Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
№１８：マウスガード一定期間使用後の評価
Author(s)
桒原, 涼子; 上原, 宏樹; 山延, 健; 河野, 克明; 松田,
祐明; 西野, 仁泰; 川上, 良明; 鈴木, 義弘; 紺野, 倫
代; 成松, 慶之郎; 小澤, 卓充; 中島, 一憲; 武田, 友
孝; 片野, 勝司; 鎗田, 文夫
Journal
歯科学報, 115(3): 281-281
URL
http://hdl.handle.net/10130/3675
Right
目的：現在，マウスガードは主に高分子材料であ る，エチレン酢酸ビニル共重合体（EVA）を用い て作製される。 本発表では実際に一定期間（１シーズン）使用し たマウスガードにおける物性の変化を評価したので 報告する。 外部刺激による構造については現在までに群馬大 学と東京歯科大学との共同研究として発表してき た。 方法：高校生ラグビー選手生徒に対し，一定期間マ ウスガードを使用してもらった（東京歯科大学倫理 委員会・承認番号 ４３７）。 マウスガードは，上下顎印象採得後，模型を作製 し，EVA 材ドゥルフォソフトを用いて，加圧形成 器にてサーモフォーミング，咬合器上にて調整，作 製した。また，マウスガードセット時の咬合調整時 は１６番２６番歯には外部刺激である熱の影響を少なく するため，臨床経験１０年以上の歯科医師が行った。 マウスガードにおける物性の変化は核磁気共鳴 （NMR）測定を用いて主に評価した。評価部位は１６ 番歯咬合面とし，マウスガード装着時のバイトアイ を用いた診査にて咬合の認められた部位について切 り出し，測定用試料として用いた。コントロールに はサーモフォーミング後の材料を用いて評価した。 結果および考察：核磁気共鳴（NMR）測定から咬 合部は結晶化度が増加していた。結晶化度の増加は 硬化を示す。以上の影響を合わせて考察すると，今 回一定期間使用したマウスガードにおいて，結晶化 度の増加，つまり個人のマウスガード保管時の温度 （一定期間使用後の調査では，約９０％のラグビー選 手が高温場所保管していた）や，口腔内温度そして マウスガード装着時の咬合圧等が結晶化度の増加， つまり劣化のベクトル因子であったと思われる。 目的：骨髄より抽出した細胞に骨分化因子を添加し 培養すると，骨細胞へと分化することが報告されて いる。また，in vivo における細胞−スキャフォル ド複合体は骨再生において，有効な手段であること が報告されている。我々は，ラジアルフロー型バイ オリアクター（RFB）を用いたマウス骨芽細胞様 細胞の培養およびヒト骨髄由来間葉系幹細胞の培養 で，スキャフォルド上に均一に増殖させることを報 告している。しかし，RFB を用いて生体由来の細 胞を成長因子を添加して増殖させた報告はまだな い。そ こ で 本 研 究 は，RFB を 用 い て 生 体 由 来 の ラット骨髄細胞を培養してその動態を検討すること を目的とした。 方法：雄性，SD 系，６週齢のラットを屠殺し，骨 髄細胞を大腿骨，上腕骨，脛骨より採取した。初代 培養のみ骨分化因子（デキサメタゾン１０−８M，β-グ リセロリン酸１０mM，５０μg/ml アスコルビン酸）を 添加した D-MEM にて培養し，２継代目まで骨分 化因子を添加していない D-MEM にて培養した。 その後タイプ１コラーゲンシート（気孔径７０∼１１０ μm，気 孔 率８０∼９５％，直 径１８mm，厚 さ３mm）に ５×１０５ 個播種した。シートを６枚重ねで RFB に 取り込み，灌流培養を行った。培養条件は３７℃， pH７．４，DO 値６．８６ppm，培養液交換量１００ml/day， 培養液灌流速度３ml/min に設定し，培地交換は培 養開始後３日目から毎日とした。また，培養に用い た培地は D-MEM に bFGF を添加したものとして いないもので比較を行った。１週間後にスキャフォ ルドを回収し HE 染色による形態観察と細胞数， ALP 活性を評価した。コントロールとしてプレー ト上で静置培養したものを用いた。 結果および考察：RFB を用いてラット骨髄細胞を 培養した結果，コントロールと比較して細胞数は有 意に高い値を示し，bFGF を添加して培養したもの はしていないものより有意に高い値を示した。ま た，H-E 染色により灌流培養を行ったスキャフォル ド上で高密度に細胞が分布していることが観察さ れ，bFGF を添加するとより高密度に観察された。 これは，栄養源の供給，老廃物の排出が RFB で効 率よく 行 わ れ た た め と 推 察 さ れ た。以 上 に よ り RFB によりスキャフォルド上にラット骨髄細胞を 増殖させること，bFGF の添加によってより高密度 となることが明らかとなった。
