と冷却法 との比較. 人血清免疫家兎並に牛血清免疫家兎の諸臓 器に於け る加温抽出法 と冷却抽出法 との比較 実験成 績は夫 々第1表,第2表. に示す如きも. のである.. 人 血 清 免 疫 家 兎 に 於 け る 抗 体 抽 出 法 の 比 較(緒 血 清 沈 降 素 価1,600. 實驗及び其の成績. 抽 出 液0.85%生. 方 氏 免 疫 体 稀 釈 沈 降 反 応) 理 的 食塩 水.
(3) 免疫動物諸臓器抗体の抽出法に就て 第2表. 牛 血 清 免 疫 家 兎 に 於 け る抽 出 法 の 比 較(補 体 結 合 反 応) 血 清 抗 体 価3,200. 抽 出 液0.85%生. 即 ち冷 却 法 は 加 温 法 に 優 る と も劣 ら ざ る よ. 種々なる抽出液に於 ける 冷却抽出抗体量の比較. に 於 て8種 類 の 抽 出 液 を 用 い た 実 験 成 績 は 第. 即 ち10倍. 等 張 食 塩 水 並 にTyrode氏. (Ca Cl2欠)+20%葡. 人血清免疫家兎肝臓及び腎臓の冷却抽出法 第3表. 理的 食塩 水. 3表 に 示 す 如 き もの で あ る.. い成 績 を 示 して 居 る.. 第2節. 2075. 液. 萄糖 に 於 て他 の抽 出液. に 於 け る よ り多 量 の 抗 体 を 抽 出 し得 て 居 る.. 種 々な る抽出液に よる人血清免疫家兎肝臓並に腎臓越幾斯中 の 沈降素量の比較(緒 方氏免疫体稀釈沈降反応) 血清沈降素価1,600.
(4) 2076. 平. 第3節. 松. 哲. 夫. み る為に補体結合反応 を用い行つた実験成績. 冷却時間 と抽 出抗体量. 牛血清免疫家兎肝臓及び腎臓の冷却抽出法. は第4表 に示す通 りである.. に於て氷結時間の長短 と抽出抗体量の関係を 第4表. 牛 血 清 免 疫 家 兎 肝 並 に 腎 に 於 け る 冷 却 時 間 と抽 出 抗 体 量 比 較 実 験(補 血 清 抗 体 価3,200. 抽 出 液0.85%生. 即 ち抽出抗体量は氷結時間1時 間で最高に 達 し其以上冷却す るも最早増加 しない. 第4節. 血 清 沈 降 素 価1,600. 後56℃. 水 浴3分. た.. 人 血 清 免 疫 家 兎 肝,腎 比 較 実 験(緒. 理 的 食塩 水. を1回. とし て. 冷 却 を 繰 返 す 事 に よ り抽 出 抗 体 量 を 比 較 し. 冷却回数 と抽出抗体量 第5表. 冷 却15分. 体 結 合 反 応). に 於 け る冷 却 回 数 と抽 出 抗 体 量 の. 方 氏 免 疫 体 稀 釈 沈 降 反 応) 抽 出液0.85%生. 理的 食塩 水.
(5) 免疫動物諸臓器抗体 の抽出法に就て 即 ち 冷 却4回. に て抽 出抗体 量 は最 高 に到達. の 比 較 は 第6表. し 其 以 後 は 最 早 増 加 しな い. 第4章. Homogeneizerに. 第6表. 2077 に 示 す 如 き も の で あ る.. 人血 清免疫家兎各臓器 よ りの乳剤收量比較表. よる. 臟器 乳剤製 法 臓 器 乳 剤 製 法 に 当 り胎 児 圧 搾 器 及 び 乳 鉢 を 用 い る代 りにHomogeneizerを. 使 用 し次 の 様. な 成 績 を 得 た. 第1節. 臓 器 乳 剤 製 法 所 要 時 間 の 比 較.. 各 臓 器2gよ. り乳 剤 製 造 所 要 時 間 を 比 較 す. るに 肝,脾,腎. の 如 き軟 か い 組 織 に 於 て は 胎. 児 圧 搾 器 及 び 乳 鉢 を 使 用 す る時 は 約30秒 に て 完 全 な る 乳 剤 を 得 る もHomogeneizerを す れ ば 約15秒. 使用 即 ちHomogeneizerに. に て 可 な り.. 又 心 臓 の 如 き硬 い 組 織 に 於 て は 胎 児 圧 搾 器. 量 の 乳 剤 を 得 て 居 る. 第3節. 及 び 乳 鉢 に ては 長 時 間 費 す も 完 全 な る乳 剤 は 得 られ な い がHomogeneizerを. 用 ふ る時 は 比. よる方 が 各臓器 共 多. 臓 器 乳 剤抽 出抗 体 量 の比 較. 前 述 の 如 く人 血 清 免 疫 家 兎 の 各 臓 器2gよ. 較 的 容 易 に 然 も短 時 間 に て 完 全 な る 乳 剤 を 造. り得 た 乳 剤 を 同 じ条 件 に て氷 結 融 解 し 其 の 抽. る事 が 出 来 る.. 出 抗 体 量 を 補 体 結 合 反 応 に よ り比 較 した 実 験. 第2節. 成 績 は 第7表. 臓器 乳 剤收 量 の比較. 人 血 清 免 疫 家 兎 各 臓 器2gよ. 第7表. に 示 す 通 りで あ る.. りの 乳 剤 收 量. 人血清免疫家兎の臓器乳剤抽出抗体量の比較(補 体結合 反応) 血清抗体価320. 即 ち 各 臓 器 共Homogeneizerに. よる方が 多. 次 に 第3節. の 成 績 は 第8表. に 示す 通. りで あ る.. 量 の 抗 体 を 抽 出 し 得 て い る. 第4節. と し て判 定 し た.其. 臓 器 乳剤 抽 出蛋 白量 の比 較. 即 ち第7表. と略 々 同 じ成 績 を 得 て 居 る.. に述 べ た実 験 に於 け る各臓 器 抽. 以 上 の 諸 実 験 よ り臓 器 乳 剤 製 法 に 当 りて. 出液 に酷 酸 黄血塩 試 験 を行 い抽 出蛋 白量を 比. Homogeneizerを. 較 した.即. 局 方醋 酸 を加. び 乳 鉢 を 使 用 す る と き よ り同 一 材 料 か ら多 量. を 加 え て 加 温 し沈 澱. の 抗 体 並 に 蛋 白 を 抽 出 し得 る 乳 剤 を 短 時 間 に. え 更 に10%黄. ち 各 抽 出 液 に1/3量 血 塩3滴. を 生 ず る も の を(+)然. ら ざ る もの を(‑). 使用す る時 は胎 児 圧 搾 器 及. 多 量造 り得 る とい う事 が 出 来 る..
(6) 2078. 平. 第8表. 松. 哲. 夫. 臓器乳剤抽出蛋白量の比較(醋 酸黄血塩試験). 間 に 亘 る も抽 出 抗 体 量 は 増 加 しな い. 第5章. 結. 論. 4). 以 上 の各 実 験成 績か ら冷却 抽 出法 は 血 球凝 集 反応 及 び 溶 血 反 応 に 於 け る と同 様 に 沈 降 反 応 並に 補体 結合 反 応 に於 て も 1). 3). 液 が 優 秀 で あ る.. 冷 却 時 間 は1時. 文 1) Kraus u. Levaditi, Comptesrend, de lacard, des sciences, Bd. 4, 1904. 2) Kraus u. Schiffmann, Wiener kl. Wochenschrift, S. 1033, 1905. 3) Cantacuzene, Annal. de I. Inst. Pasteur,. Vol. 41, 1925. 5) Benjamin u. Sluka,. Journ.. 使. 用 す れ ば 胎 児 圧 搾 器 及 び 乳 鉢 を 使 用 す る時 よ. 得 る乳 剤 を 短 時 間 に 多 量 造 り得 る.. 指導 と御校 閲に 対 し謹 ん で感 謝 の意 を表 す.. 献 8) Przygode, Wien. kl. Wochenschr., Nr. 9, S. 201, 1914. 9) Cook u. Smith, Journ. of Immunol., Vol. 2, P. 415, 1917. 10) Opie, ebenda, vol. 8, P. 19, 1923. 11). of exp. Med.,. 松 本,日 第6号,昭. 12) Freund,. Handbuch von Kolle. Wassermann, II Aufl. Bd. II. 2. 6) Scotti, Zeitschr. f. Imm. f., Bd. 5, 1910. 7) Standenath,. 増 加 し な い.. 擱筆 す るに際 し恩師緒 方教授 の終始 御懇篤 なる御. 間が適 当で其 以上 長 時. T. 22, 1908. 4) Murphy u. Sturm,. 大 とな り,其 以 上 回 数 を 増 す も抽 出 抗 体 量 は. り同 一 材 料 か ら多 量 の 抗 体 並 に 蛋 白 を 抽 出 し. 抽 出 液 と して は10倍 等 張 食 塩 水, 20%. 葡 萄 糖 加Tyrode氏. に 於 て抽 出 抗 体 量 は 最. 尚 臓 器 乳 剤 製 法 に 当 りHomogeneizerを. 臓 器 抗体 抽 出量 に於 て加 温法 に優 る と. も劣 ら な い 良 い 抽 出 法 で あ る. 2). 冷 却 回 数 は4回. ebenda, Bd. 38, 1923.. 本 微 生 物 学,病. 理 学 雑 誌,第22卷,. 和3年5月.. Journ.. of Immunol.,. Vol.. 16, P.. 275-279, 1929. 13). 岡 崎,岡 6年7月.. 山 医 学 会 雑 誌,第43年,第7号.昭. 和.
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