トランスジェニックの遺伝子改変マウス事業では、
実績・品質・安心
のサービスを提供しております。
熊本大学 山村研一 教授 が開発された可変型遺伝子トラップ法を用いて、大規模・
網羅的にノックアウトマウス系統を樹立し、その数は
『 約2700系統 』
に達しました。
それらは、樹立済みノックアウトマウスライブラリーとして、
「TG Resourse Bank®」
に
てご利用可能です。
Homologous recombination
Homologous recombination
特許
特許
特許第
特許第
3059481
3059481
号
号
特許第
特許第
3298842
3298842
号
号
特許第
特許第
3298864
3298864
号
号
ノックアウトマウスに関する基本特許
実績
新潟大学 脳研究所 﨑村建司 教授 が開発されたC57BL/6純系、高GT率を誇る
『 高品質ES細胞 』
を導入しております。大規模ノックアウトマウス作製で培ったES
細胞培養・生殖工学に関連する技術と合わせ、ターゲティング法による
「ノックアウト
マウス作製受託サービス」
を実施しております。
品質
安心
ノックアウトマウスを作製 ・ 使用等する場合には、
『 相同遺伝子組換法 』 に関する
特許
のライセンスが必要になります。当社は、日本で唯一、正式に
ライセンス許諾
を
受けておりますので、ご安心してお使いいただけます。
ご存知ですか?
9
10
◇ 樹立済みノックアウトマウス(DeltaOne
TM)
◇ 表現型解析データ(DeltaOne®)
◇ マウス凍結胚、生殖工学マニュアル
◇ スピードコンジェニック
◇ 表現型解析受託サービス
◇ 樹立済みノックアウトマウス(TG Resource Bank®)
◇ 遺伝子改変マウス作製受託サービス
・ KOマウス作製
・ Tgマウス作製
・ SPF化・増産、凍結胚・精子作製
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7
3
5
6
遺伝子改変マウス事業
DeltaOne
TG Resource Bank
受託作製
1年
C57BL/6由来
*ターゲティング法
ご希望の遺伝子
ノックアウトマウス
作製受託
使用権許諾
使用権許諾
提供形態
3ヶ月
3ヶ月
納期
129由来
TT2
ES細胞
ターゲティング法
可変型遺伝子
トラップ法
作製方法
GPCR、チャネルなど
(約900遺伝子)
ランダム
(約2,600遺伝子)
破壊遺伝子
樹立済み
*129/sv, BALB/c 由来にも対応可能です
ノックアウトマウス提供サービス比較
CONTENTS
遺伝子改変マウス作製受託
KOマウス作製
z
750系統
のノックアウトマウス樹立実績
z
高品質ES細胞(C57BL/6純系、高GT率)
使用
z
相同遺伝子組換法に関する特許
のライセンス許諾取得
安心
品質
実績
技術指導 熊本大学 山村研一 教授
大規模ノックアウトマウス作製
『 マウス750系統 ES細胞2000系統 』
日本企業で唯一
『 相同遺伝子組換法 』
ライセンス取得
『 高品質ES細胞 』
高GT率 C57BL/6純系 RENKA株
ES開発 新潟大学 脳研究所
﨑村建司 教授
受託作製
設計したProbeを作製し、サザンブロット 解析条件を決定する サザン解析条件の検討 ・ヘテロ欠損マウス ヘテロマウス 作製 キメラ率上位3匹を交配させて得られた F1産仔のゲノムを用い、サザン解析によ りジャームライントランスミッション(GT)を 確認する GTの確認 ・キメラ産仔データ ・サザン解析データ 2ヶ月 マイクロインジェクション法/アグリゲー ションによりキメラマウスを作製する(最 大3クローン使用) キメラマウスの作製 キメラマウス 作製 3ヶ月 ヘテロ欠損マウスを作製し、微生物検査 後、ご依頼者へ送付する(2ブリーディン グペア) ヘテロ欠損マウスの作製 陽性クローンを必要量スケールアップ培 養し、Feeder細胞の除去を行う(最大3ク ローン樹立) 相同組換えクローンの作製 ・コロニー数 ・サザン解析データ 4ヶ月 エレクトロポレーションにてベクターをES 細胞に導入し、G418による選択培養後、 最大350クローンを解析する(3クローン の陽性株確認時点で解析終了) ESクローンの樹立・解析 ESクローン 樹立 各armをターゲティングベクターに組込む ベクターの構築PCRにより Long arm / Short arm に相当 するゲノム配列を増幅する arm領域の作製 ・構築図 ・制限酵素データ ・サザン条件図 4ヶ月 NCBIゲノムデータベースを基にデザイン を決定する ベクターのデザイン ベクター 構築 成果物 標準 期間 詳細内容 内容 工程
■ 標準作業内容
※ 使用ES細胞は、129/sv, BALB/c 由来にも対応可能です ※ 一部工程のみの作業もお請け致します(ただし、特許の保護を受けられない場合もございます) ※ コンディショナルノックアウトマウスも作製致します ※ 価格につきましては、別途お問い合わせください ※ 納品にかかわる輸送費・微生物検査などは実費を頂きます ※ 上記作業期間は標準的なもので、作業状況により変動することもございますこと、予めご了承ください遺伝子改変マウス作製受託
Tgマウス作製
プラスミドDNA
ご用意
5ヶ月
納期
ファウンダーマウスのゲノムDNA
トランスジェニックマウス
納品物
1) プラスミドDNAの線状化および精製
2) 受精卵(C57BL/6系統) 100個へのインジェクション
3) ファウンダーマウスのゲノムDNA抽出
作業内容
100個へのインジェクションにてファウンダーマウスが得られ
なかった場合、100個への追加インジェクションを無償実施
保証項目
■ サービス内容
※ 価格につきましては、別途お問い合わせください ※ 解析はお客様にてお願い致します(当社での実施の場合、別途費用が必要となります) ※ 納品にかかわる輸送費・微生物検査などは実費を頂きますz KOマウス作製で裏付けられた実績と高い成功確率
z 追加インジェクション無償実施保証つき
マウスSPF化および増産
受託作製
凍結胚・精子作製
雄マウス2~3匹
ご用意
1ヶ月
納期
凍結胚(クライオチューブ)・精子(ストロー)
納品物
1) 提供された雄マウスからの精子採取
2) 未受精卵(C57BL/6系統) を用いて体外受精
精子凍結
3) 得られた受精卵の仮親への移植・帝王切開および飼育
作業内容
■ サービス内容
※ 価格につきましては、別途お問い合わせください ※ 事前に微生物検査成績書の提出をお願い致します(内容によりお断りさせていただく場合もあります) ※ 納品にかかわる輸送費・微生物検査などは実費を頂きます雄マウス2~3匹
ご用意
4ヶ月
納期
SPF化マウス
納品物
1) 提供された雄マウスからの精子採取
2) 未受精卵(C57BL/6系統) を用いて体外受精
3) 得られた受精卵の仮親への移植・帝王切開および飼育
作業内容
■ サービス内容
※ 価格につきましては、別途お問い合わせください ※ 事前に微生物検査成績書の提出をお願い致します(内容によりお断りさせていただく場合もあります) ※ 納品にかかわる輸送費・微生物検査などは実費を頂きますトランスジェニック社 ノックアウトマウス
※ その他系統の検索は、下記ウェブサイトにてご確認いただけます
※ 遺伝子名をご教示いただけましたら、当社でもお調べいたします
http://www.transgenic.co.jp/jp/products/mice/
TG Resource Bank
®
z
約 750 系統
の樹立済み
ノックアウトマウス
z
約 2000 系統
の樹立済み
ノックアウトESクローン
■ 樹立済み系統一例
Dst / Glrx5 / Elovl5 / Elovl6 / Acot8 / Metap1 / B3bp / Rnf111 / Nup210
Ube2j2 / Tead3 / Rassf3 / Hip1 / Smad2 / Jarid2 / Aldoa …etc
樹立済みマウス
非独占・無期限の使用権許諾
契約形態
挿入ベクター構造
5’-RACE配列
品質保証項目
自社提示情報に誤りがあった場合
返金
ご依頼者ならびに同研究グループの方々
(
第三者への供与・販売等は不可
)
使用範囲
ご依頼所に帰属
成果
(知的財産権)
マウス系統
3ヶ月(凍結胚の準備~マウス納品)
ES細胞系統 6ヶ月(ES細胞の準備~マウスの樹立~納品)
納期
2ブリーディングペア(ヘテロ)
納品物
トラップベクターの挿入により、転写が停止し、 遺伝子の破壊が引き起こされます。 トラップベクター自身にはプロモーターが含まれていないため、 内在性プロモーターの直下に挿入された場合のみ マーカー遺伝子の発現が起こり、クローンとして取得されます。Stop
プロモーター Poly AStop
Stop
Stop
プロモーター Poly A プロモーター Poly A プロモーター Poly AStop
Stop
Stop
Poly A プロモーター Poly A プロモーター マーカー (β-geo) Poly A マーカー (β-geo) Poly A 遺伝子破壊 5’RACEによる 破壊遺伝子の同定 マーカー (β-geo) Poly A 遺伝子トラップベクター マーカー (β-geo) Poly A マーカー (β-geo) Poly A 遺伝子トラップベクター 転写を阻害 ※ 費用は別途お問い合わせください■ ご提供内容
■ 遺伝子トラップ法
デルタジェン社 ノックアウトマウス
z
約 900 系統
の樹立済み
ノックアウトマウス
z 創薬ターゲット (GPCR、イオンチャネル など)にフォーカス
z 数多くの製薬企業・研究機関での使用実績あり
DeltaOne
TM
Deltagen社との使用権許諾契約
契約形態
(リサーチライセンス)
マウス到着後3年間
(コマーシャルライセンス) 無期限
ライセンス期間
ご依頼者ならびに同研究グループの方々
(
第三者への供与・販売等は不可
)
使用範囲
ご依頼所に帰属
成果
(知的財産権)
契約締結後、3~4ヶ月
納期
2ブリーディングペア(ヘテロ)
納品物
■ ご提供内容
GPCRs
Ion Channels
Transporters
Phosphatases
Protein Degradation Pathways
Protease Inhibitors
Kinases
Nuclear Hormone Receptors
Other
z
約 750 系統
のノックアウトマウス
表現型データ
z 創薬ターゲットの効率的な遺伝子機能解析に有用
z ノックアウト遺伝子ごとに約 20,000 のデータを収載
ホモ 胚および胎生致死評価
遺伝子発現評価
一般状態
病理組織学的評価
血液学&血液生化学的評価
行動評価
高週齢マウスの一般状態
& 病理組織学的評価
DeltaBase
®
樹立済みマウス
※ 詳細は別途お問い合わせください■ 収載データ一例
表現型解析受託サービス
血液学的検査 コース
血液学的検査 コース
赤血球数 平均赤血球血色素量 ヘマトクリット値 白血球数血液学的検査 コース
平均赤血球色素濃度 平均赤血球容積 血色素量 血小板数 無機リン 尿素窒素 総コレステロール A/G比 総タンパク質 カルシウム クレアチニン グルコース 中性脂肪(トリグリセライド) アルカリフォスファターゼ γ-グルタミルトランスペプチダーゼ グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ グルタミン酸オキザロ酢酸トランスアミナーゼ 総ビリルビン アルブミン血液生化学検査 簡易コース
・本検査は、マウス生体の納入が必要となります ・マウスの輸送費、微生物検査費用は、実費をご 負担頂きます ・サンプルはヘパリン血漿、または血清を、-20℃ でお送りください。組織検査 コース
組織検査 コース
⑨解剖・組織採取・ホルマリン固定 ⑧報告書作成 ⑦飼育管理 ⑥病理組織写真(CD収録) ⑤病理組織学的検査(所見) ④HE染色スライド作製*2 ③器官重量測定(10器官)*1 ②剖検 ①体重測定(剖検日当日)組織検査 コース
脳、脊髄、下垂体、下顎部リンパ節、 心臓、肺、肝臓、胸腺、脾臓、腎臓、 膵臓、副腎、腸間膜リンパ節、精嚢、 精巣、精巣上体、前立腺、子宮、膣、 卵巣、胸骨、乳腺、大動脈、大腿骨 *2 作製部位 脳、胸腺、肺、心臓、肝臓、腎臓、 脾臓、副腎、下垂体、精巣or卵巣 *1 測定部位固定した組織を既にお持ちの方は、上記④、
⑤、⑥、⑧のみご依頼頂けます。
固定した組織を既にお持ちの方は、上記④、
⑤、⑥、⑧のみご依頼頂けます。
血液生化学検査 簡易コース
血液生化学検査 簡易コース
・本検査は、マウス生体の納入が必要となります ・生体を納入、1週間馴化飼育の後に剖検し、血 液を採取します ・マウスの輸送費、微生物検査費用は、実費をご 負担頂きます ※ 解析は、各試験群(対照群含む)につきn数=3以上からお請け致します ※ 価格・納期につきましては、ご要望の検査項目・解析数を基に御見積させていただきます腎機能 簡易測定コース
腎機能 簡易測定コース
肝機能 簡易測定コース
肝機能 簡易測定コース
総タンパク 尿素窒素 腎臓(PAS染色) 病理 剖検、腎臓 湿重量 電解質 尿酸 クレアチニン 血液生化学 検査腎機能 簡易測定コース
アンモニア 直接ビリルビン 肝臓(HE)、胆嚢(HE) 病理 剖検、肝臓 湿重量 A/G比 アルブミン 総ビリルビン コリンエステラーゼ 乳酸脱水素酵素 ロイシンアミノペプチダーゼ アルカリフォスファターゼ γ-グルタミルトランス ペプチダーゼ グルタミン酸ピルビン酸 トランスアミナーゼ グルタミン酸オキザロ酢酸 トランスアミナーゼ 血液生化学 検査 肝機能 簡易測定コース代謝系 簡易測定コース
代謝系 簡易測定コース
免疫・炎症 簡易測定コース
免疫・炎症 簡易測定コース
血小板数 赤血球数 胸腺(HE)、脾臓(HE) 病理 剖検、胸腺、脾臓 湿重量 平均赤血球色素濃度 平均赤血球血色素量 平均赤血球容積 ヘマトクリット値 血色素量 白血球数 血液学的 検査 免疫・炎症 簡易測定コース 血糖 膵臓(HE)、肝臓(HE)、心臓(HE) 病理 剖検、肝臓、心臓 湿重量 中性脂肪 HDLコレステロール 総コレステロール 血液生化学 検査代謝系 簡易測定コース
・本検査は、マウス生体の納入が必要となります ・マウスの輸送費、微生物検査費用は、実費をご 負担頂きます ・本検査は、マウス生体の納入が必要となります ・マウスの輸送費、微生物検査費用は、実費をご 負担頂きます ・本検査は、マウス生体の納入が必要となります ・マウスの輸送費、微生物検査費用は、実費をご 負担頂きます ・本検査は、マウス生体の納入が必要となります ・マウスの輸送費、微生物検査費用は、実費をご 負担頂きます受託解析
その他マウス関連
スピードコンジェニック
従来法のバッククロスでは、
最低12世代(3年~5年
)の交配が必要となります。
スピードコンジェニッ
ク法では、
マイクロサテライトマーカーを用いて遺伝子置換をモニタリングすることによって、
約5世
代(約1.5年)
でコンジェニック系統を樹立します。
129系統 ♂
C57BL/6系統 ♀
自然交配 or 体外受精
により産子取得
PCR-SSLPマーカーによる解析
C57BL/6系統 ♀
レシピエント系統の遺伝子型が99%
の純度に達するまで行う(約5世代)
置換率の高い個体を選別
z
129系統 ⇒ C57BL/6系統
へのコンジェニック系統の作製
z 交配回数は5回
z 1世代ごとにゲノムマーカー解析結果をご報告
解析するマウスのゲノムDNAおよびドナー系統のゲノムDNA
ご用意
1世代につき約3週間
納期
ゲノムマーカー解析報告書
納品物
PCR-SSLPマーカーによる解析
作業内容
■ サービス内容
※ 価格につきましては、別途お問い合わせください※ Nakao K, Nakagata N, Katsuki M : Exp. Anim. 46(3):231-234, 1997